黄芪和司坦唑醇复方制剂干预去卵巢骨质疏松症大鼠胫骨中段皮质骨及上段松质骨形态计量学参数的变化

目的:观察黄芪和司坦唑醇复方制剂对去卵巢骨质疏松症模型大鼠胫骨中段皮质骨和胫骨上段松质骨形态计量学参数的影响,并与己烯雌酚作用结果进行比较。方法:实验于2005-05/12在广东医学院药理学实验中心完成。①选用SPF级3月龄Wistar雌性大鼠40只。按随机抽签法分为4组:假手术组、模型组、复方制剂组、己烯雌酚组,每组10只。假手术组行去卵巢假手术;其他3组均行去势手术(结扎子宫,削除卵巢),造成骨质疏松症模型。术后1d,假手术组及模型组、复方制剂组、己烯雌酚组分别以生理盐水、黄芪和司坦唑醇复方制剂(自制复方,生药含量为2kg/L)、己烯雌酚0.5g/L(广东华南药业集团,批号050103,1mg/粒)按大鼠5mL/kg灌胃给药,饲养8周后全部处死。②取大鼠胫骨上段松质骨和中段皮质骨硬组织包埋、切片、染色、图像分析松质骨、皮质骨形态计量学参数,即松质骨静态及吸收参数:骨小梁面积百分数,骨小梁数量,骨小梁分离度,破骨细胞数量,破骨细胞周长百分数;松质骨动态参数:骨小梁荧光周长百分数,骨矿化沉积率,骨形成率/组织参数、骨形成率/小梁面积和骨形成率/周长;皮质骨静态参数:皮质骨面积,皮质骨面积百分数,髓腔面积百分数,内骨膜面骨吸收参数;皮质骨骨形成动态参数:皮质骨内外骨膜荧光标记周长百分数,皮质内外骨膜骨矿化沉积率,皮质内外骨膜骨形成率。结果:大鼠40只均进入结果分析。①4组大鼠皮质骨面积及其百分数、骨髓腔面积参数差异不明显。己烯雌酚组和复方制剂组大鼠内骨膜面骨吸收参数明显低于模型组(P<0.05)。②复方制剂组大鼠皮质骨内、外骨膜骨形成参数均明显高于假手术组和模型组(P<0.05～0.01)。己烯雌酚组皮质骨内骨膜骨形成参数明显低于模型组(P<0.05～0.01),皮质外骨膜骨形成率明显高于模型组(P<0.05)。③复方制剂组和己烯雌酚组骨小梁面积百分数和骨小梁数量明显高于模型组(P<0.05～0.01),骨小梁分离度明显低于模型组(P<0.05,0.01)。复方制剂组和己烯雌酚组破骨细胞数量和破骨细胞周长百分数均明显低于模型组(P<0.01)。④复方制剂组大鼠胫骨上段松质骨形态计量学动态参数均明显高于假手术组(P<0.05～0.01),与模型组比较,差异不明显(P>0.05)。结论:①实验8周时间内,黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚对骨质疏松症大鼠皮质骨内骨膜面骨吸收功能有明显抑制作用。②黄芪和司坦唑醇复方制剂能促进骨质疏松症大鼠皮质骨内、外骨膜面骨形成,而己烯雌酚无该作用。③黄芪和司坦唑醇复方制剂和己烯雌酚均能促进骨质疏松症大鼠胫骨上段松质骨骨小梁面积、数量和降低破骨细胞的吸收功能。④黄芪和司坦唑醇复方制剂和去卵巢手术均有促进骨形成的作用,而己烯雌酚无该作用。     

