胃癌组织中Runx3、p21蛋白的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中Runx3、p21蛋白的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化二步法检测66例胃癌（观察组）和30例正常胃黏膜（对照组）组织中的Runx3、p21。结果对照组24例（80%）Runx3蛋白表达阳性,17例（56.7%）p21蛋白表达阳性;观察组分别为30例（45.5%）、22例（33.3%）。两组Runx3、p21蛋白阳性表达率相比P均〈0.05。观察组Runx3、p21蛋白阳性表达率与胃癌分化程度、浸润深度、淋巴结远转移有关（P均〈0.05）。胃癌组织中Runx3、p21蛋白表达呈正相关（r=0.452,P〈0.05）。结论胃癌组织中Runx3、p21蛋白表达下降。Runx3可能通过影响p21蛋白的表达影响胃癌的发生发展。     

人端粒保护蛋白在胃癌中的异常表达及其临床意义

目的 探讨人端粒保护蛋白（human protection of telomeres，hPOT1）在胃癌中的异常表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化方法检测hPOT1在57例胃癌标本中的表达，同时以10例正常胃黏膜标本做对照。结果 57例胃癌标本的表达全阳性，阳性率100％，显著高于正常胃黏膜hPOT1的表达（40％）。浸润至或超过浆膜层的胃癌hPOT1表达强度显著高于未达浆膜层者，Ⅲ／Ⅳ期胃癌明显高于Ⅰ/Ⅱ期胃癌，低分化胃癌高于高分化胃癌（P〈0．05）。结论 hPOT1在胃癌组织中表达异常增高，提示hPOT1与胃癌的发生、发展有密切的关系，检测hPOT1的表达可能会有助于胃癌的早期诊断和预后。     

p53、血管内皮生长因子在胃癌中的表达及意义

目的观察胃癌组织中p53、血管内皮生长因子（VEGF）的表达,探讨其与胃癌生物学行为及预后的关系。方法用免疫组化法检测60例胃癌组织p53、VEGF的表达,分析各指标与胃癌临床病理学特征的关系。结果 VEGF的阳性表达率为66.7%,p53的阳性表达率为75.0%;VEGF及p53的表达均与肿瘤的大小、分型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤分期有关（P均〈0.05）;与患者的术后生存时间呈负相关（P〈0.05）。VEGF与p53的表达呈正相关（P〉0.05）;p53和VEGF影响胃癌患者预后。结论 p53、VEGF的表达与胃癌的生物学行为及患者的预后有密切关系。     

热休克蛋白27和p53在胃癌中的表达及意义

[目的]研究热休克蛋白27(HSP27)和p53在胃癌组织中的表达及与胃癌生物学行为关系。[方法]采用免疫组化SABC法检测48例胃癌(胃癌组)、20例正常胃黏膜(对照组)组织中HSP27和p53的蛋白表达。[结果]HSP 27、p53蛋白表达阳性率,胃癌组分别为64.6%、68.9%,对照组分别为7.1%、0%,2组比较差异有统计学意义(P0.01);HSP27在胃癌中表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移及临床分期有关(P0.05),p53蛋白在胃癌中表达与肿瘤大小、部位、浸润深度、淋巴结转移和肿瘤增殖能力有关(P0.05),HSP27与p53的表达无相关性。[结论]HSP27和p53表达与胃癌生物学行为有关,在胃癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。     

胃癌组织中Claudin-7基因表达及临床意义

目的探讨Claudin-7基因在胃癌发生、发展中的作用。方法采用原位杂交和免疫组化法检测45份胃癌组织（观察组）及10份正常胃黏膜组织（对照组）中Claudin-7基因的表达,并分析其与胃癌临床病理参数的关系。结果观察组及对照组Claudin-7蛋白阳性表达率分别为55.55%、100%,P〈0.05;Claudin-7 mRNA阳性表达率分别为60%、100%,P〈0.05。Claudin-7蛋白及Claudin-7 mRNA表达与胃癌组织肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关,而与性别、肿瘤大小无关。结论Claudin-7基因在胃癌组织中呈低表达,可促进胃癌的发生及发展。     

