NEK2基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

利用 Real-Time PCR 检测细胞周期相关蛋白激酶2（NEK2）mRNA 在20例口腔正常黏膜组织及42例口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达。结果显示，NEK2 mRNA 在 OSCC 中高表达（P ＜0．050），不同分化程度（P ＜0．05）、不同临床分期组间差异具有统计学意义（P ＜0．05）。有无淋巴结转移（P ＞0．05）、不同年龄、不同性别组间差异无统计学意义（P ＞0．05）。NEK2基因表达增高可能参与 OSCC 的形成。     

口腔鳞癌与正常黏膜中FAPA基因mRNA的表达

目的：研究成纤维细胞激活蛋白（（fibroblast activation protein alpha,FAPA）mRNA在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）及配对正常口腔黏膜组织中的表达。方法：采用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔黏膜中FAPAmRNA的表达;所得数据用SAS6.12软件包进行χ^2检验和t检验。结果：RT-PCR检测结果表明,FAPAmRNA在30例OSCC和配对正常黏膜的阳性率分别为83%（25/30）和40%（12/30）（P〈0.001）;总表达水平分别为3.58±0.46和1.27±0.21,上调2.82倍（P〈0.0001）。结论：在OSCC的癌变过程中,FAPA基因过表达,可能是OSCC的一个靶基因;FAPA在OSCC诊断中具有应用价值。     

CD133在口腔扁平苔藓和口腔鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探究肿瘤干细胞标记物CD133在口腔正常黏膜、口腔扁平苔藓（OLP）及口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达情况及临床意义,评估其作为OLP恶性转化的早期诊断指标、OSCC治疗干预靶标的临床价值,为进一步研究口腔黏膜癌变机制提供基础。 方法回顾性分析10例正常口腔黏膜、60例OLP、60例OSCC患者的临床资料,运用免疫组织化学技术检测各组病理组织中CD133表达情况,采用Mann-Whiney秩和检验比较各组间CD133表达差异,卡方检验统计分析CD133与各临床因素的关系。采用免疫组织化学技术和免疫印迹技术检测人口腔癌前病变细胞株（DOK）和人OSCC细胞株（CAL-27）中CD133的表达情况,t检验比较CD133在DOK与CAL-27细胞株中含量差异。 结果口腔正常黏膜、OLP、OSCC三组中,CD133的阳性率为0（0/10）、31.67%（19/60）、63.33%（38/60）,表达逐渐增强。CD133在口腔正常黏膜与OLP表达强度差异有统计学意义（Z=-2.046,P= 0.041）。CD133在OLP与OSCC表达强度差异具有统计学意义（Z=-3.777,P<0.001）。CD133在DOK中弱阳性表达,在CAL-27中阳性表达,DOK与CAL-27中CD133含量差异有统计学意义（t=-5.029,P= 0.001）CD133与OSCC的临床分期和淋巴结转移有关。 结论CD133作为评估OLP恶性转化潜能的指标及OSCC早期治疗干预靶标可能具有重要临床价值。     

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目的探讨C—erbB-2在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的蛋白表达及基因扩增,并评估其在OSCC发生、发展和预后中的价值。方法收集2003年1月至2013年6月辽宁省人民医院手术切除并经病理确诊为OSCC的石蜡包埋组织蜡块60例及正常口腔黏膜组织蜡块30例,分别采用免疫组织化学SP法与荧光原位杂交（FISH）技术检测C—erbB-2蛋白表达及基因扩增。结果C—erbB-2蛋白在OSCC、正常口腔黏膜组织中的表达阳性率分别为31．7％、3．3％;扩增阳性率分别为28．3％、0;OSCC中C—erbB-2蛋白表达、基因扩增与正常口腔黏膜组织相比较,差异具有统计学意义（P〈0．05）;在OSCC组织中C—erbB-2蛋白表达、基因扩增与患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度均无相关性（均P〉0．05）,与肿瘤淋巴结转移、远处转移、临床分期相关（χ^2=10．808、17．100、4．627,χ^2=8．840、20．044、5．102,均P〈0．05）。结论C—erbB-2与OSCC的发生、发展有关,可以将其作为判断OSCC的生物学行为的重要参考指标。     

