脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转寻表达关系的研究

目的：测定脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解率的变化，探讨骨骼肌帽白降解的分子机制。方法：腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型，动物随机分成4组，分别为腹腔注射内毒素后2h、6h、12和24h组，每组各设正常对照。借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统，氨基酸自动分析仪测定不同时相点孵育液中伸指长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率；应用northern blot方法测定伸指长肌组织泛素mRNA的表达变化，分析骨骼肌帽白降解与泛素mRNA表达的关系。结果：脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在2h和6h轻度增加，肌纤维蛋白降解率则在2h和6h增加1．5－2．2倍，在12h增加40％。伸指长肌组织泛素mRNA－2．4kb的水平主要在2h和6h增加明显，增幅达2－5倍，泛素mRNA-1.2kb未见明显变化；肌纤维蛋白降解与泛素mRNA-2.4kb表达间呈显著正相关（γ=0.9731,P=0.003)。结论：脓毒症时骨骼肌蛋白降角增加可能同泛素－蛋白酶体蛋白降解途径活性增强相关。     

重组人生长激素在严重烧伤治疗中的应用

目的探讨重组人生长激素（ recombinant human growth hormone, rhGH）在严重烧伤患者中对创面愈合、蛋白质代谢及糖代谢的影响。方法46例严重烧伤病例随机分成治疗组（n=23）和对照组（n=23）,在其他治疗方案均相同的情况下,治疗组伤后第三天每晚21点开始加用rhGH。比较两组患者创面愈合时间,血红蛋白、血浆总蛋白、白蛋白浓度、抗生素应用时间及血糖水平变化。结果治疗组血红蛋白、血浆总蛋白、白蛋白浓度明显高于对照组（P〈0．05）,抗生素应用时间及创面愈合时间明显缩短（P〈0．01）,应用rhGH后第4d开始,治疗组空腹血糖水平明显高于对照组（P〈0．01）。结论rhGH能有效促进严重烧伤患者血浆蛋白质的合成,加速烧伤创面的愈合,明显升高血糖的作用。     

谷氨酰胺联合重组人生长激素对严重烧伤患者蛋白代谢和免疫功能的影响

目的探讨联合应用谷氨酰胺（Gln）和重组人生长激素（rhGH）对严重烧伤患者蛋白代谢、免疫功能及创面愈合能力的影响。方法将60例严重烧伤患者随机分为对照组、rhGH组及Gln＋rhGH组,每组20例。三组病人全部进行常规治疗外,rhGH组及Gin＋rhGH组于伤后5天皮下注射rhGH（0．2—0．25U／kg／d）,另外Gin＋rhGH组静脉给予Gin（0．2g·kg-1·d-1）。于用药后7d、14d分析比较三组患者白蛋白、免疫球蛋白水平,并记录创面愈合时间及住院日。结果Gln＋rhGH组血浆白蛋白及免疫球蛋白水平均高于rhGH组及对照组;30d创面愈合率高于rhGH组及对照组;住院日明显少于rhGH组及对照组。结论联合应用Gin和rhGH能有效促进蛋白合成,提供机体免疫功能,促进创面愈合,缩短住院日。     

经小脑延髓池局部应用反义寡核苷酸对脑组织TNF-α表达的影响

目的：观察TNF－α反义寡核苷酸对TNF－α的阻断作用。方法：用DNA合成仪合成17聚体的TNF－α正义寡核苷酸和反义寡核苷酸。24只犬随机分为对照组和实验组（包括人工脑脊液组、正义链组和反义链组）。实验组动物用已建成的颅脑爆炸伤模型装置致伤,伤前经小脑－延髓池分别注入人工脑脊液、TNF－α正义寡核苷酸和TNF－α反义寡核苷酸,比较3组动物脑组织TNF－αmRNA表达的变化。结果：与人工脑脊液组和正义链组相比,伤前经小脑－延髓池脑内局部应用TNF－α反义寡核苷酸组,颅脑爆炸伤后脑组织内TNF-αmRNA表达量明显减少（P＜0．01）。结论：经小脑延髓池局部应用反义寡核苷酸可有效阻断颅脑爆炸伤后脑组织TNF－α的表达。     

