长期烟雾暴露对大鼠肺血管重塑及转化生长因子-β1表达的影响

目的:观察长期吸烟对大鼠肺血管重塑及转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响,探讨其发生的可能机制。方法:将36只健康SD雄性大鼠随机分为对照组、烟雾暴露2周(S-2W)和烟雾暴露12周(S-12W)组。苏木精-伊红染色和α-平滑肌肌动蛋白染色切片观察肺血管重塑的程度,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)和TGF-β1在肺动脉的相对表达;RT-qPCR检测肺动脉TGF-β1的mRNA表达。结果:随烟雾暴露时间延长,模型组血管壁厚度和血管直径比值(WT%)和完全肌化血管比例均较对照组明显增大,差异具有统计学显著性(P0.01)。模型组的PCNA及TGF-β1蛋白表达水平均较对照组增大,且两模型组之间差异有统计学显著性(P0.01)。与对照组比较,模型组TGF-β1的mRNA表达均显著增加(P0.05),其中S-2W组和S-12W组之间的差异亦有统计学显著性(P0.05)。TGF-β1的mRNA表达与WT%和完全肌化血管比例呈显著正相关(P0.01);TGF-β1的mRNA表达与PCNA蛋白表达呈显著正相关(P0.01)。结论:长期烟雾暴露可导致大鼠肺血管重塑的形成,其机制可能与吸烟上调大鼠肺血管TGF-β1的mRNA表达,诱导肺血管平滑肌细胞增殖有关。     

转化生长因子β1及其2型受体在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达

目的 研究转化生长因子β1(TGFβ1)及其2型受体(TGFβRⅡ)在实验性大鼠升主动脉瘤中的表达及其意义. 方法 缩窄幼年Wistar大鼠升主动脉制作升主动脉瘤模型,4个月后处死动物,用免疫组织化学和Western blotting方法 检测动脉瘤壁TGFβ1和TGFβRⅡ的表达. 结果 免疫组织化学显示,TGFβ1表达于动脉瘤和对照组动脉全层;TGFβRⅡ大量表达于动脉瘤增生的内膜和中膜平滑肌层,而对照组表达很弱.Western blotting显示,动脉瘤组织中TGFβ1和TGFβRⅡ表达均强于对照组. 结论 TGFβ1和TGFβRⅡ在动脉瘤中表达强于对照组,TGFβ信号通路可能在动脉瘤形成过程中起重要作用.     

转化生长因子β1及其受体在横纹肌肉瘤中的表达

目的 :探讨横纹肌肉瘤 (RMS)中转化生长因子 β1(TGFβ1)及其Ⅰ、Ⅱ型受体 (TGFβRⅠ ,TGFβRⅡ )表达及其意义。 方法 :应用免疫组化技术 (S P法 )检测 4 9例经电镜或 (和 )免疫组化证实的横纹肌肉瘤及 2 0例正常横纹肌组织中的TGFβ1、TGFβRⅠ和TGFβRⅡ表达水平 ,并结合临床病理资料进行分析。 结果 :TGFβ1在RMS中的高表达率高于正常横纹肌组织 (P<0 0 1) ;TGFβRⅠ、TGFβRⅡ在 98% (48/ 4 9)的RMS及所有正常横纹肌组织中均有表达 ,两组无差异。TGFβ1表达与肌球蛋白重链呈负相关 (r=- 0 6 6 1,P <0 0 1)。TGFβ1在低分化组高表达率为 79% ,高分化组为 38%。 结论 :横纹肌肉瘤中存在TGFβ1自分泌和旁分泌现象 ,且肿瘤细胞表达相关受体。TGFβ1的表达与肌源性分化程度有关。TGFβ1信号传导途径可能参与了横纹肌肉瘤的发展与演进     

转化生长因子β_1、Bax多肽在高血压大鼠肾上腺的表达

目的　观察Dahl大鼠肾上腺中转化生长因子 β1(TGF β1)、凋亡相关基因Bax多肽表达的动态变化 ,探讨原发性高血压与肾上腺细胞凋亡的关系。方法　应用日本引进的Dahl高血压大鼠 ,SP免疫组织化学方法染色。结果　TGF β1、Bax免疫阳性细胞主要分布于肾上腺髓质 ,阳性反应产物见于细胞质中。TGF β1和Bax的阳性细胞数 ,在盐敏感性高血压 (DahlS)大鼠 ,均随着高血压的进展而有显著提高趋势。结论　TGF β1和Bax在Dahl大鼠肾上腺髓质均有表达 ,随着高血压的病程延长 ,表达逐渐明显升高 ,二者共同作用可能促进髓质细胞凋亡     