葛根素联合雌二醇对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用

背景:雌激素治疗绝经后骨质疏松症产生的不良反应较大.目的:观察小剂量葛根素联合雌二醇对去卵巢大鼠骨组织的影响.方法:120 只健康雌性大白鼠等分成只切除卵巢旁的一小块脂肪垫的假手术组和切除双侧卵巢的去卵巢模型组、葛根素组、雌二醇组及葛根素+雌二醇组.1 周后葛根素组、雌二醇组和雌二醇+葛根素组分别皮下注射葛根素(50 mg/kg,1 次/d)、雌二醇(200 μg/kg,2 次/周)和雌二醇(100 μg/kg,2 次/周)+葛根素(25 mg/kg,1 次/d).结果与结论:去卵巢模型组大鼠骨组织稀疏,骨钙、磷水平和骨密度明显低于假手术组(P < 0.01),而经雌二醇和/或葛根素治疗后大鼠骨组织形态明显改善、骨钙、磷水平和骨密度明显升高.其中小剂量的葛根素联合雌二醇治疗与较大剂量的葛根素或雌二醇治疗效果接近.提示较小剂量的雌二醇与葛根素联合治疗也可对去卵巢大鼠骨质疏松症产生良好的治疗效果.     

己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的影响

背景以往实验结果提示淫羊藿总黄酮有提高雌激素预防去卵巢大鼠胫骨上段松质骨丢失的作用,又可减少雌激素在应用于防治绝经后骨质疏松症中对子宫的刺激等不良反应,将两者结合应用是否有协同作用?目的观察己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的代谢生化指标和骨组织形态计量学的影响.设计随机对照动物实验.单位广东医学院药理教研室.材料4月龄未交配的雌性SD大鼠,体质量(225±15)g,由中国科学院上海实验动物中心提供,动物级别为清洁级(合格证号中科动管第003号).大鼠随机分为5组假手术组、去卵巢组、己烯雌酚组、淫羊藿总黄酮组与联合用药组,每组10只.方法除假手术组大鼠外,其余行双侧卵巢切除术,假手术组和去卵巢组给予溶剂对照,其余分别为己烯雌酚组22.5 μg/(kg·d),淫羊藿总黄酮组300 mg/(kg·d),联合用药组[己烯雌酚22.5μg/(kg·d)+淫羊藿总黄酮300 mg(kg·d)],均灌胃给药90天.应用骨组织形态计量学方法测量第5腰椎松质骨的动态参数(周长百分数、骨矿化沉积率、骨表面形成率、骨量形成率、骨组织形成率)和静态参数(骨小梁面积百分数、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨小梁分离度、单位骨小梁面积破骨细胞数),同时测量股骨钙、磷及羟脯氨酸含量.主要观察指标①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎松质骨的动态参数和静态参数的影响.②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响.结果5组大鼠,每组10只均纳入结果分析.①己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠股骨生化指标的影响与假手术组比较,去卵巢组大鼠股骨湿重/体质量比、干重/体质量比均明显降低(P＜0.01),骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值均降低(P＜0.05).与去卵巢组比较,己烯雌酚组大鼠股骨生化指标无明显变化(P＞0.05);淫羊藿总黄酮组大鼠骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值明显增加(P＜0.01).联合用药组骨钙、骨磷含量及钙/羟脯氨酸比值均明显增加(P＜0.01),而且高于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组(P＜0.05).②己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎静态和动态参数的影响与假手术组比较,去卵巢组大鼠腰椎静态参数中骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别减少35.0%,31.0%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别增加31.6%,106.9%,差异均有显著性(P＜0.05～0.01);动态参数标记周长百分数、骨量形成率分别增加126.8%,36.6%,差异有显著性(P＜0.01).与去卵巢组比较,己烯雌酚使去卵巢大鼠腰椎的骨小梁面积百分数增加20.3%,但差异无显著性(P＞0.05),骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少15.1%,47.1%,差异有显著性(P＜0.05);动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少44.3%,28.0%,64.1%,差异有显著性(P＜0.05).淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠腰椎静态参数和动态参数均无明显影响(P＞0.05).联合用药使去卵巢大鼠腰椎松质骨的骨小梁面积百分数、骨小梁厚度分别增加52.7%,36.6%,而骨小梁分离度、破骨细胞数分别减少25.5%,61.0%,差异均有显著性(P均＜0.01);动态参数标记周长百分数、骨矿化沉积率、骨量形成率分别减少56.1%,39.2%和2 80.1%,差异均有显著性(P均＜0.01).联合用药组的作用明显强于己烯雌酚组和淫羊藿总黄酮组,差异有显著性(P＜0.05).结论己烯雌酚和淫羊藿总黄酮联合用药明显增加去卵巢大鼠腰椎的骨量和骨小梁厚度,减少骨小梁分离度,其增加骨量的效应比单用己烯雌酚和单用淫羊藿总黄酮的作用明显,且可使股骨钙、磷含量及钙/羟脯氨酸比值增加,提示己烯雌酚与淫羊藿总黄酮联合用药对去卵巢大鼠腰椎和股骨的作用具有协同作用.     

