自体骨髓间充质干细胞移植改善重度眼表损伤临床观察

目的 评价自体骨髓间充质干细胞在严重眼表损伤移植后的治疗效果.方法 选取了化学烧伤4例,Stevens-Johnson综合征2例.骨髓间充质干细胞取自患者,细胞培养14 d后,经细胞检测鉴定为骨髓间充质干细胞,将细胞种植在羊膜表面,细胞扩增融合达90％后使用.手术切除表面结膜化组织达角膜缘外3 mm,将羊膜上培养的自体骨髓间充质干细胞移植到角膜及角膜缘表面,术后予抗生素、激素、人工泪液点眼治疗;病人定期随访,进行裂隙灯显微镜及印迹细胞学检查.结果 6例患眼均覆盖了含有自体骨髓间充质干细胞的羊膜片,术后1周角膜上皮完整.3例患者视力有改善,2例患者视力保持术前水平,1例患者视力下降.术后所有患者眼表面光滑程度有所改善,但新生血管没有明显减少.术后12周印迹细胞学检查结果,1例患者角膜表面可检测到上皮样细胞及杯状细胞.结论 自体骨髓间充质干细胞移植可以改善眼表条件,有潜在应用于治疗角膜缘功能障碍的价值.     

兔眼准分子激光原位角膜磨镶术后角膜层间上皮植入及处理的实验研究

目的利用兔眼准分子激光原位角膜磨镶术（LASIK）术后上皮植入的动物模型来探讨LASIK术后上皮植入的发病机制、自然转归、治疗及预防严重上皮植入的方法。方法对26只新西兰大白兔行LASIK治疗,人为地使角膜瓣轻度移位,做成上皮植入的动物模型。然后按Probst和Macha分级方法选取其中严重上皮植入（Ⅲ级）的20只兔（40只眼）随机分为A、B、C、D4组,每组10只眼,各组分别给予不同的处理方法,观察各种处理方法的效果。A组：作为观察组,不做处理,仅给以0.1%氟米龙滴眼液点眼;B组（单纯刮除组）：重新掀开角膜瓣,刮除角膜瓣基质面和基质床上植入的上皮,复位角膜瓣;C组（刮除＋50%酒精处理组）：刮除角膜瓣基质面和基质床上植入的上皮,50%酒精棉片贴敷1min,复位角膜瓣;D组（刮除＋角膜瓣边缘行准分子激光治疗性角膜切削术（PTK）＋角膜瓣边缘连续缝合组）,重新掀开角膜瓣,刮除角膜瓣基质面和基质床上植入的上皮,复位角膜瓣,然后用PTK以3mm直径光斑沿角膜瓣边缘切削,每处切削10个脉冲,共50～70脉冲,重点在角膜瓣的边缘与正常上皮交界处,最后以10-0尼龙线连续缝合角膜瓣边缘于基质床。各组随访3个月观察角膜水肿程度、上皮缺损和荧光素染色情况、角膜瓣融解情况,并行光镜检查。结果三种处理方法相比较B组和C组均有较高的复发率,与D组比较（P〈0.05）,差异有显著意义;术后1周荧光素染色D组和B、C两组比较（P〈0.01）,D组术后1周荧光素着色点较B、C组明显减少,差异有显著意义;术后1周角膜水肿情况,D组与B、C两组比较明显减轻（P〈0.01）,有显著意义;病理切片显示所有复发眼上皮植入均与角膜瓣周围的上皮层相连,并伴有角膜瓣边缘融解,处理成功者1周后可见,层间仍有微小的空隙,但瓣的边缘附着良好,层间镜下未见上皮细胞,3月后角膜恢复正常形态。结论对LASIK术后的严重角膜上皮植入,如果不及时、恰当的处理,很容易出现角膜瓣的融解,严重影响视力的恢复。故应于术前、术中积极预防,早期发现,及时处理,采取综合性治疗方法。刮除＋PTK＋角膜瓣边缘连续缝合是一种积极有效的处理严重上皮植入的方法,可以防止角膜瓣继续融解,能获得较好的手术效果。     

骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型视神经的保护作用

目的：探讨骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植对大鼠青光眼模型的神经保护作用。

方法：提取大鼠原代骨髓间充质干细胞并进行鉴定; Lewis大鼠分别随机分为3组：对照组、青光眼模型组和骨髓间充质干细胞组,并制作青光眼大鼠模型：左眼为实验眼(青光眼),右眼为对照眼,并进行鉴定; 然后进行骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植; HE染色观察视网膜组织形态; 免疫荧光法检测视网膜神经节细胞数量; TUNEL染色观察视网膜神经节细胞凋亡情况; Western blot检测视网膜组织中IGF1和BDNF蛋白表达情况。

结果：大鼠实验眼的眼内压均明显高于对照眼(P<0.01),表明青光眼大鼠模型均建造成功; 青光眼模型组大鼠视网膜神经纤维排列不整齐,视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度显著低于对照组(P<0.01),视网膜神经节细胞凋亡数量显著高于对照组(P<0.001); 骨髓间充质干细胞组大鼠视网膜神经纤维细胞排列较整齐,视网膜神经节细胞数量和视网膜厚度明显高于青光眼模型组(P<0.05),视网膜神经节细胞凋亡数量明显低于青光眼模型组(P<0.05); 青光眼模型组大鼠视网膜中IGF1和BDNF蛋白表达量明显低于对照组(P<0.01),骨髓间充质干细胞组大鼠的视网膜中IGF1和BDNF蛋白表达量高于青光眼模型组(P<0.05)。

结论：骨髓间充质干细胞玻璃体腔移植能改善大鼠青光眼,可以保护视网膜神经节细胞。     

兔同种异体角膜缘移植角膜印迹细胞学检测

目的 研究兔角膜缘干细胞缺乏和同种异体角膜缘移植后临床和角膜上皮表型的改变。方法 建立兔角膜缘干细胞缺乏模型,1个月后对治疗组进行同种异体角膜缘移植,术后联合使用免疫抑制剂。比较治疗组与非治疗组的临床表现和角膜表型的改变。结果 兔角膜缘干细胞缺乏后,角膜混浊,新生血管化,持续性上皮缺损;角膜上皮为结膜细胞表型。移植术后角膜上皮完整,新生血管减少,角膜透明度增加;上皮恢复角膜表型。结论 兔同种异体角膜缘移植联合术后使用免疫抑制剂是治疗角膜缘干细胞缺乏症的有效方法。印迹细胞学检查是角膜缘干细胞缺乏症诊断和角膜缘移植术后的评价手段。     

羊膜培养兔角膜缘上皮细胞及自体移植--角膜缘干细胞缺损的治疗

目的　探讨以人羊膜为载体培养兔角膜缘上皮细胞及其自体移植治疗全角膜缘干细胞缺损。方法　在8只兔右眼用正庚醇脱上皮和角膜缘环切的方法构建全角膜缘干细胞缺损模型2月。其中6只兔为实验组,活体取左眼角膜缘浅层小块,置羊膜上常规和气_液培养42天后进行自体移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损;2只兔为对照组,直接用解冻无细胞人羊膜移植治疗右眼角膜缘干细胞缺损。进行细胞和术眼活体观察、组织学观察和电镜观察。结果　角膜缘上皮细胞在羊膜上生长良好,形成复层,细胞间的联结结构存在,细胞与羊膜组织粘附牢固。实验组移植手术后角膜迅速上皮化,恢复角膜表面光滑和透明,组织学观察和电镜观察呈现生理角膜上皮层的结构特点。但眼睑闭合不全可导致手术失败。对照组术后出现角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变。结论　以羊膜为载体培养角膜缘上皮细胞后自体移植可有效地治疗角膜缘干细胞缺损导致的角膜病变。     

