TRAIL及其相关受体与中枢神经系统感染

中枢神经系统（CNS）感染是各种生物性病原体侵犯CNS实质、被膜及血管等引起的急性或慢性炎症或非炎症性疾病。CNS抵御全身炎症的一个重要的结构就是血脑屏障（BBB）,但仍有一些免疫细胞可以通过BBB进入中枢参与炎症反应。具有免疫能力的细胞通过释放各种炎症介质或细胞因子参与炎症反应,如白介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族等,其中肿瘤坏死因子超家族一直为人们所关注。     

As2O3对TRAIL抑制人肺癌A549细胞增殖及调节DR4 mRNA、DR5 mRNA表达作用的影响

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）抑制人肺癌A549细胞增殖作用的影响及机制。方法体外培养A549细胞至对数生长期后随机分为As2O3组、TRAIL组、联合组及对照组,As2O3组分别加入1、10μmol／LAs2O3,TRAIL组加入100μg／LTRAIL,联合组分别加入1μmol／LAs2O3＋100μg/LTRAIL、10μmol／LAs2O3＋100μg／LTRAIL,对照组加入DMEM培养液。四组均继续培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长情况,计算细胞增殖抑制率（IR）;用RT-PCR法检测死亡受体4（DR4）mRNA、死亡受体5（DR5）mRNA表达变化。结果 联合组IR显著高于As2O3,组及TRAIL组,尤以作用48h和72h为著（P均〈0．05）;联合组DR4 mRNA和DR5 mRNA表达均明显强于As2O3组及TRAIL组（P均〈0.05）。结论 As2O3,可增强TRAIL对A549细胞增殖的抑制作用,机制可能为上调DR4m RNA和DR5 mRNA表达;此为肺癌的临床靶向治疗根供了依据．     

原代培养的恶性胶质瘤细胞表达死亡受体与TRAIL抵抗的关系

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体( TRAIL)是肿瘤坏死因子超家族中的一员,作为肿瘤治疗的新药,在美国已进入临床Ⅱ期试验阶段[1].但由于在肿瘤治疗研究中,TRAIL一直存在治疗抵抗,因此,本文对原代培养的恶性胶质瘤细胞进行研究,通过观察TRAIL的两种受体——死亡受体(DR)4、DR5在恶性胶质瘤细胞中的表达,探讨在原代培养肿瘤细胞中存在的TRAIL抵抗问题.     

敲低DR5表达对rmhTRAIL联合5-FU干预结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨敲低死亡受体5(DR5)表达对重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rmhTRAIL)联合5氟尿嘧啶(5-FU)抑制人结直肠癌(CRC)HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养人CRC HCT116细胞,用DR5 shRNA质粒转染,构建敲低DR5的CRC HCT116/shRNA细胞系(HCT11...     

紫杉醇对TRAIL诱导胃癌SGC7901细胞凋亡的影响

目的探讨紫杉醇对TRAIL诱导的胃癌SGC7901细胞凋亡的影响。方法采用MTT法测定细胞活力、采用流式细胞仪检测细胞凋亡、Western blot检测蛋白表达。结果在胃癌SGC7901细胞中,100 ng/ml的TRAIL导致轻度的增殖抑制和细胞凋亡,TRAIL（100 ng/ml）联合紫杉醇（7.19μg/ml,24 h的IC50剂量）引起明显的细胞增殖抑制和诱导凋亡作用（P〈0.05）。TRAIL单药没有改变死亡受体5（DR5）的蛋白表达,而7.19μg/ml紫杉醇作用于胃癌SGC7901细胞后明显上调了DR5的蛋白表达。TRAIL和紫杉醇联合作用后,也有DR5蛋白的明显上调。结论紫杉醇通过上调DR5的蛋白表达增强了TRAIL诱导的胃癌SGC7901细胞凋亡。     

TRAIL及其受体促凋亡机制与消化道肿瘤治疗的前景

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)因其选择性诱导肿瘤细胞凋亡的特点而受到关注.TRAIL促肿瘤细胞凋亡的机制及其受体对它的调控机制尚在探索中.目前,TRAIL及其受体已被广泛运用于消化道肿瘤的治疗研究中,不同的消化道肿瘤细胞株对TRAIL诱导的凋亡敏感性不同,某些细胞株对TRAIL耐药.克服肿瘤细胞对TRAIL的耐药,同时保护正常细胞免受伤害,充分发挥TRAIL选择性杀伤肿瘤细胞的优点,将使TRAIL在抗癌方面发挥积极的作用.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)受体的表达及TRAIL的抗癌作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性杀伤肿瘤细胞同时赦免正常细胞。最近有报道，化疗可加强TRAIL诱导肺癌细胞凋亡。本研究意在观察TRAIL受体(TRAILR)的表达及TRAIL与顺铂、紫杉醇联合作用的抑癌性。     

