脂血标本对HBV DNA定量检测结果的影响

目的:研究脂血对HBV DNA定量检测结果的影响。方法:建立不同浓度的脂血标本,运用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各种脂血标本HBV DNA数量,进行方差分析。结果:不同浓度脂血标本HBV DNA无显著性差异,F=1.294,P=0.333。结论:脂血对HBV DNA没有影响。说明HBV DNA不需禁食,随时可以检测。     

乙型肝炎大三阳患者体液中HBV—DNA含量的测定

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）经体液传播的相关临床检验学依据。方法通过EHSA方法筛选出230例乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝e抗原（HBeAg）、核心抗体（HBcAb）同时阳性即大三阳患者,并采用荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）定量检测乙型肝炎患者的血液、唾液、乳汁以及尿液中HBV—DNA的含量结果230例大三阳患者中120例同时测其血清和尿液中HBV—DNA含量,阳性率都为100％;80例同时测其血清和唾液中HBV—DNA含量,阳性率都为100％;30例同时测其血清和母初乳中HBV—DNA含量,阳性率都为100％结论在实验中我们发现,患者唾液、尿液及母初乳中的HBV—DNA含量高低同血液中HBV—DNA的含量成一定的线性关系,为乙型肝炎是通过唾液、乳汁及尿液进行传播的理论提供了临床检验学依据。     

聚餐频率与HBV感染关系的研究

目的:了解HBV的传播与感染途径,为预防乙型肝炎提供依据。方法:不同频率聚餐人群为研究对象,采集血液和唾液为标本,用ELISA法检测血液HBV-M、PCR法检测唾液HBVDNA。结果:各组间HBV-M和HBV DNA阳性结果的差别具有统计学意义(P<0.001),阳性率与聚餐频率呈正相相关。结论:唾液中存在HBV,HBV能够通过唾液途径而传播。     

标本因素对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响

目的: 探讨标本溶血、黄疸、脂血对荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的影响。方法: 荧光定量PCR检测无溶血、无黄疸、非脂血血清和溶血、黄疸、高脂血清标本的HBV DNA。结果: 溶血、黄疸、高脂血血清与无溶血、无黄疸、非脂血血清HBV DNA定量检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论: 标本溶血、黄疸、脂血对荧光定量PCR检测HBV DNA无干扰。     

乙肝病毒感染产妇乳汁及唾液HBV-DN1检测分析

目的探讨乙肝病毒感染或携带产妇乳汁、唾液的传染性,为母婴密切接触提供科学依据。方法选取50例乙肝大三阳患者,70例乙肝小三阳患者,对其血清、乳汁、唾液分别进行HBV—DNA检测,另选30例健康产妇作为对照,对其结果进行分析。结果乙肝大三阳患者与乙肝小三阳患者的血清、乳汁、唾液HBV—DNA的阳性率之间均有显著差异（χ2=59,64,69．31,70：13;P均〈O．01）;乙肝大三阳患者血清与乳汁、唾液的HBV—DNA阳性率均无统计学差异（χ2=3．40,1．60;P均〉0．05）;乙肝小三阳患者血清与乳汁、唾液的HBV—DNA．阳性率均有统计学差异（χ2=6．80,4．46;P〈0．05）;乙肝大三阳患者与乙肝小三阳患者两组产妇乳汁和唾液HBV-DNA：阳性率之间无显著差异（χ2=0．38,0．28;P均〉0．05）;产妇乳汁、唾液中HBV—DNA阳性率与血清中HBV—DNA载量呈显著正相关（r=0．961,0．938;P〈0．01）。结论乙肝产妇的乳汁、唾液是否具有传染性与血清中病毒载量有关;乳汁、唾液的HBV—DNA检测从一定程度上可代替血清检测,优点为取材方便,产妇无痛苦易接受,更有安全感。     

慢性HBV感染儿童血清和外周血单个核细胞中HBV DNA的流行病学意义

采用生物素标记HBV DNA探针检测256例慢性HBV感染儿童血清HBV DNA,其中39例尚检测了外周血单核细胞(PBMC)中的HBV DNA,以了解其带病毒状况。结果表明:慢性HBV感染儿童多具传播危险性(67.9％,88.8％),即使血清感染性标志已阴性,仍有部分儿童血清或PBMC中HBV DNA阳性(9.4％)。因此对慢性HBV感染儿童应注意隔离,以防HBV传播。     