翼状胬肉切除联合带角膜缘干细胞的自体结膜移植术患者围术期角膜缘部上皮厚度的变化规律

目的 探究翼状胬肉切除联合带角膜干细胞的自体结膜移植术患者围术期角膜缘部上皮厚度变化规律.方法 选取行翼状胬肉切除联合带角膜缘干细胞的自体结膜移植术患者30例(30只眼)为观察组和健康体检者30例(30只眼)为对照组,对比两组研究对象的一般资料、对照组和观察组手术后不同时间点的鼻侧角膜缘上皮厚度、观察组手术后不同时间点的角膜荧光染色缺损面积.结果 观察组患者术后1、2、3、5、7天的鼻侧角膜缘内1mm的上皮厚度较对照组薄(P＜0.05),观察组患者术后1、2、3、5天鼻侧角膜缘内2mm的上皮厚度较对照组薄(P＜0.05),术后7天的鼻侧角膜缘上皮厚度和对照组之间的差异无统计学意义(P＞0.05);观察组术后1天的角膜荧光染色缺损面积为(39.29±22.68) mm2,术后2、3、5、7天的角膜荧光染色缺损面积均较前一时间点的角膜荧光染色缺损面积缩小(P＜0.05).结论 翼状胬肉切除联合带角膜缘干细胞的自体结膜移植术后角膜上皮缺损的愈合由缺损的周围向中央愈合,而其角膜缘部上皮的厚度则由角膜中央向周围逐渐恢复正常.     

骨髓间充质干细胞羊膜片移植治疗翼状胬肉的观察和护理

0引言翼状胬肉是常见眼表疾病,术后复发率高。我院眼科于2006-04/2008-10开展了“负载骨髓间充质干细胞羊膜片移植术治疗翼状胬肉”的临床课题,旨在观察骨髓间充质干细胞对角膜上皮修复和抑制胬肉复发的影响,现将临床观察情况及相关的护理措施报告如下。1对象和方法1.1对象经医院医学伦理委员会批准,有10例原发性巨大翼状胬肉患者接受了“负载自体骨髓间充质干细胞羊膜贴片移植术”,其中男7例7眼,女3例3眼,年龄42~60岁,均为鼻侧翼状,胬肉组织伸入角膜缘内超过5mm。负载自体骨髓间充质干细胞羊膜贴片的制备:无菌采集翼状胬肉患者骨髓,经分离、培养、扩增,将第3代骨髓间充质干细胞接种在羊膜上(取自     

大鼠骨髓间充质干细胞体外可诱导分化为角膜上皮细胞

目的:探讨骨髓间充质干细胞 (mesenchymal stem cell,MSC) 分化为角膜上皮细胞的可塑性及其重建角膜上皮的可能性.方法:用密度梯度离心法结合贴壁培养法分离纯化大鼠骨髓MSC,经体外与角膜基质细胞共培养诱导分化,免疫荧光法检测角膜上皮细胞特异标志物K12的表达.结果:体外培养的大鼠骨髓MSC表现出很强的增殖潜能,原代培养的骨髓MSC CD29免疫荧光染色阳性,CD34和CD45为阴性,符合骨髓MSC的特征.MSC与角膜基质细胞共培养1wk后大部分细胞分化为间质细胞,少部分细胞形态上相对偏小,免疫荧光检测这部分细胞表达角膜上皮细胞特异性标志角蛋白K12.结论:体外培养的MSC在角膜基质细胞的诱导下可横向分化为角膜上皮细胞.     

自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症

目的　探讨自体角膜缘干细胞移植在角膜缘功能衰竭症治疗中的作用。方法　将 83例 90眼初发性翼状胬肉、外伤性角膜缘板层缺损及角膜缘碱烧伤患者随机分为A、B组。A组为自体角膜缘干细胞移植组 (干细胞治疗组 ) 4 2例 4 5眼 ,其中 30眼翼状胬肉行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术 ,外伤性角膜板层损伤 10眼、角膜缘碱烧伤 5眼行自体角膜缘干细胞移植术 ;B组为传统单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层损伤、碱烧伤行结膜瓣移植术 (对照组 ) ,4 1例 4 5眼 ,其中翼状胬肉 30眼行单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层缺损 11眼、碱烧伤 4眼行结膜瓣移植术 ,术后观察角膜上皮修复时间、角膜缘新生血管、角膜透明度、泪膜破裂恢复时间以及胬肉复发率 ,术后随诊 6～ 2 4月。结果　A组术后角膜上皮修复时间 2～ 4d、BUT(6 .7± 0 .8)d ,无角膜缘新生血管生长 ,术后翼状胬肉复发率为 0 ,角膜透明 ;B组术后角膜上皮修复时间 5～ 7d ,BUT(7.9± 0 .5 )d ,角膜缘有 3～ 8支新血管生长 ,角膜有不同程度的云翳 ,翼状胬肉复发率 13.33% ,A、B 2组各项指标比较有统计学差异。结论　自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症是一种简单、安全、有效的手术方法。     