T淋巴瘤TCRβ链独特型DNA疫苗在小鼠骨骼肌中的基因蛋白表达

目的：检测T淋巴瘤TCRβ链独特型DNA疫苗的基因表达。方法：大剂量提取质粒，将BALB／c鼠随机分为pcDNA3．1组、pcDNA3．1／TCRVβ8组、pcDNA3．1／TCRβ8＋IL－2组、pcDNA3．1／TCRVβ8＋CpG＋脂质体组和全硫代CpG组共5组（每组6只），双侧股四头肌内注射疫苗免疫，于第0、2、4周各免疫1次，共3次。接种疫苗后5d，用RT－PCR法检测重组质粒mRNA表达。接种疫苗后7d应用免疫组化检测重组质粒蛋白表达。结果：pcDNA3．1／TCRVβ8组、pcDNA3．1／TCRVβ8＋IL－2组、pcDNA3．1／TCRβ8＋CpG＋脂质体组小鼠骨骼肌中均显示mRNA和蛋白表达，而pcDNA3．1组和全硫代CpG组未见mRNA和蛋白表达。结论：T淋巴瘤TCRβ链独特型DNA疫苗在小鼠骨骼肌中有效地表达了基因产物。     

非肝硬变性胆道梗阻大鼠肝脏部分切除术后肝内促肝细胞生长因子及其受体mRNA 的表达变化

目的：检测非肝硬变性胆道梗阻肝脏部分切除（PH）术后肝内促肝细胞生长的肝细胞生长因子（HGF）与转化生长因子－α（TGF－α)及其受体Met基因（HGF受体）、表皮生长因子受体EGFR（亦是TGF－α受体）mRNA的表达变化。方法：Wistar大鼠随机分为正常70％肝部分切除组（N－PH）、胆道梗阻（BDO）胆流再通（RBF）70％PH组（BDO－RBF－PH）、及胆道梗阻胆流再通组（BDO－RBF）。观察时相点为术后0、6、12、24、48及72h。RT－PCR法检测肝内HGF mRNA,TGF－αmRNA及肝细胞Met mRNA与EGFR mRNA表达。结果：N－PH组6h肝内HGF mRNA与肝细胞Met mRNA表达急剧增高并达到高峰,而BDO－RBF－PH组内HGF mRNA与肝细胞Met mRNA的表达高峰延后至术后12h,且高峰表达量低于N-PH ;N－PH组24h肝内TGF－αmRNA与肝细胞EGFR mRNA表达增高并达到高峰,而BDO－RBF－PH组肝内TGF－α mRNA与与肝细胞EGFR mRNA的表达高峰后至70％PH后48h, 且高峰表达量亦低于N－PH组。结论：非肝硬变性胆道梗阻大鼠70％RH后肝内HGF mRNA及肝细胞Met mRNA、肝内TGF-αmRNA及肝细胞EGFR mRNA表达均明显减少,且HGF及TGF－α mRNA的表达相对少于其受体mRNA的表达。     

谷氨酰胺（Gln）和重组人生长激素（rhGH）对重度烧伤患者的应用

目的探讨联合应用谷氨酰胺（Gin）和重组人生长激素（rhGH）对重度烧伤患者蛋白代谢和愈合的影响。方法选择2007年12月-2010年12月我院收治的46例重度烧伤患者,随机分为rhGH组及Gln＋rhGH组,每组23例。两组患者除全部进行常规治疗外,rhGH组皮下注射rhGH,Gln＋rhGH组在rhGH组治疗基础上静脉给予Gin。伤后1、7、14d对比分析两组患者白蛋白、免疫球蛋白水平,比较两组创面愈合时间及住院天数。结果Gln＋rhGH组伤后14d血浆白蛋白、免疫球蛋白水平及30d创面愈合率均高于rhGH组,差异有统计学意义（P〈0．05）;Gln＋rhGH组住院天数明显少于rhGH组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论应用谷氨酰胺（Gln）联合重组人生长激素能促进蛋白质合成和创面愈合。     

