脂肪酸结合蛋白的研究

脂肪酸结合蛋白(FABP)是一族多源性的小分子胞内蛋白质,广泛存在于哺乳动物体内的多种细胞。它在长链脂肪酸的转运、代谢调节中扮演着一个重要角色。脂肪酸结合蛋白的异常还可能与心肌肥大、心肌缺血、冠心病、急性和慢性酒精中毒、糖尿病以及癌症等有关。     

膜联蛋白A2在乳腺癌及乳腺纤维腺瘤中的表达及意义

目的 研究膜联蛋白A2 (Annexin Ⅱ,ANX A2)在乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中表达,以探讨其在乳腺癌发生发展中的作用.方法 分别使用免疫组织化学染色(SP)法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测乳腺浸润性导管癌和乳腺纤维腺瘤中ANX A2的蛋白表达水平和mRNA表达水平,并分析其在不同病理分级、临床分期及有无淋巴结转移的乳腺浸润性导管癌组织中的表达情况.结果 免疫组化结果显示乳腺浸润性导管癌组织中ANX A2表达高于乳腺纤维腺瘤(P＜0.05),RT-PCR结果也显示乳腺浸润性导管癌中ANX A2 mRNA的表达高于乳腺纤维腺瘤(P＜0.05).乳腺癌中ANX A2的表达与年龄、病理分级、临床分期和淋巴结转移呈正相关.结论 乳腺浸润性导管癌中annexinA2表达明显高于乳腺纤维腺瘤,annexinA2可能是乳腺癌的生物学标记物之一,其在乳腺癌的发生发展中可能扮演重要的角色.     

肝型脂肪酸结合蛋白和脂肪酸合成酶在乳腺浸润性导管癌的表达变化及其意义

目的:探讨肝型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)和脂肪酸合成酶(FAS)与乳腺浸润性导管癌发生发展的关系.方法:用半定量逆转录聚合酶链反应、免疫组织化学和Western blot等方法检测L-FABP、 FAS和血管内皮生长因子(VEGF)在86例乳腺浸润性导管癌中的表达变化.结果:L-FABP和FAS主要分布于浸润性导管癌的腺泡和导管上皮细胞, L-FABP的mRNA和蛋白质的表达量在Ⅲ级浸润性导管癌的较Ⅰ、Ⅱ级明显上调(P<0.05).相反, FAS的表达量在Ⅲ级浸润性导管癌的较Ⅰ、Ⅱ级明显下调, 两者的表达无明显相关性(P>0.05).但是, L-FABP的表达与VEGF呈明显相关性.结论:在Ⅲ级浸润性导管癌, 随着FAS表达下调, L-FABP和VEGF的表达上调.     

乳腺癌中EZH2和p53蛋白表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌组织中EZH2和p53蛋白的表达,分析二者表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision法检测50例乳腺腺病、92例乳腺浸润性小叶癌(invasive lobular carcinoma,ILC)和200例乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)组织中EZH2和p53的表达及二者的相关性。结果 EZH2在ILC与IDC中的表达差异无统计学意义(P>0.016 7),其在乳腺腺病组织中的表达低于ILC与IDC组织(P<0.016 7)。EZH2表达与患者年龄、绝经状态、组织学类型、p TNM分期等均无关,与肿瘤直径、淋巴结转移、分子亚型、生存状态及p53表达有关(P<0.05)。p53蛋白在乳腺腺病和ILC组织中的表达差异无统计学意义(P>0.016 7),其在IDC组织中的表达高于ILC与乳腺腺病组织(P<0.0167)。p53表达与患者年龄、绝经状态、肿瘤直径、淋巴结转移等无关,与组织学类型、p TNM分期、分子亚型及生存状态相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析示:EZH2及p53蛋白表达与乳腺癌患者无病生存率及总生存率具有相关性(P<0.05);COX多因素回归分析显示:EZH2及p53蛋白表达是乳腺癌患者生存的独立影响因素。结论在乳腺腺病、ILC及IDC组织中,EZH2及p53蛋白表达逐渐升高,二者表达呈正相关。EZH2及p53蛋白表达水平对评价乳腺癌患者预后有重要价值。     

