基质金属蛋白酶及组织抑制剂在肝癌中的表达及与预后的关系

目的：探讨基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制剂（TIMPs）在肝癌中的表达及其意义。方法：应用免疫组化、Northern印迹杂交及图像分析技术对人肝细胞癌（HCC）、肝癌细胞株7721、全反式维甲酸处理的7721细胞（RA－7721）和正常人肝细胞株L－02作MMP－1、2、9和TIMP－2的表达分析。结果;肝癌细胞浆内可表达MMP－1、2和9,但癌内阴性组5年生存率明显高于相应的阳性组（P＜0．05）。体外MMP－9mRNA在7721细胞表达明显高于RA－7721以及L－02细胞,而TIMP－2mRNA的表达与MMP－9相反,MMP－2mRNA在7721细胞中的表达仅略高于L－02细胞。结论：HCC组织内MMP－1和9的表达与患者的预后密切相关;癌细胞高表达MMP－9、低表达TIMP－2,可能是肝癌细胞浸润、转移的主要基础,而MMP-2并无重要作用。     

蛋白酶活化受体-4在结肠癌组织中的表达及意义

目的探讨蛋白酶活化受体-4（PAR-4）在结肠癌发生、发展中的作用。方法采用Real-time RNA法检测28份结肠癌组织及其相应癌旁组织中PAR-4表达,并采用2-ΔΔCt方法进行比较。结果 PAR-4在结肠癌组织中表达量明显增高,平均高出癌旁组织4.03倍;两者ΔCt比较,P〈0.05;低分化结肠癌组织PAR-4表达量明显高于高分化及中分化组织（P〈0.05）;高分化与中分化组织PAR-4表达无显著差异。结论 PAR-4在结肠癌组织中尤其是低分化组织中呈高表达;PAR-4可促进结肠癌的发生及发展。     

GP73在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨高尔基体糖蛋白73(GP73)表达诊断肝癌的价值。方法采用免疫组织化学染色SP法检测60份肝癌组织、癌旁组织及24份正常肝组织中GP73表达;分析GP73表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织GP73阳性率显著高于正常肝组织(P<0.05)。GP73表达与Child-Pugh分级呈正相关(P<0.05),在肝外转移和HBV感染中表达亦显著增强(P<0.05),与性别、年龄、AFP、肿瘤大小、肝硬化和门脉癌栓无明显相关性。结论 GP73与肝癌的发生发展有关。     

Caspase-9和Survivin在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Caspase-9和Survivin在肝细胞癌(HCC)患者肝癌组织中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测92例肝癌患者肝癌组织及其对应癌旁正常肝组织中Caspase-9和Survivin的表达,并分析其表达与HCC临床恶性生物学行为的相关性。组间比较采用卡方检验,相关性分析采用Spearman等级相关法。结果 Caspase-9在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,而Survivin在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织,差异均具有统计学意义(χ2=6.48、7.05,P0.05)。在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、门静脉癌栓、淋巴结转移的肝癌组织中Survivin的阳性表达率明显增高(χ2=5.07、6.18、8.29,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义;在病理分级Ⅲ~Ⅳ级的肝癌组织中Caspase-9的阳性表达率明显降低(χ2=7.63,P0.05),而在其他分组中比较差异无统计学意义。结论 Caspase-9低表达和Survivin异常高表达均参与肝癌的发生过程,Caspase-9低表达可能与肝癌细胞恶性分化密切相关,而Survivin高表达与肝癌的浸润或远处转移等恶性发展密切相关。     

组织蛋白酶B、L在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨组织蛋白酶B、L在非小细胞肺癌中的表达及意义。方法收集44例非小细胞肺癌标本，石蜡包埋切片，通过免疫组化的方法检测组织蛋白酶B、L的表达。结果组织蛋白酶B、L随着肿瘤分期的进展其表达阳性率明显升高，Ⅲ期～Ⅳ期的病人组织蛋白酶B、L的表达与I期-Ⅱ期的病人有显著差异（P〈0．05）。组织蛋白酶B和L的表达高度相似。结论组织蛋白酶B、L的表达与非小细胞肺癌的进展和预后有关。     

Pokemon基因在原发性肝癌组织中的表达及意义

采用免疫组化PV-9000二步法检测 Pokemon蛋白在原发性肝癌(HCC)癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达情况,分析其表达与HCC临床病理特征的关系.结果 Pokemon蛋白在癌组织中的阳性率(54%)明显高于癌旁组织(30%)、正常组织(10%),其表达与肿瘤大小有关(P＜0.05).提示Pokemon基因可促进HCC的发生、发展.     

