人成釉细胞瘤中端粒酶活性与细胞周期素A的表达

目的　研究端粒酶hTERT基因在人成釉细胞瘤 (ameloblastoma,AB)中的表达及其与细胞周期素A (cyclinA)和相关因子 p53蛋白、增殖细胞核抗原 (proliferationcellnuclearantigen ,PCNA)的关系 ,探讨其临床生物学意义。方法　用免疫组化 (SP法 )和原位杂交技术分别检测了AB中细胞周期素A、p53蛋白和PCNA ,hTERTmRNA的表达 ,同时以正常口腔粘膜和牙源性角化囊肿(odontogenickeratocyst,OKC)为对照。 结果　在正常口腔粘膜中只有 1例hTERT阳性 (1 / 7) ,cyclinA、p53蛋白、PCNA三者之间表达有着相似共性。OKC中表达在基底或副基底层细胞核中 ,有1 4例hTERT阳性 (1 4 / 1 6) ,4例cyclinA阳性 (4/ 32 )、1 1例p53蛋白阳性 (1 1 / 2 5) ,5例PCNA阳性(5/ 9)。hTERTmRNA在AB中表达率为 94 4% (51 / 54) ,cyclinA为 66 7% (40 / 60 ) ,p53蛋白为85 7% (42 / 4 9) ,PCNA为 78 1 % (2 5/ 32 ) ,hTERT与cyclinA、p53蛋白、PCNA之间经Kendall相关分析 ,rs 分别为 0 91 4、0 848、0 80 4 ,P <0 0 5。结论　随着组织学分级增高 ,hTERTmRNA与cyclinA、p53蛋白、PCNA阳性率及信号强度均增高。在AB中端粒酶的活性表达与p53蛋白的蓄积有关 ,与细胞的增殖、分化有关 ,并受cyclinA调节 ,在S期中有较高表达     

端粒酶hTR和hTERT在人成釉细胞瘤中的表达

目的 探讨端粒酶hTR、hTERT基因表达在人成釉细胞瘤(ameloblastoma，AB)和牙源性角化囊肿(odontognic keratocysty，OKC)中的意义，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交方法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTR、hTERT mRNA的检测。结果94．4％(51／54)AB有h1、R、hTERTmRNA的表达，81．2％(13／16)、87．5％(14／16)OKC及2／7和1／7正常口腔粘膜分别有hTR、hTERTmRNA表达，3组相比差异有显著性。hTR与hTERT在AB中表达具有相关一致性。端粒酶表达与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，有角化退变样细胞及颗粒样细胞缺乏表达。结论 hTR、hTERT活化在AB和OKC的发生、发展中起重要作用，有可能成为判断AB预后的可靠指标。     

人成釉细胞瘤中蛋白激酶C-α表达与端粒酶活性的关系

目的:研究蛋白激酶C-α(PKCα)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转录酶(hTERT)的关系,探讨其临床生物学意义。方法:用原位杂交和免疫组化SP法分别检测了AB中hTERT mRNA及PKCα蛋白的表达。同时选取牙源性角化囊肿(OKC)16例,正常口腔黏膜7例做对比研究。结果:hTERT mRNA在AB中阳性率为94.4%(51/54),OKC中为87.5%(14/16)及1/7正常口腔黏膜有hTERT mRNA表达,组间差异有显著性(P<0.001)。伴随AB的复发与恶变hTERT的表达逐渐增高。PKCα在AB中阳性表达为85.1%(46/54),OKC中为56.2%(9/16),4/7正常口腔黏膜有PKCα阳性,组间差异有显著性(P<0.01),伴随AB的复发与恶变PKCα阳性表达也随之增高(P<0.05)。hTERT阳性表达与PKCα阳性表达之间经Kendall相关分析rk=1.000,P=0.005呈高度正相关。结论:hTERT与AB的发生发展及临床生物学行为相关,端粒酶活性的释放激活与PKCα的高表达可能正相关。     

