单克隆抗体74D11,SJA111检测慢性日本血吸虫病循环抗原的研究

本研究用双抗夹心ＥＬＩＳＡ法检测慢性日本血吸虫病人血清循环抗原，观察血吸虫感染家兔血清循环抗原的动态变化。该方法采用兔抗ＡＷＡ－ＩｇＧ作包被抗体，抗日本血吸虫成虫和血卵单抗ＳＪＡ１１１和７４Ｄ１１组合作Ⅱ抗，１７２例经粪孵毛蚴确诊的血吸虫病人中，１３６例循环抗原阳性（７９．１％），其中轻度（毛蚴数〈５只／２０克粪）、中度（－２０）、重度（大于２０）感染者循环抗原阳性率分别为７３．４％、８７．７％、     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用于检测循环抗原的研究

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株（ＳｊＡ１１１）。分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１,腹水效价１．２×１０６。将ＳｊＡ１１１ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原（ＣＡｇ）,阳性者３９０例（７８．１６％）;２５例肺吸虫病人,３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中,仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）随着每ｇ粪便虫卵数（ＥＰＧ）的增加而递增。吡喹酮治疗后各期病人粪孵阴性者ＣＡｇ的转阴率：半年为７５．５０％（１１４／５１）,１年为７３．６８％（８４／１１４）,１年半为８８．０４％（１０３／１１７）。     

识别血吸虫成虫多肽表位单克隆抗体细胞株的建立及用…

作者获得１株特异的抗血吸虫成虫２０－２４ｋＤａ蛋白多肽表位的杂交瘤细胞株，分泌ＭｃＡｂ为ＩｇＧ１，腹水效价１．２×１０＾６。将ＳｊＡ１１１ ＭｃＡｂ－ＨＲＰ结合物用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测４９９例慢性血吸虫病患者的循环抗原，阳性者３９０例（７８．１６％）；２５例肺吸虫病人，３６例华支睾吸虫病人及１３２例正常人血清中，仅１例肺吸虫病人出现交叉反应。ＣＡｇ的检出率和阳性血清滴度倒数的几何均值（ＧＭＲＴ）     

抗rSjCTPI单克隆抗体检测血吸虫循环抗原的研究

为探讨抗重组血吸虫磷酸丙糖异构酶（ｒＳｊＣＴＰＩ）的单克隆抗体检测血吸虫循环酶抗原在血吸虫病免疫诊断和疗效考核中的价值。制备日本血吸虫ｒＳｊＣＴＰＩ表达蛋白,以此重组蛋白免疫小鼠,筛选出高效价的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗,建立以纯化的抗血吸虫可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的多克隆抗体（ＩｇＧ）为捕捉系统,以酶标的抗ｒＳｊＣＴＰＩ单抗为检测系统的酶联免疫吸附试验（Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ）法检测血吸虫病人等血清。并对该法的敏感性、特异性、交叉反应以及疗效考核与常规的ＳＥＡ－ＥＬＩＳＡ比较。结果获得了一株抗ｒＳｊＣＴＰＩ的单克隆抗体,其抗体同型为ＩｇＧ１。Ｐ－Ｍ－ＥＬＩＳＡ检浊急性、慢性血吸虫病人、健康人以及华枝睾吸虫病人、肺吸虫病人血清的阳性率分别为１００％、９１．７％、０、０和０。而ＳＥＡ－ＥＬＴＳＡ为１００％、９８．３％、６．     

单克隆抗体早期鉴别阳性钉螺效果的研究

以多只毛蚴感染多只钉螺后，逐周取样３０只，以抗血吸虫卵的ＭＧ２ＭｃＡｂ，应用ＥＬＩＳＡ检测螺体内血吸虫抗原，并同时以镜检为对照。结果表明，感染３周阳性钉螺体内血吸虫抗原的阳性检出率为７０％，以后逐周提高，５周为９０％，８周为９６．６７％。提示该法似有早期鉴别阳性钉螺的效能。在ＥＬＩＳＡ检测不同数量毛蚴感染钉螺体内血吸虫抗原阳性率的比较中，感染后期（８周），多只毛蚴感染组螺体内抗原阳性检出率为９６．６７％；单只毛蚴感染组为１００％，两组基本相似。结果表明，不论单只毛蚴或多只毛蚴感染钉螺，在感染后期，用ＥＬＩＳＡ检测螺体内血吸虫抗原的阳性率无差异。     

