裸鼠皮下人肝癌移植瘤模型的建立

目的建立裸鼠皮下肝癌移植瘤模型。方法BLBA/c裸鼠颈背部皮下注射人肝癌SMMC-7721细胞悬液5×106个.0.2m l-1.只-1,观察肿瘤生长情况,45d处死。瘤组织作病理及电镜检查;取裸鼠周围血作甲胎蛋白(AFP)的检测;用免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)。结果该模型具有类似人原发性肝癌的形态学特征。结论成功建立了人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型。     

人绒毛膜癌裸鼠原位移植模型的建立

目的建立人绒毛膜癌裸鼠原位移植瘤模型。方法培养人绒毛膜癌细胞系JAR,制备JAR单细胞悬液,给5只8周龄BALB/c裸鼠经皮下注射建立皮下移植瘤模型。待裸鼠皮下成瘤后,无菌条件下取瘤组织并切成1 mm^3组织块,通过手术方式植入10只10周龄BALB/c裸鼠子宫腔内,裸鼠濒死状时4%水合氯醛(10 g/kg)腹腔注射麻醉处死,观察子宫成瘤及腹腔转移情况。解剖取子宫原位移植瘤、腹腔内转移瘤、腹腔淋巴结及其他脏器组织标本,通过组织病理学检查进行鉴定。结果10只BALB/c裸鼠中共有7只裸鼠子宫内可见移植瘤肿块形成,其中2只可同时观察到子宫移植瘤和腹膜转移瘤。在病理学形态和结构上,皮下移植瘤模型、原位移植模型和腹膜转移瘤的瘤细胞与人绒毛膜癌细胞系JAR一致。结论成功建立人绒毛膜癌JAR细胞的BALB/c裸鼠原位移植瘤模型。     

肝原位移植瘤裸鼠模型的建立及活体荧光成像检测

目的 建立能够通过活体荧光成像系统实时监测肿瘤进展的肝原位移植瘤裸鼠模型.方法 重组质粒pcDNA3.1-Luc转染细胞构建稳定表达荧光素酶的PLC/PRF/5肝癌细胞株,将该细胞注入裸鼠肝脏实质内,应用活体成像技术动态监测肿瘤进展情况,解剖荧光信号阳性裸鼠观察肿瘤组织生长情况.免疫荧光检测肿瘤组织中HBsAg表达.结果 对裸鼠肝原位移植瘤应用活体荧光系统成像,在肿瘤细胞注射部位检测到荧光信号,解剖动物后可在肝脏组织中观察到异质细胞团块.免疫荧光证实移植瘤中有HBsAg表达.结论 肝脏原位移植瘤裸鼠模型建立成功,为抗肝癌药物的研发提供了工具.     

两株肺癌细胞系体外培养细胞和裸鼠体内移植瘤细胞增殖状态的比较研究

目的：比较两株肺癌细胞系（经实验证明为高、低侵袭系）体外培养细胞和裸鼠体内移植瘤细胞的增殖状态；方法：采用激光流式细胞仪，测量单个完整细胞群体的ＤＮＡ含量，分析其各细胞周期的比率；结果：体外培养的高增殖系细胞，移植入裸鼠体内后其Ｇ２／Ｍ期细胞比率反而降低，体外培养的低增殖系细胞，移植入裸鼠体内后其Ｇ２／Ｍ细胞比率反而升高，两株肺癌细胞系的增殖指数间无显著差异；结论：两株肺癌细胞系在体内、外增殖状况的差异性，说明肿瘤细胞在体外增殖速度的快慢不能准确反映其在体内的增殖状态，必须结合肿瘤细胞的其它生物学特性，才能比较准确地分析和判断肿瘤细胞的恶性程度。     