应用荧光定量PCR技术测定多次冻融对血清HBV DNA含量的影响

目的研究多次冻融状态对血清HBV DNA含量的影响。方法采用荧光定量PcR技术检测25例慢性乙型肝炎血清标本第1(基线)、2、4、6、8次循环冻融时的HBV DNA含量。结果80％(20／25)的血清标本经2到8次冻融后HBV DNA含量较基线水平仅有轻度升高。线性回归方法分析显示HBV DNA含量在每次冻融循环后较基线水平增加1．9％。冻融4～8个循环后血清HBV DNA含量下降20％以上者低于10％。结论血清标本在反复冻融8次以内其HBV DNA水平稳定的。     

脂血对检测HBV DNA的影响及解决办法

目的：评价脂血标本对荧光定量PCR检测乙肝病毒DNA的影响,并选择有效去除脂血对HBV DNA测定干扰的方法。方法：采集29例HBV DNA值〉10^5copies/ml的乙肝青壮年志愿者空腹和高脂饮食后2、46、h静脉血,测定血清甘油三酯（TG）和HBV DNA。选用低温高速离心法和乙醚萃取法处理脂血标本,测定清亮血清HBV DNA值。结果：TG水平轻度升高时,血清HBV DNA测定值有61%超出允许误差范围,且TG水平越高,超出允许误差范围百分率越高、差值越大;TG水平重度升高时,出现假阴性结果。低温高速离心法去除脂血因素干扰效果较萃取法好。结论：高血脂对荧光定量PCR检测HBV DNA结果存在影响,通过低温高速离心法可以有效去除脂血因素干扰。     

不明原因持续肝功能异常患者肝组织和外周血单核细胞中HBV DNA检测分析

目的 :检测不明原因持续肝功能异常患者肝组织和其外周血单核细胞中 HBVDNA。方法 :采用原位分子杂交技术 ,分别检测随机选择的 40例不明原因持续肝功能异常患者外周血单核细胞和其肝组织中 HBV DNA。结果 :40例不明原因持续肝功能异常患者肝组织中 HBV DNA阳性 2 4例 ,阳性率为 5 8% ;外周血单核细胞中 HBV DNA阳性 1 8例 ,阳性率为 45 % ;两者比较 ,差异无显著性。结论 :对肝组织和外周血单核细胞进行 HBVDNA检测 ,有助于诊断隐性 HBV感染 ,后者对患者侵袭性小 ,取样简便。     

乙型肝炎病毒标志物与HBV-DNA检出率的关系

目的：探讨乙型肝炎病毒标志物（HBV－M）常见模式与HBV－DNA检出率的关系。方法：采用地高辛标记探针斑点杂交法检测200例HBV－M常见模式血清中HBV－DNA。结果：41份HBsAg、HBeAg、HBcAb三项阳性（大三阳）标本中检了HBV－DNA阳性38例（HBV－DNSA阳性率为92．6％）;52例HBsAg、HBeAb、HBcAb三项阳性（小三阳）标本中检出HBV－DNA阳性9例（阳性率17．3％）;30例HBV－M全阴性标本中检出HBV－DNA阳性2例（阳性率6．7％）;20例仅HBsAb阳性的标本,其HBV－DNA全部阴性。结论：BHeAg阳性与HBV－DNA关系极为密切,其HBV复制最活跃,传染性最强。无论何种原因产生HBsAb,都能有效地清了HBV;只有HBsAb是保护性抗体,能有效地清除HBV或抑制HBV复制。即使HBV－M全阴性人群中,仍可能有病毒复制,一般都应接种乙肝疫苗。     