重组人生长激素在严重烧伤病人中的应用

目的　分析重组人生长激素 (rhGH)对严重烧伤患者蛋白质合成、免疫功能、创面愈合及血糖的影响。方法　治疗组 2 8例应用rhGH ,对照组 2 0例未用rhGH ,其余各项治疗相同。比较两组的一般情况 ,蛋白质及糖代谢变化、免疫功能、创面愈合时间等。结果　治疗组血清白蛋白、转铁蛋白、前白蛋白高于同期对照组 ;免疫功能恢复快 ,增强病人的免疫力 ;创面愈合时间明显缩短 ,住院时间缩短 ;伤后 2周内血糖升高 ,特别是伤后 1周内明显升高。结论　rhGH能有效地促进蛋白质合成 ,提高机体免疫功能及抗感染力 ,加快创面愈合及愈后质量 ,缩短住院时间 ,血糖升高是主要不良反应 ,伤后早期应用rhGH对血糖影响较大 ,伤后 1周以后应用rhGH是较合适的时机。     

脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解增强与泛素转录表达关系的研究

目的 :测定脓毒症大鼠骨骼肌蛋白降解率的变化 ,探讨骨骼肌蛋白降解的分子机制。方法 :腹腔注射内毒素建立大鼠脓毒症模型 ,动物随机分成 4组 ,分别为腹腔注射内毒素后 2h、6h、12和 2 4h组 ,每组各设正常对照。借助骨骼肌充分氧供离体孵育系统 ,氨基酸自动分析仪测定不同时相点孵育液中伸指长肌总蛋白降解率和肌纤维蛋白降解率 ;应用northernblot方法测定伸指长肌组织泛素mRNA的表达变化 ,分析骨骼肌蛋白降解与泛素mRNA表达的关系。结果 :脓毒症大鼠伸趾长肌总蛋白降解率在 2h和 6h轻度增加 ,肌纤维蛋白降解率则在 2h和 6h增加 1 5～ 2 2倍 ,在 12h增加 40 %。伸指长肌组织泛素mRNA 2 4kb的水平主要在 2h和 6h增加明显 ,增幅达 2～ 5倍 ,泛素mRNA 1 2kb未见明显变化 ;肌纤维蛋白降解与泛素mRNA 2 4kb表达间呈显著正相关 (r =0 9731,P =0 0 0 3)。结论 :脓毒症时骨骼肌蛋白降解增加可能同泛素 蛋白酶体蛋白降解途径活性增强相关。     

重组人生长激素治疗大面积深Ⅱ度烧伤患者的观察

目的：观察重组人生长激素对大面积深Ⅱ度烧伤病人血浆蛋白及其对创面愈合的作用。方法：选择32例烧伤病人随机分为rhGH组和对照组,伤后3d用药,观察血浆总蛋白,白蛋白浓度,创面愈合时间提前4．9d,瘢痕增生程度明显减轻。结论：rhGH能有效促进大面积深Ⅱ度烧伤患者血浆蛋白合成,加快烧伤创面愈合,减少瘢痕增生。     

重组人生长激素治疗腹腔感染后低白蛋白血症的实验与临床研究

目的探讨重组人生长激素（ｒｈＧＨ）对腹腔感染引起低白蛋白血症的治疗作用。方法应用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）方法,分别在体外实验、动物实验和临床研究中,观察ｒｈＧＨ对白蛋白ｍＲＮＡ表达和白蛋白合成的影响。结果ｒｈＧＨ明显促进体外培养肝细胞白蛋白基因表达（１４３％±６％,对照１００４％±２２％,Ｐ＜００１）;在内毒素损伤的肝细胞模型中,ｒｈＧＨ显著减轻内毒素介导的白蛋白ｍＲＮＡ表达抑制;在体内ｒｈＧＨ明显促进正常大鼠白蛋白ｍＲＮＡ表达（１５２％±８％,对照组１００％±３％,Ｐ＜００１）;促进腹腔感染大鼠白蛋白合成（２０４±１７ｇ／Ｌ,对照１５５±２９ｇ／Ｌ,Ｐ＜００１）;ｒｈＧＨ明显提高腹腔感染病人白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白血清浓度。结论ｒｈＧＨ对腹腔感染引起的低白蛋白血症有明显的治疗作用。     

重组人生长激素联合肠内营养治疗重度烧伤患者的临床观察

目的观察重组人生长激素（rhGH）联合肠内营养（EN）在重度烧伤患者救治中的作用。方法将62例重度烧伤患者随机分成治疗组（rhGH联合EN治疗）和对照组（单纯EN治疗），每组31例。治疗组以重组人生长激素联合肠内营养治疗，对照组以单纯肠内营养治疗。观察两组患者体重、血清白蛋白的变化及创面愈合情况。结果与对照组比较，治疗组患者体重下降显著减少，白蛋白合成增加，同时创面愈合时间明显缩短。结论生长激素联合肠内营养有利于重度烧伤患者的治疗。     

