Toll样受体4与支气管哮喘气道高反应

气道高反应性是支气管哮喘的基本特征.气道高反应的机制目前尚未完全阐明.当前支气管哮喘的治疗亦不能有效地抑制气道高反应性和气道重塑.近来发现,Toll样受体是一种属于I型跨膜蛋白的天然免疫模式识别受体.TLR4通过调控气道炎症,促进气道平滑肌增生,参与气道重塑等方式参与气道高反应性过程.本文主要探讨TLR4与在支气管哮喘...     

Toll样受体4与支气管哮喘气道高反应

气道高反应性是支气管哮喘的基本特征.气道高反应的机制目前尚未完全阐明.当前支气管哮喘的治疗亦不能有效地抑制气道高反应性和气道重塑.近来发现,Toll样受体是一种属于Ⅰ型跨膜蛋白的天然免疫模式识别受体.TLR4通过调控气道炎症,促进气道平滑肌增生,参与气道重塑等方式参与气道高反应性过程.本文主要探讨TLR4与在支气管哮喘...     

Toll样受体与支气管哮喘气道重塑

气道重塑是除气道慢性炎症以外支气管哮喘的又一重要特征.近年来研究表明,Toll样受体可通过调节多种致气道重塑因子如生长因子、细胞因子、炎性介质、趋化因子等的生成和活化,最终导致气道重塑.     

Toll样受体与支气管哮喘气道重塑

气道重塑是除气道慢性炎症以外支气管哮喘的又一重要特征。近年来研究表明，Toll样受体可通过调节多种致气道重塑因子如生长因子、细胞因子、炎性介质、趋化因子等的生成和活化，最终导致气道重塑。     

哮喘患儿Toll样受体4基因多态性及其与哮喘发病的关系

目的 探讨支气管哮喘患儿外周血Toll样受体4(TLR4)基因多态性及其与哮喘发病的关系。方法 172例哮喘患儿（观察组）,根据哮喘急性发作严重程度分为轻度34例、中度35例、重度45例和危重58例,另选择136例健康体检儿童为对照组。抽取观察组病情发作期、对照组体检时外周静脉血,采用聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性法检测TLR4基因,采用二元Logistic回归分析不同TLR4基因位点基因型儿童哮喘发病的危险性。结果 观察组患儿TLR4基因Thr399Ile位点CC、CT、TT基因型分别为31、73、68例,等位基因C、T分别为135、209例,对照组分别为42、60、34、144及128例;与对照组比较,观察组TLR4基因Thr399Ile位点T等位基因分布频率高（P<0.05）。与CC基因型比较,TLR4基因Thr399Ile位点TT型人群哮喘发病的危险性高[OR=2.353(95%CI1.575～4.663);P<0.05]。结论 哮喘患儿TLR4基因Thr399Ile位点的基因型以TT为主,等位基因T分布频率高。TLR4基因Thr399Ile位点多态性可...     

Toll样受体与支气管哮喘

Toll样受体（Toll—like receptors,TLR）是近年发现的一组天然受体,其不仅依赖胚系基因编码的保守序列识别病原微生物和激活天然免疫,而且调节获得性免疫和诱导免疫耐受,与支气管哮喘密切相关。其宿主通过TLR识别大量病原体相关结构,利用细胞信号转导途径激活机体免疫细胞,一方面参与早期的宿主防御,在天然免疫应答中发挥重要作用;另一方面通过分泌细胞因子、趋化因子、黏附分子等参与炎症反应,最终激活获得性免疫系统。本文就近年来有关TLR的结构功能、信号通路及TLR与支气管哮喘关系作一综述。     

Toll样受体与支气管哮喘

Toll样受体(Toll-like receptors,TLR)是近年发现的一组天然受体,其不仅依赖胚系基因编码的保守序列识别病原微生物和激活天然免疫,而且调节获得性免疫和诱导免疫耐受,与支气管哮喘密切相关.其宿主通过TLR识别大量病原体相关结构,利用细胞信号转导途径激活机体免疫细胞,一方面参与早期的宿主防御,在天然免疫应答中发挥重要作用;另一方面通过分泌细胞因子、趋化因子、黏附分子等参与炎症反应,最终激活获得性免疫系统.本文就近年来有关TLR的结构功能、信号通路及TLR与支气管哮喘关系作一综述.     