去卵巢大鼠骨质疏松模型的特点

目的:观察去卵巢致Wistar大鼠骨质疏松模型骨密度、结构、最大载荷等变化特点,探讨骨量与骨结构的可能关系。方法:实验于2002-09/2004-01在解放军第三军医大学动物研究所及中心实验室完成。选择雌性未孕Wistar大鼠20只,随机数字表法分为去势组、假手术组,各10只。去势组行双侧卵巢切除,假手术组不切除卵巢。术后8周测定以下指标:①骨密度:在双能X射线骨密度仪的探头下,应用小动物软件进行腰椎和股骨的扫描,测定骨密度值。②椎体压缩测试:将磨制好的椎体置于实验机上,取加载速度1mm/min进行测试,其结构力学参数由载荷-变形曲线获得,材料力学参数由应力-应变曲线获得。③骨形态计量学检查指标:骨小梁面积百分数(%Tb.Ar),代表骨量;骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N),骨小梁分离度(Tb.Sp)。④血、尿生化指标的测定:血清钙、磷,尿钙、磷,尿肌酐,均采用BECKMAN自动生化分析仪。血清骨钙素、血清碱性磷酸酶、血清抗酒石酸酸性磷酸酶、尿羟脯氨酸具体参照试剂盒说明。结果:纳入动物20只,均进入结果分析。①去势组大鼠股骨骨密度明显低于假手术组[分别为(0.166±0.026),(0.195±0.027)g/cm2,P<0.05],腰椎骨密度尤其显著[分别为(0.190±0.011),(0.251±0.029)g/cm2,P<0.01]。②去势组大鼠股骨最大载荷与假手术组相比显著降低[分别为(94.43±8.96),(109.49±12.41)N,P<0.05],腰椎最大载荷降低尤其显著[分别为(98.75±8.19),(118.82±15.74)N,P<0.01]。③去势组大鼠骨小梁面积百分数(%Tb.Ar)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)与假手术组相比显著降低(去势组分别为4.78±0.76,46.29±9.96,0.64±0.08,假手术组分别为7.74±1.76,60.91±3.80,1.26±0.26,P<0.01);骨小梁分离度(Tb.Sp)显著增高(分别为2300.85±480.10,1112.27±65.81,P<0.01)。④血、尿生化指标显示:骨吸收大于骨形成。结论:Wistar大鼠去卵巢8周成功建立了绝经后骨质疏松模型,骨量与骨结构的一些参数可能存在某种关系。     