实验性肺纤维化大鼠肺组织整合素α5β1和转化生长因子-β的表达

目的　研究纤维连接蛋白受体整合素α５β１ 在大鼠肺纤维化中的作用。方法　用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白（ＦＮ） 及其受体整合素α５β１ 和转化生长因子β（ＴＧＦβ）表达的动态变化;用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦβ对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响。结果　（１）实验组１～３ 天,病灶内上皮细胞和内皮细胞整合素α５β１ 表达明显增强,炎细胞及增生的间质细胞亦呈阳性反应。以后,整合素α５β１ 阳性反应主要见于明显增生的间质细胞,并与ＴＧＦβ阳性分布相似。ＦＮ的变化与整合素α５β１ 的变化同步。（２）ＴＧＦβ作用后,大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ 及其蛋白表达增强（α５、β１ ｍＲＮＡ 杂交条带的积分光密度值,依次分别是对照的６．６ 、４．４ 倍;α５β１ 蛋白染色积分光密度值为对照的３．６ 倍） 。结论　整合素α５β１在肺间质细胞活化、增殖、分化及细胞外基质合成中起了极其重要作用。     

α_1-肾上腺素受体抗体介导对糖尿病大鼠肾小管转化生长因子-β_1表达的影响

目的:观察α1-肾上腺素受体抗体(简称α1-受体抗体)介导的糖尿病大鼠对肾小管转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其在肾小管间质病变发生发展中的作用。方法:Wistar大鼠64只,分为对照组和糖尿病组。对照组和糖尿病组又分为无介导组与抗α1-受体抗体介导组。用链脲佐菌素复制糖尿病模型。葡萄糖氧化酶法测定血糖,放射免疫法测定尿白蛋白,免疫组化法检测肾小管基质TGF-β1的表达。结果:成功构建糖尿病大鼠模型,α1-受体抗体介导的对照组和糖尿病组肾皮质远端小管均可见TGF-β1表达,且糖尿病组明显高于对照组(P<0.01)。结论:TGF-β1在α1-受体抗体介导大鼠表达增加,即TGF-β1的表达与自身免疫有关。     

转化生长因子-β_1在自发性高血压大鼠肾小管的表达及作用

目的:研究转化生长因子-β1(TGF-β1)在自发性高血压大鼠(SHR)肾小管的表达及其与肾小管间质纤维化的关系。方法:以同龄雄性正常血压大鼠(WKY)和SHR为研究对象,监测实验前后大鼠尾动脉血压、肾功能及β2-微球蛋白(β2-MG),并采用免疫组织化学方法检测TGF-β1在肾小管中的表达。结果:同WKY组比较,SHR大鼠组24周时β2-MG显著增高,尾动脉血压显著性增高,尿素氮和血肌酐的差异无显著性意义。TGF-β1在WKY组肾小管的表达无或极微量,而在SHR组肾小管的表达明显,且随高血压病程的进展显著性增加。结论:TGF-β1在SHR肾小管的表达显著增加,提示其可能是致肾问质纤维化的重要因素。     

早期自然流产过程转化生长因子-β1的异常表达

目的 探讨自然流产患者外周血单个核细胞和胎盘组织转化生长因子-β1(TGF-β1)的异常表达.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,半定量检测30例早期自然流产患者、25例正常妊娠妇女、25例正常未妊娠妇女外周血单个核细胞内TGF-β1mRNA表达;采用免疫组织化学技术检测绒毛和蜕膜组织内TGF-β1表达强度.结果 早期自然流产患者、正常妊娠妇女、正常未妊娠妇女3组研究对象外周血单个核细胞表达TGF-β1mRNA相对含量分别为21.5±9.4%、95.7±12.9%、87.0±13.8%,组间比较均有显著性差异(P＜0.05);自然流产组合体滋养层细胞表达TGF-β1显著低于人工流产组(P＜0.01).结论 正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞TGF-β1mRNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高,提示TGF-β1对妊娠维护起重要作用;早期自然流产患者外周血单个核细胞TGF-β1 mRNA表达水平及绒毛合体滋养细胞层表达TGF-β1强度均较正常妊娠妇女显著下降,其低水平表达可能与自然流产相关.     