变形链球菌对EAhy926细胞Toll样受体2和4及白细胞介素6和8表达的影响

目的 观察变形链球菌对EAhy926细胞Toll样受体2和4的表达及炎性细胞因子白细胞介素6和8分泌的影响,初步探讨Toll样受体表达与细胞因子产生之间的关系.方法 变形链球菌作用于EAhy926细胞,RT-PCR法检测EAhy926细胞Toll样受体2和4及白细胞介素6和8的mRNA表达;流式细胞术检测EAhy926细胞表面Toll样受体2和4的表达;细胞生物活性法和ELISA分别检测EAhy926细胞白细胞介素6和8的分泌;抗体阻断实验观察Toll样受体2和4的表达与白细胞介素6和8产生间的关系.结果 将变形链球菌作用于EAhy926细胞6 h,Toll样受体2和4的mRNA表达与加入的细菌量呈一定的剂量依赖关系,以细菌与细胞作用比例为100:1时,Toll样受体2和4的mRNA表达量最高(P<0.05).变形链球菌能诱导EAhy926细胞(100:1)Toll样受体2和4的mRNA和蛋白水平表达增强,在6 h达到高峰,12 h后又逐渐下降(P<0.01).结论 变形链球菌可上调EAhy926细胞Toll样受体2和4的表达,促进炎性细胞因子白细胞介素6和8的产生;白细胞介素6和8的产生与Toll样受体2和4的表达上调密切相关.     

Toll样受体4在支气管哮喘患者气道平滑肌中的表达研究

目的 探讨支气管哮喘(简称哮喘)患者气道平滑肌上Toll样受体4(TLR4)、增殖细胞核抗原(PCNA)及B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达与气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及气道重塑的关系.方法 收集2014年1月至2015年12月,哮喘患者8例肺组织及非哮喘患者8例肺组织,分别作为实验组及对照组;测量2组气道壁厚度以对比其差异;并用免疫组织化学法检测TLR4、PCNA、Bcl-2在实验组及对照组气道平滑肌上的表达差异.结果 实验组与对照组气道壁厚度测定有显著差异[(80.91±4.99) μmvs (50.39±4.51) μm,t=12.858,P＜0.001],实验组气道平滑肌细胞上TLR4、PCNA、Bcl-2表达明显升高(137.82±7.79 vs 203.79±5.94,t=19.045,P＜0.001;119.72±7.50 vs211.87±9.43,t=21.634,P＜0.001;109.54±11.34vs204.53±9.03,t=18.533,P＜0.001).结论 哮喘患者气道平滑肌中TLR4、PCNA、Bcl-2的过表达与气道平滑肌细胞增殖增加、凋亡抑制及气道重塑有关.     

Toll样受体与支气管哮喘的相关性研究进展

支气管哮喘（哮喘）是一种发病率较高的免疫性疾病。近年来，尤其在发达国家，发病率有持续升高的趋势，有关其发病机制及治疗策略的研究越来越受到重视。哮喘的本质是由多种炎症细胞、免疫细胞参与的慢性气道炎症，其免疫学基础与Th1和Th2细胞反应失衡密切相关。Toll样受体（TLR）属于模式识别受体，是一个介导天然免疫的跨膜信号转导受体家族，近年来提出的“卫生学假说”提示了TLR与哮喘之间存在密切的关联性，并且哮喘的发病与遗传因素关系密切，而遗传因素可以决定TLR的多态性。目前有关TLR基因的多态性与哮喘相关性的研究不断出现，本文结合近年来众多相关文献，就TLR的信号转导及其多态性与哮喘关系的研究作一综述。     