三氧化二砷及干扰素对U266细胞TRAIL和其受体表达的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）联合IFNα-2a治疗人多发性骨髓瘤（MM）的可行性。方法将人MM细胞系U266细胞株随机分为4组,空白对照组不行特殊处理,As2O3组加入As2O3,IFNα-2a组加入IFNα-2a,As2O3＋IFNα-2a组同时加入As2O3及IFNα-2a。孵育48h后用双标记流式细胞术检测细胞凋亡率,用流式细胞仪检测细胞肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）及其受体表达。结果As2O3＋IFNα-2a组细胞凋亡率、TRAIL及其受体表达均显著高于其他三组（P〈0．05）,空白对照组TRAIL及其受体表达均显著低于其他三组（P〈0．05）。结论As2O3,及IFNα-2a均可上调TRAIL及其受体表达,促进U266细胞凋亡,且两者有协同作用;此为临床治疗MM提供了新的思路。     

TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病相关性的研究进展

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)归属于肿瘤坏死因子超家族,与死亡受体结合后,激活caspase瀑布样级联反应,可诱导肿瘤细胞、转化细胞及病毒感染细胞发生凋亡,而对正常组织及细胞无凋亡诱导作用。TRAIL及其受体通过与HBV、细胞因子等的相互作用,在HBV相关慢性肝病的发病机制中发挥着重要作用。此外,体内TRAIL表达还与慢性乙型病毒性肝炎患者抗病毒治疗存在一定的关联性。本文对TRAIL及其受体与HBV相关慢性肝病的相关性进行综述,为进一步明确两者间的关系提供理论依据。     

白细胞介素-1受体相关激酶1在脂多糖诱导的足细胞损伤中的作用及其机制

目的 探讨白细胞介素(IL)-1受体相关激酶1(IRAK1)在脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法 将体外培养的永生化人足细胞分为5组：正常对照组(control组)、LPS组、LPS+空载转染组(LPS+si-NC组)、LPS+IRAK1干扰质粒转染组(LPS+si-IRAK1组)、LPS+肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)干扰质粒转染组(LPS+si-TRAF6组)。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测5组足细胞IRAK1和TRAF6蛋白及其mRNA的相对表达水平;采用免疫荧光检测5组足细胞紧密连接蛋白(ZO)-1、结蛋白(Desmin)的定位及相对表达水平;采用Western Blot检测5组足细胞IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、人核因子(NF)-κB抑制蛋白(IKB)α、NF-κB(p65)、磷酸化NF-κB(p-p65)蛋白的相对表达水平;采用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测IRAK1和TRAF6结合情况。结果 LPS组足细胞IRAK1、TRAF6蛋白及mRNA相对表达水平...     

肿瘤坏死因子相关配体与阿司匹林合用对肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响

目的 观察肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)与阿司匹林合用对肝癌SMMC-772l细胞的作用。方法 氨甲喋呤法检测SMMC-772l细胞存活分数；流式细胞仪检测SMMC-772l细胞的凋亡率和细胞周期；WesternBlot法检测凋亡相关基因的表达。结果 单用300ng／ml TRAIL、3、10mmol／L阿司匹林SMMC-772l细胞存活分数分别为82．76％、81．34％和71．29％，合用的存活分数分别为43．5％、37．8％。3、l0mmol／L阿司匹林与300ng／ml TRAIL合用诱导的细胞凋亡率明显大于单用两药诱导的细胞凋亡率之和(单用300ng／ml TRAIL、3mmol／L和10mmol／L阿司匹林凋亡率分别为21．25％、1．89％和6．08％，合用的凋亡率分别34．76％，38．56％)并使G0/Gl期细胞增加l3、10mmol／L的阿司匹林使SMMC-772l细胞Bcl-2的表达明显减弱，但对Bax的表达无影响。结论 TRAlL与阿司匹林合用对肝癌SMMC-772l细胞有明显的协同杀伤作用，其机制可能与阿司匹林抑制Bcl-2的表达有关。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体及其在脑缺血中的作用

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)在缺血等病理状态下被诱导,并介导脑缺血后的神经元凋亡.了解TRAIL在缺血脑组织中的上调机制,有望开发出新的卒中治疗方法.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体DR4在大肠癌的表达及意义