改良PRK与传统酒精去上皮瓣PRK治疗近视的疗效观察

目的 比较改良酒精去上皮瓣准分子激光角膜切削术(photorefractive keratectomy,PRK)与传统酒精去上皮瓣PRK矫正近视的效果.方法 选取近视患者136例(272眼),其中男64例(128眼),女72例(144眼),年龄19～40岁,平均27.2岁.等效球镜度数右眼(-7.53±1.23)D,左眼(-7.67±1.43)D;等效柱镜度数右眼(-1.13±0.47)D,左眼(-1.45±0.37)D:角膜中央厚度右眼(491.23±15.37)μm,左眼(489.31±14.21)μm;患者右眼行传统酒精棉片去上皮瓣的PRK(对照组),左眼行改良酒精去上皮瓣的PRK(试验组);术中取游离的角膜上皮瓣作HE染色,观察角膜上皮基底膜的连续性,以判定去除角膜上皮瓣的完整性.术后随访3个月,观察术后患者角膜上皮愈合时间、视力、屈光度.HE染色观察角膜上皮基底膜的完整性情况.结果 试验组术后角膜上皮愈合时间平均2.66 d,对照组术后角膜上皮愈合时间平均3.21 d,差异有统计学意义(P<0.05).术后第3天裸眼视力≥1.0者:试验组27眼占19.8%,对照组17眼占12.5%,差异有统计学意义(P<0.05);术后1个月、3个月试验组与对照组裸眼视力差异均无统计学意义(均为P>0.05).术后第3天:对照组等效球镜度数(-0.75±0.75)D,等效柱镜度数(-0.50±1.25)D;试验组等效球镜、柱镜度数分别为(-0.50±0.25)D、(-0.25±0.75)D,组间差异均有统计学意义(均为P<0.05).对照组连续的角膜上皮34例,不连续的角膜上皮102例,而试验组连续的角膜上皮115例,不连续的角膜上皮21例,差异有统计学意义(P<0.005).结论 改良酒精去上皮瓣PRK矫正近视有良好的治疗效果,且角膜上皮基底膜完整性较好,角膜上皮愈合时间较短,是一种安全、有效、预测性好的屈光手术.     