谷胱甘肽—S—转移酶多克隆抗体免疫金测定法检测日本血？…

目的 探讨谷胱甘肽－Ｓ－转移酶（ｒＳｊ２６ＧＳＴ）多克隆抗体诊断日本血吸虫病的应用价值。方法 以抗ｒＳｊ２６ＧＳＴ多克隆抗体为捕获并检测抗体，并建立双抗体夹心斑点免疫检测技术，用于检测日本血吸虫循环抗原，并以斑点免疫金测定法和ＥＬＩＳＡ检测抗体作对照。结果 ３种方法检测急性血吸虫病的敏感性均为１００％，对慢性血吸虫病的敏感性分别为７６．４％、９８．１％和９６．２％。特异性分别为９５．０％、９８．０     

单克隆抗体早期鉴别阳性钉螺效果的研究

以多只毛蚴感染多只钉螺后，逐周取样３０只，以抗血吸虫卵的ＭＧ２ＭｃＡｂ，应用ＥＬＩＳＡ检测螺体内血中吸虫抗原，并同时以镜检为对照。结果表明，感染３周阳性钉螺２体内血吸虫抗原的的阳性检出率为７０％，以后逐周提高，５周为９０％，８周为９６．６７％。提示该法拟有早期鉴别阳性钉螺的效能。在ＥＬＩＳＡ检测不同数量毛蚴感染钉螺体内血吸虫抗遥阳性率的比较中，感染后期，多只毛蚴感染组螺体内抗原阳性检出率为９６．６     

武汉地区医院病人弓形虫感染情况调查

应用酶联免疫吸附试验，对武汉地区７５１例医院病人进行了弓形虫特异性抗体ＩｇＧ、ＩｇＭ和循环抗原ＣＡｇ的检测，共检出阳性２２９例，总阳性率为３０．４９％．其中ＩｇＧ、ＩｇＭ和ＣＡｇ的单项阳性率分别为１３．５８％，７．３２％和３．２０％；三项中两项阳性的阳性率分别为３．５６％（ＩｇＧ，ＩｇＭ），０．８０％（ＩｇＭ，ＣＡｇ），１．４６％（ＩｇＧ，ＣＡｇ）；三项均阳性５例，阳性率为０．６７％。结果表明：医院病人中弓形虫感染较普遍，感染率在各病种之间有明显差异，但与病人的年龄、性别、职业及有无猫、狗类动物接触史无明显关系。     

武汉地区医院病人弓形虫感染情况调查

应用酶联免疫吸附试验，对武汉地区７５１例医院病人进行了弓形虫特异抗体ＩｇＧ，ＩｇＭ和循环抗原ＣＡｇ的检测，共检出阳性２２９例，总阳性率为３０．４９％，其中ＩｇＧ，ＩｇＭ和ＣＡｇ的单项阳性率分别为１３．５８％，７．３２％和３．２０％，三项中两项了性的阳性率分别为３．５６％（ＩｇＧ，ＩｇＭ）０．８０％（ＩｇＭ，ＣＡｇ）１．４６％（ＩｇＧ，ＣＡｇ），三项均阳性５例，阳性率为０．６７％，结果表明，医院病人     

Dot－ELISA检测抗原与IHA、COPT检测抗体诊断血吸虫病的比较

本文比较了斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ）检测循环抗原，间接血凝试验（ＩＨＡ）、环卵沉淀试验（ＣＯＰＴ）检测抗体诊断血吸虫病的效果。１２例急性血吸虫病患者血清３种方法检测均为阳性；２７７例慢性血吸虫病患者血清３种方法检测阳性率分别为７９．４２％、６４．６２％和６３．１８％。１４例华支睾吸虫病患者血清和８９例健康人血清Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测均为阴性。１０例急性血吸虫病患者，在离开流行区经吡喹酮治疗后３７周时粪检全部转阴，检测血清循环抗原４例转阴，其余６例滴度大幅度下降；ＩＨＡ检测３例转阴，其余７例几何平均倒数滴度（ＧＭＲＴ）由４７．５７降至９．３５；ＣＯＰＴ检测平均环沉率由２１．５％降至４．１２％。结果表明Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测血吸虫循环抗原具有较好的敏感性和特异性。这３种方法在血吸虫病诊断及疗效考核中均有一定价值。     