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体DR4在大肠癌组织中的表达情况及其与临床病理的关系．方法:采用免疫组化SP法和流式细胞分析方法对41例大肠癌组织和9例正常组织DR4的表达情况进行检测并比较．结果:DR4蛋白免疫组化染色定位于细胞膜和细胞浆,癌组织中阳性表达率为65．85％,明显高于正常组织的22．20％(P<0．05)．流式细胞分析该蛋白表达量,癌组织平均荧光指数为1．17±0．13,亦明显高于正常组织的1．00± 0．13(P<0．05)．不同分化程度的癌组织中DR4 蛋白表达无统计学差异,临床有淋巴结转移的癌组织与无淋巴结转移的癌组织DR4表达无统计学差异．结论:大肠癌组织中DR4表达上调,与组织分化程度无关．     

白介素1受体拮抗剂与呼吸系统疾病

细胞因子在多种肺疾病中起到重要作用.其中,白介素1(IL-1)通过介导炎症,免疫损伤及致纤维化作用在肺疾病的发展中扮演重要角色,而作为IL-1特异性的天然拮抗剂白介素1受体拮抗剂(IL-1RA)也越来越受到广泛重视.本文就IL-1RA和肺疾病的相关研究进展作一简要综述.     

选择性内皮素受体拮抗剂对大鼠心肌纤维化模型细胞因子表达的影响

目的 检测心肌纤维化调控因子的表达水平差异,探讨选择性内皮素受体拮抗剂对心肌纤维化细胞因子表达的影响.方法 选择健康成年雄性Wistar大鼠[（250±50）g]24只,随机分为3组,每组8只.A组（模型组）背部皮下注射异丙肾上腺素＋胃灌生理盐水;B组（安立生坦组）背部皮下注射异丙肾上腺素＋胃灌安立生坦;C组（对照组）注射生理盐水＋胃灌生理盐水.A组及B组大鼠背部皮下注射异丙肾上腺素5 mg/d,C组背部皮下注射等体积生理盐水,连续8d.第9天开始,B组给予安立生坦40 μg/d胃灌,1次/d,连续4周;C组及A组给予等体积生理盐水胃灌,1次/d,连续4周.4周后超声心动图评估心功能,观察心肌超微结构,明确各组模型细胞因子的表达.结果 M型超声心动图提示,模型组与对照组相比LVIDd、LVIDs显著增加,FS和EF显著降低（P＜0.05）.对照组较安立生坦组LVIDd、LVIDs有所增加（P＜0.05）,FS和EF略降低,但差异无统计学意义（P＞0.05）.B组和A组的的细胞因子表达有显著性差异,B组和C组的AngⅡ、TGF-β1、CTGF、ET-1细胞因子表达均明显小于A组,但差异无统计学意义;B组和C组HGF明显高于A组.病理结果提示,B组心肌细胞肿胀、断裂及胶原纤维增生程度明显低于A组.结论 选择性内皮素受体拮抗剂能够通过影响血管生成因子的表达,改变心肌纤维化进程.     

Flow cytometric measurement of tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand and its receptors in gastric epithelium and infiltrating mucosal lymphocytes in Helicobacter pylori-associated gastritis

BACKGROUND: Tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) and its receptors have recently been reported to be responsible for apoptotic signaling molecules. However, little is known about TRAIL-mediated apoptosis in the human glandular stomach. METHODS: Biopsies from 66 patients (28 Helicobacter pylori-negative, 38 H. pylori-positive) were investigated for phenotypic distribution of TRAIL and its receptors DR4/DR5 and DcR2 on mucosal epithelium, and infiltrating mucosal lymphocytes using flow cytometry. Apoptosis of the cells was examined by terminal deoxynucleotidyl transferase (TdT)-mediated dUTP nick and labeling (TUNEL). In addition, the phenotypic distribution of CD antigens on infiltrating major T- and B-lymphocytes were determined. RESULTS: Membrane-bound TRAIL and its receptors were constitutively expressed in all patients with high levels in the gastric mucosal epithelium. In particular, these protein molecules were overexpressed in mucosal lymphocytes coupled with increased proportions of CD19+ B cells, and CD3+ T cells bearing CD8+CD11b- and CD4+CD62L- surface phenotypes in H. pylori-positive gastric mucosa. The frequencies of apoptotic epithelium and infiltrating lymphocytes in H. pylori-associated gastritis were significantly greater than those of H. pylori-negative normal mucosa (P < 0.01). CONCLUSION: The present findings show that flow cytometric analysis is useful for detection of membrane-bound TRAIL and its receptors in gastric epithelium and infiltrating mucosal lymphocytes.     

