犬腺垂体远侧部P物质样免疫反应神经纤维的超微结构研究

本室曾在光镜水平上显示,犬腺垂体远侧部P物质样免疫反应多膨体神经纤维与腺细胞关系极为密切。本实验应用包埋前免疫组织化学电镜法,进一步研究了这种神经纤维的超微结构,及其与腺细胞的关系。本文发现P物质样免疫反应多膨体神经纤维与各种腺细胞以及滤泡星形细胞发生直接接触,与促生长激素细胞和促肾上腺皮质激素细胞有典型的突触结构,其中与后者构成的突触较多。大多数突触为不对称型,含有圆形或椭圆形清亮小泡和大致密芯泡。本实验结果表明,犬腺垂体远侧部P物质样免疫反应神经纤维对腺细胞活动有直接调节作用。     

小鼠拟经络线皮肤内神经—肥大细胞联接的发现——光镜与电镜免疫组织化学研究

本研究在小鼠的拟足阳明经络线皮肤内发现了神经—肥大细胞联接,联接特化地建立在神经终末与肥大细胞之间,而不是神经纤维在行程中与肥大细胞的单纯并靠。形成联接的神经终末与肥大细胞都呈P物质(SP)免疫反应。参与联接的肥大细胞为小型细胞;参加联接的神经终末内含有数量不等的SP免疫反应囊泡、线粒体、神经细丝等成分。推测参加联接的神经终末系初级感觉神经元的周围突。本研究试用光镜与电镜相结合的双PAP法得到初步成功。     

孤束核中含生长抑素的神经细胞和神经纤维——免疫电镜研究

本文报道用免疫电镜方法研究大白鼠延髓孤束核联合亚核内含生长抑素(SRIF)的神经细胞及神经末梢。实验结果表明,孤束核内的SRIF样免疫反应阳性胞体为中小型细胞,呈梭形或椭圆形。含SRIF样免疫反应的轴突主要构成轴轴突触,后者为通道突触或终末突触。含SRIF的孤束核神经细胞本身不接受含SRIF的神经纤维支配,但其树突可与未标记的轴突形成轴树突触。     

大鼠纹状体边缘区P物质样免疫反应神经终末的超微结构研究

边缘区是用免疫组织化学与束路追踪相结合的方法,在大白鼠纹状体发现的一个新区,其间的P物质、脑啡肽等免疫反应神经终末的数量,比纹状体的其他部分多。本文用包埋前免疫电镜方法,研究了该区的P物质免疫反应神经终末的突触特点。发现4种主要的突触类型,最常见的是轴-树和轴-棘突触,几种由两个以上突触组成的复合型突触群也较常见,偶尔可见轴-轴突触。同时也观察到未标记的轴突终末与P物质样免疫反应树突形成突触。P物质样免疫反应轴突终未形成对称型和非对称型突触。非对称型突触、突触后小型树突以及突触构成的复杂性,证明该区的P物质样免疫反应神经终末的来源可能与纹状体其他部位不同,并且提示该区的功能与纹状体其他部分可能不同。     

大鼠脑血管的肽能神经支配——光镜与免疫电镜研究

本实验应用免疫细胞化学和免疫电镜方法研究了大鼠脑血管壁的血管活性肠多肽(VIP)能神经支配。实验结果表明:VIP样免疫反应神经纤维位于血管壁外膜或外、中膜交界处。在神经末梢之间和神经末梢与平滑肌细胞之间未见突触结构。VIP末梢直接紧贴平滑肌细胞,两者间最小距离为100nm。上述结果表明:脑血管除传统的肾上腺素能和胆碱能神经支配外,还接受肽能神经支配。VIP神经对脑血管的调节作用可能借非突触释放直接作用于平滑肌而实现。此外,本文还证实了P物质(SP)在脑血管的分布及讨论了SP对脑血管的调节功能。     

大鼠下丘脑前部室周区内生长抑素样神经元与神经肽Y样传入纤维的关系

应用包埋前免疫电镜PAP双重反应技术对大鼠下丘脑前部室周区内的生长抑素和神经肽Y的分布进行了超微结构研究。先用DAB法显示神经肽Y反应，然后用钼酸-TMB法显示生长抑素免疫反应，再经DAB-氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。光镜观察结果显示在下丘脑室周区内见到生长抑素样神经元和神经肽Y样神经纤维末梢。电镜观察结果显示，生长抑素的钻酸-TMB免疫反应产物呈针状或块状位于胞质内；神经肽Y样神经纤维末梢内见到颗粒状或絮状DAB免疫反应产物分布于小清亮囊泡周围和线粒体膜上。神经肽Y样神经纤维末梢与生长抑素样神经元胞体形成轴-体突触。此外神经肽Y样神经末梢内大颗粒囊泡与突触前膜融合而形成胞吐像。由此可见神经肽Y样神经纤维末梢经过突触或非实触方式作用于下丘脑前部室周区内生长抑素样神经元而调节其分泌活动。     