重组人生长激素对心脏手术后疲劳综合征的影响

目的 观察重组人生长激素（rhGH)对心脏手术后疲劳综合征（POFS）的治疗效果。方法 按随机、对照、双盲的原则收集心脏手术后病人60例,分为A组（rhGH治疗组）和B组（对照组）,每组30例。对两组病人作疲劳记分（Christensen记分）,并测定血清生长激素（GH）的水平和血浆蛋白等指标;计算术后氮平衡。结果 A组术后疲劳程度明显轻于B组（P＜0.01）,脱离呼吸机时间早于B组（P＜0.01）;血清GH水平升高程度强于B组（P＜0.01）;术后第1天,视黄醇结合蛋白（RBP）水平显著高于B组（P＜0.05）;术后第4、8天血浆转铁蛋白（TFN）、前白蛋白（PA）和RBP水平均显著高于B组（P＜0.01）;术后第1－7天氮平衡的改善明显好于B组（P＜0.01）。结论 （1）使用外源性rhGH,能减轻POFS的程度,有助于病人及早脱离呼吸机,能在较短时间内改善病人营养状况,较快达到正氮平衡。（2）血浆急性期蛋白（RBP、PA和TFN等）的水平是判断POFS的一种可靠的生化判断旨标,它们的减少与POFS的发生有关。     

Growth hormone improves graft mucosal structure and recipient protein metaboli sm in rat small bowel transplantation

Objective To observe the effects of recombinant human growth hormone (rhGH) on graft structure and recipient protein metabolism in rat small bowel transplantation (SBT) and total parenteral nutrition (TPN) models. Methods Twenty recipients of rat allogeneic heterotopic small bowel transplants (SD→Wistar) were divided into two groups (GH group and control group).Both groups were supported by standard TPN.Acute rejection was suppressed with CsA 10 mg·kg-1·d-1 intramuscularly.All rats in the experimental group received subcutaneous rhGH 1 U·kg(-1)·d(-1) after transplantation.Morphological mucosal indices of transplanted gut and metabolic parameters such as body weight, nitrogen balance, urinary 3-methyl histidine excretion and serum albumin of the recipients were compared between two groups. Results The application of rhGH promoted graft recovery significantly compared with standard TPN support alone.On postoperative day 14, all morphological indexes of transplanted gut recovered to the preoperative state.Protein metabolism in the recipient was also significantly improved.rhGH decreased the catabolism of protein, accelerated regaining of positive nitrogen balance and corrected hypoalbuminemia. Conclusion GH is an effective metabolic intervention in SBT.It may promote the structural repair of the graft and correct the metabolic disturbance.It is useful in improving the outcome of clinical SBT.     

重组人生长激素与肠外营养支持在结直肠癌患者术后的应用

目的观察重组人生长激素(rhGH)和肠外营养在结直肠癌患者术后的应用效果.方法 20例患者接受肠外营养支持(PN)和rhGH(实验组),20例患者接受与实验组同样的肠外营养(对照组).结果治疗前两组病人血蛋白指标(白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白)无明显差异,治疗后均升高,而实验组血蛋白指标的水平明显高于对照组(P<0.05),二者差异显著.术后第10天实验组疲劳度评分明显低于对照组.结论结直肠癌患者术后应用rhGH和肠外营养有利促进蛋白质合成和减轻患者的疲劳度.     

重组生长激素对手术后疲劳综合征大鼠模型的影响

目的探讨rhGH对POFS大鼠模型的作用及其作用机制初步探讨.方法选用POFS大鼠模型,观察大鼠体重、肛温、体力活动、血清蛋白、转铁蛋白等;对模型大鼠小肠粘膜损伤进行病理评价;测定肝脏白蛋白基因表达.结果rhGH能改善大鼠模型术后一般情况和转铁蛋白等营养学指标,减轻创伤应激带来的小肠粘膜损伤,增加肝白蛋白基因表达.结论rhGH能缩短大鼠模型POFS持续时间,减轻POFS的程度.     