VEGF与p53蛋白在膀胱癌组织中的表达及意义

目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）与p53蛋白在膀胱癌发生、发展中的作用。方法分别采用SP免疫组化法及EnVision二步法检测VEGF和p53蛋白在58份膀胱癌肿瘤组织标本（观察组）及12份正常膀胱组织标本（对照组）中的表达,并分析两者表达的相关性及与膀胱癌临床病理特征的关系。结果观察组VEGF及p53蛋白阳性表达率均显著高于对照组,观察组有淋巴结转移及血行转移者VEGF阳性表达率明显高于无淋巴结转移及血行转移者（P〈0．01）;p53蛋白表达与膀胱癌淋巴结、血行转移情况及肿瘤大小均无明显相关性;VEGF表达阳性者p53蛋白阳性表达率明显高于VEGF表达阴性者。结论VEGF表达异常升高与膀胱癌发生、发展及转移有关;p53蛋白可通过激发VEGF表达参与膀胱癌发生、发展。     

胃癌组织mdm2、p53及p21蛋白表达与EB病毒感染的关系

应用免疫组化技术检测13例EB病毒相关胃癌（EBVaGC）（观察组）组织中mdm2、p53和p21蛋白的表达,并与45例EB病毒阴性胃癌（EBVnGC）（对照组）进行比较,发现两组mdm2、p53和p21蛋白的阳性检出率无明显差异（P均〉0．05）,但观察组p53蛋白过表达率（15．38％）明显低于对照组（57．78％）,P〈0．01。观察组核抗原基因EBNA1均为阳性,潜伏膜蛋白基因LMP1均为阴性,即刻早期基因BZLF1、早期基因BARF1和BHRF1阳性率分别为46．15％、46．15％和15．38％,三者与mdm2、p21和p53蛋白的表达均无显著相关性（P〉0．05）。提示胃癌组织中病毒感染与p53蛋白的异常表达有关,而与mdm2和p21蛋白的异常表达无相关性。     

胃癌组织中PTEN、p53的表达变化及意义

目的观察胃癌组织中p53、FTEN的表达变化,探讨其意义。方法采用免疫组化法检测60例胃癌组织中的p53、PIEN。结果胃癌组织中PTEN、p53的阳性率分别为46．7％、75．0％,PTEN、p53表达均与胃癌患者肿瘤的大小、Borrmman分型、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关（P均〈0．05）,PTEN、p53表达呈明显负相关（r=-0．513,P〈O．05）;PTEN、p53表达分别与胃癌患者术后生存率呈正相关（r=0．556,P〈0．05）和负相关（r=-0．493,P〈0．05）。结论p53、PTEN表达在胃癌发生发展中有重要作用。     

Hpa、p53表达与大肠癌浸润转移的关系

目的 观察乙酰肝素酶（Hpa）及原癌基因053的表达变化与大肠癌浸润转移的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测54例原发性大肠癌组织中的Hpa及p053蛋白。结果Hpa与大肠癌肿瘤直径有关（P〈0．01）,Hpa、p53与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和肝转移有关（P均〈0．05）。结论Hpa和p53蛋白的表达在大肠癌浸润转移中起重要作用,联合检测Hpa和p53蛋白对判断大肠癌淋巴结和肝转移有一定参考价值。     

食管癌组织中CtBP1、p16蛋白的表达变化

目的观察食管癌组织中C端结合蛋白（CtBP）1和p16蛋白的表达变化。方法采用免疫组化法检测57例食管癌组织（观察组）及30例癌旁组织（对照组）中的CtBP1和p16蛋白,并分析其与食管癌临床病理参数的关系。结果观察组51例、对照组29例CtBP1蛋白表达阳性,两组CtBP1蛋白阳性表达率相比P〉0.05。观察组30例、对照组24例p16蛋白表达阳性,两组p16蛋白阳性表达率相比P〈0.05。食管癌组织中p16表达与临床分期、淋巴结转移有关（P均〈0.05）,与病理分型无关（P〉0.05）;CtBP1表达与临床分期、淋巴结转移、病理分型均无关（P均〉0.05）。结论食管癌组织中p16蛋白表达下调,CtBP1蛋白表达无明显变化。     

hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞突变型p53表达的影响

目的通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中人端粒保护蛋白（human protection of telomeresl，hPOTl）的表达，观察hPOTl RNA干扰对胃癌BGC823细胞突变型p53基因转录水平的影响。方法从hPOTl编码区外显子8的区域选取一段19个碱基的序列gtactagaagcctatctca为RNA干扰靶向序列，构建hPOTl的RNA干扰真核表达载体，转人体外培养的低分化人胃癌细胞BGC823，提取细胞总RNA，半定量RT-PCR检测hPOTl和突变型p53基因mRNA表达水平的改变，验证hPOTlRNA干扰载体的基因沉默效率，了解抑制hPOTl表达后突变型p53基因mRNA水平的改变。结果经DNA测序鉴定，hPOTlRNA干扰载体包含干扰序列的插入片段，插入位置正确。经半定量RT-PCR鉴定，RNA干扰组细胞的hPOTl mRNA表达水平明显下调，基因沉默效率在70％左右；突变型p53表达下调。结论通过RNA干扰技术抑制人胃癌细胞BGC823中hPOTl表达后，突变型p53表达下调，提示hPOTl与突变型p53之间有一定的相关性。     

hPOT1 RNA干扰对人胃癌细胞株BGC-823端粒长度和hTERT表达的影响

人端粒保护蛋白1（hPOT1）的主要作用为保护端粒和调节端粒长度。目的：探讨hPOT1在人胃癌细胞中对端粒长度的调节作用及其可能机制。方法：以RNA干扰（RNAi）技术抑制人胃癌细胞株BGC-823中hPOT1的表达．以实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞端粒长度，以半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA表达。结果：以RNAi技术抑制hPOT1表达后，BGC-823细胞端粒长度明显缩短，反映端粒相对长度的T／S值显著小于亲本BGC-823细胞组和阴性对照组（1．383±0．091对2．758±0．647和3．043±0．548，P〈0．05），亲本细胞组与阴性对照组之间则无明显差异。hPOT1RNAi组细胞hTERTmRNA表达亦明显下调。结论：在人胃癌细胞中，hPOT1能正性调节端粒长度；在hPOT1下调引起端粒缩短的环节中，hTERT表达下降可能起一定作用。     

人端粒保护蛋白反义核酸抑制SGC7901胃癌细胞增殖

目的 研究人端粒保护蛋白（human protection of telomeres,hPOT1）对胃癌细胞生长增殖的作用.方法 利用本课题组先前所构建的hPOT1正、反义核酸真核表达载体,转染SGC7901胃癌细胞,G418筛选阳性克隆,用Western印迹法、MTT法、流式细胞仪、透射电镜等技术观察基因转染后SGC7901细胞hPOT1蛋白的表达、细胞生长曲线、细胞周期、细胞凋亡及细胞形态学的变化.结果 转染了hPOT1反义核酸真核表达载体（pcDNA-as-hPOT1）的SGC7901胃癌细胞hPOT1表达降低,生长减慢,阻滞于G2/M期,细胞凋亡增加.结论hPOT1反义核酸真核表达载体能显著抑制hPOT1蛋白的表达,hPOT1蛋白可能参与胃癌细胞的周期调控,并与细胞的生长增殖有关.     

热水诱导慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织p53和增殖细胞核抗原蛋白的表达

背景：慢性萎缩性胃炎（CAG）属胃癌癌前状态,高热饮食是CAG发生的危险因素之一。目的：观察热水诱导CAG大鼠胃黏膜组织中p53和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达,探讨长期高热饮食与CAG和胃癌的可能关系。方法：以55℃蒸馏水灌胃建立大鼠CAG模型。分别于灌胃第8、12、24、32和65周取腺胃组织,光学显微镜下观察胃黏膜组织学改变;采用免疫荧光技术标记p53和PCNA蛋白,行激光扫描共聚焦显微镜观察。结果：热水灌胃组第24周时胃黏膜开始出现萎缩改变。温水灌胃组各时间点胃黏膜均未见p53和PCNA蛋白表达。热水灌胃组第24周时胃黏膜细胞核中即可见p53蛋白绿色荧光和PCNA蛋白红色荧光表达,第32周和65周时表达更为明显。免疫荧光双标记时可见两种蛋白共表达。结论：热水灌胃可致大鼠CAG并引起胃黏膜癌相关基因p53和PCNA蛋白表达增强,可能与胃癌的发生有关。     