大鼠神经垂体内后叶加压素神经分泌末梢的GABA能神经支配的免疫电镜证实

为了探讨神经垂体内后叶加压素（ＶＰ）释放的γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）能神经调控，本研究用包埋前ＡＢＣ法结合免疫电镜双标技术，研究了大鼠神经垂体内ＶＰ能神经和ＧＡＢＡ能神经的超微结构分布及其相互联系。先用ＤＡＢ法显示ＧＡＢＡ免疫反应，然后用钼酸铵－ＴＭＢ法显示ＶＰ免疫反应，再用ＤＡＢ－氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。电镜观察发现：在神经垂体内ＧＡＢＡ样免疫反应产物呈电子密度高的颗粒状沉淀，定位于神经末梢内的小清亮羹泡周围和线粒体膜上；ＶＰ样免疫反应产物呈电子密度高的不规则形块状或针状散在于神经分泌末梢内。ＧＡＢＡ样神经末梢分布于神经分泌末梢之间或紧贴毛细血管和垂体细胞，可与神经分泌末梢紧密接触甚至形成突触。ＶＰ样神经分泌末梢内含小透亮囊泡和大颗粒囊泡，并可与ＧＡＢＡ样轴突末梢形成突触。在这种情况下，ＧＡＢＡ样轴突为突触前成分，突触前、后膜呈对称性，突触间隙宽度小于２０ｎｍ，内含电子致密物质。以上结果证实，在大鼠神经垂体内ＶＰ释放受到ＧＡＢＡ神经的直接突触调控。     

大鼠弓状核内神经紧张素能和P物质能阳性结构的免疫电镜双标记研究

用包埋前免疫电镜双标记技术研究大鼠下丘脑内的神经紧张素(NT)和P物质(SP)分布的超微结构。证实在弓状核内存在NT样和SP样免疫反应阳性的胞体、树突和轴突。NT样和SP样免疫反应阳性的树突和轴突均可接受免疫反应阴性结构的非对称性传入突触。SP样免疫反应阳性轴突终末除可与免疫反应阴性的树突和胞体形成对称性传出突触外, 还可与NT样免疫反应阳性胞体形成对称性轴-体突触。本研究首次直接证实大鼠弓状核内的NT能神经元接受SP能神经的支配。     

狗腺垂体远侧部降钙素基因相关肽免疫反应神经纤维的超微结构研究

本实验应用包埋前免疫电镜法,研究了狗腺垂体远侧部降钙素基因相关肽(CGRP)免疫反应神经纤维的超微结构,及其与腺细胞的关系。发现CGRP免疫反应神经纤维与促肾上腺皮质激素细胞和促生长激素细胞构成典型的突触结构,其中与前者之间的突触较多。大多数突触为非对称型,神经终末内含有清亮小泡和大致密芯泡。还观察到许多未被免疫染色的神经终末,它们与促肾上腺皮质激素细胞、促生长激素细胞、催乳激素细胞和促甲状腺激素细胞形成突触。我们还应用包埋后免疫双标记法,发现在狗腺垂体远侧部神经纤维中,P物质样免疫反应物质与CGRP免疫反应物质共存,但它们分布于不同大致密芯泡内。     

大白鼠脊髓前角内含片氨基丁酸神经元的化学神经解剖学研究

用HRP与免疫细胞化学结合法和免疫电镜方法观察了大白鼠脊髓L_(4～5)节段内前角含γ-氨基丁酸(GABA)神经元的分布及其与躯体传出的关系。光镜下,在脊髓前角各层,包括位于前角的前外侧部的Rexed IX层,均有GABA免疫反应阳性神经元胞体和末梢分布。GABA阳性胞体为圆形或三角形,具有多个突起,可分大、中两型。电镜下,GABA样免疫反应产物呈细小颗粒状沉淀,分布于核周质、树突和轴突内。在轴突末梢,免疫反应产物定位于小透亮囊泡和线粒体外膜周围。GABA阳性树突接受GABA阳性或阴性轴突的传入性突触。HRP与免疫细胞化学结合法显示:在Rexed IX层存在HRP单标细胞、GABA单标细胞和HRP/GABA双标细胞。双标细胞占HRP标记细胞总数的79%。以上结果证明:在Rexed IX层的前角神经细胞内含有GABA,这些神经元参与躯体传出,并在突触水平接受来自GABA神经元的自身调节。     