转化生长因子β1及p53对大鼠气管上皮细胞转化的影响

本义研究转化生长因子β1（TGF-β1）和P53对致癌物转化的大鼠气管上皮（RTE）细胞的影响。结果表明早期转化的RTE细胞（尚未具致癌性）和恶性转化的RTE细胞（已具致癌性）的条件培养基可以抑制原代RTE细胞的集落形成率（CFE）,部分抑制早期转化RTE细胞的CFE,但对恶性转化的RTE细胞无抑制作用。TGF个;中和抗体可以阻断这种抑制作用,表明条件培养基中可能有TGF-β1。转化RTE细胞分泌TGF-β1可使对后者有抗性作用的细胞具有生长优势。为了评价P53对RTE细胞转化的作用,将野生型,突变型P53分别导人早期转化的RTE,研究表明,野生型P53抑制,而突变型P53促进转染细胞的CFE。突变型P53可能增强TGF-β1的分泌,从而促进转染细胞在裸鼠中癌变。本研究表明突变型P53可能通过TGF-β1自分泌或旁分泌途径促进RTE细胞恶性转化。     

转化生长因子β1在大鼠肝内的原位表达

为探讨转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对肝细胞增殖的调节作用，用ＴＧＦβ１单克隆抗体和免疫组织化学方法研究ＴＧＦβ１在大鼠胎肝、正常成年肝、再生肝和癌变肝中的表达。结果表明：正常成年大鼠肝的大部分血管内皮细胞及胆管上皮细胞表达ＴＧＦβ１。大鼠胎肝的少量血窦内皮细胞表达ＴＧＦβ１，出现后表达逐渐增强，至生后３０ｄ的表达水平同成年肝。肝大部分切除１￣２ｄ，血窦内皮细胞ＴＧＦβ１表达增强，于大部切除后１０     

转化生长因子β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞γ-谷氨酰半胱氨酸合酶表达的影响

目的:探讨转化生长因子(TGF)-β1对香烟诱导的大鼠肺泡巨噬细胞?-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)和活化蛋白(AP)-1亚单位c-fos mRNA及其蛋白表达的影响.方法:通过支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞,随机分为对照组、香烟组和TGF-β1组.TGF-β1组加入终浓度为3μg/L的TGF-β1,2 h后除对照组外,余2组均加入香烟烟雾提取物,对照组加入磷酸盐缓冲液.分别用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和免疫细胞化学方法检测肺泡巨噬细胞中γ-GCSh(重链亚单位)及c-fos mRNA和蛋白的表达.结果:香烟组γ-GCSh和c-fos mRNA及其蛋白表达水平显著高于对照组(分别P＜0.05,P＜0.01).TGF-β1组γ-GCSh mRNA及其蛋白表达水平明显低于香烟组(均P＜0.01);而c-fos mRNA及其蛋白表达水平明显高于香烟组(均P＜0.01).结论:转化生长因子-β1参与香烟所致慢性阻塞性肺疾病肺氧化/抗氧化失衡的发病机制.     

转化生长因子α,β1对大鼠肺泡Ⅱ型细胞生长的影响

目的 探讨转化生长因子α和β１对肺泡Ⅱ型细胞增生的影响及其作用机制。方法 采用原代培养的成年大鼠肺泡Ⅱ型细胞,加入ＴＧＦα、ＴＧＦβ１作用４８小时,测定肺泡Ⅱ型细＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量和细胞数量,并用斑点杂交、原位杂交和免疫组化方法检测细胞内细胞周期蛋白Ｄ１、细胞周期依赖性激酶４ ｍＲＮＡ和蛋白的表达。结果 随ＴＧＦα浓度递增,肺泡Ⅱ型细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量和细胞数量均逐渐增加,呈量效正相关;ＴＧ     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1/Smad蛋白的动态表达及意义

目的 探讨转化生长因子TGF-β1/Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用.方法 50只健康雄性SD大鼠分为2组:正常组和模型组,模型组大鼠利用40％ CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达.结果 ①肝组织病理:与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生.模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义(P＜0.05);②TGF-β1/Smad基因蛋白:免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF-β1、转化生长因子βⅠ型受体(TβR-Ⅰ)、Smad2/3、Smad7蛋白表达均显著增强(P＜0.01),模型组大鼠肝脏TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P ＜0.05或0.01);模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7之间存在正相关关系(P＜0.05或0.01).结论 肝组织TGF-β1/Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1/Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展.     