hPOT1 RNA干扰对人胃癌BGC823细胞TRF1、TRF2和Tankyrase1表达的影响

目的 观察人端粒保护蛋白(hPOT1)RNA干扰对胃癌BGC823细胞端粒重复序列结合因子1(TRF1)、端粒重复序列结合因子2(TRF2)、端锚聚合酶(Tankyrase1)转录水平的影响.方法 采用半定量RT-PCR方法检测TRF1、TRF2和Tankyrase1在mRNA表达水平的改变.结果 hPOT1RNA干扰抑制细胞中hPOT1表达后,TRF1表达明显上调,TRF2和Tankyrase1明显下调.结论 人胃癌BGC823细胞中hPOT1表达下调伴随TRF1表达明显上调、TRF2和Tankyrase1表达明显下调,提示hPOT1和TRF1、TRP2、Tankyrase1三个端粒相关蛋白之间具有较为密切的联系,并且相互制约、相互影响.     

Down-expression of tumor protein p53-induced nuclear protein 1 in human gastric cancer

AIM: Overexpression of tumor protein p53-induced nuclear protein 1 (TP53INP1) induces G1 cell cycle arrest and increases p53-mediated apoptosis. To clarify the clinical importance of TP53INP1, we analyzed TP53INP1 and p53 expression in gastric cancer. METHODS: TP53INP1 and p53 expression were examined using immunohistochemistry in 142 cases of gastric cancer. The apoptosis of gastric cancer cells was analyzed using the TUNEL method. The relationship between the expression of TP53INP1 and clinicopathological factors was statistically analyzed. RESULTS: TP53INP1 was expressed in 98% (139/142 cases) of non-cancerous gastric tissues and was down-expressed in 64% (91/142 cases) of gastric cancer lesions from the same patients. TP53INP1 expression was significantly decreased (43.9%) in poorly differentiated adenocarcinoma compared with well or moderately differentiated adenocarcinoma (81.6%). Cancers invading the submucosa or deeper showed lower positively (59.1%) compared with mucosal cancers (85.2%). Decrease or loss of TP53INP1 expression was significantly correlated with lymphatic invasion (54.3% vs 82.0% without lymphatic invasion) and node-positive patients (31.3% vs 68.3% in node-negative patients). P53 was expressed in 68 (47.9%) patients of gastric cancer, whereas it was absent in normal gastric tissues. A significant association was also observed between TP53INP1 status and the level of apoptosis in tumor cells: the apoptotic index in TP53INP1-positive tissues was significantly higher than that in TP53INP1-negative portions. Finally, when survival data were analyzed, loss of TP53INP1 expression had a significant effect in predicting a poor prognosis (P=0.0006). CONCLUSION: TP53INP1-positive rate decreases with the progression of gastric cancer. TP53INP1 protein negativity is significantly associated with aggressive pathological phenotypes of gastric cancer. TP53INP1 is related to the apoptosis of gastric cancer cells. The decreased expression of the TP53INP1 protein may reflect the malignant grade of gastric cancer and is regarded as an adverse prognostic factor.     

幽门螺杆菌感染与胃粘膜上皮细胞凋亡、增殖及p53基因表达探讨

目的:研究幽门螺杆菌(Helieobacter pylori,HP)感染后胃粘膜组织p53基因表达改变和细胞凋亡及增殖的变化。方法:采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)技术及免疫组织化学方法对HP阳性者根除前后及HP阴性者的胃粘膜上皮组织中的细胞凋亡、增殖及p53蛋白表达状态进行原位观察和比较。结果:慢性活动性胃炎HP感染者细胞凋亡指数和增殖指数显著高于不伴HP感染者(P<0.01),根除前后比较差异亦显著(P<0.01)。HP阳性组突变型p53阳性率显著高于HP阴性组(P<0.05)。在HP相关性胃炎中,p53阳性者的细胞增殖指数显著高于p53阴性者(P<0.05)。结论:HP可引起胃粘膜上皮细胞凋亡和增殖改变,突变型p53异常表达可能参与此过程。说明HP与胃癌发生动态过程有关系。     