人皮肤内神经-肥大细胞联接在经络线上的发现 Ⅱ“传入性”神经-肥大细胞联接和伴同传出性轴突的薛旺细胞

本研究取材于人的皮肤,电镜常规方法处理。发现人皮肤内有两种类型的神经肥大细胞联接。提示可能分别为传出性和传入性的,或暂称为A型和B型联接,分别报告于上篇和本篇中。 B型联接的构造特点是,脱开薛旺鞘样长带包被的轴突来到肥大细胞近旁,突进细胞体中。轴突终末的一部分被胞质唇封盖起来,终末周围的轴膜与细胞质膜形成联接的双层膜。无肥大细胞表面皱褶参与其形成,无线粒体和显明的囊泡存在终末之内,无薛旺细胞包被轴突终末。薛旺细胞伴同A型联接出现,可与肥大细胞紧密接触。胞质内有狭缝系统和粗面内质网片断,能拖出长尾,估计将过渡为鞘膜。薛旺细胞不是间织细胞,这里的间织细胞应是成纤维细胞。     

电针对大鼠三叉神经尾侧脊束核内P物质影响的免疫及超微免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学及免疫电镜方法研究了电针对大鼠三叉神经尾侧脊束核内ＳＰ的影响以及含ＳＰ的轴突终末的突触联系。结果表明,电针大鼠“人中”、“承浆”穴后痛阈明显提高（Ｐ＜０．０１）,三叉神经尾侧脊束核内ＳＰ免疫反应活性也较对照组明显增加（Ｐ＜０．０１）。三叉神经尾侧脊束核内含ＳＰ轴突终末内含有密集的清亮透明小泡、少量大颗粒小泡及线粒体,轴突终末内的ＳＰ免疫反应产物分布于大颗粒小泡内和清亮小泡壁上。含ＳＰ的轴突终末主要与三叉神经尾侧脊束核内神经元的树突形成轴－树突触;极少数ＳＰ阴性轴突终末与ＳＰ阳性轴突形成轴－轴突触或接触。电针可能通过轴－轴突触的突触前抑制方式,抑制了三叉神经初级传入细纤维ＳＰ的释放,从而参与针刺镇痛过程。     

人皮肤内神经—肥大细胞联接在经络线上的发现——Ⅰ.传出性神经—肥大细胞联接

在人皮肤内阳明经络线上发现了神经—肥大细胞联接。目前尚不能确定此联接一定只出现在经络线上而不出现在经络线之外。联接特化地建立在轴突终末和肥大细胞之间,而不是轴突在其行程中与肥大细胞单纯地紧密相接。参加联接的轴突终未有薛旺细胞相伴与包被,终末内有囊泡、线粒体、神经丝、复合小泡等。肥大细胞表面皱褶可参与联接的形成。这种联接可能与轴突反射时感觉神经纤维的传出性分枝有联系,建议暂称为传出性神经-肥大细胞联接。与肥大细胞形成联接的轴突终未似属C类纤维。     

大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区5-羟色胺样、P物质样和亮氨酸-脑啡肽样免疫反应阳性亚微结构的电镜观察

本文用免疫电镜技术研究了大鼠中脑导水管周围灰质腹外侧区内5-HT样、SP样和L-ENK样的免疫反应阳性亚微结构。5-HT样免疫反应阳性的胞体较多,常见5-HT样阳性树突与阴性轴突终末形成多为非对称性的轴-树突触;偶见阳性轴突终末与阴性树突以及阴性轴突终末与阳性胞体分别构成轴-树和轴-体突触.SP样阳性胞体数目较少,可见少量含多形性小泡的阴性轴突终末与之形成轴-体突触;由阴性轴突终末与阳性树突所形成的轴-树突触最常见;阳性轴突终末与阴性胞体和阳性树突分别构成轴-体突触和轴-树突触。L-ENK样阳性胞体数目也较少,L-ENK样阳性树突与阴性轴突终末所形成的轴-树突触最多见,可见L-ENK样阳性胞体与阴性轴突终末构成轴-体突触;偶见阳性轴突终末与阴性树突形成轴-树突触。上述各种突触均主要含圆形小泡,有时有少量扁平小泡、椭圆形小泡和颗粒囊泡。     

Cholecystokinin-like immunoreactivity in the dorsal horn of the spinal cord of the rat: a light and electron microscopic study