兔眼局部应用小檗碱溶液安全性的初步研究

目的研究兔眼部局部应用小檗碱溶液的安全性及其对兔眼角膜上皮修复的影响。方法实验研究。日本大耳白兔92只,随机数字表法分为一般情况组(32只兔,64只眼)和角膜损伤组(60只兔,60只眼)。一般情况组再用随机数字表法分为4个组,每组8只兔(16只眼),根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液,分为一般情况对照组及一般情况A、B、C组;双眼给药,每只眼先单次给药,观察72 h后再连续4周多次给药。角膜损伤组兔右眼制作角膜上皮损伤模型后,根据给予去离子水或0.5、1.0、1.5 mg/ml小檗碱溶液,分为角膜损伤对照组及角膜损伤A、B、C组,每组15只兔(15只眼),连续给药1周。一般情况组兔进行行为学观察,并应用Draize眼刺激性评分系统,对兔角膜、结膜、虹膜受累的面积、程度和反应进行评分,测量不同时间眼压,视网膜电图(ERG)检测b波振幅。角膜损伤组兔于角膜缺损后1、2、3、4、5、6、7 d观察角膜上皮缺损修复情况。所有兔停药后进行角膜组织病理学观察。兔泪液pH值比较采用配对t检验,Draize眼刺激性评分采用秩和检验,眼压、视网膜电图b波振幅及角膜上皮损伤面积和修复时间的多组比较采用方差分析及SNK-q检验。结果单次给药和多次给药后一般情况组兔均无明显异常行为。一般情况对照及A、B、C组在多次给药1、2、4周时Draize眼刺激评分差异均无统计学意义,其中一般情况C组的Draize眼刺激评分分别为7(0,12)、6(0,10)、6(0,16)分(χ^2=1.640,0.265,1.963,1.381;P>0.05)。一般情况对照及A、B、C组在多次给药前后不同时间的眼压差异均无统计学意义(F=0.065,0.292,0.015,0.041;P>0.05)。在多次给药前及给药后2、4周一般情况对照组的b波振幅分别为(127.75±17.12)、(129.18±15.83)、(128.81±13.58)μV,一般情况A组为(130.68±18.75)、(131.38±16.96)、(130.62±12.18)μV,一般情况B组为(128.00±16.74)、(128.44±16.64)、(129.06±16.16)μV,一般情况C组为(131.81±19.37)、(132.13±18.36)、(129.94±12.60)μV,各组在给药前后不同时间b波振幅差异均无统计学意义(F=0.037,0.011,0.017,0.702;P>0.05)。一般情况对照组与一般情况A、B、C组角膜组织病理学检查结果无明显差异。角膜损伤各组在不同时间的角膜上皮缺损面积有统计学意义(F=5.316,25.864,127.613;P<0.05),角膜损伤对照组与角膜损伤A、B、C组之间两两比较,角膜损伤C组的角膜上皮缺损面积明显大于其他3个组,差异具有统计学意义(q=5.153,10.313,6.976;P<0.05)。角膜损伤对照及A、B、C组的修复愈合时间为(83.0±1.85)、(82.9±2.07)、(83.7±2.09)和(101.6±2.20)h,角膜损伤C组角膜上皮缺损修复时间长,差异有统计学意义(F=301.437,P=0.000),角膜损伤对照组及角膜损伤A、B组之间比较,角膜上皮缺损修复时间差异无统计学意义(F=0.813,P=0.450);修复结束后,角膜损伤组之间角膜组织的病理学检查结果无明显差异。结论兔眼局部应用小檗碱溶液较安全,兔眼眼表未见明显的毒性反应,对视网膜未见明显影响。1.5 mg/ml浓度小檗碱溶液可延迟兔眼角膜上皮缺损修复,但对修复后的角膜组织结构的完整性无影响。     

Bandage contact lens and topical indomethacin for treating persistent corneal epithelial defects after vitreoretinal surgery

PURPOSE: Persistent corneal epithelial defect is a complication of vitreoretinal surgery. We assessed the efficacy of using bandage contact lenses in conjunction with topical indomethacin to facilitate wound healing and control pain safely. METHODS: Patients presenting with a persistent corneal epithelial defect after vitreoretinal surgery were assigned randomly to 1 of 2 treatment groups. Patients in both groups received a therapeutic contact lens and chloramphenicol eyedrops, whereas group A received indomethacin eyedrops and group B received placebo eyedrops. This study was conducted in a single-masked randomized fashion. Patients were evaluated daily to monitor subjective symptoms and to measure the maximum and minimum dimensions of the epithelial defects. RESULTS: Sixteen patients were analyzed. The subjective evaluation of photophobia, foreign-body sensation, and tearing on the day after starting treatment did not differ significantly between the 2 groups (P > 0.05), whereas the difference in the mean pain decrease between groups A and B at day 1 was significant (P = 0.01). The rate of epithelial healing quantified as the days needed to heal the epithelial defect did not differ between the 2 groups (P = 0.823). CONCLUSIONS: Our study showed that topical indomethacin ophthalmic solution improves comfort in patients with a persistent corneal epithelial defect (after vitreoretinal surgery) treated with bandage contact lenses.     

The effects of acetylcholine and propolis extract on corneal epithelial wound healing in rats.

