超声微泡造影剂在冠状动脉粥样硬化性心脏病治疗中的应用进展

冠状动脉粥样硬化性心脏病(CHD)是威胁人类健康和生命的疾病之一,药物、介入及外科治疗均不能根治.外源性给予某些促血管生成因子或治疗基因能促进缺血心肌血管再生和侧支循环建立,改善心肌缺血.超声微泡造影剂作为促血管生成因子或治疗基因的载体,联合超声辐照能更安全、高效、靶向地导入缺血心肌组织,为CHD的治疗开辟了一个新的应用前景.本文就近年来超声微泡造影剂在CHD治疗中的应用进展做一综述.     

超声辐射力对靶向微泡黏附内皮祖细胞的调控作用

目的研究超声辐射力对体外靶向微泡黏附内皮祖细胞的调控作用,为临床治疗动脉粥样硬化不稳定斑块提供前期实验基础。方法首先进行靶向微泡的制备及其黏附内皮祖细胞的拍片,其次建立微血管流体模型,通过高分辨摄像机观测超声辐照力对内皮祖细胞黏附靶向微泡的推移现象。结果镜下观察靶向微泡黏附内皮祖细胞情况较好;超声辐照对微泡无明显破坏作用,推移速度缓慢稳定;当微泡浓度为7×107/ml时,超声辐射力对微泡推移现象较稳定,延长辐照时间对微泡的推移作用无明显影响。结论靶向微泡黏附内皮祖细胞黏附作用较好,超声辐射力可显著提高体外微血管内携带干细胞微泡的靶向黏附作用。     

超声微泡在缺血性血管疾病诊断与治疗中的研究进展

微泡造影剂受一定强度超声辐照后会破裂并产生声致孔效应,从而使局部毛细血管破裂,血管内容物外渗并在局部引起炎症反应,其产生的炎症因子可促进局部组织血管新生.超声介导微泡造影剂携药物或基因进行缺血性疾病的治疗是一种新型安全有效的靶向治疗技术.本文就超声微泡促进血管新生机制及其在缺血性血管疾病诊断与治疗方面的研究进展作一综述.     

超声联合微泡增敏肿瘤化疗的基础研究与临床应用进展

恶性肿瘤死亡率高,化疗是其重要的治疗方法之一。应用微泡的声孔效应提高细胞对化疗药物的摄取,增加肿瘤组织局部药物浓度以达到增敏化疗作用,是目前肿瘤治疗研究的新方向之一。超声联合微泡可增加肿瘤组织局部药物浓度、增强细胞毒作用,促进肿瘤细胞凋亡,缩小肿瘤体积,改善肿瘤对化疗药物的耐药性,具有良好的临床应用价值及前景。本文就超声联合微泡增敏肿瘤化疗的基础研究及临床应用方面进行综述。     

经多功能心腔内超声导管超声辐照破坏微泡对犬心肌组织的生物学效应

目的观察经多功能心腔内超声(ICE)导管超声辐照破坏微泡对动物心肌产生的生物学效应,探索基因治疗缺血性心脏病的新方法。方法 15只犬随机分为US+MB组、US组、对照组3组,每组5只。以介入法将多功能ICE导管送入犬心室。对US+MB在ICE监控下向左心室游离壁注射0.5ml微泡,并以1 W/cm2的声能对注射部位辐照1min;对US组以相同条件行左心室壁辐照,但不注射微泡;对照组在插入导管后不进行任何处理。术后3天处死动物,观察心肌组织大体改变,并行HE染色观察细微结构变化。结果ICE能对注射针的进针深度、微泡注射及辐照过程进行实时监控。观察期内所有动物均正常存活。US+MB组心肌辐照部位出现充血、心肌细胞间隙增宽、少量炎性细胞浸润等改变,US组心肌组织仅出现轻微充血;对照组动物心肌无异常变化。结论经ICE导管超声辐照破坏微泡能在靶区域产生相应生物学效应,内置ICE可对心肌内微泡注射、超声辐照过程进行实时监控。此款新型多功能导管可能为基因治疗缺血性心脏病提供新的、更加安全有效的途径。     