Cholecystokinin-like immunoreactivity was investigated with an indirect immunoperoxidase technique in the whole spinal cord with the light microscope and in the dorsal horn with the electron microscope. Intraparenchymal injections of colchicine were performed to allow the detection of cholecystokinin-like immunoreactive cell bodies. Rats treated at birth with capsaicin were also studied at the light microscope. Numerous cholecystokinin-like immunoreactive fibres and varicosities were found in the two superficial layers of the dorsal horn and in the intermedio-medial nucleus; cholecystokinin-like immunoreactive cell bodies were also present in these two regions. After neonatal capsaicin treatment, the number of cholecystokinin-like immunoreactive fibres and varicosities was strongly reduced in the dorsal horn. At the electron microscope level, cholecystokinin-like immunoreactivity was localized in numerous neurites often filled with vesicles (axon terminals and dendrites containing vesicles) and in few cell bodies and dendrites. The immunoreaction was found mainly associated with ribosomes, granular reticulum, neurotubules and vesicles. Large granular vesicles were filled with the reaction product whereas small and medium-sized vesicles showed a varying degree of immunoprecipitate around their membrane. In addition dense "granules" of precipitate were observed in numerous presynaptic neurites. Cholecystokinin-like immunoreactive axons were of small calibre and mostly unmyelinated. Cholecystokinin-like immunoreactive axon terminals made asymmetric synaptic contacts with generally unlabelled dendrites or dendritic spines. A single labelled nerve terminal could contact several different dendrites in structures resembling glomeruli. Few axo-somatic synapses but a relatively high number of axo-axonic contacts were seen. About half of these axo-axonic contacts involved pre- and postsynaptic profiles. Both light and electron microscopic observations led us to the conclusion that some of the cholecystokinin-like immunoreactive fibres of the dorsal horn originate in the spinal ganglia via capsaicin-sensitive C afferents; and some from intrinsic neurons, particularly islet cells. Other fibres may come from supraspinal centres, other local neurons or capsaicin-insensitive afferents from the spinal ganglia. The results are discussed with regard to data in the literature, particularly those concerned with the specificity of the cholecystokinin antibodies; it is hypothesized that several types of cholecystokinin-like immunoreactive peptides may be present in the dorsal horn, depending on their origin (supraspinal, intrinsic or peripheral).(ABSTRACT TRUNCATED AT 400 WORDS)     

大鼠脊髓胶状质内含P物质(SP)及脑啡肽(ENK)神经终末的超微结构

水文应用超微免疫组织化学技术探讨正常及切断后根大鼠胶状质(SG)内P物质(SP)及脑啡肽(ENK)轴突终末的分布及其突触联系。电镜观察发现:SP或ENK免疫反应产物主要分布于轴突终末的大颗粒囊泡的内面,小清亮囊泡及线粒体的外表面,在未应用秋水仙素的情况下,ENK样免疫反应性也可出现于树突及核周质,但电子密度较低。大量的含SP或ENK的终末,分别和未标记树突形成突触。但也偶然见到肽能神经终末与未标记轴突或胞体接触或形成突触联系。常遇到三或四联体,亦偶可见到以含SP轴突终来为中心的突触球。切断后根,手术侧既可见到变性轴突(SP阳性)与未标记轴突接触,又可见到ENK阳性轴突终末与溃变轴突接触,但为数不多。因此认为:通过SP阳性一级传入细纤维传递的感觉信息既可汇集于神经元的一个树突又可多向传递于若干个神经元。ENK在胶状质的抑制作用主要为突触后,但ENK对含SP的一级传入纤维的突触前抑制也不能排除。     

家兔下橄榄背侧副核的超微结构特点——电镜研究

本实验对7只家兔的下橄揽背侧副核进行了电镜观察。除发现已报道过的轴树突触、轴体突触及以树突为中心的突触球外,还见此核内有轴轴突触、轴突与胞体棘形成的突触,以轴突为中心的突触球及核内微纤维束。轴树突触最常见,突触后成分为树突或棘。轴体突触较少见。有一轴突终末与一胞体棘形成突触,同时还与一树突形成突触。轴轴突触前、后成分中均含圆形囊泡,有时形成轴-轴-树突触串。家兔下橄榄背侧副核内见有两种突触球,一种以树突为中心,另一种以轴突为中心。还发现两个轴突终末同时与另一轴突终末形成轴→轴→轴突触。下橄榄背侧副核内的复杂突触形式,说明传入冲动在其中可能经过扩散、会聚、突触前抑制及整合等复杂的过程。     

Suprachiasmatic nucleus neurons immunoreactive for vasoactive intestinal polypeptide have synaptic contacts with axons immunoreactive for neuropeptide Y: an immunoelectron microscopic study in the rat

An electron microscopic study showed by using a dual immunolabeling technique that in the suprachiasmatic nucleus of the rat, axon terminals immunoreactive for neuropeptide Y (NPY) made synaptic contacts upon neurons immunoreactive for vasoactive intestinal polypeptide (VIP). Diaminobenzidine (DAB)-labeled NPY axon terminals made synaptic contacts on silver-gold-labeled VIP perikarya and dendritic processes. The presynaptic NPY terminals contained many small clear vesicles and a few cored vesicles labeled with DAB chromogen. At the synaptic portion, a symmetrical thickening of the pre- and post-synaptic membranes was evident.