组织蛋白酶B在小鼠暴发性肝衰竭肝组织中的表达

目的研究组织蛋白酶B在暴发性肝衰竭小鼠肝组织中的表达。方法雄性昆明种小鼠腹腔同时注射脂多糖和D-氨基半乳糖,动态观察给药后2、4、6、8 h肝脏病理改变;以TUNEL法检测肝细胞凋亡;应用免疫组化和RT-PCR检测肝组织中组织蛋白酶B的表达。结果肝组织病理：给药后4 h出现凋亡细胞,6 h大量肝细胞凋亡,8 h以肝细胞坏死为主;TUNEL：给药后凋亡指数逐渐升高,6 h达到高峰,8 h有所降低;免疫组化：组织蛋白酶B表达2 h无明显变化（P〉0.05）,4 h逐渐增加,8 h达到高峰（P〈0.05）;RT-PCR：2 h组织蛋白酶B mRNA的表达量无明显变化（P〉0.05）,4 h表达略有升高,6 h表达最高,8 h表达有所降低（P〈0.05）。结论组织蛋白酶B在小鼠暴发性肝衰竭肝组织中表达明显增加,提示其可能通过促进肝细胞的凋亡而参与了暴发性肝衰竭的发病。     

肝细胞肝癌中组织蛋白酶D、H和L的表达

目的 检测人原发性肝细胞肝癌组织中组织蛋白酶D(CD)、组织蛋白酶H(CH)和组织蛋白酶L(CL)表达,探讨其作用与机制.方法 应用免疫组织化学法测定82例肝组织标本CD、CH和CL蛋白的表达,包括对照组17例,肝细胞肝癌(HCC)组37例和肝细胞肝癌癌旁组织(PTT)组28例,采用吸光度值分析其相对含量.数据采用SPSS 11.5软件统计分析,组间比较采用单因素方差分析.结果 HCC组CD(1.21±0.33)、CH(0.89±0.22)和CL蛋白(1.16±0.25)的平均吸光度值均明显高于对照组(分别为0.19±0.07,0.24±0.12和0.28±0.14)和PTT组(分别为0.27±0.13,0.31±0.14和0.36±0.15),差异有统计学意义(均P=0.0001),PTT组与对照组间3种蛋白表达均无明显差异(均P＞0.05).3种蛋白免疫组织化学表达形态显示,HCC组呈大量密集成弥漫性的点、片状深棕色满布整个细胞质,对照组和PTT组均仅见细胞质中有散在点状浅棕色分布.结论 人肝癌组织CD、CH和CL蛋白高表达,可能是反映原发性肝癌发生发展的重要标记物之一.

Abstract：

Objective To determine the expression of cathepsin D (CD), cathepsin H (CH) and cathepsin L (CL) in human primary hepatocellular carcinoma (HCC), and to investigate their mechanisms. Methods The protein expression of CD, CH and CL in hepatic specimens consisted of control (n = 17), HCC (n = 37) and paracancerous (n = 28) tissues were detected by immunohistochemistry. The relative values of CD, CH and CL protein expression were examined with absorbent density analysis. Data were analyzed using SPSS11. 5 software. The univariate analysis was used to compare the difference among groups. Results The mean absorbance of CD, CH and CL proteins in HCC tissues (1.21± 0.33, 0. 89 ± 0.22 and 1.16± 0. 25, respectively) were significantly higher in comparison with those in control tissues (0. 19 ± 0. 07, 0. 24 ± 0. 12 and 0. 28 ± 0. 14,respectively) and in paracancerous tissues (0.27±0.13,0. 31± 0.14 and 0. 36±0.15)(all P values =0.0001). Whereas there was no difference between control and paracancerous tissues with respect to CD, CH and CL proteins (P ＞0. 05). Three proteins immunohistochemically appeared as a lot of diffused spots and stripes staining in cytoplasma of HCC tissues,but only a few scatted spots staining was found in control and paracancerous tissues. Conclusion The high expression of CD, CH and CL protein in primary HCC may be important markers for carcinogenesis and malignant progress.     

