孔圣枕中丹对痴呆大鼠学习记忆能力的影响及其机制研究

目的:探讨孔圣枕中丹对痴呆大鼠学习记忆能力及对TChE、NGF的影响。方法:建立VD大鼠模型,中药干预后,Y-型迷宫及跳台计数仪定量测定学习记忆能力,分光光度法检测TChE含量,免疫组化法检测NGF的表达。结果:孔圣枕中丹能增强模型动物的学习记忆能力,降低TChE含量,增强NGF表达。结论:孔圣枕中丹能明显提高痴呆动物的学习记忆能力,其机制可能与降低TChE含量,增强NGF表达有关。     

孔圣枕中丹临床与实验研究现状

孔圣枕中丹为孙思邈的名方之一,载于《备急千金要方》,由远志、菖蒲、败龟板、龙骨四味药组成。此方广泛用于治疗失眠、神经衰弱、情感障碍、儿童多动综合征等多种神经精神疾病。本文就近15年来孔圣枕中丹的研究进展进行综述,为该方的现代研究提供实践经验与思路。     

孔圣枕中丹拆方抗小鼠抑郁作用的实验研究

目的:比较孔圣枕中丹拆方对小鼠抑郁病理模型的疗效,为中药临床防治抑郁症提供理论依据。方法:取130只昆明种小鼠归类分为13组,即正常组、抑郁模型组、氟西汀组及孔圣枕中丹拆方10组。各组连续灌胃给药3周。末次给药后进行强迫游泳实验及悬尾实验,分别记录6 min,测定并比较后4 min内强迫游泳不动时间及悬尾不动时间。结果:模型组小鼠与正常组相比,强迫游泳(P<0.05)和悬尾静止不动时间(P<0.05)均升高。悬尾试验中,孔圣枕中丹2组(远志、龟板)、4组(菖蒲、龟板)、7组(龙骨、菖蒲、龟板)、8组(远志、龙骨、菖蒲)的小鼠静止不动的时间较模型组降低,差异有显著意义(P<0.05);其他孔圣枕中丹拆方组、氟西汀组与模型组比较无显著差异(P>0.05);孔圣枕中丹拆方各组与氟西汀组、拆方组之间比较无显著差异(P>0.05)。强迫游泳试验中:孔圣枕中丹2组(远志、龟板)、3组(远志、菖蒲)、4组(菖蒲、龟板)、5组(远志、龙骨、菖蒲)、8组(远志、龙骨、菖蒲)、9组(龙骨、菖蒲)小鼠静止不动的时间较模型组降低,差异有显著意义(P<0.01)。结论:孔圣枕中丹拆方2组(远志、龟板)、4组(菖蒲、龟板)、8组(远志、龙骨、菖蒲)具有明显的抗小鼠抑郁作用。     

孔圣枕中丹辨证加味治疗老年痴呆60例临床疗效

痴呆综合征是慢性全面性的精神功能紊乱,以及缓慢出现的智能减退为主要临床特征,包括定向、学习能力、语言、记忆、思维、理解、判断、计算等功能的减退和不同程度的人格改变,而没有意识障碍。本病起病缓慢病程较长且多数无明显病因（AD）,目前能找到的确实病因中血管性疾病占多数（VD）。据国外资料显示,65岁以上老年人中明显痴呆的占2-5％;80岁以上老年人中增加到15—20％,如以轻中度痴呆合并估计则要超过上述数字2-3倍以上,其中半数为Alzheimer病,及其他尚无有效治疗的原发退行性痴呆。     

基于网络药理学研究孔圣枕中丹治疗轻度认知功能障碍的作用机制

目的 基于网络药理学方法研究孔圣枕中丹治疗轻度认知功能障碍的可能作用机制.方法 检索中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP),筛选孔圣枕中丹的活性成分,通过蛋白质数据库(Uniprot)获得各活性成分的潜在靶点,利用比较毒物基因组学数据库(CTD)获得轻度认知功能障碍作用靶点.采用Cytoscape 3.7.1软件...     