上皮钙依赖粘附素相关分子在乳腺浸润性小叶癌和导管癌中的表达及意义

目的 探讨上皮钙依赖粘附素相关分子α-、β-、γ-catenin在乳腺浸润性小叶癌（ILC）和浸润性导管癌（IDC）中的表达及其意义。方法 采用免疫组织化学LSAB法检测了19例ILC和32例IDC组织中α-、β-、γ-catenin的表达,并根据阳性癌细胞占肿瘤细胞的比例进行半定量化分析和统计学x^2检验。结果 α-、β-、γ-catenin在19例ILC中表达缺失和明显减少的分别为15例（78.9%),10例（52.6%)和16例（84.2%),而在32例IDC癌组织中的表达缺失和明显减少为24例（75.0%),14例（43.8%)和26例(81.3%)例。另外,这3种蛋白在浸润性癌组织中表达强度弱于原位癌灶的表达强度。α-catenin和β-catenin在乳腺浸润性癌中的表达具有明显的正相关性,未发现α-、β-、γ-catenin在乳腺浸润性癌中的表达与有无伴有淋巴结转移病例之间的关系有统计学意义。结论 α-、β-、γ-catenin在乳腺ILC和IDC中表达均为明显缺失和减少,说明这些粘附分子在乳腺浸润性癌发生中确实丧失了其正常的细胞粘附功能。     

表皮型脂肪酸结合蛋白的研究进展

表皮型脂肪酸结合蛋白（epidermal fatty acid binding protein,E-FABP）是脂肪酸结合蛋白家族中的成员,已经证实E-FABP不仅在皮肤组织中的角质形成细胞有表达,还在多种细胞和组织中有表达。最近研究表明,E-FABP与包括肿瘤在内的多种疾病的发生发展密切相关。     

性激素结合球蛋白在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨性激素结合球蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG)在乳腺癌中的表达及意义.方法 采用免疫组化EnVision法检测SHBG、AR、ER在83乳腺癌中的表达,每例标本中均包括浸润性乳腺癌(invasive breast carcinoma,IBC)和原位癌(carcinoma in situ,CIS)组织.结果 CIS及IBC中SHBG表达与AR、ER无相关性,CIS中SHBG阳性68例(81.9%),IBC中阳性53例(61.9%),两者差异有显著性(P=0.007),AR、ER阳性乳腺癌中表达SHBG者临床分期低,差异有显著性(P值分别为0.049和0.013),SHBG阳性的乳腺癌中AR、ER均阳性者组织学分级低,差异有显著性(P=0.000).结论 AR、ER阳性乳腺癌中SHBG具有抑制肿瘤增殖的作用,其表达缺失可能参与了激素依赖性乳腺癌的进程.     

SSTR2与Her-2在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨SSTR2与Her-2在原发性乳腺浸润性导管癌组织中的表达,及其与临床病理因素的关系。方法：应用免疫组织化学法（IHC）检测80例原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR2与Her-2的表达情况,并分析其与临床病理因素的关系。结果：原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR2阳性表达率为77.5%（62/80）,Her-2阳性表达率为46.3%（37/80）,Her-2与SSTR2同时表达阳性率为31.3%（25/80）。SSTR2与Her-2两者表达有相关性（P〈0.05）。SSTR2的表达与年龄（P〉0.05）,月经状态（P〉0.05）,肿瘤大小（P〉0.05）无关,与不同肿瘤临床TNM分期,淋巴结转移状态密切相关（P均〈0.05）。Her-2的表达与年龄（P〉0.05）,月经状态（p〉0.05）无关;与肿瘤大小,不同肿瘤临床TNM分期,淋巴结转移状态密切相关（P〈0.05）。结论：原发性乳腺浸润性导管癌组织中SSTR2阳性表达率为77.5%,因此对大多数疑为乳腺癌的患者可应用生长抑素受体显像技术（SRS）进行筛选。SSTR2与Her-2两者表达有相关性,因此生长抑素显像技术有助于提示乳腺癌患者Her-2基因表达情况,联合检测Her-2与SSTR2对乳腺癌临床诊断、分期和预后具有指导意义。     

乳腺癌组织中金属硫蛋白表达的意义

目的：探讨金属硫蛋白（ＭＴ）在浸润性乳腺导管癌中的表达及其临床意义。方法：常规免疫组化ＬＡＢ法检测了９６例浸润乳腺导管癌术后标本中ＭＴ中的表达情况。结果：浸润性乳腺导管癌标本的表达率为５２．１％,在大多数阳性病例中胞浆、胞核均着色。ＭＴ表达与乳腺癌的核分级有关;ＭＴ表达阳性者和阴性者相比预后大多较差。结论：ＭＴ表达可预测癌的预后,ＭＴ有可能作为又一个增殖旺盛、侵袭强的肿瘤标志物。     

HER-2、p16、p53蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达及意义

目的探讨HER-2、p16、p53蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达情况及其临床意义。方法收集2008年7月～2010年12月商丘市中心医院行手术治疗,术后证实为乳腺浸润性导管癌患者149例,检测HER-2、p16、p53蛋白在乳腺浸润性导管癌中以及正常组织中的表达情况。结果乳腺浸润性导管癌HER-2过表达,阳性率为23.5%;p16、p53阳性率分别为31.5%和51.0%;HER-2过表达与腋窝淋巴结转移、组织学分级存在明显相关性(χ2=5.687、5.924,P均<0.05);p16阳性表达在不同年龄之间存在统计学差异(χ2=4.213,P<0.05),p53阳性表达在不同组织学分级之间存在统计学差异(χ2=6.378,P<0.05);HER-2、p16表达与术后无瘤生存存在明显的相关性;p16与p53存在明显相关性(r=0.282,P<0.05)。结论 HER-2、p16、p53与乳腺浸润性导管癌的发生、发展密切相关,可作为临床指导治疗和评价患者预后的重要指标。     