eIF4E在肝癌组织中的表达及意义

目的探讨eIF4E在肝癌发生发展过程中的作用。方法采用免疫组织化学S-P法检测62份肝癌组织及癌旁硬化肝组织、15份正常肝组织中eIF4E蛋白的表达情况,并分析eIF4E表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织中eIF4E阳性表达率显著高于癌旁硬化肝组织及正常肝组织(χ2=29.37,P<0.001),其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及包膜的完整程度无关,与肝癌分化程度、临床分期及有无门静脉癌栓有关。结论 eIF4E蛋白表达随肝癌分化程度降低而增高;eIF4E在肝癌的发生发展过程中可能起非常重要的作用。     

C／EBP在肝癌组织及其癌旁组织的表达和意义

Ｃ／ＥＢＰ是近年发现的一种真核细胞转录调控因子，与细胞分化状态有关，Ｃ／ＥＢＰ主要存在于分化成熟的组织细胞中，在分化不良的细胞存在较少或检测不到。本文采用兔抗Ｃ／ＥＢＰ多肽抗体，经免疫组化ＡＢＣ染色，对３１例原发性肝细胞癌（２６例带癌旁肝组织）和２６例原发性肝内胆管细胞癌（１５例带癌旁肝组织）及１５例正常肝组织的表达情况进行了分析，结果发现Ｃ／ＥＢＰ抗原在３１例原发性肝细胞癌中阳性表达８例（２５．８％），２６例原发性肝内胆管细胞癌中阳性反应１０例（３８．５％），而４１例相应癌旁、１５例正常肝组织全部呈阳性反应。本试验中原发性肝细胞癌和原发性肝内胆管细胞癌组织Ｃ／ＥＢＰ阳性表达率低于相应的癌旁组织及正常肝组织，前者与后者差异显著（ｐ＜０．０５）。     

肝细胞癌组织中Cat S的表达及意义

目的探讨组织蛋白酶S（CatS）在肝细胞癌（HCC）中的表达以及与肝癌侵袭转移的关系。方法用免疫组织化学法检测63例HCC组织、癌旁组织和11例正常肝组织中组织蛋白酶S（Cats）的表达。采用免疫荧光染色法观察CatS与CD31在HCC组织中的定位。结果HCC组织中CatS的阳性率为53．97％,显著高于癌旁组织的30．16％（P〈0．05）;正常肝组织中未见表达。CatS的表达与门静脉浸润、肝外转移以及肿瘤分化程度有关（P〈0．05）。CatS与CD31共同定位于内皮细胞（EC）。CatS在CD31阴性的肿瘤细胞中也有少量表达。结论CatS在肝癌发生、发展过程中起重要作用,有可能成为预测HCC侵袭转移的新指标。     

肝细胞癌中ATP7B的表达及意义

目的 检测肝细胞癌组织ATP7B蛋白的表达,探讨其临床及病理学意义.方法 采用SP免疫组织化学方法检测ATP7B在9例正常肝组织及41例肝癌组织中的表达,分析其表达水平与临床病理特征的关系.结果 ATP7B在肝癌组中的阳性表达率为73.2％,显著高于正常肝组织(33.3％)(P＜0.05).增高的ATP7B表达与癌细胞分化程度显著相关(P＜0.05),高中低分化癌组织阳性表达率分别为62.5％、66.7％及92.3％.但其阳性表达率与TMN临床分期或肿瘤是否有血管浸润无关(P＞0.05).结论 肝细胞癌组织ATP7B阳性表达率显著升高,且与肿瘤分化程度有关,这对临床病理分级具有一定参考价值.     