端粒酶逆转录酶基因在牙源性病损中的表达

目的 研究成釉细胞瘤（ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿（odontogenic keratocyst,OKC)中hTERT mRNA的表达，探讨其在AB、OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法 采用mRNA原位杂交法对口腔颌骨内54例AB、16例OKC及7例口腔正常粘膜，进行了hTERT mRNA的检测。结果 94.4%(51/54)AB、87.5%(14/16)OKC及1／7正常口腔粘膜有hTERT mRNA表达，3组相比差异有显著性（P＜0.001)。hTERT与AB不同组织学类型、病损发生部位、单房与多房无关（P＞0.05)，在AB外周细胞及星网状多边形细胞中有表达，在角化退变样细胞及颗粒样细胞中缺乏表达。结论 ①hTERT活化在AB及OKC的发生、发展中起重要作用；②hTERT活性阳性率与病变中的细胞分化，临床生物学行为有关，随着组织学分级增高hTERT mRNA阳性率及信号强度均增高。     

人端粒酶逆转录酶与c-myc和刺激蛋白1在成釉细胞瘤中的表达

目的　研究原癌基因转录因子c-myc和刺激蛋白1(SP1)在人成釉细胞瘤(AB)中的表达及与端粒酶逆转 录酶(hTERT)的关系。方法　选取54例AB(原发31例,复发19例,恶变4例)存档蜡块,采用原位杂交检测AB中 c-myc mRNA、hTERTmRNA的表达,采用免疫组化SP法,检测AB中SP1蛋白的表达。结果　c-myc mRNA在AB中 阳性率为81·5%(44/54),hTERTmRNA为94·4%(51/54),SP1为83·3%(45/54);伴随AB的复发与恶变,3者表达强 度上升;相关性分析得出hTERT与c-myc之间存在相关性(rs=0·853,P<0·001),hTERT与SP1之间存在相关 性(rs=0·900,P<0·001)。结论　hTERT在AB中明显增加的活性可能与转录因子c-myc和SP1有关,3者在AB中 的表达趋势与AB的临床生物学特性相关。     

PCNA、p53和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌中的表达及意义

目的：探讨PCNA、p53蛋白和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌组织中的表达及临床意义。方法：采用原位杂交和免疫组化技术检测口腔黏膜单纯增生(HP)9例,轻度异常增生(LD)11例,中度异常增生(MD)10例,重度异常增生(原位癌CIS)9例,鳞癌(SCC)11例中p53蛋白、PCNA和hTERTmRNA的表达。结果：PCNA、p53和hTERT在口腔黏膜癌前病变和鳞癌中均有表达的异常。结论：hTERT、PCNA和p53与口腔黏膜癌前病变癌变的发生发展有关,它们的异常表达有助于口腔黏膜癌前病变和鳞癌的早期诊断,为研究癌前病变癌变的发生提供了一定的理论依据。     

p21WAF1、细胞周期蛋白E mRNA及p27KIP1蛋白在成釉细胞瘤中的表达

目的研究细胞周期蛋白E(cyclin E)、周期素依赖激酶抑制因子p21WAF1 mRNA和p27KIP1蛋白在人成釉细胞瘤(AB)中的表达,探讨其临床生物学意义.方法用原位杂交法分别检测了54例AB中cyclin E和 p21WAF1 mRNA,免疫组化SP法检测p27KIP1蛋白的表达.结果 cyclin E mRNA在AB浆核中有较强的表达,阳性率为66.7%(36/54),伴随AB的复发与恶变,cyclin E mRNA阳性率有所增加,原发AB、复发AB、恶性AB组间差异有统计学意义(P<0.05).牙源性角化囊肿(OKC)中cyclin E阳性率为50.0%(8/16).p21WAF1 mRNA在AB浆核中表达强度减弱且有较多的丢失,阳性率为22.6%(12/53),伴随AB复发与恶变阳性率表达下降.OKC p21WAF1阳性率为37.5%(6/16).p27KIP1蛋白在AB细胞核中大部分丢失,AB阳性率为16.7%(9/54),OKC 中p27KIP1阳性率为6.3%(1/16).AB中,cyclin E与p21WAF1 、p27KIP1均呈中度负相关(rk=-0.440, rk=-0.519, P=0.001).结论 AB的发生、浸润与细胞的增殖活性相关,且受cyclin E的高表达及p21WAF1 、 p27KIP1的低表达等多种因子共同调控.     

