胡蓝降糖缓释片质量标准研究△

目的：建立胡蓝降糖缓释片的质量控制标准。方法：采用薄层色谱法对胡蓝降糖缓释片中绞股蓝进行定性鉴别,用高效液相色谱法对胡芦巴中薯蓣皂苷元进行含量测定。结果：本品定性鉴别薄层色谱特征明显,专属性强。采用迪马SEDEX75-蒸发光散射检测器,岛津YP—ODS色谱柱（150mm×4．6mm,5μm）,甲醇-水（84：16）为流动相;检测波长203nm;流量1．0mL·min^-1;柱温40℃;漂移管温度85℃;气流体积流量2．5L·min^-1。塔板数以薯蓣皂苷元计,不低于2000。薯蓣皂苷元在0．842～8．42μg与其色谱峰面积呈良好线性关系,薯蓣皂苷元平均回收率为98．53％,胡蓝降糖缓释片在2,4,12h的释放量分别在18％-35％,35％～55％,80％以上,均符合规定。结论：该法简便、准确、专属性强,可作为胡蓝降糖缓释片的质量控制方法。     

降糖三黄片对糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C和转化生长因子β1的影响

目的 观察降糖三黄片对糖尿病肾病(DN)大鼠肾组织中蛋白激酶C(PKC)和转化生长因子β1(TGF β1)的影响及其对肾脏的保护作用.方法 将49只Wistar大鼠随机分为正常组10只,造模组39只.采用高脂饲料加链脲佐菌素腹腔注射复制DN大鼠模型,34只造模成功大鼠分为模型组10只,中药组和西药组各12只.中药组给予降糖三黄片[787.5mg/(kg·d)],西药组给予卡托普利片[4mg/(kg·d)],正常组及模型组灌服等量蒸馏水,各组均连续灌胃8周.实验末腹主动脉采血检测各组大鼠血糖、血脂、胆固醇和胰岛素水平;治疗第4、8周测24h尿蛋白总量;摘取右侧肾脏称重并计算肾质量系数;免疫组织化学检测肾组织TGFβ1水平和PKC活性.结果 中药组血糖、血脂、胰岛素水平下降,胰岛素敏感指数上升,与模型组及西药组比较差异有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).中药组肾质量系数低于模型组(P＜0.05),中药组和西药组尿蛋白总量均较模型组减少(P＜0.01);中药组肾质量系数、尿蛋白总量与西药组比较差异均无统计学意义.中药组、西药组大鼠TGF-β1、PKC表达明显低于模型组(P＜0.01),西药组略低于中药组但两组比较差异无统计学意义.结论 降糖三黄片可抑制DN大鼠肾组织中PKC活性.下调TGF-β1水平,使细胞外基质合成减少,起到保护肾组织、推迟肾纤维化的作用.     

牛蒡子提取物对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性作用的研究

目的 :研究糖尿病大鼠肾皮质蛋白激酶C(PKC)活性的变化及牛蒡子提取物对其影响 ,探讨牛蒡子粗粉及提取物治疗糖尿病肾病的作用机制。方法 :采用链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射造成糖尿病肾病大鼠模型 ,给予牛蒡子粗粉及提取物灌胃治疗 6周 ,检测其体重、肾重 体重、尿量、尿微量白蛋白、肾皮质PKC活性变化。结果 :经牛蒡子粗粉及提取物治疗后 ,糖尿病大鼠尿量、肾重 体重、尿白蛋白均有明显减少 ,与模型组相比 ,有明显差异 (P <0 0 5 )。可降低胞膜PKC活性 ,与模型组相比 ,有明显差别 (P <0 0 5 )。结论 :牛蒡子提取物降低胞膜PKC活性 ,可能为其对肾脏保护作用的机制之一。表明 :牛蒡子醇提物较其水提物和粗粉疗效更为显著     

