反义寡核苷酸治疗白血病的研究现状

反义核酸技术是近十年来肿瘤治疗研究的热点,它包括反义寡核苷酸(又称反义DNA,Antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)、反义RNA、核酶及RNA干扰等技术.其中反义寡核苷酸技术的主要作用原理是根据碱基互补配对原则,利用合成的寡核苷酸选择性地与靶基因mRNA互补结合,干扰或阻止其基因产物的形成,从而达到治疗肿瘤的目的.     

反义技术在造血系统疾病研究中的应用

<正> 反义技术是根据碱基互补的原理,用人工合成或生物体生成的与目标靶的DNA或RNA序列特定互补的短核苷酸片段,抑制或封闭基因表达的技术方法。反义技术能够较好地抑制和封闭目的基因的表达,干扰复制、转录和翻译,为肿瘤的基因治疗和基因功能的研究提供了强有力的工具。1978年,Zamecnik和Stephenson首次发现反义RNA能抑制Rous肉瘤病毒在培养细胞中的增殖,展示了反义核酸作为基因水平治疗药物的潜力。1990年美国的基因工程新闻将反义技术列为9O年代十大热点生物技术之一。反义技术在临床应用方面取得了重大进展,目前已有4种反义     

反义技术在体外净化中的应用

随着分子生物学的迅速发展 ,以基因治疗为主的新技术、新方法被广泛地引入自体造血干细胞移植物的体外净化。笔者介绍反义技术在体外净化中的一些研究进展。1　反义技术用于体外净化的作用原理大多数肿瘤是异常基因表达、正常基因表达下调或过度表达的结果。反义核酸的策略是将与癌基因或异常表达的正常基因互补的反义核苷酸 (DNA或 RNA)导入肿瘤细胞 ,与肿瘤细胞内相应的 DNA或 RNA结合 ,阻断癌基因转录和表达 ,从而阻止肿瘤细胞生长。例如 ,大多数慢性粒细胞白血病 (CML)患者存在有染色体易位 ,并表达为具有 CML 特异性的 bcr/abl…     

反义RNA与肝癌的研究进展

反义RNA是一类能与特异性mRNA互补并从翻译、转录或转录后水平上高度特异地抑制靶基因表达的RNA分子.肝癌是全球最常见且致命的恶性肿瘤.肝癌组织的无限增殖、侵袭转移、放化疗耐受等能力成为其无法治愈并不断恶化的重要原因.反义RNA 在肝癌肿瘤中异常表达,肿瘤的恶性表型维持需要众多反义RNA的参与.近年来,利用反义RNA技术治疗恶性肿瘤已经成为了一个新的研究方向,本文对这一技术治疗肝癌进行了综述.     

反义RNA在植物基因工程领域的应用进展

反义RNA广泛存在于各类生物中.它通过与靶RNA进行碱基互补配对的结合方式参与基因表达的调控.目前利用反义RNA技术调控植物基因的表达取得了很大进展,反义RNA在植物基因工程领域主要应用于抑制果实成熟、抗病、作为反向筛选标记基因、控制花色、控制淀粉合成、控制油料种子中脂肪酸的合成、控制雄性不育等方面.此外,通常采用反义RNA技术抑制食物中原有的与所需去除的化学成分合成有关的基因表达,降低或去除食物中的有害化学成分.反义RNA技术的研究尚处于初级阶段,但它作为一门新兴的生物技术必将在今后的农业发展中发挥重要作用.     

反义核酸技术及应用

反义核酸技术是用人工合成的或生物合成的特定互补的DNA或RNA片段阻断从基因到蛋白的信息流 ,以达到抑制或阻断基因表达的生物新技术。利用核酸分子杂交原理将反义寡核苷酸 (antisenseoligonucleotide,ASON)作为外源性基因表达抑制物结合到靶mRNA序列上阻止其翻译成蛋白[1 ] 。具有杂交特异性和选择性调节基因的表达的特点[2 ] ,这一技术不仅已成为常用的实验室研究方法 ,还广泛的应用于研究病毒、肿瘤、寄生虫和遗传性疾病的预防和治疗 ,具有重要的应用前景。对于人类基因的研究 ,人们采用分子克隆、分子杂交、PCR技术等一系列研究…     

反义技术在心血管病方面的应用

反义（antisense）核酸是指与体内某些RNA或DNA序列具有互补顺序，并能通过碱基配对与互补链杂交，从而影响其转录或翻译过程的RNA或DNA片段。通过反斗核酸特异性抑制某些基因的表达，可能抑制由于癌基因的表达引起的血管平滑肌细胞增殖，抑制某些心血管病的发生与发展。近年来该领域的研究结果显示：应用反义核酸技术抑制血管平滑肌细胞的增殖将可能成为治疗心血管疾病的新途径之一。     