Toll样受体2和Toll样受体4及其信号通路在原发性痛风性关节炎发病机制中作用的研究

目的 探讨Toll样受体(TLR)2、TLR4及其信号通路在痛风炎症反应中的作用.方法 应用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测痛风性关节炎急性组32例、痛风性关节炎非急性组20例及健康对照组(健康体检者)32名外周血单个核细胞(PBMCs)TLR2 mRNA、TLR4 mRNA水平,Western-blot检测上述3组各8例PBMCs核蛋白核因子-κB p65,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测3组血浆白细胞介素(IL)-1β含量;并将上述各指标水平与痛风患者及健康体检者血尿酸水平进行相关性分析.多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用q检验.结果 TLR4 mRNA、核因子-κB D65、血浆IL-1β及血尿酸水平在痛风性关节炎急性组[(5.0+1.2)、(7.11+0.18)、(283_+83)pg/ml、(585_+123)μmol/L]和非急性组[(2.3±O.4)、(0.63±0.06)、(134±29)pg/ml,(493±107)μmol/L]均显著高于健康对照组[(1.1± 0.6)、(0.52±0.12)、(97±17)pg/ml,(326±65)μmol/L](P均<0.01),痛风性关节炎急性组高于非急性组(P均<0.01);TLR2 mRNA在3组的表达差异无统计学意义(P>0.05).痛风患者TLR4 mRNA和IL-1B水平与血浆尿酸水平呈正相关(rs=0.876,0.779;P均<0.05),而TLR2 mRNA和IL-1β水平与血浆尿酸水平无相关性(P均>0.05).健康体检者TLR4、TLR2 mRNA与血尿酸、IL-1B水平均无相关性(P均>0.05).结论 原发性痛风性关节炎可通过胞膜型模式识别受体激活固有性免疫应答,TLR4-核因子-κB-IL-1β信号通路参与了痛风免疫及炎症反应调节,痛风患者体内尿酸盐晶体与TLR4及其信号通路激活有关.

Abstract：

objective The roles of TLRs and their signal pathway in gouty arthritis(GA)were explored.Methods TLR2 and TLR4 mRNA was measured using real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-PCR)in PBMCs,IL-1β level was detected using ELISA in plasma,and NF-κB p65 protein level in PBMCs was measured using Western blot.Level of TLR2 mRNA,ILR4 mRNA,IL-1β,NF-κB p65protein was compared among acute GA,non-acute GA and healthy controls.Correlation between TLR2mRNA,TLR4 mRNA and serum uric acid,IL-1β level in GA patients was analyzed.One-way ANOVA was used to analyze data between multiple groups and q-test was used for two-two comparison.Spearman's analysis was applied for correlation analysis.Resuits The expression of TLR4 mRNA,NF-KB p65 protein,IL-1β arid serum uric acid level in patients with acute GA [(5.0±1.2), (7.11±0.18), (283±83)pg/ml,[585±123)μmol/L] was significantly increased compared to non-acute GA[(2.3±0.4),(0.63±0.06),(134±29)pg/ml,(493±107)μmol/Lj and healthy controls(1.1±0.6),(0.52±0.12),(97±17)pg/ml,(326±65)μmol/L](P<0.01,respectively).Significant diffefence was also observed between non-acute GA patients and healthy controls(P<0.05,respectively).The level of TLRR4 mRNA was positively correlated with uric acid and IL-1β level in GA patients(rs=0.876,0.779;P<0.05,respectively).Conclusion Innate immunity are activated by membrane-type pattern recognition receptors in primary GA.TLR4-NFκB p65-IL-1β signat transduction may participate in the inflammatory mechanisms of gout.Urate crystals in patients with gout may:be involved in the activation of TLR4 and its signal pathway.     