孔圣枕中丹及拆方对小鼠高架十字迷路行为活动的影响

目的研究孔圣枕中丹及其拆方对小鼠的抗焦虑作用。方法正交试验设计,采用高架十字迷路模型观察灌胃给予孔圣枕中丹及其拆方对小鼠抗焦虑作用;地西泮作为平行对照。结果孔圣枕中丹及其拆方有增加入开臂次数和入开臂时间趋势;与空白对照组相比,地西泮和实验5(远志2g/kg,石菖蒲2g/kg,龙骨2g/kg)延长入开臂时间和开臂时间百分比具有显著差异;正交分析,抗焦虑作用的活性顺序是:远志>石菖蒲>龙骨>龟板,方差分析远志差异显著。结论孔圣枕中丹具有较弱的抗焦虑作用。     

孔圣枕中丹配方颗粒治疗心肾阴虚证肿瘤相关失眠疗效观察

目的综合评价经典名方孔圣枕中丹(配方颗粒)对心肾阴虚证肿瘤相关失眠的治疗效果,为临床推广应用提供依据。方法将符合诊断标准的肿瘤相关失眠患者随机分为治疗组与对照组,治疗组应用孔圣枕中丹免煎颗粒,每日早、晚餐后30 min各服1袋;对照组仅常规西药舒乐安定治疗失眠,每晚口服1 mg;28 d为1疗程。选择国际通用的匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)、中医证候量表为观察指标,分别在治疗前、治疗第14天、治疗第28天记录2组病例PSQI评分、临床证候与单项症状变化,并以SPSS 18.0统计软件分析睡眠质量、中医证候疗效。结果与对照组比较,孔圣枕中丹颗粒治疗肿瘤相关失眠,在第14、28天,能够明显改善患者PSQI、中医证候积分,与对照组比较,经t检验,具有统计学意义,治疗组优于对照组(P0.001);治疗组睡眠疗效优于对照组,经卡方检验,有统计学意义(P0.001);治疗组中医证候疗效优于对照组(P0.001)。第14、28天与第1天以及第14天与第28天PSQI各单项积分比较,除第14天与第28天睡眠P0.05,其余各项比较,均具有统计学意义(P0.001)。结论孔圣枕中丹颗粒治疗肿瘤相关失眠有确切疗效,值得临床推广应用。     

加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血大鼠神经行为学及VEGF表达的影响

目的 观察加味孔圣枕中丹对局灶性脑缺血大鼠神经行为学及血管内皮生长因子（vasular endothelial growth factor,VEGF）表达的影响.方法建立大鼠大脑中动脉栓塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型.实验动物随机分为假手术组、模型组、银杏叶组和加味孔圣枕中丹组（n=10）,分别灌胃给予生理盐水、银杏叶片混悬液及加味孔圣枕中丹水煎浓缩液18 mL·kg-1·d-1,连续14 d.神经行为学采用平衡木试验、Bederson评分评价;RT-PCR和免疫组织化学法测定缺血脑组织VEGF mRNA及蛋白表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠平衡木试验评分显著降低,Bederson评分显著升高,VEGF蛋白表达升高（P＜0.05）;与模型组比较,加味孔圣枕中丹组大鼠平衡木试验评分显著升高,Bederson评分显著下降,VEGF mRNA和蛋白表达显著升高（P＜0.05）.结论 加味孔圣枕中丹能上调缺血后脑组织VEGF基因和蛋白表达,这可能是其改善MCAO大鼠神经功能损伤、治疗脑缺血的作用机制之一.     