转化生长因子-β1及肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因多态性与结节性甲状腺疾病相关性研究

目的 探讨转化生长因子(TGF)-β1 +869T/C和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)+1525 G/A的基因多态性在结节性甲状腺疾病患者中的分布及其相关性.方法 选择2007年9月至2009年9月于内蒙古科技大学包头医学院第一附属医院内分泌科确诊的结节性甲状腺疾病患者544例作为研究对象,其中包括136例结节性甲状腺肿患者(结甲组),132例甲状腺瘤患者(腺瘤组),146例Graves病患者(GD组),130例桥本甲状腺炎患者(HT组),同时另选择135例健康体检者作为对照组.所有对象清晨空腹采2ml静脉血,采用聚合酶链式反应-单链构象多态分析(PCR-SSCP)、聚合酶链式反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测TGF-β1+869 T/C和TRAIL+ 1525A/G基因多态性.结果 ①TGF-β1+869T/C:结甲组的CC基因型[47.0％ (64/136)]、C等位基因频率[63.2％(172/272)]均高于对照组[16.3％(22/135)、45.2％(122/270)],组间比较差异有统计学意义(x2=30.76、17.79,P均＜0.05).腺瘤组CC基因型[42.4％(56/132)]、C等位基因频率[59.1％(156/264)]均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(x2=24.40、10.34,P均＜0.05).携带C等位基因的人群患结节性甲状腺肿的风险是携带T等位基因的2.086倍[比值比(OR)=2.086;95％可信区间(CI):1.480～2.943];携带C等位基因的人群患腺瘤的风险是携带T等位基因的1.752倍(OR=1.752;95％CI:1.244～2.469).②TRAIL+1525G/A:结甲组GG基因型[40.4％(55/136)]、G等位基因频率[62.9％(171/272)]均高于对照组[11.9％(16/135)、48.5％(131/270)],组间比较差异有统计学意义(x2=9.176、11.307,P均＜0.05).腺瘤组GG基因型[53.0％(70/132)]及等位基因频率[73.1％(193/264)]均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(x2=9.806、33.82,P均＜0.05).携带G等位基因的人群患结节性甲状腺肿的风险是携带A等位基因的1.796倍(OR=1.796,95％CI:1.275～ 2.531);携带G等位基因的人群患腺瘤的风险是携带A等位基因的2.884倍(OR=2.884,95％CI:2.009 ～ 4.142).结论 TGF-β1+869T/C、TRAIL+1525G/A多态性可能与结节性甲状腺疾病的发病有关,TGF-β1的C等位基因和TRAIL的G等位基因可能是结节甲状腺疾病的易感基因.     

THP-1巨噬细胞热休克处理对单核细胞超化蛋白-1和白细胞介素表达的影响

目的:探讨热休克处理对THP-1巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、白细胞介素-8(IL-8)的影响以及热休克蛋白70(HSP70)、TLR4/P38MAPK和TLR4/NF-κB在其中的作用。方法:实验前用佛波酯孵育THP-1细胞,使其诱导分化成巨噬细胞,换无血清培养基培养后加处理因素。实验分成A组:常温对照组;B组:热休克处理组。THP-1巨噬细胞在42℃水浴受热1h,37℃恢复6h;C组:热休克+抗TLR4抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-TLR42h后同B组;D组:热休克+P38MAPK抑制剂组,THP-1巨噬细胞加入P38MAPK特异性抑制剂SB20358030min后同B组;E组:热休克+NF-κB抑制剂组:THP-1巨噬细胞加入NF-κB特异性抑制剂PDTC30min后同B组;F组:热休克+抗HSP702h抗体组,THP-1巨噬细胞加入anti-HSP702h后同B组。用RT-PCR或westernblot或ELISA检测各组细胞HSP70、TLR4、MCP-1、IL-8mRNA或蛋白的表达。结果:热休克处理上调THP-1巨噬细胞HSP70、TLR4、MCP-1和IL-8的表达。SB203580、anti-TLR4可完全抑制热休克诱导的MCP-1和IL-8表达上调,而PDTC、anti-HSP70对上述效应起部分抑制作用。结论:THP-1细胞经热休克处理后通过HSP70、TLR4/P38MAPK、TLR4/NF-κB途径上调MCP-1和IL-8的表达。     

Protective effect of recombinant human IL-1Ra on CCl4-induced acute liver injury in mice

AIM: To evaluate the effects of positive regulation of recombinant human interleukin 1 receptor antagonist (rhIL-1Ra) on hepatic tissue recovery in acute liver injury in mice induced by carbon tetrachloride (CCl 4 ). METHODS: Acute liver damage was induced by injecting 8-wk-old mice with CCl 4 1 mL/kg (1:3 dilution in corn oil) intraperitoneally (ip). Survival after liver failure was assessed by injecting 8-wk-old mice with a lethal dose of CCl 4 2.6 mL/kg (1:1 dilution in corn oil) ip. Mice were subcutaneo...