雌激素对去卵巢大鼠骨形态的影响

目的观察大鼠去卵巢后椎体骨丢失的组织学改变、椎体骨密度和生物力学性能变化,了解激素复合药物对椎体骨丢失的影响。方法选用40只6月龄雌性SD大鼠,随机分为4组,每组10只,包括非手术组、假手术组、去卵巢组和去卵巢后药物治疗组。治疗组为去卵巢后3周给予盖福润(gevrine)0.8mg/kg,羟乙膦酸钠35mg/kg,1次/d。术后12周处死各组大鼠,进行骨形态计量学、骨密度及生物力学检测。结果与假手术组相比,去卵巢组的骨小梁体积占海绵骨体积百分比明显降低(P<0.01),椎体骨密度显著降低(P<0.01),骨的力学强度降低(P<0.05)。与去卵巢组相比,治疗组骨小梁体积占骨体积百分比明显增加(P<0.05),椎体骨密度明显增加(P<0.05),骨的力学强度增加(P<0.05)。结论雌激素复合药物盖福润和羟乙膦酸钠能抑制骨丢失,促进骨形成,对大鼠脊柱骨质疏松有明显的防治作用。     

普萘洛尔对去卵巢大鼠胫骨骨形态的影响

背景普萘洛尔是非选择性竞争抑制肾上腺β受体阻滞剂,具有拮抗交感神经兴奋作用,而绝经后骨质疏松的发生与交感神经活性的改变可能存在联系.目的观察普萘洛尔对去卵巢大鼠骨形态的影响,并与雌激素治疗结果进行比较.设计完全随机设计,对照实验.单位解放军北京军区总医院内分泌科.材料实验于2002-03/2003-04在中国中医研究基础理论研究所动物室完成.选用6月龄雌性未交配SD大鼠40只.将40只大鼠随机分为4组,每组10只假手术组,雌激素治疗组,普萘洛尔治疗组,安慰剂组.方法①雌激素治疗组和普萘洛尔治疗组及安慰剂组大鼠麻醉后,开腹,结扎切除双侧卵巢后.假手术组打开腹腔后切除卵巢周围一小块脂肪组织后关腹.②雌激素治疗组采用17?-雌二醇谷物油溶解后皮下注射20 μg/(kg·d);普萘洛尔治疗组采用普萘洛尔8 mg/(kg·d)胃内灌注.安慰剂组及假手术组给予与治疗组等量的谷物油皮下注射和/或蒸馏水灌胃.2个治疗组在治疗措施的同时,给予与安慰剂组及假手术组相同的干预措施.各组均在术后1周给药,共干预12周.③采用LeicaQwin图像分析系统进行骨组织形态计量,观察骨小梁体积百分比、活性生成表面百分比、骨小梁矿化率、骨小梁骨生成率指标的变化.④显著性差异性比较采用t检验.主要观察指标各组大鼠胫骨骨形态计量结果比较.结果大鼠40只,每组10只均进入结果分析.①大鼠左侧胫骨活性生成表面百分比和骨小梁矿化率假手术组和雌激素治疗组明显低于安慰剂组(P＜0.01),普萘洛尔治疗组明显高于安慰剂组(P＜0.05).②大鼠左侧胫骨骨小梁骨生成率普萘洛尔治疗组明显高于安慰剂组(P＜0.05).③大鼠左侧胫骨骨小梁体积百分比假手术组和普萘洛尔治疗组明显高于安慰剂组(P＜0.01),普萘洛尔治疗组明显低于假手术组和雌激素治疗组(P＜0.01).结论普萘洛尔能使卵巢切除术后骨质疏松大鼠的骨量增加,抑制骨丢失,促进骨形成,对大鼠质疏松有明显的防治作用.     