步长脑心通对慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响

目的：通过观察步长脑心通对慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠认知功能及神经细胞凋亡的影响,探讨步长脑心通治疗血管性痴呆的疗效和机制。方法：采用双侧颈总动脉永久结扎法制备前脑缺血大鼠模型,将造模成功的Wistar大鼠随机分为1月和2月模型对照组及给药组（步长脑心通）,另设1月和2月正常对照组,每组6只大鼠。应用Morris水迷宫评定不同时期大鼠认知功能; 通过HE染色观察神经细胞的形态学改变;采用免疫组化方法对脑组织神经细胞凋亡率及Bcl-2蛋白表达水平进行检测。结果：Morris水迷宫检测结果表明,1月和2月给药组大鼠游迷宫平均潜伏期均明显低于模型对照组（P<0.01）;HE染色观 察发现,1月和2月给药组大鼠锥体细胞海马CA1区神经细胞缺血性改变较模型对照组改变轻,2月较1月给药组缺血改变明显;TUNEL染色观察发现,1月和2月给药组大鼠神经细胞凋亡率明显低于模型对照组(P<0.05);给药组Bcl-2蛋白阳性细胞灰度平均值明显低于模型对照组(P<0.05)。结论：步长脑心通可明显提高Bcl-2的表达,抑制神经细胞凋亡,可用于治疗慢性脑缺血所致的认知功能障碍。     

Bcl-2、bax、P53蛋白表达与老年妇女外阴营养不良细胞凋亡的相关性研究

目的 :探讨老年妇女外阴营养不良组织中细胞凋亡及相关基因的表达情况。方法 :采用原位末端标记及免疫组化S -P法检测 78例老年妇女外阴营养不良和 12例老年妇女外阴营养不良恶变石蜡包埋组织中的细胞凋亡及相关基因bcl- 2、bax、p5 3的表达情况。另取石蜡包埋的老年妇女正常外阴皮肤 10例作为对照。结果 :老年妇女正常外阴皮肤、外阴营养不良及外阴营养不良恶变中均存在细胞凋亡及bcl- 2、bax和p5 3的表达 ,细胞凋亡指数 (AI)及bcl- 2和bax的表达在营养不良组明显高于营养不良恶变组 (P >0 .0 1) ,而 p5 3的表达却相反 (P >0 .0 1)。在老年妇女正常外阴皮肤及外阴营养不良中凋亡细胞的分布区域与表达bcl- 2和bax蛋白的细胞分布区域一致 ,bcl- 2与bax表达呈正相关 (P >0 .0 5 ) ;在恶变部位凋亡细胞的分布区域与突变型 p5 3蛋白表达呈负相关 ,p5 3分别与bcl- 2和bax的表达呈负相关 (P >0 .0 5 )。结论 :老年妇女外阴营养不良的发生发展和恶变与细胞凋亡有关 ,bcl- 2、bax和p5 3起一定作用。     

通络益智散对血管性痴呆大鼠海马CA1区P53蛋白表达的影响

目的:探讨通络益智散对血管性痴呆大鼠海马CA1区P53蛋白表达的影响。方法:用双侧颈总动脉(CCA)法制备大鼠血管性痴呆模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、通络益智散高低剂量组和尼莫地平组。3周后,断头处死大鼠,取大脑海马做病理和海马CA1区P53免疫组化检测。结果:假手术组海马CA1区未见P53阳性细胞,通络益智散大小剂量及尼莫地平组海马CA1区P53阳性细胞平均灰度值均明显高于模型组(P<0.05)。结论:通络益智散能显著降低CA1区P53蛋白的表达,抑制血管性痴呆大鼠脑损伤引起的细胞凋亡,对血管性痴呆大鼠的脑组织有保护作用,这可能是其治疗血管性痴呆的作用机理之一。     

星半通膈散诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究

目的 研究星半通膈散药液诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制.方法 采用MIT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞及检测p53、bcl-2基因表达.结果 星半通膈散不同剂量药液均可抑制人食管癌Eca-109细胞生长,诱导细胞凋亡,降低p53(突变型)、bcl-2蛋白表达率.结论 星半通膈散能诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡,而抑制p53基因突变、下调bcl-2基因表达可能是其重要机制.     