葛根素对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的作用

目的 研究葛根素(Pue)对糖尿病大鼠。肾脏蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型，随机分为糖尿病组、Pue(500、250、125mg／kg)治疗组、维生素E(VitE)组，同时另设正常对照组，给药12周后，测定肾功能及。肾脏指数，ELISA法测定肾脏PKC活性，放免法测定尿蛋白排泄率，并对肾组织进行光镜及电镜观察。结果 糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率、肾脏指数(肾脏质量／体重)、肾小球细胞膜PKC活性明显升高，给予Pue治疗12周后，治疗组糖尿病大鼠尿白蛋白排泄率较糖尿病组显著降低，肾脏肥大也有明显改善，肾小球细胞膜PKC：活性显著下降，光镜及电镜下肾脏病理改变较糖尿病组有较大改善。结论 Pue可以纠正糖尿病大鼠早期肾脏高滤过、高灌注，并对糖尿病大鼠肾脏病变有一定的保护作用，其部分机制可能是通过下调。肾脏PKC活性而实现的。     

益气温阳化瘀法对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响

目的:探讨益气温阳化瘀法之肾消方对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C活性的影响。方法:单肾切除加链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。分别予以中药肾消方和厄贝沙坦干预治疗16周,测定大鼠肾组织PKC活性,检测24 h尿蛋白排出量(Upro),肾脏常规染色光镜观察病理变化。结果:16周时单肾糖尿病大鼠肾组织出现肾小球硬化病理改变,Upro明显升高,细胞膜PKC活性(mPKC)明显升高,细胞浆PKC活性(cPKC)明显降低,mPKC和cPKC比值(M/C)明显升高。肾消方和厄贝沙坦干预治疗显著降低Upro,降低mP-KC和M/C,升高cPKC(P<0.01),改善肾组织病理改变。结论:肾消方对单肾切除STZ糖尿病大鼠具有肾保护作用,可通过抑制PKC的活性进而延缓DN的发生。     

牛蒡子提取物对糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C活性作用的研究

糖尿病肾病 (ｄｉａｂｅｔｉｃｎｅｐｈｒｏｐａｔｈｙ ,ＤＮ)是糖尿病(ｄｉａｂｅｔｉｃｍｅｌｌｉｔｕｓ ,ＤＭ)最常见的并发症 ,也是糖尿病患者主要的死亡原因之一。近年来 ,有关细胞内信号传导系统的研究备受关注 ,该系统是细胞外刺激调节细胞收缩、舒张等生理功能几细胞增殖、分化和细胞内有关物质合成的必经途径 ,而ＰＫＣ是细胞内诸多信号传导系统相互影响的中心环节[1] ,ＰＫＣ是高糖或ＧＬＵＴ1表达增高时系膜信号传导通路中的重要介质 ,几乎所有的系膜细胞功能改变均与ＰＫＣ激活有关 ,高糖下ＰＫＣ的激活来源于糖酵解过程中间产…     

六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病大鼠肾脏蛋白激酶C活性及结缔组织生长因子的影响

目的观察六味地黄加味胶囊对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏的保护作用,对肾脏蛋白激酶C(PKC)活性及结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响。方法ip链脲佐菌素(STZ)建立大鼠DN模型,模型成功后随机分为5组:对照组、模型组、洛汀新组、六味地黄加味胶囊组、洛汀新与六味地黄加味胶囊合用组,药物干预12周后,透射电镜观察各组大鼠肾脏超微结构,免疫组织化学法检查肾皮质CTGF表达,检测相对肾质量、血糖、尿白蛋白排泄率(UPER)、血肌酐(SCr)、尿肌酐(UCr)、内生肌酐清除率(CCr)、肾脏PKC活性等。结果DN大鼠肾脏胶原沉积明显,相对肾质量、血糖、UPER、CCr、肾脏PKC活性、肾皮质CTGF表达等显著升高,洛汀新、六味地黄加味胶囊及两药合用均可降低肾脏PKC活性和肾皮质CTGF的表达,改善DN大鼠蛋白尿、肾功能,减轻肾脏胶原沉积,两药合用能更显著降低肾脏PKC活性、肾皮质CTGF的表达,降低蛋白尿和改善肾功能作用更强。结论洛汀新、六味地黄加味胶囊及两药合用均能保护DN大鼠肾脏,且两药合用较单用洛汀新作用更强。     

桂枝汤对低体温大鼠下丘脑组织蛋白激酶A和C活性的影响

目的：研究低体温大鼠下丘脑蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C（PKC）活性的变化及桂枝汤的升温作用机理。方法：选用腹腔注射氨基比林低体温大鼠模型，先观测桂枝汤（p．o．）对模型大鼠体温的影响，继而采用放射性同位素法，测定给予桂枝汤后低体温大鼠下丘脑组织中PKA、PKC的活性。结果：桂枝汤可使低体温模型大鼠下丘脑组织中受抑的PKA、PKC活性显著增强，促进体温恢复。结论：PKA、PKC参与了大鼠的低体温过程，桂枝汤的升高体温的作用可能与提高下丘脑组织中PKA、PKC活性有关。     