金乌骨通胶囊对去势大鼠骨质疏松作用的研究

目的研究金乌骨通胶囊对去卵巢大鼠骨质疏松的治疗作用。方法雌性Wistar大鼠40只被随机分为正常对照组、假手术组、卵巢切除组、实验组,每组10只。骨质疏松模型成功后,实验组大鼠灌服金乌骨通胶囊,正常对照组、假手术组和卵巢切除组按照实验组的方法给大鼠灌服等容积的蒸馏水,治疗3个月,测定大鼠腰椎和胫骨上端骨密度及外周血清中雌激素(E2)、降钙素(CT)的含量。结果假手术组腰椎、胫骨上端骨密度明显高于卵巢切除组及实验组(P0.05),但与正常对照组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组腰椎、胫骨上端骨密度明显高于卵巢切除组(P0.01)。假手术组血清E2明显高于卵巢切除组及实验组(P0.01),但与正常对照组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组血清E2虽较卵巢切除组有所升高,但差异未见统计学意义(P0.05)。卵巢切除组血清CT较假手术组明显降低(P0.01),正常对照组、实验组与假手术组比较差异未见统计学意义(P0.05);实验组血清CT较卵巢切除组明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。结论金乌骨通胶囊减轻骨吸收、促进骨形成、延缓骨质疏松的发生和发展可能与卵巢切除大鼠血清CT升高有关,而且不依赖于雌激素的表达。     

雌孕激素合用对去卵巢骨质疏松大鼠的骨保护效果

背景有报道雌激素和孕激素联合应用对防治绝经后骨质疏松症有协同作用,且副作用较小.目的观察炔诺酮和炔雌醇联合应用对去卵巢大鼠骨量的影响.设计随机对照验证性实验观察.单位广东医学院药理教研室.对象清洁级4个半月龄未交配的雌性SD大鼠24只,体质量(23O±l5)g.方法实验于2002-05/11在广东医学院药理教研究空完成.大鼠随机分成3组假手术组,去卵巢组,复方炔诺酮组,每组8只,前2组采用体积分数为0.056的乙醇溶液5mI/(kg·d)灌胃,复方炔诺酮组采用炔诺酮60μg(kg·d)和炔雌醇3.5μg/(kg·d)灌胃(实验用药剂量参照人的用药20～35 ug雌激素十孕激素).所有动物给药时间为90d.给药结束后取胫骨标本,采用全自动图像分析系统对胫骨近端次级骨小梁形成区进行破骨细胞和有关动静态参数的测量;另取肱骨标本用电感偶合等离子体直读光谱仪测定钙含量和测定羟脯氨酸含量.同时测定尿中的钙和羟脯氨酸的含量.主要观实指标①各组大鼠骨小梁面积、骨小梁厚度、骨小梁数目、骨小梁分离度、破骨细胞周长的静态参数变化.荧光周长百分数、矿化沉积率、骨形成率动态参数变化.②血清碱性磷酸酶、骨和尿中钙含量和羟脯氨酸含量变化.结果24只大鼠均进入结果分析.①去卵巢大鼠与假手术组大鼠相比,骨小梁面积百分数下降,骨小梁数目降低和骨小梁分离度增加,伴随明显的破骨细胞周长增加(P＜0．01);骨形成指标明显增加荧光周长百分数和矿化沉积率增加(P＜0．05),骨形成率(BFR/BV)明显增加(P＜0．01).②复方炔诺酮组与去卵巢组比较,骨量和骨小梁数目增加,骨小梁面积增加82％和骨小梁数目增加83%(P＜0.05),骨小梁分离度降低51％(P＜0．05);破骨细胞周长降低52.05%(P＜0.01);同时骨有机质含量增加和尿羟脯氨酸排出量减少(P＜0.05).结论炔诺酮和炔雌醇联合应用可防治去卵巢大鼠骨质疏松,增加骨量和骨有机质含量,且不明显抑制骨形成.实验提供的药物剂量参照人的用量,20～35μg雌激素结合一种孕激素,其效果良好时即可提供一种最好的骨保护作用.     