微泡介导下诊断超声波开放人血脑屏障的可行性研究:体外微泡破坏实验

目的探讨诊断超声经人颅骨破坏微泡的可行性及条件,为下一步开展诊断超声联合微泡开放人血脑屏障的在体实验研究奠定基础。方法建立体外微泡破坏实验装置,分别考察GE Vivid 7、Sequoia 512和Philips iE 33超声仪器对儿童、青年和老年颅骨的颞骨窗、枕骨窗和顶骨窗5.0 cm处微泡的破坏情况。选择Sequoia 512超声仪器以最低频率(1.75 MHz)、机械指数(1.9)经青年颞骨辐照微泡后,考察不同辐照深度微泡的破坏情况。结果3种超声诊断仪经所有颅骨的颞骨窗、枕骨窗辐照后后都能明显地破坏微泡,但经顶骨不能击破微泡。Sequoia 512超声仪器经青年颞骨后在辐照深度7.5 cm处仍能明显地破坏微泡。结论诊断超声波经人颅骨颞骨窗、枕骨窗仍能破坏微泡,具有联合微泡开放人血脑屏障的潜在可能性。     

超声联合微泡在肿瘤化疗增敏的基础研究与临床应用进展

恶性肿瘤是一类死亡率很高的疾病,化疗是其重要的治疗方法之一。应用微泡的声孔效应提高细胞对化疗药物的摄取以增加肿瘤组织局部药物浓度达到增敏化疗的目的,是目前肿瘤治疗研究的新方向之一。超声联合微泡可增加肿瘤组织局部药物浓度、增强细胞毒作用,促进肿瘤细胞凋亡,缩小肿瘤体积,改善肿瘤对化疗药物的耐药性,具有良好的临床应用价值及前景。本文拟从超声联合微泡增敏肿瘤化疗的基础研究及临床运用方面进行综述。     

低频低能量超声联合微泡抑制人前列腺癌细胞PC-3转移的研究

目的探讨低频低能量超声联合微泡抑制人前列腺癌细胞转移及分子机制。方法以频率21 k Hz、声强46 m W/cm2超声,采用连续波辐照人前列腺癌细胞PC-3悬液30 s。分为三组:对照组、单独超声辐照组及超声辐照联合微泡组(加声诺维200μl)。辐照后培养12 h,Transwell小室模型进行细胞体外转移实验,western-blot检测其基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达。结果辐照后12 h,与对照组比较,单独超声辐照组及超声辐照联合微泡组细胞转移数量受到抑制,并且以超声辐照联合微泡组受到抑制最明显(均P0.05);细胞辐照24 h后,与对照组比较,单独超声辐照组及超声辐照联合微泡组MMP-2及MMP-9蛋白表达明显受到抑制,并且以超声辐照联合微泡组最为明显(均P0.05)。结论低频超声联合微泡能够抑制人前列腺癌细胞PC-3的转移,并且可能通过下调MMP-2、MMP-9蛋白表达来实现。     

超声微泡造影剂实现肿瘤靶向性治疗研究进展

低功率超声辐照微泡栓塞肿瘤血管是治疗肿瘤的一种新方法,特异性抗体偶联微泡介导的药物或基因靶向运输在肿瘤治疗方面也显示出巨大潜力,具有广阔的应用前景。现对超声微泡造影剂介导肿瘤靶向性治疗的研究进展做一综述。     

超声声致孔隙效应增强兔前列腺组织通透性的研究

目的 探讨超声联合造影剂微泡的超声声致孔隙效应开放血-前列腺屏障,提高前列腺组织通透性的可行性.方法 15只健康8月龄性成熟新西兰兔,随机分为单纯微泡组、单纯超声组、超声联合微泡辐照组,超声直接辐照前列腺,荧光显微镜、体视显微镜、伊文思蓝(EB)示踪观察前列腺组织通透性的变化.结果 体视显微镜下超声联合微泡辐照组前列腺组织可见蓝色EB分布于前列腺包膜,部分EB渗透到腺体实质,腺体呈均匀蓝染,单纯超声组及单纯微泡组EB均分布于包膜,腺体实质部分渗透不明显.单纯超声组、单纯微泡组、超声联合微泡辐照组前列腺冰冻切片均可见红色EB荧光分布;经苏木素复染后可见超声联合微泡辐照组腺体管腔内有EB荧光,而单纯超声组、单纯微泡组均未见管腔内红色EB荧光;超声联合微泡辐照组前列腺EB平均浓度较单纯超声组、单纯微泡组高,差异有统计学意义(P<0.01),单纯微泡组及单纯超声组EB浓度均值未见显著差异(P>0.05).结论 超声联合造影剂微泡的超声声致孔隙效应可以有效开放血-前列腺屏障,明显提高兔前列腺组织通透性.     