口腔鳞癌与正常黏膜中T细胞分化蛋白mRNA的表达

目的：研究T细胞分化蛋白（T-cell differentiation protein,MAL）mRNA在口腔鳞状细胞癌（oral squamous cellcarcinoma,OSCC）及配对正常口腔黏膜组织中的表达及意义。方法：采用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常口腔黏膜中MAL mRNA的表达,所得数据采用SAS6.12软件包进行χ2检验和t检验。结果：RT-PCR检测表明,MAL mRNA在30例OSCC和配对正常黏膜的阳性率分别为36.7%（11/30）和86.7%（26/30）（P〈0.001）;总表达水平分别为1.20±0.18和2.96±0.36,OSCC中表达水平较正常黏膜中表达下调2.47倍（P〈0.001）;MALmRNA在OSCC中表达下调与患者的性别、肿瘤的临床分期、有无颈淋巴结转移等临床参数无关,但与病理分化程度显著相关。结论：在OSCC的癌变过程中,MAL mRNA表达下调,表明MAL基因可能是OSCC的一个靶基因;MAL在OSCC诊断中具有潜在的应用价值。     

幽门螺杆菌感染与口腔扁平苔藓和鳞状细胞癌相关性的初步探讨

目的研究正常口腔黏膜、口腔扁平苔藓（OLP）和口腔鳞状细胞癌（OSCC）中幽门螺杆菌（Hmylori）感染情况及其与p53蛋白和p16蛋白表达的关系．探讨H．pylori感染与OLP和OSCC的相关性。方法OLP标本23例、OSCC标本50例和正常口腔黏膜标本10例,采用免疫组化sP法检测其H．pylori的感染、p53蛋白、p16蛋白的表达．应用SPSS13．0软件包对结果进行卡方分析检验．单因素方差分析和线性回归检验分析。结果正常口腔黏膜组织组、0LP组及0SCC组中H．pylori阳性率分别为0、47．8％和48．0％,正常口腔黏膜组与OLP组和OSCC组间差异有统计学意义（X2=7．17．P=0.013;X^2=8．00,P=0．004）;OLP标本中H．pylor／阳性组和阴性组p53蛋白表达率分别为45．5％和16．7％,p16蛋白表达率为分别36．4％和66．7％,组间差异有统计学意义（X^2=3．86,P=0．043：X^2=3．89,P=0．048）;OSCC标本中H.pylori阳性组和阴性组p53蛋白表达率分别为91．7％和84．6％,p16蛋白表达率为分别20．8％和30．8％,组间差异无统计学意义（X^2=0．58,P=0．669;x2=0．65,P=0．526）。结论H．pylori感染与OLP和OSCC存在一定的相关性。H．pytori感染在OLP和OSCC发生、发展中的作用有待于进一步研究。     

DNMT1基因在口腔鳞状细胞癌中的表达及意义

采用 Real-Time PCR 检测 DNA 甲基转移酶-1（DNMT1）mRNA 在20例口腔正常黏膜组织及43例口腔鳞状细胞癌（OS-CC）组织中的表达,用免疫组织化学法和 Western blot 分别检测 DNMTl 蛋白在组织样本中的表达。结果显示 DNMTl mRNA 在 OS-CC 中高表达（Z ＝－2．028,P ＜0．05）,43例 OSCC 组织中,DNMTl 蛋白阳性表达率为81％,而在20例口腔正常黏膜组织中的阳性表达率为25％（P ＜0．05）。DNMTl 有可能参与 OSCC 的发生发展。     

STK15基因在口腔疣状癌和鳞癌的表达研究

目的：研究丝氨酸／苏氨酸激酶15基因（Serine／Threonine kinase15,STK15）在口腔疣状癌和口腔鳞状细胞癌的表达,探讨其在疣状癌发生发展中的作用。方法：取20例口腔鳞状细胞癌和10例口腔疣状癌患者的肿瘤组织及其相应正常口腔黏膜组织标本,应用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）方法检测上述标本STK15基因mRNA的相对含量。结果：口腔疣状癌组织STKl5基因mRNA的表达水平高于对应正常组织,其差异显著（t=2．333,P〈0．05）;口腔鳞癌组织STK15基因mRNA的表达水平高于对应正常组织,其差异显著（t=2．498,P〈0．05）;STK15基因mRNA在口腔疣状癌中的表达显著低于口腔鳞癌（t=2．199,P〈0．05）。结论：STK15基因可能在口腔疣状癌和口腔鳞癌的发生发展中起作用,STK15基因在疣状癌的发生发展过程中作用较在口腔鳞癌中小。     