日本血吸虫感染动物血清中循环抗体（CAb）及循环抗原（CAg）水平的动态研究

应用膜片固相抗原免疫酶测定法（Ｄ－ＩＥＡ）和ＥＬＩＳＡ检测日本血吸虫感染家兔血清中ＣＡｂ和ＣＡｇ水平时,高峰分别在感染后１０～１２周和１０周,ＣＡｂ和ＣＡｇ水平均与感染度和感染期密切相关。实验结果表明,感染宿主血清中ＣＡｂ／ＣＡｇ水平的消长规律并不一致,宿主在感染中期（感染后１０～２０周）显示ＣＡｂ检测为优势,在感染早期（感染后１０周内）则以ＣＡｇ检测为优势。本项研究可为选用适宜的ＣＡｂ／ＣＡｇ检测途径,提供依据。应用改进方法Ｄ－ＩＥＡ检测血吸虫感染者血清中特异性抗体时,可取得满意效果。     

日本血吸虫感染动物血清中CAb CAg及CIC水平的动态

本文对感染10条与50条单、双性血吸虫的4组家兔,在感染后2—18wk,连续检测了血吸虫CAb、CAg及CIC水平,并与正常对照兔进行了对比.结果表明,CAg在感染早期显示高水平,CAb在感染中期呈现明显高峰,而CIC在感染后期也有较高水平.阐明了血吸虫感染宿主血清中CAb、CAg和CIC水平的消长规律,也提示了感染宿主CAb、CAg及CIC水平与感染度和单、双性感染有关.     

快速检测血吸虫循环抗原EIA-kit的应用研究

应用快速检测血吸虫C_(Ag)的EIA-kit检测各期血吸虫病人血清,对急性血吸虫病的阳性率为100.0%(45/45);对慢性血吸虫病的阳性率为94.8%(530/559);但对晚期病人的检出率仅52.4%(66/126).该试剂盒与Kato-Katz法、粪孵法平行检测112例血吸虫病人,Kato-Katz法1次仅能查出54.5%(61/112);孵化法1次查出75.9%(85/112);EIA-kitl次即能查出96.4%(108/112).与常用查抗体的方法平行检测109例血吸虫病人血清,C_(Ag)阳性率为92.9%、IHA为96.9%、COPT为83.7%、ELISA为98.5%.对血吸虫病人治疗效果考核表明,治后3月C_(Ag)转阴率为79.7%、6月为86.1%、1年为91.3%.经实验室和现场应用表明该试剂盒检测C_(Ag)有较高的敏感性和特异性.     

日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制研究

探讨日本血吸虫感染中循环抗原动态变化及其机制。感染日本血吸虫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠淋巴结Ｂ细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合，制备抗血吸虫循环抗原不同表位的单克隆抗体组合后为探讨针，检测日本血吸虫病患者和健康人血清；晚期血吸虫病患者脾血和外周血；感染日本血吸虫兔和小鼠的门脉血和外周血。     

双抗体夹心-ELISA用于旋毛虫活动性感染的诊断及疗效考核

目的检测宿主血清中旋毛虫循环抗原 ( CAg)以诊断本病和考核药物疗效。方法双抗体夹心 -ELISA法。结果 94只实验感染旋毛虫小鼠 ,受染 3d后 ,即有 7%的小鼠显示阳性反应 ,受染 30 d,无论受染幼虫数目多寡 ( 50、1 50及 30 0条幼虫 /只 ) ,全部受染鼠 ( 1 0 0 % )均显示阳性反应。给予丙硫咪唑治疗后的第 1周 ,CAg的阳性率仍为 1 0 0 % ,但在治疗后第 2、3及 4周 ,则分别降为 60 %、2 0 %及 1 0 %。检测 61头感染旋毛虫猪血清中 CAg,4 0头 ( 65.6%± 6.1 % )呈阳性反应。 1 0 0头正常猪均为阴性 ,30头感染囊尾蚴和 30头感染弓形虫的猪 ,仅 1头感染弓形虫的猪出现轻度交叉反应。检测 36例旋毛虫病人血清中 CAg,2 6例 ( 72 .2 % )呈阳性反应。 50例正常人皆为阴性。 1 4 2例其他 9种寄生虫病人 ,仅 1例囊尾蚴病人出现轻度交叉反应。结论旋毛虫 CAg的检测具有早期诊断和考核药物疗效的价值。     