反义策略研究造血基因调控及白血病基因治疗

绝大多数DNA由两条碱基互补的单链组成,生物信息以不同核苷酸排列顺序的形式编码在DNA链上。DNA双链中被转录为RNA的链称为正义链,与正义链互补的链为反义链。精心设计一段与正义链互补的寡核苷酸,会象“封条”一样阻断基因转录;将含有反义序列的载体导入细胞内,可以干扰特定基因的表达。反义核酸技术就是利用这一原理,在基因位点、前体mRNA、mRNA及蛋白水平上,直接研究特定基因在细胞增殖、分化和凋亡中的调控作用。 反义核酸策略中,反义寡核苷酸、反义RNA和核酶技术已经被广泛应用于抗病毒和抗恶性肿瘤研究。在利用反义技术研究造血细胞的基因调控方面,特别是某些癌基因在白血病细胞内的过度表达、突变方面,已经取得了一些进展。目前,人工合成的寡核苷酸已能特异、高效地抑制白血病细胞的增殖和裸鼠体内肿瘤结节的形成,在对白血病患者的系统治疗方面也进行了尝试。利用基因工程技术构建含反义RNA或核酶特征序列的载体,能够抑制白血病异常基因的表达,并特异性地干扰易位融合基因。 利用反义核酸技术治疗白血病和肿瘤,目前仍有许多不同的见解,争论的焦点集中在三个方面:互补寡核苷酸的作用机制、可靠性及实际效果。一般认为,人工合成的寡核苷酸要应用于临床,尚需进一步提高稳定性和生物利用度。尽管如此     

细胞核内反义RNA和反义ribozyme——基因表达抑制新途径

近年来,新采用的反义技术已有细胞核内反义RNA和Antizyme。前者是指将反义RNA限制于细胞核内抑制靶基因原始转录子,以避免在细胞浆需抑制极其巨大数量的靶RNA,而起到把问题解决在萌芽状态的独特作用,这种模拟真核生物天然存在反义RNA封闭基因表达机制的高效方法,无疑开辟了一条抑制基因表达的新途径。后者是反义ribozyme,即ribozyme基因与反义RNA基因相连接,转录成具有ribozyme和反义RAN双重功能的一类RNA分子,实际上是基因剪刀和基因表达封条的联合体。目前,它在转基因植物研究方面,应用比较广泛。从研究进展、存在问题、发展对策和应用前景四方面评述细胞核内反义RNA和反义ribozyme是抑制基因表达的新途径。     

反义寡核苷酸技术的进展及应用

随着分子生物学和遗传工程的发展,基因治疗应运而生,得到广泛的肯定,其中包括反义核酸技术,简称反义技术。那些能与特定的ＤＮＡ或ＲＮＡ以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录和翻译的短核酸片段,称为反义寡核苷酸（ａｎｔｉｓｅｎｓｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ）。研究反义寡核苷酸作用机理和应用的技术叫反义技术。 反义技术概述 早在１９８４年,Ｊｏｈｎａｔｈａｎ Ｇ就报道了用反义ＲＮＡ抑制ＴＫ基因的表达取得了良好的效果~［１］。反义寡核苷酸抑制靶基因的作用途经包括：１．反义寡核苷酸与ＤＮＡ双螺旋形成三螺旋,…     

靶向微小RNA的病毒感染疾病治疗新策略

微小RNA(microRNA,miRNA)是真核生物细胞的一类长度约为19～25个核苷酸的非编码小RNA,在生物体发育和基因表达过程发挥重要的调控作用。miRNA分子通过与靶mRNA的互补配对,在转录后水平上对基因的表达进行负调控。近来研究表明miRNA在病毒感染宿主过程中发挥重要作用。通过设计抗miRNA反义寡核苷酸促进或阻断特定miRNA的表达可以实现抑制病毒复制的目标。本文综述了抗miRNA反义寡核苷酸研究现状和面临的挑战。     

反义药物在疾病治疗中的应用研究

所谓反义药物(Antisense Drug)目前包括反义DNA、反义RNA及Ribozyme。反义DNA的作用是用人工合成的与待封闭基因的某一区段互补的正常或化学修饰的DNA片段(8～28mer)抑制或     