天麻素对血管性痴呆大鼠学习记忆能力和海马p53表达的影响

目的：探讨天麻素对血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力和海马p53表达的影响。方法：将大鼠随机分成模型组、对照组、治疗组（高剂量天麻素组和低剂量天麻素组）,采用改良Pulsinelli四血管闭塞法（4-VO）建立VD大鼠模型,天麻素高剂量组模型大鼠用天麻素80 mg.kg^-1.d^-1灌胃,天麻素低剂量组模型大鼠用天麻素40 mg.kg^-1.d^-1灌胃,连续4周。水迷宫检测各组大鼠学习记忆能力,免疫组织化学检测大鼠海马p53免疫反应阳性细胞表达。结果：与VD模型组比较,天麻素治疗后VD大鼠学习记忆能力明显提高,海马p53免疫阳性神经元明显减少（P〈0.01）,以高剂量天麻素组效果更显著。结论：天麻素可改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与下调p53表达、抑制缺血海马神经细胞的凋亡有关。     

肺腺癌bcl-2及p53表达意义探讨

目的：探讨肺腺癌原发灶及其淋巴结转移灶中凋亡相关基因bcl-2及p53的表达意义,为进行肺腺癌的分子生物学研究提供理论依据。方法：采用免疫组化S-P法,用抗bcl-2单克隆抗体及抗p53单克隆抗体分别对63例发生淋巴结转移的肺腺癌组织及其相应淋巴结进行标记分析,且按性别、年龄、分化程度、TNM分期等进行分组比较。结果：bcl-2与肺腺癌淋巴结转移、患者性别、年龄、分化程度无关（P〉0．05）,TNM分期Ⅰ～Ⅱ期肺腺癌bcl-2阳性率大于Ⅲ～Ⅳ期肺腺癌,差异具有显著性（P〈0．05）;p53与肺腺癌淋巴结转移、患者性别、年龄无关（P〉0．05）,与分化程度有关（P〈0．05）,TNM分期肺腺癌p53阳性率Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期肺腺癌,差异具有显著性（P〈0．05）。结论：bcl-2及p53在肺腺癌发生发展过程中可能起一定作用．可作为评估肺腺癌预后的生物学指标。     

夏星汤诱导人胃癌MGC-803细胞凋亡及对p53、bcl-2基因表达的影响

目的 研究夏星汤药液对人胃癌MGC-803细胞株的增殖、凋亡及p53、bcl-2基因表达的影响.方法 采用MTT比色法检测夏星汤药液作用48h后对MGC-803细胞生长增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法检测p53、bcl-2基因表达.结果 随着夏星汤药液浓度逐渐增加,细胞增殖率逐渐降低,细胞抑制率、凋亡率逐渐升高,p53(突变型)和bcl-2蛋白表达得分逐渐下降.结论 夏星汤能够抑制人胃癌MGC-803细胞增殖,对细胞有诱导凋亡作用,在凋亡过程中涉及p53(突变型)和bcl-2基因表达下降.     

p53和bcl-2在胰腺癌组织中的表达及意义

目的 检测p53和bcl-2蛋白在胰腺癌及其它胰腺疾病组织中的表达,并探讨其临床意义.方法 应用链霉菌抗生物素过氧化酶免疫组化法对32例原发性胰腺导管腺癌、12例胰腺癌手术切缘经病理证实的正常胰腺组织、10例良性疾病组织进行p53和bcl-2蛋白检测.结果 p53蛋白阳性表达仅见于原发性胰腺导管腺癌,阳性率为43.8%,p53蛋白表达与原发性胰腺导管腺癌临床病理特征无关;bcl-2蛋白在原发性胰腺导管腺癌、正常胰腺组织和良性疾病组织中均表达,阳性率分别为46.9%、25.0%和20.0%,在胰腺癌中表达率较高,但无统计学意义;bcl-2蛋白表达在组织学高、中分化和临床Ⅰ～Ⅱ期显著高于组织学低分化和临床Ⅲ～Ⅳ期(P＜0.05).结论 p53和bcl-2蛋白在胰腺癌的发生中起着重要的作用;bcl-2蛋白的表达能反映胰腺癌的生物学行为.     