降糖益肾活血方对糖尿病肾病大鼠的干预作用及其机制研究

目的 探讨经降糖益肾活血方干预后的DN模型大鼠肾组织PKC酶的活性与转化生长因子β1(TGF-β1)变化情况,以揭示其在DN发病过程中的作用及相互关系.方法 将实验大鼠用高糖高脂饲料喂养1个月后,采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立早期糖尿病肾病(DN)大鼠模型.将大鼠随机分为4组:正常对照组,DN模型组、中药治疗组和西药福辛普利对照组.断头处死,分离肾小球,提取纯化胞浆及胞膜蛋白,利用[γ32P]-ATP底物磷酸化的方法检测胞浆及胞膜PKC活性.用免疫组织化学和400倍光镜检测TGF-β1在各组大鼠肾脏的表达.结果 造模各组大鼠胞膜PKC活性、细胞内总的PKC活性明显高于正常对照组,差异显著,中药治疗组、阳性对照组与DN模型组比较差异显著,但中西药组间比较差异无统计学意义.造模各组大鼠TGF-β1的表达均高于正常组,经降糖益肾活血方干预的DN大鼠TGF-β1表达明显减弱,与DN模型组比较差异显著,与阳性对照组差异不显著.结论 降糖益肾活血方能降低肾小球PKC活性.下调肾组织TGF-β1蛋白的过度表达.     

菟箭合剂对糖尿病大鼠肾组织蛋白激酶C活性作用的研究

目的 :观察菟箭合剂对实验性糖尿病肾病大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)活性、肾功能及肾脏结构的影响。方法 :单肾切除加链脲佐菌素 (STZ)腹腔注射制作糖尿病肾病动物模型。中药菟箭合剂 (20g·kg^-1·d^-1)和阳性对照药缬沙坦 (2 0mg·kg^-1·d^-1)干预治疗 12周 ,用氚标记的二丁酸佛波醇酯 ([³H]PDBu)结合法测定大鼠肾组织PKC活性 ,检测 24 h尿蛋白排出量 (Upro) ,肾脏常规染色光镜观察病理变化。结果 :12周时单肾糖尿病大鼠肾组织出现肾小球硬化病理改变 ,Upro明显升高 ,细胞膜PKC活性 (mPKC)明显升高 ,细胞浆PKC活性 (cPKC)明显降低 ,mPKC和cPKC比值 (M/C)明显升高。菟箭合剂和缬沙坦干预治疗显著降低Upro ,降低mPKC和M/C ,升高cPKC(P<0.01) ,改善肾组织病理改变。结论 :菟箭合剂对单肾切除STZ糖尿病大鼠具有肾保护作用 ,推测部分地通过抑制肾组织PKC激活途径来达到的。     

复方黄连降糖片防治糖尿病肾病的实验研究

目的：研究复方黄连降糖片的药效学及其防治糖尿病肾病的作用。方法：选用健康的雄性Wistar大鼠，尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)，随机分为模型组、中药组和虫草组，同时设正常组。并开始用药，用药2周后处死动物，收集血液，并做肾脏病理形态学观察。同时观察以下指标：空腹血糖、饮食、饮水、体重、尿量、血清胰岛素、尿微量白蛋白、肾脏指数。结果：糖尿病大鼠在造模结束后，血糖明显升高，饮食、饮水增多，体重降低，肾脏指数增大，血清胰岛素降低，尿微量白蛋白升高，伴有肾脏基底膜明显增厚的病理改变。给予药物治疗后，血糖、饮食、饮水、尿微量白蛋白、肾脏指数均有所降低，而血清胰岛素有所升高。结论：复方黄连降糖片能改善1型糖尿病的总体状况，并对糖尿病肾病有一定的防治作用。     