胃癌p53基因表达与转移及预后的研究

目的观察胃癌组织ｐ５３基因的超表达及其与预后的关系。方法用抗人Ｐ５３基因蛋白单克隆抗体Ｓ＿Ｐ免疫组织化学方法，观察１２８例胃癌组织ｐ５３表达状况，并对ｐ５３表达与胃癌淋巴结转移状态和术后５年生存率进行比较分析。结果胃癌组织１２８例的ｐ５３表达阳性率为４３８％（５６／１２８）；ｐ５３表达阳性和阴性组的胃癌局部和远处淋巴结转移率分别为６７９％（３８／５６）和５１４％（３７／７２），两者经统计学处理无显著性差异（Ｐ＞００５）。获得随访９８例，胃癌术后５年生存率的随访结果显示，ｐ５３阳性和阴性组分别为３８１％（１６／４２）和３０１％（１７／５６），两组间无统计学意义（Ｐ＞００５）。结论胃癌的发生与ｐ５３基因突变关系密切，并可用免疫组化检测，但Ｐ５３基因蛋白在胃癌组织中的超表达，似不能作为判断胃癌预后的参考指标，应进一步探讨     

Mutated p53 protein expression and proliferative activity in advanced gastric cancer.

BACKGROUND/AIMS: When the DNA of cells is damaged, wild-type p53 protein induces the expression of p21 (Waf1/Cip1/Sdi1), and regulates the progression of the cell cycle by inducing G1 arrest. Thus, wild type p53 or p21 protein negatively regulates cancer cell proliferation. However, in tumor with loss of expression of functional wild-type p53 protein by mutation or allelic deletion of the gene for p53, whether the proliferative activity of cancer cells might be accelerated or not is unclear. In this study, we investigated the correlation between the level of expression of mutated p53 protein and the proliferative activity of cancer cells in advanced gastric cancer. METHODOLOGY: Ninety-seven samples from patients with gastric cancer that had invaded the serosa without lymph node metastasis (t3, n0, stage II) were investigated by immunohistochemical staining with a monoclonal antibody against p53 and against p21, and with the monoclonal antibody Ki-67. DNA ploidy patterns were analyzed by flow cytometry. The immunoreactivity against p53 and the proliferative activity of cancer cells were scored in terms of a labeling index (LI; percentage of immunostained cells) in each case. Moreover, the prognostic values for 93 surviving patients were evaluated by univariate and multivariate analysis. RESULTS: The mean p53 LI was 24% (range: 0-82.4%) and the mean Ki-67 LI was 23.1% (range: 0-70.7%) in 97 tumors. The expression of p21 protein was detected in 30 of 97 tumors (30.9%) and DNA aneuploidy was detected in 36 of 97 tumors (37.1%). There was significant correlation between the p53 LI and the Ki-67 LI (r = 0.61, t = 7.456, p < 0.001) in 97 tumors. Although, no significant difference was detected, the mean p53 LI (18.3%) of 30 tumors with expression of p21 protein was lower than that of 67 tumors without expression of p21 protein (26.6%, p = 0.096). However, no significant correlation between expression of p21 protein and Ki-67 LI was observed. The p53 LI was not an independent prognostic factor in 93 surviving patients by multivariate survival analysis (p = 0.069). However, the 5-year survival rate of 50 patients with a low level of p53 LI (p53 LI (< or = 10%, 78.3%) was significantly better than that of 43 patients with a high level of p53 LI (p53 LI > 10%, 62.1%, p = 0.045). CONCLUSIONS: Accumulation of mutated p53 protein might suppress the expression of p21 protein in gastric adenocarcinoma, and cancer cells with overexpression of mutated p53 protein might have a high proliferative activity.