腮腺组织HBsAg、HBcAg和HBVDNA的检测

目的 观察乙型肝炎病毒感染者腮腺组织中HBsAg、HBcAg和HBV DNA的表达情况。方法 对22例血清学HBV标志阳性的腮腺肿瘤患者用免疫组化方法检测腮腺活检组织HBsAg、HBcAg的表达；应用PCR技术对免疫组化阳性病例进一步检测腮腺组织HBV DNA。结果 22例腮腺组织中HBsAg阳性10例。阳性率为45．5％；HBcAg阳性9例，阳性率为40．9％。总阳性率为54．5％(12／22)，其中HBsAg和HBcAg同时阳性7例。占31．8％。阳性信号呈棕褐色细颗粒状，弥漫分布于腮腺腺泡细胞。12例免疫组化阳性患者检出HBV DNA7例，阳性率为58．3％。结论 腮腺组织对HBV有较强的亲和力，唾液中HBV的出现可能源于受染的唾液腺组织，含HBV的唾液是乙型肝炎生活接触性传播的媒介。     

慢性乙型肝炎病毒感染者血清标志物检测及临床分析

目的 了解慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者血液中HBV各抗原抗体系存在模式及与HBV核酸基因(DNA)水平的关系。方法 对490例慢性HBV感染者进行血清标志物检测及分析。结果HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性("大三阳")模式占42.86％,其99.12％血液标本中HBV DNA定量值>103拷贝／mL,HBV DNA定量值>107拷贝／mL的占64.47％。HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)均阳性("小三阳")模式占40.00％,其34.86％血液标本中HBV DNA定量值>103拷贝／mL,HBV DNA定量值>107拷贝／mL的占14.47％。结论 慢性HBV感染者,血清标志物以"大三阳"和"小三阳"两种模式存在多见,HBeAg和抗-HBe与HBV DNA水平密切相关。     

分子杂交技术监测孕期乙型肝炎病毒的母婴传播

对40例孕中期检测乙型肝炎表面抗原阳性孕产妇临产前血、新生儿脐血、胎盘绒毛和其中17例3～6个月婴儿血,用Bio-HBV DNA探针进行斑点杂交检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA,其阳性率:母血35.0％,脐血47.5％、胎盘绒毛75.0％、婴儿血29.4％;用~(32)P-HBV DNA探针复测母血和胎盘绒毛HBV DNA,其阳性率分别为30.0％、70.0％。     

乙型肝炎患者唾液HBV标志物检测结果分析

用ELISA检测100名乙肝患者唾液中的五种HBV标志物模式,经统计总阳性率为60％,其HBsAg阳性率为31％,HBeAg阳性率为12％;HBsAg、HBeAg抗—HBC三项阳性率为9％;HBsAg、HBeAg,抗HBC,抗—HBC阳性率为20％。结果表明HBV患者的唾液有一定传染性。     

乙肝患者血清中HBeAg与乙肝病毒DNA关系的探讨

目的：探讨乙肝患者血清中e抗原（HBeAg）与乙肝病毒DNA（HBV—DNA）之间的关系。方法：选取305例HBsAg阳性的乙肝患者血清标本．分别用微粒子酶免疫分析法（MEIA）和核酸扩增荧光定量法（FQ—PCR）检测HBeAg和HBV—DNA。结果：305例标本中,HBeAg阳性率为71．48％,而HBV—DNA阳性率为58．69％。HBeAg阳性标本中．HBV—DNA阳性率为66．05％;而HBeAg阴性标本中,HBV—DNA阳性率为40．23％,两者有显著性差异（Х^2=17．11,P〈0．01）。不同浓度组HBeAg和HBV—DNA检测结果比较,有统计学意义（Х^2=35．67,P〈0．01）。结论：HBV—DNA比HBeAg能更准确反映出乙肝病毒复制情况,可以更好地指导临床进行乙肝治疗。     

乙型肝炎前S1抗原、HBeAg与HBV-DNA的关系及临床意义

目的了解乙肝前S1抗原、HBeAg与HBV—DNA之间的关系及临床意义。方法用ELISA法检测乙肝前S1抗原、HBeAg,荧光定量PCR检测HBV—DNA。结果HBeAg与HBV—DNA的符合率为79．38％,前S1抗原与HBV—DNA、HBeAg一致率分别为74．74％、73．71％;115份HBV—DNA阳性血清中,有33份(28．70％)前S1抗原为阴性,有39份(33．9l％)HBeAg为阴性;79份HBV-DNA阴性血清中,1份血清(1、27％)HBeAg阳性,16份标本(20．25％)前S1抗原阳性。结论HBV—DNA、HBeAg、乙型前S1抗原有较好的一致性,都可作为乙肝病毒存在和复制的指标。但三者的检出并不完全相同,提示他们所表达的意义并不完全一致,各自具有独立的临床意义。     