增殖细胞核抗原和血管内皮生长因子反义核酸基因治疗肝癌的实验研究

选择增殖细胞核抗原 (PCNA)和血管内皮生长因子(VEGF)作为靶基因 ,设计针对 PCNA m RNA和 VEGFm RNA的两种反义核酸作用于人肝癌细胞株及裸鼠肝癌模型 ,观察人肿瘤细胞增殖情况及生物学行为的变化 ,及对裸鼠致瘤的抑制效应。1.增殖细胞核抗原反义核酸抑制人肝癌细胞体外增殖的影响目的　根据 PCNA c DNA 序列设计合成与 PCNAm RNA AU G起始密码子后的 18位碱基序列互补的 PCNA反义寡核苷酸 ,作用于人肝癌细胞株 ,观察对肝癌细胞体外增殖的影响及生物学特性的改变。　方法　利用体外培养技术 ,通过细胞生长曲线测定、MTT…     

反义核酸技术及其在卵巢恶性肿瘤治疗中的应用

随着分子生物学及基因工程的发展 ,基因治疗已成为研究热点。反义核酸技术的概念是根据碱基互补原理 ,使用与目标靶的遗传物质 (DNA或mRNA)特定互补的短核苷酸片段封闭基因表达的方法。由于反义核酸技术是从生命的最根本点核酸角度着眼 ,对疾病的治疗有突破性的进展。1　反义核     

VEGF165反义RNA表达对人胃癌细胞恶性生物学行为的影响

目的利用本室构建的反义VEGF165（血管内皮生长因子,vascular endothelial growth factor）真核表达载体,研究VEGF反义RNA表达对人胃癌细胞生物学表型的影响. 方法用阳性脂质体介导的基因转染技术,将VEGF反义RNA重组体转入人胃癌细胞系,观察转染细胞的细胞周期、增殖能力及致瘤生长情况等生物学表现. 结果 VEGF反义RNA重组体转染胃癌细胞后,斑点杂交、间接免疫荧光等分析显示,反义RNA基因转染技术可使VEGF的表达明显减弱;与未转染的细胞相比,G2/M期细胞增加(0.39),而S期细胞减少(0.54);克隆形成率(2.2%)低于未转染细胞(4.0%);肿瘤细胞接种裸鼠后33 d时,VEGF反义RNA表达人胃癌细胞所致的移植瘤体积（345±136) mm3明显小于未转染细胞所致的移植瘤体积（1534±363) mm3. 结论 VEGF反义RNA可以通过抑制肿瘤组织血管生成而防治肿瘤的生长,另外VEGF的表达可能与细胞增殖能力有关.     

c-myc反义RNA对NIH/3T3、人胃癌细胞生长及生物大分子合成的影响

采用c-myc反义RNA表达质粒与pSV_2neo质粒经电击穿孔技术共转染了NIH/3T3细胞和人胃癌823细胞,经适当浓度G418筛选后,获得其相应的转染细胞株。实验表明,该转染细胞在一定浓度Cd~(2 )诱导c-myc反义RNA表达后,细胞形态有所改变,生长速度受到抑制,DNA、RNA及蛋白质生物合成均有不同程度的变化。     

反义核苷酸技术在胃癌中的应用研究进展

反义技术是1984年由Izant等首先提出的，根据碱基互补原理，用外来合成特定的互补的反义核苷酸与细胞内核酸相互作用以抑制或封闭该表达。目前反义技术在肿瘤治疗的研究中已成为热点之一，并且已取得了一些成绩。现将对其在胃癌中的研究重点介绍如下。     

反义技术治疗肿瘤的临床进展

反义技术是根据核酸间的碱基互补原理 ,用生物合成或人工合成的互补反义核酸或其化学修饰物与细胞内的特定核酸结合以抑制或封闭其表达。在肿瘤治疗方面 ,人们以癌变过程中的不同突变基因为靶位 ,设计了许多反义抗肿瘤药物 ,其中部分已进入临床试验阶段。作者对已进入临床试验阶段的反义抗肿瘤药物进行综述     

端粒酶反义RNA技术在抑制结肠癌生长中的研究现状

反义RNA是指能够通过碱基互补与靶RNA(主要是mRNA)特异性结合,抑制靶RNA的功能,从而控制其表达的一类小分子转录物.反义RNA的发现始于原核生物,后来发现真核细胞中也存在天然反义RNA.由于能够选择性地封闭靶基因表达,而且随着近年来反义RNA技术与端粒酶研究的不断深入,构建出针对端粒酶的反义RNA抑制其活性,达到抑制肿瘤生长的目的,成为近年来的研究热点.本文对反义RNA作用原理、抗结肠癌作用中的应用等进行综述.     

反义寡核苷酸技术的进展及应用

随着分子生物学和遗传工程的发展,基因治疗应运而生,得到广泛的肯定,其中包括反义核酸技术,简称反义技术.那些能与特定的DNA或RNA以碱基互补配对的方式结合,并阻止其转录和翻译的短核酸片段,称为反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide).研究反义寡核苷酸作用机理和应用的技术叫反义技术.