果王素通过下调转化生长因子-β1表达抑制大鼠肺纤维化北大核心CSCD

目的:通过观察果王素对博莱霉素诱导的肺纤维化(PF)大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响,探讨果王素是否可通过调节TGF-β1抑制PF,并探究其给药浓度对大鼠PF的影响。方法:将128只SD大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组、果王素低、中、高剂量组(60、120、180 mg/kg),通过向气管内注入博莱霉素建立大鼠PF模型。自造模后第2天起将泼尼松及果王素按一定配比分别予以各组大鼠灌胃,空白组和模型组每日予以等量0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d。空白组大鼠全部于第28天处死,余组分别于第7、14、28天各处死8只并取材,通过HE、Masson染色观察大鼠肺组织病理变化,采用免疫组化、Western blot、实时荧光定量PCR检测TGF-β1蛋白及mRNA表达。结果:果王素对PF有抑制作用,并与剂量相关,空白组大鼠肺组织TGF-β1蛋白及mRNA表达最低,其余各组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在7 d时达到高峰,并随时间的推移逐渐下降。同一时间点,模型组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在肺组织中的表达明显高于其他各组(P<0.01,P<0.05),药物干预组间,泼尼松组及果王素高剂量组TGF-β1蛋白及mRNA明显低于果王素低、中剂量组(P<0.01,P<0.05),果王素高剂量组与泼尼松组间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:果王素可能通过下调TGF-β1的表达抑制PF。     

转化生长因子-β1和结缔组织生长因子在慢性心力衰竭大鼠心肌纤维化中的动态表达

目的:探讨慢性心力衰竭心肌内转化生长因子-β1(TGF-β1)及结缔组织生长因子(CTGF)的表达及意义.方法:采用肾上腹主动脉缩窄法制作雄性Wisstar大鼠慢性心衰模型,随机分为心衰1、7、14d组,另取假手术组作为对照.观察和比较成模后心衰各组和假手术组血流动力学参数及左心室肌质量指数,用Masson染色法和透射电镜观察左室心肌组织形态的改变.用免疫组织化学方法检测各组大鼠左室心肌组织中TGF-β1、CTGF的表达水平.结果:心衰模型各组TGF-β1、CTGF的蛋白表达高于假手术组,且随着心力衰竭程度的加重而表达增高.结论:TGF-β1、CTGF可能参与了大鼠压力负荷性心肌纤维化的发生和发展,其水平的高低与慢性心力衰竭的严重程度密切相关.     

肝纤维化大鼠转化生长因子β1／Smad蛋白的动态表达及意义

目的探讨转化生长因子TGF—β1／Smad信号通路在实验性肝纤维化发生中的作用。方法50只健康雄性SD大鼠分为2组：正常组和模型组,模型组大鼠利用40％CCl4油剂诱导形成肝纤维化模型,于6周及9周观测肝标本的病理,免疫组化法检测肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达。结果①肝组织病理：与正常组比较,模型组大鼠肝组织都有不同程度的炎症和纤维化产生。模型组纤维化程度较正常对照组明显,差异有统计学意义（P〈0．05）;②TGF—β1／Smad基因蛋白：免疫组织化学检测显示,与正常对照组相比,模型组大鼠肝脏中TGF—β1、转化生长因子βI型受体（TβR—I）、Smad2、3、Smad,蛋白表达均显著增强（P〈0．01）,模型组大鼠肝脏TGF—β1、TβR-I、Smad。和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）;模型组大鼠肝脏纤维化分级与TGF—β1、TβR—I、Smad2/3和Smad,之间存在正相关关系（P〈0．05或0．01）。结论肝组织TGF—β1／Smad蛋白表达水平与肝纤维化程度相关,TGF-β1／Smad信号的增强可能促进了肝纤维化的进展。     

花背蟾蜍肺发生及转化生长因子-β的表达

目的分析花背蟾蜍肺发生的规律,观察转化生长因子-β(TGF-β)在肺发育过程中的表达,探讨其生物活性作用及调控意义,为动物学和发育生物学研究提供基础资料。方法利用生物显微技术和免疫组织化学方法,研究花背蟾蜍肺(218只)的组织发生,检测TGF-β(TGF-β1、TGF-2β、TGF-3β)在花背蟾蜍肺组织发生中的表达,并利用IPP专业图像分析软件对其表达强度进行定量分析。结果1.花背蟾蜍的肺发生开始在幼虫第22期,它起始于咽部尾侧,从26期开始分化出微小腔隙,到31期开始形成明显肺腔,33期开始出现原始肺泡,36期肺内出现明显的隔膜和肺泡,肺壁中已有较多毛细血管,39期肺已接近幼蟾肺,肺上皮由矮柱状或立方形变成扁平形。整个发育过程可分为4个阶段,即肺芽Ⅰ期、肺芽Ⅱ期、原始肺泡期和肺泡期。2.在蟾蜍发育早期,TGF-β(β1、β2、β3)在肺壁中有表达,到发育的中后期,TGF-β(1β、β2、β3)主要表达于肺间质细胞处。结论TGF-β(1β、2β、3β)在蝌蚪肺发育过程中的阳性反应呈间歇性变化,表明TGF-β(β1、β2、β3)在花背蟾蜍肺发育的不同阶段具有不同的表达特征,可能发挥着不同的功能,它们对花背蟾蜍肺内网状隔膜的形成,肺泡上皮细胞的成熟分化都有重要的作用。     