超声联合声诺维辐照增强GFP基因在鼠胶质瘤C6细胞中的转染

目的 探讨超声联合声诺维微泡辐照对增强型绿色荧光蛋白基因(EGFP)在鼠胶质瘤C6细胞中的转染增效作用及安全性.方法 实验分为4组:单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组和质粒+超声+微泡组.辐照条件为超声频率1 MHz,声强1 W/cm2,辐照时间30 s,占空比20%.按不同实验条件辐照后,应用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪评估基因转染效率,台盼蓝染色法评估细胞活力.结果 经超声联合微泡辐照C6细胞后,GFP基因转染效率较其他组显著增加,差异有统计学意义(P<0.01),且各组均未发现显著的细胞损伤.结论 超声联合声诺维微泡辐照可显著增强GFP基因在鼠胶质瘤C6细胞的转染,为临床胶质瘤基因治疗提供了一种安全,有效的非病毒基因转染方法.     

诊断超声联合微泡促顺铂跨血脑屏障转运的实验研究

目的 探讨诊断超声联合超声造影剂(微泡)促顺铂跨体外血脑屏障(BBB)模型的可行性.方法 利用BALB/c小鼠脑微血管内皮细胞(BMVEC)建立BBB体外实验模型,根据是否加入微泡和超声辐照,分为四组:对照组、超声组、微泡组和超声联合微泡组.每组添加浓度为5 ng/μl的生物素胶体金50 μl和顺铂,顺铂达到9 μg/cm2,供池定容在460 μl,分别于超声辐照后再培养48 h,并在培养不同时间点从受池中取样,通过高效液相色谱法(HPLC)检测顺铂的通透率;透射电镜观察细胞膜与细胞内超微结构的变化以及胶体金的分布;实验前后细胞小室行扫描电镜能谱分析.结果 2 MHz、0.6 W/cm2、10 min的诊断超声辐照联合脂膜微泡(1 μl/ml)能够促顺铂跨体外BBB模型的转运,透射电镜观察到内皮细胞胞饮小体增多,细胞内可见胶体金分布;单纯超声辐照组细胞间隙可见少量胶体金分布,对照组和微泡组细胞内外均不能见到胶体金;扫描电镜能谱分析,各组碳和锌元素总量均无改变,而超声组和超声联合微泡组两种元素的能谱分布发生转变.经HPLC检测,顺铂通透量超声组与超声联合微泡组显著高于对照组与微泡组,组间比较差异有统计学意义.结论 微泡联合诊断超声波能通过短暂开放紧密连接,促进药物顺铂跨BBB的转运.     

超声微泡携带药物靶向治疗乳腺癌研究进展

超声微泡携带药物靶向治疗肿瘤是近年来超声分子影像学领域研究的热点。超声微泡在超声能量作用下导致破裂,产生瞬态"击破效应",所携带的药物可定向释放到超声辐照的肿瘤部位提高肿瘤组织内药物浓度,实现靶向治疗肿瘤作用。药物靶向治疗乳腺癌的关键技术之一是如何安全、高效地将抗肿瘤药物定向转导入肿瘤靶组织和细胞。传统脂质体载体存在转导率低和靶向性差等缺点。因此,研发高效的肿     