PURPOSE: To investigate the effects of topical acetylcholine and topical administration of propolis, a natural beehive product, on corneal epithelial wound healing. METHODS: The whole corneal epithelium was debrided in 42 eyes of 21 rats by mechanical scraping with a dulled scalpel blade. Animals were divided into three groups. Group 1 received topical 1% water extract of propolis (WEP), group 2 received topical acetylcholine (ACh), and group 3 (control group) received topical phosphate-buffered saline, 6 times a day for 3 days, starting immediately after debridement. The area of the corneal epithelial defect was stained with fluorescein, photographed, and then measured every 12 h. The mean epithelial defect area and the mean percentage of epithelial defect remaining at each follow-up were compared between the groups. RESULTS: The mean epithelial defect area and the mean percentage of epithelial defect remaining at each time were significantly smaller (p < 0.001, p < 0.05, respectively) in the ACh and propolis groups as compared with control groups. There was no statistically significant difference between the propolis or ACh groups at any time (p > 0.05). At 72 h, the mean percentage of defect remaining was 2.58% in the ACh group, 1.3% in the propolis-treated group, and 8.68% in the control group. CONCLUSIONS: This study demonstrated that ACh and propolis facilitated corneal epithelial wound healing of rats. Although the mechanisms of the effect of propolis on wound healing and its clinical use still remain to be determined, ACh may have a place in the treatment of corneal epithelial injuries.     

Avastin对大鼠角膜结构和缺损愈合速率的影响

目的 评估贝伐单抗(bevacizumab,商品名Avastin)对大鼠角膜上皮缺损愈合速率及对正常大鼠角膜形态结构的影响.方法 健康雌性SD大鼠随机分为缺损组和正常组,缺损组包括实验A组和对照A组,均建立角膜上皮缺损模型,每组4只(8眼);正常组包括实验B组和对照B组,每组2只(4眼).上述实验组双眼均滴5 g·L-1的Avastin,对照组均滴生理盐水.A组于造模后12 h、18 h、24 h、36 h荧光素染色裂隙灯观察角膜上皮缺损修复情况,直至上皮缺损愈合;B组在连续滴眼7 d后做角膜组织病理学观察和透射电镜检查.结果 裂隙灯观察显示,在24 h内实验A组和对照A组角膜上皮愈合速率一致,36h时角膜上皮均已愈合;实验A组和对照A组在12 h、18 h、24 h角膜上皮缺损平均愈合速率比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05);正常组滴眼7 d后,与对照B组比较,实验B组的光镜和电镜检查未见角膜结构改变及炎性细胞浸润.结论 短期局部应用5 g·L-1Avastin对大鼠角膜上皮缺损愈合速率和正常角膜结构无影响.     

