左旋奥硝唑磷酸二钠药代动力学方法学试验研究

目的:研究验证左旋奥硝唑磷酸二钠药代动力学方法学.方法: 选取健康成年大鼠8只,雌雄各半,分别以灌胃和静脉注射法给予左旋奥硝唑磷酸二钠,收集不同时间的含药血浆,采用高效液相色谱(HPLC)法测定血浆中 甲硝唑、左旋奥硝唑磷酸二钠、左旋奥硝唑、奥硝唑的血药浓度.结果:证实了HPLC法专属性良好.静脉注射给予左旋奥硝唑磷酸二钠后2 min、灌胃给药后5 min 血浆中已经检测不到药物,同时左旋奥硝唑含量很高.结论:HPLC法对检测血浆样品中甲硝唑、左旋奥硝唑磷酸二钠、左旋奥硝唑专属性良好.左旋奥硝唑磷酸二钠药代动力学研究中以HPLC法检测左旋奥硝唑含量的方法是合理的,结果可反映其在体内的药代动力学过程.     

左旋和右旋奥硝唑在大鼠体内的药代动力学

目的:研究大鼠口服和静注左旋、右旋奥硝唑,比较两者药代动力学行为差异。方法:大鼠分别口服和静注左旋、右旋奥硝唑后,用HPLC法测定血浆中药物的浓度。色谱柱为Lichrospher C18柱,流动相为甲醇-0.4%HOAc(30∶70),流速0.8 mL/min,柱温40℃,紫外检测波长316 nm。结果:口服给药后,左旋、右旋奥硝唑的t1/2分别为2.49和3.42 h,AUC分别为168.21和207.19μg.h/mL,CL/F分别为0.11和0.09 L/h。静脉注射给药后,左旋、右旋奥硝唑的t1/2分别为2.19和3.23h,AUC分别为138.40和203.09μg.h/mL,CL分别为0.08和0.05 L/h。结论:左旋、右旋奥硝唑在大鼠体内的药代动力学行为存在一定的差异。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中的左旋紫堇达明及其药代动力学研究

目的：建立快速、灵敏的LC-MS/MS分析方法定量测定大鼠血浆中左旋紫堇达明（L-CDL）的浓度,经系统方法学验证后,应用于该药的大鼠药代动力学研究。方法以普萘洛尔为内标,以水（含0.1%甲酸与5 mmol/L的甲酸铵）和乙腈（含0.1%甲酸）为流动相,血浆样品中的L-CDL和内标经C18（2.1 mm×750 mm,3μm）柱分离后,质谱电喷雾离子化源（ESI）正离子多反应监测（MRM）方式分别对离子对m/z 342?192.1和m/z 260?116.2进行检测。方法验证包括专属性、标准曲线与定量下限、批内和批间精密度、准确度、基质效应、提取回收率、稳定性。结果 L-CDL在大鼠血浆样品的定量线性范围为1~5000 ng/ml,最低定量下限为1 ng/ml,批内和批间精密度（RSD）＜10%,回收率93.5%~102.8%,基质效应108.3%~112.5%。大鼠经胃给予L-CDL 10 mg/kg后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC0-24分别为：（557.8±330.1）ng/ml、（7.04±3.93）h、（2408±630）h·ng/ml。结论建立的LC-MS/MS方法简便、快速、灵敏,适用于L-CDL在大鼠体内的药代动力学研究。     

半枝莲提取物中半枝莲碱A和半枝莲碱B大鼠体内药代动力学研究

目的?建立同时测定生物样品中半枝莲碱A和半枝莲碱B的LC-MS/MS分析方法,并对其药代动力学进行研究。方法?血浆样品采用乙酸乙酯萃取,BDS Hypersil C₁₈(50mm×2.1mm, 2.4μm)色谱柱进行梯度洗脱,柱温40℃,流动相为乙腈:0.05％甲酸水溶液,流速为0.25mL/min。电喷雾离子源,MRM模式。大鼠单剂量灌胃500mg/kg半枝莲提取物后,检测半枝莲碱A和半枝莲碱B的血药浓度,DAS软件对其血药浓度-时间曲线进行拟合,统计矩模型计算药动学参数。结果?半枝莲碱A和半枝莲碱B在0.512~258.0ng/mL和0.482~241.0ng/mL间线性关系良好（r2>0.994）;精密度、准确度、提取回收率和基质效应、稳定性均符合生物样品分析要求。半枝莲碱A和半枝莲碱B的AUC_(0-t)分别为(88.69±12.4)μg/L·h和(57.09±9.84)μg/L·h,达峰浓度分别为(10.22±1.31)ng/mL和(6.27±0.80)ng/mL。结论?该方法简便、准确、灵敏,可用于半枝莲提取物中半枝莲碱A和半枝莲碱B体内药代动力学研究。      

耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学

建立大鼠血浆中耳聋左慈丸中成分毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的共检测LC-MS/MS定量方法，并运用此方法评价耳聋左慈丸在大鼠体内的药代动力学行为。采用甲醇作为蛋白沉淀剂，用蛋白沉淀法处理血浆样本，以甲醇为有机相，0.1%甲酸水溶液为水相，在负离子模式下对毛蕊花糖苷、氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷进行定量分析方法的建立，并且对所建方法进行方法学考证。选取健康SD大鼠，单次灌胃20 mL/kg（相当于原药10 g/kg剂量）的耳聋左慈丸提取液，运用建立的方法测定在给药后不同时间间隔的待测物质血浆浓度，并利用Phoenix WinNonlin8.3软件经非房室模型拟合计算药代动力学参数。方法学验证结果表明，毛蕊花糖苷（r = 0.993 7）、氧化芍药苷（r = 0.994 6）在0.5 ~ 50 ng/mL范围内线性良好， 松果菊苷（r = 0.993 6）、苯甲酰芍药苷（r = 0.992 6）在1 ~ 100 ng/mL范围内线性良好，4种物质的批间及批内精密度的RSD均小于15%，批间及批内准确度均在85% ~ 115%之间。提取回收率、基质效应和稳定性均满足相关要求。在大鼠单次灌胃耳聋左慈丸提取液后，4种待测物质都发生了较快的吸收和消除，氧化芍药苷、松果菊苷、苯甲酰芍药苷的血药浓度-时间曲线中都出现双峰现象；与其他3种物质相比，氧化芍药苷在大鼠血浆中浓度较高，c_max1为（24.40 ± 4.78） ng/mL，c_max2为（22.50 ± 2.70） ng/mL。结果表明，该方法的验证结果符合生物样本分析方法指导原则，可用于评价耳聋左慈丸提取液在大鼠体内的药代动力学行为。     

富马酸替诺福韦二吡呋酯胶囊在中国人体内的药代动力学

研究富马酸替诺福韦二吡呋酯胶囊在中国人体内的药代动力学特征。12名健康受试者依次进行低剂量(300mg)单、多次给药;高(600 mg)剂量单次给药和低剂量饮食影响单次给药的药代动力学试验,计算药代动力学参数。受试者单次口服300 mg和600 mg受试制剂后,替诺福韦的cmax分别为(305.4±96.4)和(590.0±149.6)ng/mL,AUC0-72 h分别为(2 396±489)和(4 465±1 042)ng.h/mL,t1/2分别为(19.9±2.4)和(21.9±3.0)h。结果显示替诺福韦在300～600 mg剂量范围内呈现线性药代动力学特征,体内过程不受性别差异的影响。与空腹给药相比,高脂餐后给药的tmax延后1.6 h,AUC0-72 h提高约32%。多次给药达稳态后,替诺福韦的稳态血药浓度波动度为2.7±0.6,累积常数Rcmax为1.3±0.3,RAUC为1.7±0.4,在人体内的暴露量增加约70%。     

苦地丁中紫堇灵和乙酰紫堇灵在急性肺损伤大鼠体内的药代动力学研究

目的 研究苦地丁中主要活性成分紫堇灵和乙酰紫堇灵在急性肺损伤大鼠体内的药代动力学研究。方法 建立同时测定大鼠血浆中紫堇灵和乙酰紫堇灵的LC-MS/MS分析方法,血浆样品采用乙腈沉淀蛋白,在C₁₈色谱柱下进行梯度洗脱。离子源为电喷雾离子源,采用多反应离子检测。同时对其专属性、线性及范围、准确度、精密度、稳定性、基质效应进行考察。采用滴鼻LPS诱导急性肺损伤大鼠模型,灌胃428 mg/kg苦地丁提取物后,测定大鼠血浆中紫堇灵和乙酰紫堇灵的血药浓度,采用DAS3.0计算其药代动力参数。结果 紫堇灵和乙酰紫堇灵在0.25~100.0 ng/mL和0.40~160.0 ng/mL之间有较好的线性（R2>0.995）;同时批间及批内精密度和准确度、基质效应、回收率以及不同条件下的稳定性均符合要求。与正常组相比,急性肺损伤大鼠体内的紫堇灵暴露水平显著增加（AUC,P<0.01）,而乙酰紫堇灵的暴露水平未见明显变化。结论 该方法具有快速、灵敏、准确的特点,可用于苦地丁提取物中紫堇灵和乙酰紫堇灵体内药代动力学研究,同时紫堇灵在急性肺损伤大鼠体内暴露水平显著增加,清除显著减弱。      