冠心病血管新生治疗的进展

冠心病是威胁人类健康的疾病。新近研究发现,血管生长因子经安全有效的载体导入或直接注入缺血心肌,可以促进血管新生。干细胞研究的进展和基因治疗技术以及在心血管的应用,为缺血性心脏病的治疗提供了新策略。超声介导微泡造影剂携药物或基因进行缺血性疾病的治疗是一种新型的靶向治疗技术。本文就各种因子和细胞及各种方法在血管新生中的作用作一综述。     

间歇式发射对微泡超声空化损伤小血管的增强作用

目的 探讨不同的超声发射方式在微泡超声损伤肠系膜小血管中的效应.方法 32只新西兰大白兔随机分为单纯微泡组、单纯超声辐照组、超声连续辐照微泡组和超声间歇辐照微泡组进行实验.静脉注射脂氟显微泡0.1 ml/kg,用峰值声压2.6MPa的低占空比治疗超声照射,照射后肉眼观察照射区域肠系膜小动静脉血管损伤情况,取辐照区小血管做病理检查.结果 单纯微泡组和单纯超声辐照组照射区小血管未发现任何生物学效应,而由微泡超声辐照的两组均出现了小血管破裂出血、血栓形成等生物学效应.肉眼观察超声间歇辐照微泡组形成的血肿大于超声连续辐照微泡组;病理学检查表明超声间歇辐照微泡组血管内皮细胞损伤,基底膜断裂以及血栓栓塞情况均高于超声连续辐照微泡组.且超声连续辐照微泡组形成的血管损伤情况不稳定.间歇辐照组损伤面积显著高于连续辐照组(P＜0.01).结论 在适宜参数条件下,微泡超声空化可引起肠系膜小血管壁破裂出血、形成血栓及栓塞血管;微泡再灌注增强了血管的损伤.     

低频超声辐照联合微泡抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的实验研究

目的 观察低频超声(20 kHz)辐照联合静脉注射微泡造影剂SonoVue对裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤的抑瘤效应,并探讨其可能的抑瘤机制.方法 通过细胞移植和瘤块移植方法建立24只裸鼠人前列腺癌Du145移植瘤模型,随机分为超声微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组,每组6只.超声微泡组:尾静脉注射0.2 mL SonoVue的同时对瘤体行20 kHz超声辐照,辐照强度2 W/cm2,辐照2 min;单纯超声组:尾静脉持续缓慢推注生理盐水0.2 mL,同时超声辐照2 min;单纯微泡组:尾静脉持续缓慢推注SonoVue 0.2 mL同时行假照;对照组不做任何处理.各组均隔天治疗1次,共3次.治疗后测量瘤体大小,绘制瘤体生长曲线,计算抑瘤率.首次治疗后14 d剥离瘤体,通过光镜、电镜观察肿瘤组织病理改变.免疫组织化学法观察CD34阳性染色血管,计算肿瘤微血管密度(MVD),比较各组间MVD的差异.结果 24只裸鼠均成功植瘤.治疗后超声微泡组瘤体体积明显小于其他各组(P＜0.05),抑瘤率为62.70%.HE染色观察超声微泡组瘤体组织大部分损伤坏死,电镜下超声微泡组肿瘤内微血管的内皮细胞损伤,线粒体肿大,基底膜断裂.超声微泡组瘤体内CD34阳性染色微血管数减少,其MVD值显著低于其他各组(P＜0.05).结论 20 kHz低频超声辐照联合微泡造影剂SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生长,其抑瘤机制是超声空化效应破坏肿瘤的微血管.     