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目的探讨水通道蛋白-3（AQP-3）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化Envosion法,检测山西省人民医院病理科2009年9月至2013年7月存档的60例OSCC病理组织石蜡标本和10例正常口腔黏膜上皮组织q-AQP-3蛋白的表达水平并进行比较分析。结果在60例OSCC的病理标本中AQP-3主要表达在细胞的胞膜上,也有少量表达在胞浆中。AQP-3在OSCC标本中的阳性表达率（81．7％）明显高于在正常口腔黏膜组织中的阳性表达率（20．0％）,差异有统计学意义（P〈0．05）。OSCC组织中AQP-3的表达在不同年龄（X2=0．032）、性别（X2=O．045）、病变部位（X2=1-313）方面的差异均无统计学意义（均P〉O．05）,在不同组织分化程度（X2=8．626）、临床分期（X2=21．59）以及是否有颈淋巴结转移（X2=3．90）方面的差异有统计学意义（均P〈0．05）。结论AQP-3的异常表达与OSCC的发生、发展有密切关系,可作为OSCC治疗和预后的辅助性指标。     

口腔鳞癌中VEGF-C的表达及与颈淋巴转移的关系

目的：检测口腔鳞癌（OSCC）中血管内皮生长因子-C（VEGF-C）的表达,以探讨VEGF-C与OSCC淋巴转移的关系及其临床意义。方法：应用免疫组织化学染色（S-P法）检测40例OSCC组织及14例正常口腔黏膜组织中VEGF-C的表达情况。结果：45.0%的OSCC组织中可见VEGF-C表达,在正常口腔黏膜中无表达;22例伴淋巴结转移的OSCC组织中,68.2%有VEGF-C表达,18例不伴有淋巴结转移者,16.7%有VEGF-C表达,两组之间差异有统计学意义（P〈0.01）;16.7%的Ⅰ～Ⅱ期OSCC有VEGF-C表达,57.1%的Ⅲ～Ⅳ期OSCC有VEGF-C表达,两者之间差异有统计学意义（P〈0.05）;与肿瘤的部位、年龄及性别无关（P〉0.05）。结论：VEGF-C在OSCC组织中表达明显上调,并与淋巴管生成、颈淋巴结转移及TNM分期等临床病理生物学行为有关,提示VEGF-C可能在OSCC的生长及转移中起重要作用。     

口腔鳞癌与正常黏膜中细胞角蛋白基因13的表达

目的:研究细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)在口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma,OSCC)组织中的表达及意义。方法:用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常黏膜中CK13mRNA的表达,同时用免疫组化方法检测CK13蛋白在OSCC及正常黏膜标本中的表达。所得数据采用Fisher确切概率计算法进行统计学处理。结果:RT-PCR检测结果表明,CK13mRNA在27例OSCC中的表达较其对照黏膜表达下调,平均下调4.2倍;免疫组化染色结果显示,CK13蛋白在正常口腔黏膜与肿瘤组织之间、高分化OSCC与中、低分化OSCC之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在OSCC的发生、发展中,CK13基因的转录和表达水平发生明显变化,可能存在转录后水平的表达调控。CK13在OSCC分类诊断中有应用价值。     

口腔鳞状细胞癌中蛋白酪氨酸磷酸酶基因的突变与表达

目的 探讨抑癌基因蛋白酪氨酸磷酸酶基因(phosphatase and tensin homolog deleted in chromosome 10,PTEN)的突变和基因表达水平变化在口腔鳞状细胞癌发生、发展过程中的作用.方法 应用聚合酶链反应(PCR)、基因测序方法检测42例口腔鳞状细胞癌和癌旁组织中PTEN第3、5、6、8外显子有无突变.应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测上述病例癌组织及癌旁组织中PTEN mRNA的表达.结果 发现2例口腔鳞状细胞癌组织中PTEN第5外显子发生点突变.42例口腔鳞状细胞癌和癌旁正常组织中均有PTEN mRNA表达,口腔鳞状细胞癌组织中PTEN mRNA表达量[PTEN/磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde phosphate dehydrogenase,GAPDH)]为(0.36±0.12),低于相应癌旁正常组织(0.64±0.09),差异有统计学意义(P＜0.01).结论 PTEN mRNA表达水平降低与口腔鳞状细胞癌的发生有一定关系.     