microRNA-145在肝细胞肝癌中的表达及临床意义

[目的]探讨肝细胞肝癌中microRNA-145(miR-145)水平的变化及其临床意义。[方法]采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测30例肝癌组织、癌旁组织及3例正常肝组织中miR-145表达量,以及Hep G2肝癌细胞、L-O2胎肝细胞中miR-145表达量并计算miR-145相对表达量。结合采集组织的性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度等临床病理参数分析miR-145表达水平有无明显差异。[结果]肝癌组织中miR-145表达明显低于正常肝组织,差异有统计学意义(P0.05),癌旁组织与正常肝组织及肝癌组织之间表达差异无统计学意义(均P0.05),Hep G2细胞中miR-145表达明显低于L-O2细胞,差异有统计学意义(P0.05)。miR-145在肝癌中的表达异常与性别、年龄、淋巴结转移、肿瘤大小、HBV感染、AFP浓度无相关,差异无统计学意义。[结论]miR-145在肝癌患者中低表达,在肿瘤发生发展过程中可能担任了抑癌基因的角色,对肝细胞肝癌的临床诊断有意义。     

MACC-1 mRNA和c-Met mRNA在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的检测胃癌组织中结肠癌转移相关因子-1（MACC-1）mRNA和肝细胞生长因子受体原癌基因c-Met mRNA的分子表达水平,并探讨其与胃癌临床病理生物学行为的关系以及它们之间的相关性。方法采用实时荧光定量PCR（QT-PCR）技术检测45例胃癌及其癌旁组织标本中MACC-1 mRNA和c-Met mRNA的表达水平。结果 MACC-1 mRNA和c-Met mRNA的表达与组织学分级、浸润深度、临床分期、淋巴结转移显著相关（P〈0.05）,与年龄、肿瘤大小无关（P〉0.05）。且两者表达呈正相关（r=0.366,P〈0.05）。结论 QT-PCR技术可对胃癌组织中的MACC-1 mRNA和c-Met mRNA表达进行定量检测;MACC-1 mRNA和c-Met mRNA的高表达与胃癌的侵袭转移有关,可作为胃癌腹膜转移的预后评估因子。     

HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的探讨HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin在肝细胞肝癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测72例HBsAg阳性的肝细胞肝癌组织及癌旁组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的表达,并与临床病理资料做对照分析。结果HCC组织中HBx、Twist、E-cadherin及N-cadherin的阳性表达率分别为84.7%、80.6%、52.8%和45.8%,而癌旁组织的阳性表达率分别为81.9%、51.4%、70.8%和27.8%。除HBx外,后三种蛋白在肝癌组织及癌旁组织的表达差异均有显著性（P〈0.05）。HBx、Twist和N-cadherin的表达升高及E-cadherin表达下降分别与有无门脉癌栓和肝外是否转移相关（P〈0.05）;HBx的表达分别与Twist和N-cadherin的表达呈正相关（P〈0.05）;HBx、Twist和N-cadherin的表达则分别与E-cadherin的表达呈负相关（P〈0.05）。结论HBx、Twist和N-cadherin的高表达以及E-cadherin的低表达与肝癌的侵袭和转移有密切关系,HBx可能通过上调Twist而促进肝癌细胞的上皮—间质转化（EMT）改变。     

肝癌细胞HepG2表达白细胞介素6的意义

近年来,炎症及炎症因子与肿瘤的关系得到进一步的关注.原发性肝细胞癌(HCC)的风险因素不仅包括HBV和HCV感染,还有慢性酒精性肝病、血色病和脂肪肝等慢性肝病,多种炎症因子及细胞因子参与其中,其中白细胞介素6(IL-6)与肝癌的关系已经流行病学及实验研究证实[1-2].近年本实验室观察到部分肝癌细胞株也表达IL-6,本研究进一步探讨肝癌细胞HepG2表达IL-6情况及其对HepG2细胞生长的影响.     

大肠癌组织中talin mRNA的表达及意义

目的探讨踝蛋白（talin）mRNA在大肠癌组织中的表达变化及其在大肠癌发生、发展中的作用。方法采用荧光定量逆转录PCR（FQ-RT-PCR）方法检测41例大肠癌及癌旁正常组织中talin mRNA的表达。结果talin mRNA在大肠癌组织中的表达量为126535copy／μg RNA,而在癌旁正常组织中为22689376copy／μg RNA,两者相比,P〈0．01;有淋巴结转移的大肠癌较无转移者talin mRNA表达低,P〈0．01;癌组织浸润越深,talin mRNA表达越低,P〈0．01。结论talin mRNA在大肠癌中表达降低;talin与大肠癌的浸润、转移有关,可作为大肠癌发生、发展的预测指标之一。