隐丹参酮单剂量和多剂量给药在大鼠体内药代动力学研究

目的 评价单剂量和多剂量灌胃隐丹参酮(Cryptotanshinone,CTS)的药动学特征.方法 将20只SD雄性大鼠随机分为单剂量组(隐丹参酮10 mg/kg,1d)、多剂量组(隐丹参酮10 mg/kg,每天1次,连续10 d)给予灌胃后,用LC-MS/MS法测定血浆中隐丹参酮的浓度.血药浓度数据用DAS 2.0药代动力学软件处理,按两室模型拟合并求算药代动力学参数.结果 隐丹参酮单剂量给药后,Cmax为(12.16±14.11)ng/mL,Tmax为(2.88±2.56)h,T1/2为(3.70±3.50)h,MRT为(6.69±0.54)h,AUC0-24为(58.40±25.73)ng·h/mL;多剂量给药后,Cav为(1.95±0.61)ng/mL,Tmax为(3.20±2.08)h,T1/2为(7.12±5.06)h,AUCss为(46.74±14.51)ng·h/mL,DF为2.42±0.28.单剂量和多剂量的AUC0-24、Tmax、T1/2差异无统计学意义.结论 隐丹参酮长期给药后无蓄积风险.     

伊曲康唑4种异构体在大鼠体内的药代动力学比较

采用LC-MS/MS法研究伊曲康唑4种异构体在大鼠体内的药代动力学差异。大鼠分别灌胃伊曲康唑4种异构体后,用LC-MS/MS法测定血浆中伊曲康唑4种异构体的代谢及主要代谢产物羟基伊曲康唑的生成情况。采用乙腈直接沉淀蛋白,色谱柱为Durashell HILIC柱(100 mm ×2.1 mm,5.0 m),流动相中有机相为甲醇-乙腈(1∶1),水相为含5 mmol/L 乙酸铵和0.2% 乙酸的超纯水,以0.5 mL/min的流速进行梯度洗脱,总洗脱时间为5.5 min。扫描方式为选择反应监测(MRM),采用正离子方法检测。大鼠单次灌胃给予15 mg/kg伊曲康唑4种不同异构体后,2S,4R,2R型伊曲康唑和2S,4R,2S型伊曲康唑在大鼠体内的羟基代谢物的生成量明显高于(2R,4S,2R)型伊曲康唑和(2R,4S,2S)型伊曲康唑(P<0.001)。此外,伊曲康唑在大鼠中存在明显的雌雄差异,雌性大鼠体内的峰浓度(c_max)和药时曲线下面积(AUC_0-∞)明显高于雄鼠,半衰期(t_1/2)明显长于雄鼠,消除较雄鼠慢。通过检测伊曲康唑4种异构体原药及相应的羟基代谢物在大鼠体内的经时过程,表明不同异构体在大鼠体内的药代动力学行为存在明显的代谢差异和性别差异。     

康普瑞丁磷酸二钠壳聚糖-海藻酸钠靶向微球的药代动力学及体内分布研究

康普瑞丁磷酸二钠(Combretastatin A4p,CA-4P)为新型抗肿瘤前体药物,体内代谢成康普瑞丁活性形式与血管内皮细胞的微管系统结合、阻止新生血管的生成而发挥抗肿瘤的作用,是治疗非小细胞肺癌的药物之一,CA-4P在体内经非特定磷酸酯酶作用可迅速去磷酸化而生成具有生物活性的CA4。由于康普瑞丁给予大鼠静脉注射给药后,     