口腔鳞癌组织CK19蛋白质与mRNA水平的关系及其临床意义

目的：探讨口腔鳞癌组织中细胞角蛋白19（CK19）的蛋白质表达与基因转录之间的关系及其临床意义。方法：采用免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR方法，对33例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织中CK19的蛋白质表达和mRNA水平进行检测，采用SPSS10.0软件包对数据进行配对t检验和相关分析。结果：口腔鳞癌组织中，CK19蛋白质和mRNA表达呈正相关，且均显著高于癌旁组织。癌组织CK19蛋白质表达阳性率为90，91％（30／33），mRNA水平是癌旁组织的2．21倍。CK19蛋白质和mRNA表达均与肿瘤的恶性程度显著相关。恶性程度越高，两者的表达水平也越高。结论：口腔鳞癌组织中CK19蛋白质和mRNA表达上升，并且与肿瘤恶性程度相关．CK19免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR技术在鉴别组织恶性程度上具有潜在的临床价值。     

涎腺多形性腺瘤中赖氨酰氧化酶表达的研究

目的 检测涎腺多形性腺瘤(salivary pleomorphic adenoma,SPA)组织中赖氨酰氧化酶(lysyl oxidase,LOX)的表达,探讨LOX与SPA发生发展的关系.方法 取20例SPA组织标本,并配对20例SPA瘤旁涎腺组织,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR方法检测LOX mRNA在组织中的的表达水平,并分析其表达变化,用蛋白质印迹法检测LOX的蛋白表达水平.结果 SPA组织中LOX mRNA表达水平明显高于瘤旁涎腺组织(12.81 ±0.92),SPA组织中LOX蛋白表达水平明显高于瘤旁涎腺组织.结论 LOX mRNA和蛋白在SPA瘤组织中均呈高表达,提示LOX的异常表达可能参与了SPA的发生、发展.     

腮腺毛细血管瘤组织中bFGF mRNA基因的定量检测及其临床意义

目的 :探讨bFGFmRNA基因与腮腺血管瘤发生、发展的关系。方法 :应用RT -PCR技术对 16例腮腺血管瘤和 5例正常腮腺组织进行了bFGFmRNA的基因表达的分析。结果 :发现bFGFmRNA基因在所测组织中均有不同水平的表达 ,腮腺血管瘤的高表达率为 6 2 4% ,正常组织无高表达。结论 :提示bFGFmRNA基因与腮腺血管瘤的发生、发展有一定的关系     

实时荧光定量PCR法测定成釉细胞瘤中肿瘤坏死因子基因的表达

目的探讨肿瘤坏死因子（TNF）基因mRNA在成釉细胞瘤（AM）中的表达水平及其与AM的相关关系。方法用10对临床配对AM和正常牙囊组织．提取和纯化mRNA，逆转录成cDNA，在测定最佳反应条件后，采用实时荧光定量PCR技术验证TNF基因的表达情况，结合内参照3-磷酸甘油醛脱氢酶fGAPDH）管家基因进行相对定量分析。结果采用实时荧光定量PCR技术完成10对配对组织中TNF基因的检测．得到TNF基因mRNA在AM和牙囊组织的相对定量表达值分别（1．709±0．655）、（0．873±0．039），经检验其表达水平的差异具有统计学意义（P=0．001），TNF在9对临床配对标本中呈高表达。结论TNF可能是与AM密切相关的基因。     

Gli2基因在涎腺多形性腺瘤中的表达及其意义

目的:探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤和正常涎腺组织中的表达水平及其在多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:收集20例腮腺多形性腺瘤组织和20例相对应的瘤旁正常腮腺组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Gli2基因mRNA的表达水平,分析其表达变化,并探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤发生发展中的作用及其临床应用价值。结果:与正常腮腺组织相比,多形性腺瘤组织中Gli2基因mRNA的表达水平升高。结论:多形性腺瘤中Gli2 mRNA的高表达可诱导肿瘤细胞持续增殖,提示Gli2基因可能在涎腺多形性腺瘤的发生发展中具有重要作用。