应用降钙素对骨质疏松骨床中多孔表面羟基磷灰石植入体骨整合的影响

背景:研究表明降钙素具有提高骨量、骨质量,降低骨折发生的效果.目的:评价全身应用鲑鱼降钙素对多孔表面羟基磷灰石植入体骨整合的影响,及其在治疗骨质疏松症同时促进植入体生物学固定的能力.设计、时间及地点:随机对照实验,实验分别于2007-09/12和2008-03/05在中山大学动物实验中心和香港大学医学院矫形外科组织学实验室完成.材料:SPF级5月龄雌性SD大鼠30只,按随机数表随机分为3组,即假手术+羟基磷灰石棒组、卵巢切除+羟基磷灰石棒组、卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组,每组10只.方法:卵巢切除+羟基磷灰石棒组、卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组SD大鼠切除卵巢建立绝经后骨质疏松动物模型,假手术+羟基磷灰石棒组大鼠行假手术作为对照.在大鼠的胫骨平台处开孔植入多孔羟基磷灰石假体,卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组大鼠皮下注射鲑鱼降钙素[5U/(kg·d)]12周.主要观察指标:取带植入体的胫骨制备成薄片,运用骨组织计量学及双能射线骨密度检测仪,记录腰椎骨密度变化,观察假体周围的骨量并测量假体的骨结合率.结果:持续皮下注射鲑鱼降钙素,卵巢切除+降钙素+羟基磷灰石棒组大鼠的腰椎骨密度逐渐改善.应用降钙素处理后,大鼠平均骨整合面积比率提高了22.0%,较卵巢切除+羟基磷灰石棒组骨整合比率提高近1倍(t=9.665,P<0.05).结论:骨质疏松条件下,全身给予鲑鱼降钙素能提高骨床和植入体周围骨量、促进主体骨-植入体的骨整合.     

复合振动对卵巢切除大鼠骨质量的作用

背景:目前所使用的全身振动防治骨质疏松所需振动强度较大,人体不适感较强.作者设计了复合振动,前期实验发现复合振动可在更低强度下有效预防卵巢切除大鼠的骨密度下降. 目的:课题创新性提出低强度复合振动可维持生长期卵巢切除SD大鼠骨质量的理论假设,并期望实验结果加以验证.方法:SPF级4月龄雌性未育SD大鼠32只,随机分为正常对照组、卵巢切除组以及振动1、振动2组,每组大鼠均为8只.振动1组接振45～55Hz,0.05～0.1 g;振动2组接振45～55Hz,0.12～0.21 g.振动20min/次,1次/d,5次/周,休息间隔不大于2d.实验时间13周.观察振动干预前后大鼠活体骨密度,体外标本骨微结构以及生物力学性能. 结果与结论:卵巢切除组腰椎骨密度下降(P<0.05),而正常对照组与两振动组有显著性增加,股骨骨密度均增加,组间差异无显著性意义;卵巢切除各组骨微结构参数均明显下降,但振动2组骨小梁数量、骨小梁厚度、骨小梁间距、骨体积分数相对于卵巢切除组有显著改善:腰椎骨强度值两振动组较卵巢切除组显著增加(P=0.025、0.006),与正常对照组比较差异无显著性意义.实验结果证明,特定的复合振动舒适感较好的低强度下可以有效预防卵巢切除SD大鼠骨密度下降,减轻骨微结构破坏程度,维持骨强度,具有改善卵巢切除大鼠骨质量的作用和潜在的预防骨质疏松作用.     

Tiotidine and cimetidine--kinetics and dynamics

Tiotidine and cimetidine kinetics and dynamics were compared to assess mechanisms of the longer duration of effect of tiotidine in man. Both drugs has similar lag times for absorption. Tiotidine with a meal was more slowly absorbed than when fasting and was also more slowly absorbed than cimetidine with a meal. The elimination rates for both drugs did not differ; they were both approximately 2 to 3 hr. Oral doses of cimetidine achieved areas under the plasma concentration curve approximately three times that of tiotidine but these concentrations were only 1/10 as potent. The cimetidine concentration inducing 50% inhibition of food-stimulated gastric acid secretion was 0.41 +/- 0.04 whereas it was 0.04 +/- 0.003 microgram/ml for tiotidine. The effect of tiotidine lasted longer than that of cimetidine because the doses recommended for use in man resulted in higher concentrations in plasma relative to effective concentration than clinical doses of cimetidine.