二妙丸中3种生物碱成分在Beagle犬体内的药代动力学

建立高灵敏的LC-MS/MS法测定血浆中小檗碱、巴马汀和药根碱的浓度,并用于研究Beagle犬灌服市售二妙丸后体内3种生物碱的药代动力学特征。6只健康Beagle犬,雌雄各半,单剂量灌服市售二妙丸制剂(相当于小檗碱25mg/kg)后,0～48 h间隔采集血样,采用电喷雾正离子化质谱法监测血浆中各成分的浓度。测得小檗碱、药根碱和巴马汀的cmax分别为(4.474±1.8),(0.508 3±0.2),(0.812 4±0.7)ng/mL,t1/2分别为(38.1±15.4),(23.8±9.9),(20.2±17.1)h,AUC0-48 h分别为(37.4±3.9),(3.75±1.2),(3.01±0.9)ng.h/mL。结果显示Beagle犬口服给药二妙丸后小檗碱、药根碱和巴马汀的血药浓度低,达峰时间快,消除半衰期长。     

大鼠灌服炙甘草汤后甘草次酸药动学研究

目的 建立大鼠ig炙甘草汤后体内甘草次酸的LC-MS/MS测定方法。方法 采用醋酸乙酯沉淀蛋白处理血浆样品,选用白藜芦醇为内标,采用LC-MS/MS法测定,色谱条件为ORBAX SB-C₁₈反相色谱柱（Agilent,50 mm×2.1 mm,1.8 μm）,乙腈-水（80∶20,含0.2%甲酸）为流动相,体积流量0.2 mL/min,柱温30 ℃。样品经电喷雾离子（ESI）源负离子化后,通过Agilent 6410三重四级杆串联质谱仪,采用多反应监测（MRM）对甘草次酸进行测定,分别选用m/z 469.4→425.4和227.1→143.0作为甘草次酸和内标物白藜芦醇的检测离子对。结果 甘草次酸在33.4～8 560.0 ng/mL线性关系良好（R²＝0.997 1）,日内（n＝6）、日间（n＝6）精密度、稳定性RSD均小于10%。甘草次酸高、中、低3个质量浓度平均提取回收率分别为75.3%、78.2%、78.5%。在此方法下得到大鼠ig炙甘草汤后血浆中甘草次酸的药动学参数分别为t_max＝（8.00±1.13）h,C_max＝（811.02±300.25）ng/mL,AUC_0～24＝（11 439.21±3 367.36）ng/mL·h。结论 该方法灵敏、准确、快速、选择性高,可用于甘草次酸血药浓度监测和药动学研究。     

大黄及牛黄解毒片大鼠给药后血浆中大黄活性成分的药代动力学比较研究

考察大黄及牛黄解毒片给药后大黄活性成分在大鼠体内药代动力学行为的差异。大鼠分别灌胃给予大黄生药材96 mg/kg(含总蒽醌1.83 mg/kg,相当于大黄酸0.28 mg/kg、大黄素0.30 mg/kg、大黄酚0.81 mg/kg、芦荟大黄素0.23 mg/kg及大黄素甲醚0.20 mg/kg)及牛黄解毒片250 mg/kg(含总蒽醌与大黄生药材等量,相当于大黄酸0.33 mg/kg、大黄素0.38 mg/kg、大黄酚0.71 mg/kg、芦荟大黄素0.24 mg/kg及大黄素甲醚0.17 mg/kg),血浆经甲醇沉淀后,采用LC-MS/MS法测定大黄活性成分血药浓度,WinNonlin 7.0软件计算药代动力学参数。大鼠灌胃大黄及牛黄解毒片后,大黄酸的c_max分别为(121±103)及(474±251)μg/L,AUC0-t分别为(275±176)及(406±194)μg·h/L;大黄酚异构体的c_max分别为(2 325±1 390)及(3 580±2 169)μg/L,AUC0-t分别为(8 170±2 661)及(8 856±4 023)μg·h/L;仅在牛黄解毒片给药大鼠血浆中检测出大黄素,且牛黄解毒片给药后大鼠血浆中大黄酸的c_max、AUC及t1/2,大黄酚异构体的Vd及CL与单味大黄相比显著增加,大黄酚异构体的t_max显著下降。实验结果表明,牛黄解毒片复方配伍增强了大黄活性成分在大鼠体内的吸收利用,改变了大黄活性成分的药代动力学行为。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中1-脱氧野尻霉素及药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中1-脱氧野尻霉素（DNJ）的液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）测定方法,并用于大鼠口服桑叶总生物碱后DNJ的药代动力学研究。方法：血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,以乙腈-6.5mmol·L-1甲酸铵水溶液为流动相,采用AgilentEclipsePlusC18柱（2.1mm×150mm,3.5μm）进行分离,梯度洗脱,流速0.4mL·min-1。采用电喷雾离子源,多反应监测（MRM）模式,正离子检测,用于定量的离子反应为m/z164.0→69.0（DNJ）,m/z208.1→146.0（米格列醇,内标）。结果：DNJ在1~500ng·mL-1浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均小于10.9%,准确度在92.4%~112.7%,DNJ和内标的提取回收率均大于84.1%。结论：本方法快速、灵敏、操作简便,可用于1-脱氧野尻霉素的药代动力学研究。     