沉默激酶功能区受体抑制前列腺癌PC-3细胞的裸鼠体内成瘤能力

目的 研究激酶功能区受体(KDR)基因表达沉默后对前列腺癌PC-3细胞裸鼠体内成瘤能力的影响.方法 将15只5周龄BALB/c雄性裸鼠随机分为干扰组、阴性质粒组和未转染组,每组5只.分别接种构建的pSilencer 3.1-KDR siRNA表达质粒转染PC-3细胞、阴性对照质粒pSilencer3.1-NC转染PC-3细胞以及未转染的PC-3细胞于裸鼠皮下;观察各组PC-3细胞在裸鼠体内成瘤率、瘤体生长速度以及平均瘤质量等方面的变化,RT-PCR和Western blot技术检测瘤体KDR基因和蛋白表达.结果 pSilencer3.1KDR质粒转染组的裸鼠瘤体生长速度明显慢于未转染组和pSilencer3.1-NC质粒转染组;与未转染组和PSilencer3.1-NC组相比,pSilencer3.1-KDR组肿瘤的生长受到明显抑制,平均体积较小(0.28 cm3 vs 0.721 cm3,0.715 cm3,P＜0.01),平均瘤质量较轻(0.14g vs 0.648g,0.635g,P＜0.01);裸鼠肿瘤组织中KDR mRNA和蛋白的表达明显降低.结论 RNAi介导的KDR基因沉默可显著影响PC-3细胞裸鼠体内的瘤体生长速度,KDR有可能成为肿瘤治疗的新靶点.     

高转移人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性

用人卵巢癌细胞系HO－8910移植探鼠，建立高转移人卵巢癌探鼠皮下移植瘤模型命名为（NSMO），已传代23次，仍保持高转移的特性。共接种BALB/c棵小鼠57只，皮下成瘤率为100％，平均带瘤存活时间为159．9天。在解剖47只裸鼠中有转移瘤鼠42只（89．4％）。最早出现转移的时间为56天。移植瘤组织学和超微结构保持原来人卵巢分化差的浆液性乳头状囊腺癌的形态特征和分泌功能。流式细胞术分析显示DNA指数为1．4，染色体分析显示众数为54（属于超二倍体），显示人类癌症的特征。移植瘤相关标记物检测显示大多数癌细胞雌激素受体和孕激素受体阳性。该模型为转移机制的研究和寻找抗转移药物提供了理想的工具。     

端粒酶核酶hTERT 5''RZ时辰治疗人肝癌裸鼠移植瘤

我们在既往的研究中 ,为探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的生物节律 ,在时辰同步化裸鼠中构建了肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤。继续在程控光照条件下饲养 ,于光照后 3,6 ,9,1 2 ,1 5 ,1 8,2 1小时取样 ,用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量 ,细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果 ,肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随昼夜节律变化 ,且伴随端粒酶活性的同步节律变化 ,均在光照后 2 1小时达高峰 ,光照后 9小时处于低谷 ;节律周期呈余弦分布。表明 ,肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰 ,为制定肿瘤时辰化疗方案提…     

美国实验室裸鼠移植瘤造模带教体会

裸鼠移植瘤模型是抗癌药物筛选的主要体内模型。2008年至2010年,笔者在美国伯明翰阿拉巴马大学（university of al-abama at birmingham,UAB）医学院药理毒理系做博士后研究,主要研究方向为抗肿瘤药物的筛选并数次为新进实验室的博士生及博士后进行裸鼠移植瘤造模带教。本文以胰腺癌裸鼠皮下移植瘤模型的造模带教为例,谈几点体会。     

NK4基因转染对裸鼠人淋巴瘤移植瘤的抑制作用

目的 探讨NK4基因转染对裸鼠人淋巴瘤移植瘤的抑制作用及其机制.方法 采用NK4基因重组质粒pVITRO2-NK4转染的Raji细胞建立裸鼠皮下人淋巴瘤移植瘤模型,动态监测裸鼠体重和肿瘤大小.8周后获取瘤组织,分别采用免疫组化和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡和微血管密度(microvessel density,MVD),并进行相关分析.结果 NK4基因转染组裸鼠移植瘤体积明显小于对照组(P<0.01),而对照组间差异无显著性(P>0.05);各组间裸鼠体重降低,差异无显著性(P<0.01).NK4基因转染组的淋巴瘤细胞AI值达237±10.94,而质粒pVITRO2转染组和未转染Raji组的AI值分别为79.7±30.8和81.7±22.2,NK4基因转染组明显高于对照组(P<0.001),而对照组间差异无显著性(P>0.05);NK4基因转染组MVD为4.7±1.52,而质粒pVITRO2转染组和未转染Raji组MVD分别为12.0±1.00和10.66±1.53,NK4基因转染组明显低于对照组(P<0.001),而对照组间差异无显著性(P>0.05).结论 NK4基因转染可明显抑制裸鼠人淋巴瘤移植瘤的生长,其可能通过抑制肿瘤血管新生和促肿瘤细胞凋亡而发挥其效应.     

genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体介导的信号转导通路的影响

目的　通过 genistein对人卵巢癌细胞系SKOV3 及其裸鼠移植瘤中表皮生长因子受体(EGFR)介导的肿瘤信号转导系统的影响 ,探讨其抑制增殖作用的机制。方法　应用免疫细胞化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶 (SP)法检测c erbB 2蛋白的表达 ;Western印迹检测细胞c jun和c fos蛋白的表达 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测c erbB 2 ,c raf 1,c jun和c fosmRNA的表达。结果　 2 0 μmol/Lgenistein处理组c erbB 2、c raf 1及其下游基因c jun、c fosmRNA表达减弱。2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 4 8h后 ,c erbB 2蛋白表达减弱 ,平均吸光度 (A)值减低 ,为0 4 2± 0 0 2 (P <0 0 5 )。Western印迹检测结果表明 :2 0 μmol/Lgenistein处理SKOV3 细胞 12～ 72h后 ,c jun、c fos蛋白表达水平逐渐减弱。结论　genistein下调SKOV3 中EGFR介导的肿瘤信号转导通路中两个关键基因c erbB 2和c raf 1之mRNA及蛋白及其下游核转录因子c jun和c fos的mRNA及蛋白的表达水平 ,提示genistein干预EGFR介导的肿瘤信号转导系统中主要信号分子的表达可能是其抑制卵巢癌增殖的分子基础。     

Establishment of a Human Hepatoblastoma Model In Athymic Nude Mice

An athymic nude mouse model of human hepatoblastoma, designated HBL 2, was established. HBL 2 produced α -fetoprotein (AFP) and the serum level in tumor-bearing mouse was roughly proportional to the tumor weight. Reactivity of AFP to Concanavalin A and Lens culinaris lectins indicated that it contained predominantly fucosylated, non bisecting N acetylglucosamine as a sugar moiety. Alpha 1 acid glycoprotein (AAG) was also found in both HBL 2 tumor extract and sera of tumor bearing mice. The serum level, however, was not proportional to either the tumor weight or the value of the tumor extract. In addition, fatty acid binding protein (FABP) was detected in approximately 40% of tumor cells and in tumor extract with polyclonal antibody against liver FABP. Thus, HBL 2 is an unique model of human hepatoblastoma, in that it produces FABP in addition to AAG and AFP. Acta Pathol Jpn 42: 255 261, 1992.     

131I-BDI-1在荷人膀胱癌裸鼠体内的生物分布研究及辐射剂量评估

目的 探讨131I-BDI-1在荷人膀胱癌裸鼠模型中的体内生物分布和对肿瘤的靶向定位性能以及其生物安全性,并由此估算131I-BDI-1在人体内主要脏器的内照射吸收剂量和人体有效剂量.方法 通过氯胺-T法用131I溶液直接标记抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1,制备131I-BDI-1,荷人膀胱癌EJ细胞裸鼠尾静脉注射222kBq 131I-BDI-1后,于不同时刻处死动物,取感兴趣器官和组织,称重并测量放射性计数,计算131I-BDI-1在荷瘤裸鼠中的标准摄取值和靶/非靶组织比值.利用标准的MIRD数据表计算人体的％ID/g,通过MIRDOSE3.1软件估算131 I-BDI-1对人体各个器官的辐射吸收剂量及有效剂量.结果 生物分布数据示131I-BDI-1血液清除缓慢,肿瘤部位放射性明显持续滞留,除血液外,具有较高的靶/非靶组织比值.131I-BDI-1人体内照射的有效剂量为1.46×10-2 mGy/MBq.结论 131I-BDI-1对肿瘤有良好的靶向性,有望成为一种新型的针对人膀胱癌肿瘤的诊治药物,其辐射吸收剂量较低,作为肿瘤治疗药物是安全的.     

Human Prostate DU145 Carcinoma Cells Implanted in Nude Mice Remove the Peritoneal Mesothelium to Invade and Grow as Carcinomas

Implanted human, androgen‐independent prostatic carcinoma cells (DU145) into athymic (NCr nu/nu) mice produce diverse tumors on the peritoneal surfaces of many organs. Light and ultrastructural observations show that the mesothelial covering these surfaces are typically microvilli‐coated, squamous cells or secretory cuboidal cells. The peritoneal regions colonized by tumors lack mesothelial cells and are covered by actively replicating carcinoma cells that grow as poorly differentiated cell clusters made of cell aggregates to somewhat compact spheroids covered with pleiomorphic microvilli and containing an undifferentiated vascular supply. These xenografts clusters invade the diaphragm and develop into tumors with both a basal solid aspect and an upper region of cribriform morphology. Furthermore, each tumor contains two cell types: (1) a poorly differentiated clear cell type, which grows into intraperitoneal tumors and (2) a large, basophilic cell type, which invades the peritoneal stroma of organs, including of the diaphragm. Anat Rec, 2013. © 2012 Wiley Periodicals, Inc.     