乙肝患者血清中HBV DNA测定及其意义

目的：了解HBV感染时，HBV DNA阳性的不同血清学指标组合情况。方法：对370份HBV DNA阳性的血清用ELISA方法进行血清学测定。结果：HBsAg、HBeAg、HBeAg、HBcAb均阳性的标本216例，占58.4％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本63例，占17％；HBsAg、HBcAb均阳性的标本48例，占13％；HBsAg、HBeAg均阳性的标本30例，占8.1％；HBsAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb均阳性的标本6例，占1.6％；HBsAb阳性1例，占0.3%。结论：单凭HBsAg和HBeAg阳性来判断肝脏中HBV复制及有无传染性是不够的，是造成部分慢性乙肝漏诊；同时HBV DNA含量的监测，更有利于临床治疗方案的选择和疗效观察。     

HBV携带者血清和白带HBV-DNA FQ-PCR检测分析

目的了解乙型肝炎病毒HBV携带者血清与白带中HBV—DNA含量的关系及其意义。方法选择经血清学检测诊断为女性HBV携带者867例，采用荧光定量聚合酶链反应（FQ—Pen）技术测定其白带中和血清HBV—DVA含量，并对所有检测指标进行相关性分析。结果867例携带HBV女性中，HbsAg、HbeAg、HbcAb三大阳者的血清和白带中HBV—DNA的阳性检出率均为100％；HbsAg、HbeAb、HbcAb三小阳组阳性率分别为85．6％和84．3％；HB．sAg、HBsAb两组的阳性率分别为86．6％和83，7％，白带HBV—DNA含量与血清HBV—DNA含量呈正相关（r=0，896），且白带HBV—DNA含量低于血清含量近10^1。蛄论白带与血清中HBV—DNA含量呈正相关。血清HBV—DVA阳性的育龄女性应作白带HBV—DVA检测，以对其阳性者采取防治措施，降低HBV母婴播率具有重要意义重大。     

标本因素对HBV DNA测定的影响

目的 探讨脂血、黄疸、溶血及常温储存3d和4℃保存7d对乙肝病毒D N A(H B V D N A)荧光定量测定结果的影响.方法 将阳性标本进行即时检测、室温保存3d检测、4℃保存7d后检测及高脂血和非脂血、黄疸和非黄疸、溶血血清和未溶血血清同时作HBV DNA荧光定量PCR.结果 溶血与未溶血血清标本、黄疸和非黄疸、脂血和非脂血血清标本HBVDNA含量都在同一数量级.血清标本在室温下短期贮存(3d)、4～12保存7d内分别与即时检测HBV DNA含量比较均无统计学意义(P>0.05).结论 脂血、黄疸、溶血、血清标本不同储存温度及时间对HBV DNA定量结果测定无影响.     

巢式聚合酶链反应检测血清中HBV—DNA的临床意义

为了探讨乙肝病毒血清标志物ELISA测定法与定性PCR法测定结果的关系,对106例连续住院的患者通过采集空腹静脉血液3ml,分离血清,分别做ELISA法测定及PCR法检测。结果显示,HBeAg阳性血清标本、HBsAg/HBeAg/抗HBc—IgG三项阳性血清标本、HBsAg/抗HBe/抗HBc—IgG三项阳性血清标本中HBV—DNA阳性率分别为100％(20/20,18/18,16/16),HBsAg阳性血清标本中HBV—DNA阳性率75％(12/16),抗HBs阳性血清标本中HBV—DNA阳性率33.33％(4/12),HBVM全部阴性血清标本中HBV—DNA阳性率18.18％(4/22)。提示了PCR法检测乙肝病毒的方法比血清标志物ELISA法有更高的临床检出率,是检测乙肝病毒最灵敏的实验指标。