基于LC-MS/MS 研究异夏佛塔苷在大鼠体内药代动力学及其绝对生物利用度

建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的浓度,研究异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性及其绝对生物利用度。分别灌胃给药1.5、3.0、6.0 mg/kg和静脉注射异夏佛塔苷0.5 mg/kg后,建立LC-MS/MS分析方法测定大鼠血浆中异夏佛塔苷的含量,运用 DAS 3.0软件计算药代动力学参数。异夏佛塔苷在1.0~500.0 ng/mL内线性良好(r=0.997 6),专属性、精密度和准确度、基质效应和提取回收率以及稳定性均符合生物样本分析要求。药代动力学参数显示:灌胃给药低、中、高3个剂量组,c_max分别为(109.34±22.87)、(259.84±95.35)、(499.26±288.09)ng/mL,AUC_0-t分别为(310.57±46.18)、(552.67±207.14)、(1 075.03±371.19)h·ng/mL,t_1/2分别为(2.36±0.22)、(2.91±0.19)、(3.04±0.86)h,t_max分别为(1.03±0.25)、(1.18±0.17)、(1.5±0.43)h,MRT_0-t分别为(11.33±1.53)、(11.27±1.09)、(8.29±0.76)h;静脉注射后,AUC_0-t为(1 536±421.3)h·ng/mL,t_1/2为(2.57±0.46)h,MRT_0-t为(9.55±2.37)h,绝对生物利用度分别为6.73%,5.99%,5.80%。结果表明,本研究所建立的LC-MS/MS分析方法可应用于异夏佛塔苷在大鼠体内的药代动力学特性研究。     

马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布研究

目的 研究马钱子总碱囊泡凝胶经皮给药后在大鼠组织中的分布。方法 18只SD大鼠经皮给予马钱子总碱囊泡凝胶后0.5、2、6 h,采集大鼠皮肤、骨骼肌、脑、心、肺、肝、脾、肾、胃、小肠、脂肪、睾丸、子宫、关节等组织,以溶剂萃取法对样品进行提取,应用LC-MS/MS联用技术对各组织中的马钱子碱和士的宁进行测定。结果 经皮给药后,马钱子碱和士的宁在大鼠体内分布较广,主要分布在肺、肝、肾、小肠,其次为心脏、关节、皮肤等,而在脑、肌肉、脂肪中的分布量较低。结论 马钱子总碱囊泡凝胶能减少马钱子碱和士的宁在脑、心脏的分布,有利于降低中枢毒性和心脏毒性。     

布南色林片在中国健康志愿者体内的药代动力学

为了研究布南色林片单次给药后的中国健康志愿者体内的药代动力学,30例健康志愿者单次口服4 mg、8 mg和12 mg布南色林片后,采集60 h内动态血标本,采用LC-MS/MS测定血浆中布南色林的浓度,并用DAS 3.2.4软件对试验数据进行处理,计算药代动力学参数。单次口服4 mg、8 mg和12 mg布南色林片的主要药代动力学参数c_max分别为(539.61±388.74)、(1 190.39±736.51)和(1 637.34±481.45)ng/L,t_max分别为(1.00±0.47)、(1.38±0.79)和(1.43±0.94)h,t_1/2分别为(12.05±3.49)、(14.76±3.78)和(13.68±3.92)h,AUC_{0-60 h}分别为(4 692.21±3 041.75)、(7 964.42±3 988.07)和(9 648.22±2 565.07)ng·h/L,AUC_0-∞分别为(5 060.91±3 146.10)、(8 547.61±4 209.87)和(9 986.15±2 659.51)ng·h/L。可见,在4~12 mg给药剂量范围内,布南色林片的主要药代动力学参数的c_max、AUC_{0-60 h}、AUC_0-∞与剂量呈正相关。