免疫酶染色试验诊断日本血吸虫病价值的研究

应用感染30条血吸虫尾蚴后7wk的鼠肝组织内虫卵冰冻切片抗原作免疫酶染色试验,采取单盲法检测606例经粪检确诊的日本血吸虫病人和310名健康人,阳性率和假阳性率分别为89.9％和4.2％;检测239例已治疗过的日本血吸虫病人,阳性率为24.7％,转阴率为75.3％;检测10例肺吸虫病人及60例华支睾吸虫病人,交叉反应率为0～6.7％。对不同感染期及不同感染度的血吸虫病兔血清中特异性抗体的动态检测,能显示抗体的消长,免疫酶染色的反应性和反应强度与感染期和感染度密切相关。本文进一步证明该法具有较高的诊断效果,并有疗效考核的价值。     

组合单克隆抗体多表位检测日本血吸虫循环抗原的研究

目的探讨抗肠相关抗原单克隆抗体（单抗）JPG5和抗虫卵可溶性抗原单抗JPS6、JPG5＋JPG1组合和JPS6＋JPG1组合对血吸虫循环抗原（CAg）的诊断效能。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）对慢性血吸虫病、急性血吸虫病、晚期血吸虫病、卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病、乙型肝炎患者血清,以及治疗前、治疗后半年、治疗后1年的慢性血吸虫病疗效考核血清进行CAg单位点和多位点检测。结果JPG5检测慢性血吸虫病患者的敏感性和特异性分别为74.3%和96.8%,JPS6分别为78.7%和95.3%;两株单抗与卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病及乙型肝炎患者血清的交叉反应率分别为15.2%、15.6%、3.2%和21.5%、15.6%、16.0%。JPG5检测治疗后1年的慢性血吸虫病患者血清CAg阴转率高于JPS6。JPG5＋JPG1组合检测慢性血吸虫病患者的敏感性和特异性分别为80.1%和93.7%,JPS6＋JPG1组合分别为73.5%和96.1%;两种组合与卫氏并殖吸虫病、华支睾吸虫病及乙型肝炎患者血清交叉反应率分别为21.5%、15.6%、18.0%和22.8%、15.6%、16.0%。两种组合多位点检测治疗后1年的慢性血吸虫病患者血清CAg阴转率分别为66．7％和45．5％。结论JPG5、JPS6可用作CAg检测的备选探针。JPG5＋JPG1组合与JPS6＋JPG1组合对CAg的诊断效能相近;较之单位点检测,多位点检测敏感性无明显提高。     

双抗体夹心ELISA检测循环抗原在血吸虫病控制流行地区应用的研究

对血吸虫病已控制流行地区1099名10岁以上的人群,应用抗血吸虫成虫抗原多克隆抗体(PcAb)为捕捉抗体,抗血吸虫虫卵抗原单克隆抗体(McAb)MG_2-HRP为覆盖抗体的双抗体夹心ELISA,检测血吸虫循环抗原(CAg),并以ELISA检测抗体(CAb)作平行对照.结果CAg和CAb的阳性检出率分别为4.55%和4.64%,两者的差异无显著意义(P>0.05).在50例CAg阳性者中,无血吸虫病治疗史者31例,而51例CAb阳性者中,无血吸虫病治疗史者仅6例.CAg和CAb联合检测能提高检出率.     

杂交瘤细胞凝集试验诊断血吸虫病的实验研究

目的用杂交瘤细胞凝集试验(hybridomacellsagglutinationtest,HCAT)诊断实验日本血吸虫病,并探讨杂交瘤细胞在特异性血清中凝集的机制。方法分泌抗血吸虫31/32kDa抗原单抗的杂交瘤细胞H226经特定处理后分别与感染日本血吸虫尾蚴10、30和50条的小鼠血清孵育,动态观察感染后不同时间的凝集反应。上述杂交瘤细胞涂片后与日本血吸虫感染兔血清进行间接免疫荧光试验(IFT),以探讨凝集机制。结果杂交瘤细胞在感染鼠血清中呈现凝集反应:感染后2wk时,50条尾蚴感染组中70％HCAT阳性,至第5周,全部感染小鼠均出现阳性反应。抗原滴度在感染后逐步升高,感染后6wk时达到最高。重度感染鼠的抗原滴度明显高于中、轻度感染鼠。IFT显示,在杂交瘤细胞膜表面呈现特异性的黄绿色荧光,而细胞内未见显色。结论HCAT是一种血吸虫病诊断新方法。