c-myc mRNA在成釉细胞瘤中的表达

目的:研究成釉细胞瘤(AB)和牙源性角化囊肿(OKC)中c-mycmRNA的表达,探讨c-myc在AB和OKC中的发生、发展及其生物学意义。方法:使用原位杂交法检测54例AB、16例OKC和7例口腔正常黏膜(NOM)组织中c-mycmRNA的表达,并将AB按原发、复发、恶变分组,结果使用χ2检验进行统计分析。结果:AB、OKC及NOM组织中c-mycmRNA的阳性表达率分别为81.5%(44/54)、75.0%(12/16)和14.3%(1/7),3组比较有显著性差异(χ2=15.488,P<0.05)。原发组AB中c-mycmRNA的阳性表达率为71.0%,复发组为94.7%,恶变组为100.0%,伴随原发、复发、恶变,差异有显著性(χ2=16.912,P﹤0.05)。结论:c-myc表达在AB的发生、发展中有重要作用;c-mycmRNA的表达与AB的临床生物学行为有关,伴随其生物学行为变化,c-mycmRNA表达增强;提示c-myc有可能成为评价预后的有效指标。     

人端粒酶逆转录酶与bcl-2在成釉细胞瘤中的表达

目的　研究成釉细胞瘤(AB)中人端粒酶逆转录酶(hTERT)和bcl-2的表达。方法　采用原位杂交或免疫组化方法对AB(分原发、复发和恶变组)中hTERTmRNA和bcl-2进行检测,并与正常口腔黏膜作对照。结果　 hTERTmRNA阳性表达率在AB中为94·4%,正常口腔黏膜中为14·3%(P<0·001);bcl-2蛋白阳性率在AB中为 88·0%,正常口腔黏膜中为44·4%(P<0·001)。从表达趋势看伴随着AB的复发与恶变,hTERTmRNA与bcl-2表达均增强(P<0·05)。结论　端粒酶和bcl-2可作为评价AB预后的有效指标。端粒酶的活化和bcl-2表达的增强在 AB的发生、发展中起着重要作用。     

细胞凋亡抑制基因bcl-2在牙源性病损中表达的研究

目的　观察凋亡相关基因bcl- 2在成釉细胞瘤 (Ameloblastoma,AB)和牙源性角化囊肿 (OdontogenicKeratocyst,OKC)中的表达 ,探讨其与AB和OKC的生物学意义。方法　应用免疫组化法 (S -P)检测 75例AB(原发 31例 ,复发 37例 ,恶变 7例 ) ,35例OKC及 9例口腔正常粘膜。同时采用原位杂交法检测了 2 0例AB(12例原发 ,8例复发 ) ,12例OKC中的bcl- 2mRNA。结果　 88% (6 6 / 75 )AB ,74.2 % (2 6 / 35 )OKC ,44 .4% (4 / 9)正常口腔粘膜有bcl- 2蛋白表达 ,三组间相比差异有显著性 (P <0 .0 0 1)。同样在原发组AB 77.4% (2 4/ 31) ,复发组AB94.5 % (35 / 37) ,恶性组AB10 0 % (7/ 7)。bcl- 2阳性率及阳性强度随着组织学分级变化而增加 ,组间统计 (P <0 .0 5 )。在 2 0例AB及 12例OKC中bcl- 2mRNA表达趋势与bcl- 2蛋白的表达是相一致的 (P <0 .0 1)。bcl- 2阳性表达与AB不同组织学分型 ,病损发生部位 ,肿瘤生长方式 (单房与多房 )无关 (P >0 .0 5 )。bcl- 2在病变中表达的特征为AB的外周层细胞为强表达 ,星网状层有阳性表达 ,随着细胞增殖分化呈实性片状时bcl- 2表达增强 ,角化退变样细胞 ,颗粒性变细胞表达缺失。OKC中多在基底层细胞中表达。结论　①bcl- 2在AB及OKC的发生、发展及细胞分化与增殖中起着重要作用。     