微泡增强低频超声空化抑制裸鼠前列腺癌移植瘤

目的观察低频超声（20kHz）辐照联合静脉注射微泡造影剂SonoVue对裸鼠前列腺癌（Dul45）移植瘤的抑瘤效应,并探讨其可能的抑瘤机制。方法通过细胞移植和瘤块移植方法建立24只裸鼠前列腺癌Dul45移植瘤模型,随机分为超声微泡组、单纯超声组、单纯微泡组和对照组,每组各6只。超声微泡组：尾静脉注射0．2mLSonoVue的同时对瘤体行20kHz超声辐照,辐照强度200mW／cm2;单纯超声组：尾静脉注射生理盐水0．2mL,同时超声辐照2min;单纯微泡组：尾静脉注射SonoVue0．2mL同时行假照,各组均隔天1次,共3次,对照组不做任何处理。治疗后测量瘤体大小,绘制瘤体生长曲线,计算抑瘤率。首次治疗后14d剥离瘤体,通过光学显微镜、电子显微镜观察肿瘤组织病理改变。免疫组织化学方法观察CD34阳性染色血管,计算肿瘤微血管密度（microvesseldensity,MVD）,比较各组间MVD的差异。结果24只裸鼠均成功植瘤。治疗后超声微泡组瘤体体积均数明显小于其他3组（P〈O．05）,抑瘤率为62．7％。光学显微镜下超声微泡组瘤体组织大部分损伤坏死,电子显微镜下超声微泡组肿瘤内微血管的内皮细胞损伤,线粒体肿大,基底膜断裂。超声微泡组瘤体内CD34阳性染色微血管数减少,其MVD值显著低于其他各组。结论20kHz低频超声辐照联合微泡造影剂SonoVue可有效抑制裸鼠人前列腺癌移植瘤的生长,其抑瘤机制可能是通过超声空化效应破坏肿瘤的微血管实现的。     

低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的研究进展

低频超声(low-frequency ultrasound,LFUS)联合微泡(microbubbles,Mbs)辐照诱导肿瘤细胞凋亡是近年来超声医学研究的热点之一,其机制主要是微泡使低频超声空化效应明显增强,该效应从多个方面对肿瘤细胞产生影响而导致其凋亡[1]。本文对低频超声联合微泡辐照诱导肿瘤细胞凋亡的基础、机制和研究进展作一综述。一、肿瘤细胞凋亡凋亡是细胞最基本的生物学现象,在生物体的进化、     

载竹红菌素脂质微泡的制备及对兔VX2肝肿瘤的显影实验

目的 制备一种载光动力药物的脂质超声微泡,测定物理特性,并观察其对兔VX2肝肿瘤的显影效果及过程.方法 采用机械振荡的方法 制备载竹红菌素脂质微泡,并测定其粒径大小、分布、Zeta电位和包封率、稳定性及超声辐照后药物释放情况.采用不同超声模式观察微泡在兔VX2肝肿瘤的显像效果及过程.结果 载药微泡的粒径为(1052.4±322.7)nm,Zeta电位为 (21.1±7.4)mV,包封率为(88.1±4.6)%,超声辐照能够促使微泡释放药物,对兔VX2肝肿瘤的显影效果好.结论 载竹红菌素脂质微泡包封率高、微泡能够释放药物、显像好,符合理想的药物载体,为实时监控下的体内定位光动力治疗疾病提供了一种新的思路.     

低频超声联合微泡造影剂诱导人前列腺癌PC3细胞及DU145细胞自噬的实验研究

目的：研究低频超声联合微泡造影剂对人雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞及DU145细胞自噬的影响。方法2种细胞均各分为空白对照组、单纯微泡组、单纯低频超声组和低频超声联合微泡组4组,每组设3个复孔。单纯微泡组加200μl的微泡造影剂混匀,不进行超声辐照;单纯低频超声组以声功率80 mW的20 kHz低频超声,不加造影剂,连续波辐照60 s;低频超声联合微泡组加200μl的微泡造影剂,混匀后以声功率80 mW的20 kHz低频超声,连续波辐照60 s;空白对照组不进行任何处理,辐照后的细胞继续培养24 h,吖啶橙染色荧光显微镜与透射电镜观察细胞自噬泡。结果经吖啶橙染色后,荧光显微镜下,2种细胞低频超声联合微泡组的胞质内可见大量红色荧光的酸性囊泡,明显多于其余3组;单纯低频超声组红色荧光的酸性囊泡量亦多于空白对照组,空白对照组与单纯微泡组红色荧光的酸性囊泡量差异不大。透射电镜下,2种细胞的低频超声联合微泡组细胞细胞核基本正常,但胞质内出现大量由双层膜包裹的自噬泡或自噬体,而空白对照组内的细胞形态基本正常,胞质内未见到明显的自噬泡的形成。结论低频超声联合微泡造影剂能明显诱导人雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞及DU145细胞的自噬。