Toll-like receptor (TLR) 2 and TLR4 deficiencies exert differential in vivo effects against Schistosoma japonicum

Little is known about the functions of Toll-like receptor 2 (TLR2) and TLR4 in innate/acquired responses to Schistosoma japonicum. Through in vivo study, the contributions of TLR2 and TLR4 to host immune responses during S. japonicum infection were investigated. Early infection experiments showed higher protein and mRNA levels of IL-12, IFN-γ and IL-4 in dermal tissues and retroauricular draining lymph nodes respectively in TLR2(-/-) mice on day four post-infection and opposite changes in TLR4(-/-) mice. In the acute infection with S. japonicum for 6 weeks, TLR2(-/-) mice manifested lower egg burden as well as the enhancement of T cell activation and upregulated expression of some cytotoxic genes, as assayed by Th1/Th2 cytokine secretion and DNA microarray analysis. Also, the opposite parasitological and immunological effects were observed in TLR4(-/-) mice. These results demonstrate that during S. japonicum infection, TLR2 and TLR4 might direct distinct adaptive immune responses since the early stage, which may lead to different infection outcomes.     

变应性鼻炎和哮喘患者血清IL-9、IL-4、IL-5变化及临床意义

目的探讨血清IL-9、IL-4、IL-5在变应性鼻炎、支气管哮喘（哮喘）、变应性鼻炎合并哮喘中的作用。方法采用双抗体夹心ELISA法检测哮喘组、过敏性鼻炎组、过敏性鼻炎合并哮喘（合并组）患者及查体健康者（对照组）的血清IL-9、IL-4、IL-5。结果与对照组比较,三组患者的血清IL-4、IL-5、IL-9均明显升高（P均〈0．01）;其中血清IL-5合并组高于哮喘组及过敏性鼻炎组（P〈0．01,〈0．05）,过敏性鼻炎组高于哮喘组（P〈0．01）;IL-4合并组高于哮喘组（P〈0．05）。结论IL-4、IL-5、IL-9参与过敏性鼻炎和哮喘的发病,三组患者均表现为Th2型细胞因子过度表达;变应性鼻炎合并哮喘的炎症程度较高,哮喘和鼻炎也有不同炎症反应。     

不同粒径氯化钠粉吸入疗法对哮喘小鼠肺组织炎症指标及血清中IL-4、IL-5水平的影响

目的探讨不同粒径氯化钠粉对哮喘小鼠IL-4、IL-5水平及肺组织炎症指标的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机分成对照组、哮喘模型组、超细氯化钠粉治疗组、大粒径氯化钠粉治疗组。采用OVA致敏和激发构建哮喘模型。对照组则利用PBS致敏、OVA激发。ELISA检测小鼠血清中IL-4、IL-5水平,肺泡灌洗液(BALF)观察白细胞计数及分类,制备肺组织石蜡切片。结果模型组BALF中白细胞总数及分类比率较对照组明显增高(P<0.05,P<0.01),超细氯化钠治疗组白细胞总数及分类比率较模型组明显降低(P<0.05);模型组IL-4、IL-5水平明显高于对照组(P<0.01),超细氯化钠粉治疗组和大粒径氯化钠治疗组IL-4、IL-5水平明显低于模型组(P<0.01,P<0.05)。结论超细氯化钠粉吸入治疗哮喘小鼠可下调其血清IL-4、IL-5水平,起到抑制气道炎症、治疗哮喘的作用。     

卡介菌多糖核酸联合特异性脱敏对支气管哮喘缓解期者气道反应性及血清IgE、IL-4的影响

目的观察卡介菌多糖核酸（BCG—PSN）联合特异性脱敏治疗（SIT）对支气管哮喘缓解期患者气道反应性的影响。方法 选择支气管哮喘缓解期患者70例，随机分为3组，分别给予BCG—PSN、SIT及BCG-PSN＋SIT（联合治疗组）治疗，并比较3组治疗后气道反应性、血清IgE及白细胞介素-4（IL-4）水平的变化。结果联合治疗组治疗2月后气道反应性改善值第1秒用力呼气量％改善值（△FEV1％）由（19．3±13．6）％增加至（23．6±18.2）％，至3月时明显增加至（32.7±18．8）％，此时血清总kE仅轻度升高[（317±363）kU／L]，IL-4水平显著降低[（7±9）ng／L]，与单用BCG—PSN和SIT组比较差异显著（P〈0.05或P〈0．01）。结论BCG—PSN与SIT联合治疗，可有效降低哮喘缓解期患者气道反应性，且减少体内炎性细胞因子释放。     