青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C移位活化的抑制作用

目的探讨青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C(PKC)由细胞浆到细胞膜移位活化的抑制作用。方法将实验大鼠随机分为对照组(A组)、糖尿病非治疗组(B组)及糖尿病青蒿素治疗组(C组),B组、C组采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素(STZ)65 mg/kg的方法建立糖尿病大鼠模型,造模后C组采用青蒿素300 mg/(kg·d)腹腔注射。于实验进行到第3周、第6周时分别宰杀大鼠6只,测算肌酐清除率(Ccr)、24 h尿白蛋白排泄率(UAER)及肾脏系数(肾脏质量/体质量);采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定PKC的活性。结果 B组大鼠Ccr、UAER、肾脏细胞膜PKC活性及肾脏系数均较A组明显升高(P0.05或0.01);C组大鼠上述指标均较B组明显下降(P0.05或0.01)。结论青蒿素通过抑制糖尿病大鼠肾脏细胞PKC移位活化而对糖尿病大鼠早期肾脏病变起到保护作用。     

益气降糖片对糖尿病大鼠血糖体重影响的研究

目的:观察益气降糖片对糖尿病大鼠血糖、体重的影响.方法:采用健康Wistar大鼠用链脲佐菌素造糖尿病大鼠模型,用益气降糖片治疗10周.结果:益气降糖片2g/kg组、4g/kg组、参芪降糖颗粒3g/kg组,血糖均较模型对照组明显下降(P＜0.01),益气降糖片4g/kg组血糖下降值与2g/kg组、参芪降糖颗粒3g/kg组相比有显著差别(P＜0.01).益气降糖片2g/kg组、4g/kg、参芪降糖颗粒3g/kg组体重增加值均较模型对照组明显升高(P＜0.01),益气降糖片4g/kg组体重增加值与2g/kg组、参芪降糖颗粒3g/kg组相比有显著差别(P＜0.01).结论:益气降糖片可降低糖尿病大鼠血糖,增加糖尿病大鼠体重.     

青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C移位活化的抑制作用

目的探讨青蒿素对实验性糖尿病大鼠肾脏蛋白激酶C（PKC）由细胞浆到细胞膜移位活化的抑制作用。方法将实验大鼠随机分为对照组（A组）、糖尿病非治疗组（B组）及糖尿病青蒿素治疗组（C组）,B组、C组采用腹腔单剂量注射链脲佐菌素（STZ）65mg／kg的方法建立糖尿病大鼠模型,造模后c组采用青蒿素300mg／（kg·d）腹腔注射。于实验进行到第3周、第6周时分别宰杀大鼠6只,测算肌酐清除率（Ccr）、24h尿白蛋白排泄率（UAER）及肾脏系数（肾脏质量／体质量）;采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定PKC的活性。结果B组大鼠Ccr、UAER、肾脏细胞膜PKC活性及肾脏系数均较A组明显升高（P〈0．05或0．01）;C组大鼠上述指标均较B组明显下降（P〈0．05或0．01）。结论青蒿素通过抑制糖尿病大鼠肾脏细胞PKC移位活化而对糖尿病大鼠早期肾脏病变起到保护作用。     

降糖明目胶囊对实验性糖尿病模型血糖影响的实验研究

1　实验材料1 1　材料　动物 :健康大耳白家兔 ,体重 2 0～ 2 5ｋｇ ,雌雄各半 ,由本院动物室提供 ,合格证号 :湘医动字 0 2 7号 ;Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,由湖南医科大学实验动物学部提供 ,合格证号 :湘医动字 2 0 -0 0 9号。试剂 :四氧嘧啶、链脲佐菌素 ,均为Ｓｉｇｍａ公司产品。药物 :降糖明目胶囊 (简称ＪＭ) :由本院中药所制剂室提供 ,批号 9712 10 ,成人每日用量 31 8ｇ生药 ,动物给药剂量按比例换算 ,其中高剂量组 5 6ｇ/ｋｇ,中剂量组 2 8ｇ/ｋｇ,小剂量组 1 4ｇ/ｋｇ ;导升明 -5 0 0 (简称ＤＸＭ) :奥地利依比威大药厂生产 ,人临床…     