肝脏型脂肪酸结合蛋白与代谢综合征

肝脏型脂肪酸结合蛋白（liver fatty acid binding protein, L-FABP）基因定位于人类2号染色体短臂（2p11）上,主要表达于哺乳动物肝脏细胞,其功能是调节脂肪酸的吸收及细胞内的转运。近来研究表明L-FABP的功能状态与脂肪性肝病、肥胖、胰岛素抵抗等脂质代谢异常的疾病的发生发展关系密切。     

Cytoplasmic fatty acid‐binding protein facilitates fatty acid utilization by skeletal muscle

The intracellular transport of long‐chain fatty acids in muscle cells is facilitated to a great extent by heart‐type cytoplasmic fatty acid‐binding protein (H‐FABP). By virtue of the marked affinity of this 14.5‐kDa protein for fatty acids, H‐FABP dramatically increases their concentration in the aqueous cytoplasm by non‐covalent binding, thereby facilitating both the transition of fatty acids from membranes to the aqueous space and their diffusional transport from membranes (e.g. sarcolemma) to other cellular compartments (e.g. mitochondria). Striking features are the relative abundance of H‐FABP in muscle, especially in oxidative muscle fibres, and the modulation of the muscular H‐FABP content in concert with the modulation of other proteins and enzymes involved in fatty acid handling and utilization. Newer studies with mice carrying a homozygous or heterozygous deletion of the H‐FABP gene show that, in comparison with wild‐type mice, hindlimb muscles from heterozygous animals have a markedly lowered (?66%) H‐FABP content but unaltered palmitate uptake rate, while in hindlimb muscles from homozygous animals (no H‐FABP present) palmitate uptake was reduced by 45%. These findings indicate that H‐FABP is present in relative excess and plays a substantial, but merely permissive role in fatty acid uptake by skeletal muscles.     

人脂肪酸合成酶启动子在乳腺癌细胞中的转录活性分析

目的分析人脂肪酸合成酶（FAS）启动子在乳腺癌细胞中的转录活性,并与cerbB2启动子、midkine启动子相比较,为其乳腺癌靶向基因治疗提供依据。方法Western blot和间接免疫荧光法检测FAS蛋白在3种人乳腺癌细胞系SKBR3、MCF-7、MDA-MB-231以及正常成纤维细胞系NIH3T3中的表达。构建pGL3-FAS、pGL3-cerbB2和pGL3-midkine荧光素酶表达载体,并分析其在SKBR3、MCF-7、MDA-MB-231和NIH3T3细胞系中的相对转录活性。结果FAS蛋白在3种乳腺癌细胞系中均有表达,其中在SKBR3细胞中表达量最高,在MDA-MB-231细胞中表达量最低,而在正常成纤维细胞系NIH3T3中不表达。FAS蛋白主要定位于细胞质。FAS启动子在3种乳腺癌细胞系中均具有较强的转录活性,转录活性明显高于强启动子SV40和肿瘤特异性启动子midkine;而在正常成纤维细胞中,转录活性很低。FAS启动子在cerbB2高表达的SKBR3细胞中转录活性最高,与cerbB2启动子相当;在cerbB2表达较弱的MCF-7和MDA-MB-231细胞中的转录活性则明显高于cerbB2启动子。结论FAS启动子在乳腺癌细胞中具有强转录活性,较cerbB2启动子作用范围更广,较midkine启动子转录活性更高,而在正常细胞中转录活性很低,具有良好的乳腺癌靶向性,可作为乳腺癌广谱基因治疗的靶向工具。     

人N端脂多糖结合蛋白基因在sf21昆虫细胞中的表达

目的 表达重组人N端脂多糖结合蛋白（truncated lipopolysaccharide binding proten,tIBP）。方法 通过病毒鉴定、SDS-PAGE、western blot、毛细管电泳、体外结合实验、细胞活性实验对重组病毒及重组蛋白tLBP的分子量、纯度和生物学活性进行分析。结果 重组病毒空斑分析确定MOI(multiplicity of infection)为8～10,SDS-PAGE显示感染时间65～72h为最佳表达分析;凝胶扫描显示特异表达蛋白占总产物的9.8%,纯化蛋白的分子量约27000u,纯度达95%以上;毛细管电泳显示表达产物呈单一峰型;Lowry法测定约1L上清液可获9mg纯化蛋白;Western blot间接显示表达产物反应带与预期值相符;酶联体外结合实验证实该蛋白可特异结合LPS。应用U937细胞,经LPS(1ng/mL）刺激与LPS（1mg/mL）刺激加纯化蛋白细胞中获得高效表达,并观察到它在体外具有结合或中和内毒素的活性作用。     