Morphological and Cytogenetic Studies of a Human Synovial Sarcoma Xenotransplanted into Nude Mice

Specimens of a synovial sarcoma from the left thigh of a 60 year old woman and cells from the tumor transplanted into nude mice were examined morphologically and immunohistochemically, and the karyotype was analyzed. lmmunohistochemically, cells of both the parent tumor and the transplanted tumor were positive for vimentin and cytokeratin. The multicystic features of the parent tumor were not reproduced in the mice. On ultrastructural examination, the parent tumor cells were found to have dilated channels of endoplasmic reticulum as well as a junctional apparatus, and they formed extracellular spaces. The transplanted tumor cells, in contrast, had a poorly developed endoplasmic reticulum and were devoid of extracellular spaces. Chromosome analysis of the tumor cells revealed a translocation, t (X; 18) (p 11; q11), as reported previously for synovial sarcoma, thus suggesting the diagnostic utility of the chromosome pattern for identification of synovial sarcoma.     

重组人血管内皮抑制素对荷瘤裸小鼠的治疗作用

观察了重组人血管内皮抑制素 (YH - 16 )对人肝癌Be174 0 2 细胞系、人宫颈癌Hela细胞系和人胃癌SGC790 1细胞系在裸小鼠体内的抑制作用。试验采用每日尾静脉注射给药 ,YH - 16的剂量分别为 1.5、0 .75、0 .4mg/kg ,共给药 14次。结果表明YH - 16对上述三种人癌细胞系有明显抑制作用 ,其抑制率Be174 0 2 为 45 .6 7、43.0 8和 40 .0 0 % ;Hela为 40 .70、30 .15和2 4.12 % ;SGC790 1为 5 1.89、44 .34和 35 .85 %。YH— 16各给药组动物健康状况良好 ,无明显毒副反应     

人白血病K562细胞系在裸小鼠体内成瘤性的观察

用K56 2 细胞裸小鼠体内移植模型进行试验治疗研究 ,分别用K56 2 传代细胞直接接种和K56 2 瘤块移植法 ,将人白血病K56 2 传代细胞系 1× 10 7个细胞接种于裸小鼠皮下 ,其成瘤率为 32 % (8/2 5 ) ,38d肿瘤体积达 790 .8± 5 6 5 .7mm3。瘤块移植法未获可测量的瘤体。表明K56 2 细胞裸小鼠体内移植 (或细胞直接接种 )模型难以用作试验治疗研究。     

无线粒体DNA的人食管癌细胞系的建立

为了研究线粒体疾病呼吸键功能缺陷的分子遗传机制,我们用人食管癌细胞系制备无线粒体DNA的细胞系。在细胞培养液中加溴化乙院50ng／mL、尿嘧啶50μg／mL、丙酮酸100μg／nL,进行连续传代培养。Southern杂交及PCR结果均显示：线粒体DNA进行性减少,呼吸控制率渐降低,到溴化乙啶处理第12天时消失,细胞生长是营养缺陷型,成为无线粒体DNA的细胞系。     

树突状细胞激活的CTLs在裸鼠体内外诱导抗喉癌作用

目的探讨树突状细胞(Dendritic cells,DCs)激活的细胞毒性T细胞(eytotoxic T lymphocytes,CTLs)在裸鼠体内外能否诱导抗喉癌免疫。方法用细胞因子从健康人外周血诱导DCs,MTT法检测DCs激活的CTLs在体外对喉癌细胞的作用。将裸鼠接种CTLs,1w后用喉癌细胞攻击,观察成瘤潜伏期、成瘤率、瘤重量及瘤体积。结果用细胞因子能从健康人外周血诱导大量DCs,该DCs激活的CTLs在体外对喉癌细胞产生了高效而特异的抑制及杀伤作用(P<0.01)。在裸鼠体内,负载抗原的DCs激活的CTLs有免疫保护作用,其成瘤率减低(84%,P<0.01),潜伏期延长(14±2d,P<0.01),瘤重及瘤体积均显著降低(0.47±0.10g,12.64±3.98mm~3,P<0.01)。结论DCs激活的CTLs能在裸鼠体内外诱导高效的抗喉癌作用。