丹参酮ⅡA对自发性高血压大鼠蛋白激酶C的影响

目的:观察丹参酮IIA对自发性高血压大鼠蛋白激酶C的影响,探讨丹参酮IIA防治高血压心肌肥厚的机制。方法:将18只8周龄的自发性高血压大鼠随机分成三组:一组于8周处死,另两组经腹腔分别注射丹参酮IIA和蒸馏水,共10周。测量大鼠尾动脉收缩压(SBP)及左心室重量指数(LVMI)。应用HE染色、免疫组织化学的方法,结合计算机图像分析技术,检测心肌细胞的直径和面积,以及蛋白激酶C(PKC)的表达。结果:与8周龄的自发性高血压大鼠相比,18周龄大鼠的SBP、LVMI、心肌细胞的直径和面积显著增加,PKC表达上调。丹参酮IIA可抑制LVH的发展和心肌组织PKC的表达,但收缩压无明显改变。结论:长期应用丹参酮IIA可预防自发性高血压大鼠左室肥厚的形成,其机制可能与丹参酮IIA能降低心脏蛋白激酶C的表达有关。     

中药干预糖尿病鼠肾脏蛋白激酶C信号通路的研究进展

细胞信号转导系统己成为近年来研究糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的热点之一,高糖作为始动因子,诱导蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)信号通路激活并促进DN发生、发展的研究倍受关注。诸多研究显示PKC信号通路的异常激活参与了DN的发生发展,且其重要作用已逐渐确立:PKC信号通路激活可明显影响血液动力学、增加血管通透性以及细胞外基质(extracellular matrixc,ECM)沉积、抑制Na+-K+-ATP酶活性和参与细胞增殖等。并且PKC抑制剂的使用为DN防治开辟了新视角与途径。研究证实,单味中药及其提取物(如牛蒡子及其提取物、槲皮素等)及一些中药复方(如菟箭合剂、六味地黄加味胶囊等)对DM鼠肾脏有部分保护作用,对PKC信号通路也有良好的抑制作用。但现有研究证据表明PKC信号通路抑制剂多为非特异性,且副作用大,而特异性PKC信号通路抑制剂尚在研究中,且迄今无成功应用到临床的先例。因此,随着中药现代化研究加快,深入研究中药抑制PKC信号通路激活,对从信号通路干预DN进展具有重要意义。本文就目前中药干预PKC信号通路与DN研究进展综述,为今后用中药作为PKC抑制剂来防治DN提供一定实验与理论依据。     

十一味益肾降糖片对Ⅲ期糖尿病肾病大鼠肾损伤干预的实验研究

目的:探讨十一味益肾降糖片对Ⅲ期糖尿病肾病(DN)大鼠肾损伤的干预作用。方法:采用高糖高脂饮食加链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立Ⅲ期DN大鼠模型,设立空白组(A组)、模型组(B组)、十一味益肾降糖片组(C组)、厄贝沙坦治疗组(D组)。灌胃12周后,检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、肾肥大指数(KW/BW)、24 h尿蛋白定量(24-hrUP)、血清胱抑素(CysC)、肾小球硬化指数等指标,取右肾制作病理切片,观察肾脏病理改变。结果:十一味益肾降糖片可改善DN大鼠的一般状况,降低FBG、KW/BW、24-hrUP、CysC等指标;抑制肾小球毛细血管基底膜增厚、系膜基质增生及细胞外基质合成。结论:十一味益肾降糖片可降低Ⅲ期DN大鼠FBG、KW/BW、24-hrUP、CysC等指标;减轻肾脏病理损害,保护肾脏功能。     

仙人掌粉对四氧嘧啶糖尿病大鼠降糖作用的实验研究

1　材料与方法1 1　材料与试剂　健康Ｗｉｓｔａｒ大鼠黑动字第 (Ｐ0 0 10 2 0 0 8) ,雄性 ,体重 180～ 2 2 0ｇ ,由哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心提供。仙人掌粉 ,由哈尔滨英霞实业有限公司提供 ,来源于墨西哥食用仙人掌脱水处理而成。四氧嘧啶系Ｓｉｇｍａ公司产品。1 2　Ｗｉｓｔａｒ大鼠糖尿病模型的建立　选取健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 5 0只用于造模 ,以 4%的四氧嘧啶 ( 2 0 0ｍｇ/ｋｇ)进行皮下注射 ,4ｈ后给予 5 %葡萄糖水溶液饮用 ,7ｄ后禁食 3ｈ经尾部取血测血糖 ,14ｄ后测空腹血糖 ,若血糖值仍居高不下 (血糖值≥ 10ｍ…