乳腺良、恶性病变组织中MMP-26蛋白的表达及其与ER的关系

目的检测基质金属蛋白酶-26(MMP-26)蛋白在人乳腺良、恶性病变组织中的表达,及其与部分临床指标的关系,分析MMP-26在肿瘤进展中的作用及临床意义,并探讨雌激素及其受体(ER)对MMP-26蛋白表达调节作用。方法应用免疫组化SP法,检测MMP-26蛋白在正常乳腺组织、乳腺增生症、原位癌和乳腺浸润性导管癌(IDC)中的表达,以及ER在IDC中的表达并进行评分,结果用INSTAT统计软件分析。结果6例正常乳腺组织和8例乳腺增生症中,分别有1例MMP-26呈弱阳性表达,阳性率分别为16.7%和12.5%。4例原位癌中MMP-26全部阳性表达。在67例IDC中,有41例MMP-26阳性表达,阳性率为61.2%。MMP-26的表达与发病年龄、肿瘤大小、病理学分级无关,而与淋巴结转移密切相关(P<0.05)。MMP-26蛋白在IDC的阳性表达与ER在癌组织中的表达呈明显的负相关(P<0.01)。结论MMP-26在肿瘤浸润和转移中发挥重要作用;MMP-26在IDC中的表达可能受雌激素及其受体的调节。     

神经周浸润在乳腺癌中的意义

目的：对乳腺浸润性导这癌神经周浸润与肿瘤的大小、肿瘤的组织学分级、肿瘤的ＴＮＭ分期、淋巴结转移、５年存活率、肿瘤标志物ＣＥＡ等之间关系进行探讨。方法：６５例乳腺浸润性导管癌组织常规取材制片,ＨＥ、Ｇｏｄｅｎ－Ｓｗｅｅｔ网染,ｌａｍｉｎｉｎ、ＣＥＡ、ｖｉｍｅｎｔｉｎＳ－Ｐ法免疫标记染色法光镜观察。结果：神经周浸润与肿瘤大小、的组织学分级、肿瘤的ＴＮＭ分期、淋巴结转移率均成正相关;与淋巴管浸润关系密切     

Effect of endurance training and/or fish oil supplemented diet on cytoplasmic fatty acid binding protein in rat skeletal muscles and heart

Endurance training and/or a fish oil supplemented diet affect cytoplasmic fatty acid binding protein (FABP_c) content in rat skeletal muscles and heart. After 8 weeks of swimming, trained rats exhibited higher FABP_c content in the extensor digitorum longus (EDL) and in the gastrocnemius than did control rats (30%). The FABP_c increase was associated with an increase of citrate synthase activity (85% and 93%, respectively, in the two muscles), whereas lactate dehydrogenase activity decreased significantly. In contrast, in the soleus and in the heart we did not observe any effect of exercise either on FABP_c or on the metabolic profile. Therefore, increasing oxidative capacities of muscle by exercise resulted in a concomitant increase of the FABP_c content. Giving a polyunsaturated fatty acid (ω-3) supplemented diet for eight weeks induced a large rise of the FABP_c in EDL (300%), gastrocnemius (250%), soleus (50%) and heart (15%) without a concurrent accumulation of intramuscular triglycerides or modification of the citrate synthase activity, suggesting that polyunsaturated fatty acids may increase FABP_c content by up-regulating fatty acid metabolism genes via peroxisome proliferator-activated receptor alpha activation. Endurance trained rats fed with an ω-3 diet had similar FABP_c content in the gastrocnemius muscle when compared to sedentary ω-3 fed rats, whereas an additive effect of exercise and diet was observed in the EDL. The FABP_c in the soleus and in the heart of rats fed with ω-3 supplements remained constant whether rats performed exercise or not. As a result, both exercise and ω-3-enriched diet influenced FABP_c content in muscle. These two physiological treatments presumably acted on FABP_c content by increasing fatty acid flux within the cell. Electronic Publication     

乳腺癌中nm23-H1 mRNA及其蛋白低表达的研究

目的 探讨ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ及其蛋白低表达之间相关性及与乳腺癌生物学行为的关系。方法 应用ＲＴ／ＰＣＲ及免疫组化方法对５８例乳腺癌组织中ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ及其蛋白的表达进行检测。结果 分别有４４．８％,４８．２％的乳腺癌伴有ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ或该基因编码蛋白的低表达,ｎｍ２３－Ｈ１ ｍＲＮＡ与其蛋白表达虽有相关性,但并不完全吻合。