转化生长因子β1基因转染对大鼠骨髓树突状细胞免疫功能的影响

目的 研究人转化生长因子β1(TGFβ1)基因修饰对大鼠骨髓树突状细胞(DC)免疫功能的影响。方法 构建TGFβ1-pcDNA3质粒并转染未成熟DC。检测转染后DC的TGFβ1表达及其功能变化,输注1周后柃测TGFβ1-DC在受者脾和淋巴结的分布、T细胞凋亡水平及T细胞端粒酶表达。结果 TGFβ1-pcDNA3质粒转染DC能有效抑制DC的成熟和分化,并下调Dc的多种功能。TGFβ1基因转染不仅能降低DC对LPS的反应,同时抑制DC在MLR中刺激T细胞增殖的能力。TGFβ1-DC输注受者后,1周内可在脾和淋巴结内形成微嵌合,并有效诱导T细胞的凋亡,抑制T细胞端粒酶的活性和表达。结论 TGFβ1基因能有效抑制DC的多种功能,可用于诱导机体免疫耐受。     

转化生长因子β1及Smad4、Bax蛋白在大鼠胚胎心脏发育中的表达及意义

目的观察大鼠胚胎心脏的发育过程并探讨转化生长因子β1(TGF-β1)及Smad4、Bax蛋白在胚胎心脏发育中的作用机制。方法取大鼠妊娠11~19d(E11~E19)胚胎40只用组织学和免疫组织化学SABC法观察大鼠胚胎心脏的发育过程和TGF-β1及Smad4、Bax蛋白在胚胎心脏的表达。结果大鼠胚胎心脏E12.5时出现室间隔肌部,E16心室分隔完成。TGF-β1在E11~E19均有表达,表达情况由弱到强再减弱,E15时最强。Smad4表达由弱到强,E17时最强,E13时表达出现空间差异。Bax蛋白表达高峰在E15,后降至一个稳定水平。结论E14、E15为心肌分化、心塑形关键时期;TGF-β1及Smad4、Bax蛋白在大鼠胚胎心脏发育中起重要作用。     

肌动蛋白和转化生长因子-β1在大鼠试验性肺气肿发生中的作用

目的　观察大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和转化生长因子 (TGF) β1在呼吸道上皮损伤修复及肺气肿发生中的作用。方法　将Wistar大鼠随机分为 2组 :吸烟加肺炎克雷伯杆菌感染组 (SI组 )和对照组 (C组 )。SI组应用吸烟加反复肺炎克雷伯杆菌感染法建立大鼠慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型 ,C组动物不吸烟不染菌。透射电镜和光镜观察肺组织病理学改变。对各组动物进行动脉血氧分压 (PaO2 )、动脉血二氧化碳分压 (PaCO2 )和右心室收缩压 (RVSP)测定。免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白 过氧化物酶 (SP)法检测各组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白和TGF β1表达的变化。结果　第 16周SI组大鼠与C组比较 ,小气道炎症反应明显 ,细支气管壁明显增厚 (P <0 0 5 ) ,内径与外径比明显降低 (P <0 0 5 ) ,并于 16周形成明显的肺气肿 ,肺腺泡内小动脉肌化明显 (P <0 0 5 )。SI组动物第 8周和第 16周PaO2 比C组明显降低 (P <0 0 5 ) ,而RVSP比C组明显升高 (P <0 0 5 )。C组大鼠小气道上皮细胞肌动蛋白表达较弱 [吸光度值 (A值 )为 0 0 9± 0 0 3],第 4周和第 8周 ,SI组小气道上皮细胞肌动蛋白阳性表达明显增强 (A值分别为 0 2 4± 0 0 6和 0 2 5± 0 0 5 ,P <0 0 5 )。C组大鼠肺组织TGF β1为阴性 ,SI组大鼠第 2、4、8