THP-1巨噬细胞热休克处理对单核细胞超化蛋白-1和白细胞介素表达的影响

目的:探讨热休克处理对THP-1巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-8(IL-8)的影响以及热休克蛋白70(HSP70)、TLR4/P38MAPK和TLR4/NF-κB在其中的作用。方法:实验前用佛波酯孵育THP-1细胞,使其诱导分化成巨噬细胞,换无血清培养基培养后加处理因素。实验分成A组:常温对照组;B组:热休克处理组。THP-1巨噬细胞在42℃水浴受热1h,37℃恢复6h;C组:热休克+抗TLR4抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-TLR42h后同B组;D组:热休克+P38MAPK抑制剂组,THP-1巨噬细胞加入P38MAPK特异性抑制剂SB20358030min后同B组;E组:热休克+NF-κB抑制剂组:THP-1巨噬细胞加入NF-κB特异性抑制剂PDTC30min后同B组;F组:热休克+抗HSP702h抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-HSP702h后同B组。用RT-PCR或westernblot或ELISA检测各组细胞HSP70、TLR4、MCP-1、IL-8mRNA或蛋白的表达。结果:热休克处理上调THP-1巨噬细胞HSP70、TLR4、MCP-1和IL-8的表达。SB203580、anti-TLR4可完全抑制热休克诱导的MCP-1和IL-8表达上调,而PDTC、anti-HSP70对上述效应起部分抑制作用。结论:THP-1细胞经热休克处理后通过HSP70、TLR4/P38MAPK、TLR4/NF-κB途径上调MCP-1和IL-8的表达。     

Therapeutic Effect of Intratracheal Administration of Murine IL-4 Receptor Antagonist on Asthmatic Airway Inflammation

Objective. It is well known that IL-4 and IL-13 play critical roles in the pathogenesis of asthma. In this study, by overexpressing murine IL-4 receptor antagonist (mIL-4RA), a competitive antagonist for both IL-4 and IL-13, we investigated the therapeutic effects of mIL-4RA on mouse asthmatic airway inflammation. Material and methods. BALB/c mice were randomly divided into four groups: healthy control mice; ovalbumin (OVA) sensitized/challenged mice; OVA sensitized/challenged mice intratracheally administered with mIL-4RA plasmid (mIL-4RA group); and OVA sensitized/challenged mice intratracheally administered with control plasmid (control plasmid group). The airway inflammation was determined by histopathological examinations. Cytokines were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Flow cytometry was used to analyze CD4 and CD8 T-lymphocyte subsets. Results. Compared to the control plasmid-treated mice, intratracheal administration of mIL-4RA expressing plasmid on the sensitization phase protected the mice from the subsequent induction of asthmatic airway inflammation. The eosinophilic infiltration in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was significantly reduced compared to that of the control (p < 0.01). Interestingly, intratracheal administration of mIL-4RA regulated the Th1/Th2 cytokine imbalance in local airway with increased IL-13 levels and decreased IFN-γ levels compared to the control plasmid group. However, although we did see the decreased level of IL-4 and IL-13 in serum, the serum level of IFN-γ is not changed in the mIL-4RA group, suggesting that mIL-4RA could not correct the imbalance of Th1/Th2 cytokines in serum. In addition, intratracheal administration of mIL-4RA had no effect on the ratio of CD4/CD8 T-lymphocyte subsets in the peripheral blood, lung, or spleen. Conclusions. This study demonstrated that intratracheal administration of mIL-4RA attenuated the asthmatic inflammation and regulated the Th1/Th2 cytokine imbalance in local airway with minimal systemic effects. This method may serve as a potential therapeutic option for treating asthma.