抑癌基因p16在成釉细胞瘤及牙源性角化囊肿中表达的研究

目的 研究成釉细胞瘤（Ameloblastoma,AB）中 p16蛋白及 p16 mRNA表达,探讨其生物学意义。方法 应用免疫组化方法（SP）检测40例 AB及牙源性角化囊肿（Odontogenic keratocyst,OKC）7例,基底细胞癌（Basal cell carcinoma,BCC）8例 p16蛋白的表达,同时用原位杂交法检测 p16 mRNA在20例 AB中表达。结果 40例AB,7例 OKC,8例 BCC,p16蛋白缺失表达分别为70％,85.7％,100％。p16mRNA缺失率80.5％,与蛋白缺失表达一致率53.8％。结论 （1）AB与 OKC的发生与p16蛋白缺失有关。（2）AB中原发与复发比,原发与恶变比 p16蛋白缺失率不同（P<0.05）。（3）AB及 OKC,BCC三种不同病变经统计学处理 P>0.05,末见明显相关性。（4）在 AB中p16蛋白与 p16 mRNA表达 P<0.05,具有一定相关性。     

p53 expression in odontogenic keratocyst epithelium

The expression of p53 protein was studied in odontogenic keratocysts (OKC, 11 solitary, 5 recurrent and 6 NBCCS cysts), radicular (RC, n=5) and dentigerous (DC, n=5) cysts, using a panel of antibodies to p53 (clone BP53-12, clone 1801 and polyclonal CM1) and a sensitive biotin-streptavidin method on paraffin embedded sections. Of the three antibodies tested, clone BP53-12 gave the most intense and consistent nuclear staining pattern. Clone 1801 and polyclonal CM1 stained only 38% and 71% OKC linings, respectively, but not RC and DC linings. However, BP53-12⁺ cells were detected in the epithelial linings of all cyst types. Quantification of BP53-12⁺ cells was performed by manual counting and by relating cell number to unit length of basement membrane as determined by TV image analysis. BP53-12⁺ cell counts in solitary OKC linings (25.5 ± 11.0 cells/mmBM) were significantly greater than those in DC (9.3 ± 4.9 cells/mmBM, P<0.01) and RC (6.7 ±2.6 cells/mmmBM. P<0.01) linings. The epithelial distribution of positive cells in OKC was predominantly suprabasal, which also varied from that of DC and RC linings (P<0.005). There were no detectable differences in BP53-12 reactivity between the different subtypes of OKC (i.e., solitary, recurrent and NBCCS-associated OKC: P>0.1). When data for the NBCCS-related OKC group were excluded, there was a significant correlation (r=0.55. P<0.01) between p53 and Ki67 labelling. To detect the presence of p53 gene mutations, genomic DNA, extracted from paraffin sections of OKC (4 solitary, 2 recurrent and 4 NBCCS cysts). RC (n=3) and normal oral mucosa (n=1), was subjected to a combination of polymerase chain reaction and single-stranded conformation polymorphism (PCR-SSCP) analysis for exons 5-10 of the p53 gene. Exon 4 was not analysed because of compromised DNA quality. No abnormality in banding patterns was found and all samples save results similar to DNA from known, sequenced, normal p53 gene controls. Absence of p53 mutations within exons 5–9 was confirmed by the direct sequencing of 2 fresh frozen OKC samples (1 solitary and 1 NBCCS cyst). These results suggest that over expression of p53 protein in OKC epithelium, detected by immunocytochemistry, is not reflected by alteration of the p53 gene and presumably reflects overproduction and/or stabilisation of normal p53 protein.