化疗耐药相关基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及其临床意义

目的 探讨p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ耐药相关基因在弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中的表达及其临床意义.方法 用免疫组织化学S-P法对34例DLBCL患者p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白表达进行检测,分析其表达与DLBCL治疗效果及生存期的关系.结果 p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白在DL-BCL中表达阳性率分别为32.4%、47.0%、25.2%、52.9%、64.7%,p53、bcl-2、P-gp、GST-π蛋白表达阳性患者化疗有效率、3年生存率低于阴性患者,TopoⅡ蛋白表达阳性患者化疗有效率高于阴性表达患者,但3年生存率却较低.结论 p53、bcl-2、P-gp、GST-π、TopoⅡ蛋白可作为DLBCL患者化疗效果和预后的预测指标,指导DLBCL患者的个体化治疗.     

微囊藻毒素LR诱导L-02细胞发生凋亡

目的了解微囊藻毒素（MC）LR对L-02细胞的毒性机制。方法以L-02细胞为材料,用不同浓度的MCLR处理该细胞,观察了细胞增殖能力、细胞形态改变、乳酸脱氢酶（LDH）泄漏、细胞凋亡率及凋亡相关基因等一系列指标的变化。结果MTT细胞增殖实验可知,MCLR在24h内对L-02细胞有轻微的抑制作用,随后却促进细胞增殖。48h处理对LDH泄漏没有显著影响．延时处理导致LDH泄漏发生,且MCLR浓度越高,LDH泄漏越严重,此结果显示发生了细胞氧化损伤。光镜下50μg／ml的毒素浓度在60h处理后可造成明显的细胞形态改变,如细胞变圆、不贴壁、萎缩、膜发泡,这些都是典型的细胞凋亡形态变化。36h不同浓度MCLR处理的细胞凋亡率较低,约为22％-9％,延长处理时间至60h,高浓度（50μg／ml）处理的L-02细胞的凋亡率可达80％。经高浓度MCLR处理60h的L-02细胞中．p53和Bcl-2基因产物大量表达。结论微囊藻毒素LR可诱导L-02发生凋亡并上调凋亡相关基因p53和bcl-2的表达。     

脑膜瘤相关基因p53、bcl-2的研究现状

脑膜瘤是中枢神经系统最常见良性肿瘤之一，与其他肿瘤一样其形成和发展受多种因素影响。近年来发现肿瘤的发生不仅可出现癌基因的激活，而且出现肿瘤抑制基因的缺失或失活。肿瘤抑制基因是当前肿瘤学研究的热点。而目前研究表明脑膜瘤的发生与细胞凋亡相关基因bcl-2及p53有一定相关性，现综述如下。     

Clusterin、bcl-2及p53在前列腺上皮组织中的表达及相关性研究

目的通过检测新的凋亡抑制因子Clusterin在前列腺癌组织中的表达,探讨其与前列腺癌发生发展的关系及其与bcl-2和p53表达的关系.方法采用免疫组织化学染色法检测Clusterin、bcl-2、p53在10例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织(BPH)、49例前列腺癌组织标本中的表达.结果Clusterin在前列腺正常、增生、癌组织中的阳性及弱阳性表达率分别为10%(1/10)、66.6%(10/15)、91.8%(45/49).前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常组织(P＜0.005)及增生组织(P＜0.005),且在癌组织中与肿瘤临床分期(P＜0.001)、病理分级(P＜0.001)呈正相关.前列腺癌Clusterin表达与bcl-2(P＜0.05)及p53(P＜0.001)表达呈正相关关系.结论Clusterin基因可能通过抑制凋亡在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用,且其表达与bcl-2、p53的异常表达密切相关.