重组人生长激素对败血症大鼠肠粘膜屏障功能保护作用的机制研究

目的观察重组人生长激素(RHGH)对败血症大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用腹腔注射E.COLI复制大鼠败血症模型。42只健康雌性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、败血症组(S组)及RHGH治疗组(T组),S组及T组又依观察时点再分为1D、3D两个亚组(T1D,T3D,S1D,S3D)。应用RT-PCR、免疫组化、放射免疫等方法,动态观测肝组织IGF-1MRNA表达情况、肠粘膜BCL-2蛋白表达水平及细菌移位、血浆生长激素(GH)及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平及肠道形态等指标的变化情况。结果1RHGH能明显减轻败血症大鼠肠粘膜结构损伤,减轻肠道细菌移位。2T组大鼠肠粘膜BCL-2表达水平(T1D:2441±117;T3D:3628±235)明显高于S组水平(S1D:321±36;S3D:1873±57)(P<0.01)。3T组大鼠血浆GH水平〔T1D:(1.28±0.24)ΜG/L;T3D:(2.14±0.48)ΜG/L〕显著高于S组水平〔S1D:(0.74±0.12)ΜG/L;S3D:(0.60±0.18)ΜG/L〕(P<0.01)。4T组大鼠血浆IGF-1水平〔T1D:(168.94±65.67)ΜG/L;T3D:(201.56±64.98)ΜG/L〕明显高于S组水平〔S1D:(116.72±13.96)ΜG/L;S3D:(107.50±23.53)ΜG/L〕(P<0.05)。5T组大鼠肝IGF-1MRNA表达水平〔T1D:(0.98±0.20);T3D:(1.76±0.17)〕显著高于S组水平〔S1D:(0.38±0.09);S3D:(0.46±0.10)〕(P<0.01)。结论RHGH可能通过抑制肠粘膜上皮细胞凋亡及GH/IGF-1的作用来维护败血症大鼠肠粘膜屏障功能。     

严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白分解代谢的临床研究

目的分析严重烧伤脓毒症患者骨骼肌蛋白降解变化及其生物学机制。方法收集同期收治的20例严重烧伤脓毒症患者(烧伤脓毒症组)和12例整形患者(对照组)的血、24h尿和股四头肌标本,通过放免法测定血浆皮质醇和肿瘤坏死因子(TNF)-α含量,高效液相-色谱分析法检测股四头肌内3-甲基组氨酸(3-MH)含量以及尿中3-MH排出量,核糖核酸印迹法检测股四头肌内编码泛素、E2-14k和蛋白酶体C2亚基的mRNA表达变化。蛋白免疫印迹法检测股四头肌内蛋白酶体C2亚基的蛋白表达变化。结果烧伤脓毒症组血浆内皮质醇含量(478±56)μg/L和TNF-α含量(22·4±3·8)μg/L均显著高于对照组血内皮质醇含量(72±12)μg/L和TNF-α含量(0·5±0·1)μg/L(均P<0·01)。烧伤脓毒症组股四头肌内3-MH含量(4·3±0·6)μmol/g及24h尿内3-MH排出量(456±25)μmol均显著高于对照组股四头肌内3-MH含量(2·5±0·4)μmol/g和24h尿内3-MH排出量(202±29)μmol(均P<0·01)。烧伤脓毒症组股四头肌泛素mRNA2·4kb条带和1·2kb条带的表达分别较对照组增强51%和32%,差异有统计学意义(P<0·01);E2-14k mRNA1·2kb条带的表达较对照组增强75%,差异有统计学意义(P<0·01);蛋白酶体C2亚基mRNA和蛋白表达分别较对照组增强39%和130%,差异有统计学意义(P<0·01)。结论重症烧伤脓毒症时骨胳肌蛋白降解显著增强,体内糖皮质激素及TNF-α含量增加,从基因水平激活细胞内蛋白降解途径-泛素系统是重症烧伤脓毒症患者骨胳肌蛋白降解增强的原因之一。     

重组人生长激素在烧伤治疗中的评价

目的：评价重组人生长激素（rhGH)重度烧伤创面的影响。方法：选择20例大面积烧伤病人，随机分为rhGH治疗组和对照组，并分析比较两组一般状况，定期检测患者的血清蛋白，深Ⅱ度创面及供皮区的愈合时间、体重变化。结果：治疗组血清白蛋白、前白蛋白较对照组增高，深Ⅱ度创面和供皮区愈合时间及住院时间较对照组短，体重下降减少。结论：rhGH对大面积烧伤患者治疗作用明显，并且是安全的。