维生素A棕榈酸酯对兔机械性角膜上皮损伤愈合及结膜杯状细胞的作用研究

目的 探讨维生素A棕榈酸酯与重组牛碱性成纤维细胞生长因子对兔机械性角膜上皮损伤愈合及结膜上皮细胞、杯状细胞的作用.方法 实验研究.选取雄性新西兰大白兔120只,建立机械性角膜上皮损伤模型(角膜中央直径8 mm上皮刮除),随机数字表法分为4组,每组30只.A组使用盐酸林可霉素滴眼液,B组合用维生素A棕榈酸酯凝胶与盐酸林可霉素滴眼液,C组合用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶与盐酸林可霉素滴眼液,D组合用重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶与维生素A棕榈酸酯凝胶及盐酸林可霉素滴眼液.各组均于机械性角膜上皮损伤建模后当日开始用药.用法均为3次/d,1滴/次,观察时间为7 d.在模型建立第0、1、4、7天共4个时间点采用前节裂隙灯显微镜照相系统进行眼表照相,并计算角膜上皮损伤及其修复面积;在模型建立前及建立后第1、4、7天共4个时间点进行角结膜组织透射电镜检查、角膜光镜组织学检查及结膜印迹细胞学检查,对角膜上皮、结膜上皮细胞修复情况及结膜杯状细胞形态数量进行分析.采用方差分析、Tukey显著性检验等对数据进行统计学分析.结果 造模后第1天各组角膜上皮已愈合面积比较差异有统计学意义(F=17.663,P=0.000),角膜上皮已愈合面积A组(53.512±18.850)mm~2,B组(92.194±14.367)mm~2,C组(89.779±20.535)mm~2,D组(127.816±16.379)mm~2,B组与C组之间差异无统计学意义(P=0.995);结膜印迹细胞学检查显示,各组结膜杯状细胞数量(每740μm×550μm 面积)明显下降,A组(10.083±4.441)个,B组(10.667±3.551)个,C组(9.583±4.502)个,D组(9.167±5.606)个,但各组之间的差异无统计学意义(F=0.239,P=0.868).造模后第4天各组角膜上皮已愈合面积比较差异有统计学意义(F=37.665,P=0.000),角膜上皮已愈合面积A组(120.369±11.839)mm~2,B组(156.606±8.087)mm~2,C组(154.216±9.990)mm~2,D组(175.181±5.168)mm~2,B组与C组之间差异无统计学意义(P=0.968);结膜印迹细胞学检查显示,各组结膜杯状细胞数量(每740 μm ×550 μm 面积)开始恢复,A组(41.250±4.575)个,B组(56.083±6.374)个,C组(48.417±4.562)个,D组(61.917±5.017)个,各组之间比较差异有统计学意义(F=36.210,P=0.000).造模后第7天各组角膜上皮已愈合面积A组(177.472±3.585)mm~2,B组(186.715±3.022)mm~2,C组(182.293±3.158)mm~2,D组(194.106±2.176)mm~2,D组角膜上皮已愈合面积大于其他3组(P<0.05);结膜印迹细胞学检查显示,各组结膜杯状细胞数量(每 740 μm×550 μm面积)明显恢复,A组(63.167±11.488)个,B组(99.501±15.877)个,C组(82.015±9.175)个,D组(104.750±9.659)个,各组之间比较差异有统计学意义(F=30.312,P=0.000),B组与D组之间比较差异无统计学意义(P=0.700).透射电镜下观察角膜组织,维生素A棕榈酸酯和重组牛碱性成纤维细胞生长因子均能促进角膜上皮细胞之间连接的建立,维生素A棕榈酸酯具有保护角膜上皮细胞、防止上皮角化、促进角膜上皮增殖分化的作用.电镜检查结膜组织,可见B、D组新生的结膜杯状细胞数量较多,胞内分泌颗粒密集,与A、C组有明显差异,B、C、D组新生的结膜上皮细胞连接紧密.结论 维生素A棕榈酸酯和重组牛碱性成纤维细胞生长因子均能够有效促进机械性角膜上皮损伤的角膜上皮修复,合并用药时作用最明显.维生素A棕榈酸酯可促进结膜杯状细胞的再生,促进结膜上皮细胞间连接的建立,明显优于重组牛碱性成纤维细胞生长因子.     

白细胞介素-34在大鼠角膜移植排斥反应中的作用机制

目的　探讨白细胞介素-34（interleukin-34,IL-34）在大鼠角膜移植术后的表达情况以及在免疫排斥反应中的作用。方法　以SD大鼠为供体、Wistar大鼠为受体建立角膜移植实验模型。Wistar大鼠60只按照随机数字表法随机分为3组,B组为自体角膜移植组,C、D组行同种异体角膜移植术。另取10只为正常对照组（A组）。术后B、C组术眼滴泰利必妥眼液,D组术眼滴典必殊眼液。术后各组分别取10只大鼠判断四组角膜植片的存活情况并作生存分析。其余大鼠于术后14 d取术眼角膜植片,行组织病理学、免疫组织化学及RT-PCR检测。结果　生存分析结果提示,A组和B组角膜不发生排斥反应,D组角膜存活时间为（26.00±0.97）d,远高于C组（10.00±1.55）d（P<0.001）。HE染色结果显示,C组角膜组织各层有大量炎性细胞浸润以及新生血管形成,D组仅有少量炎性细胞、新生血管。免疫组织化学结果提示,IL-34蛋白在C组的表达量（0.089 4±0.005 6）明显高于A组（0.037 7±0.002 3）、B组（0.068 4±0.004 4）和D组（0.044 5±0.004 5）的表达量（F=145.21,P＜0.01）,且主要集中在上皮层和基质层。RT-PCR结果提示,IL-34、IL-1β、TNF-α、IL-17A的mRNA 在C组角膜组织中表达水平明显高于A组、B组和D组（均为P<0.05）。结论　IL-34参与了大鼠角膜移植术后的排斥反应,而典必殊可能通过抑制IL-34的表达及相关的信号通路,延缓排斥反应的进展。     

角膜切口对白内障手术后散光的影响

目的:观察沿角膜散光陡峭轴方向做透明角膜切口行白内障超声乳化联合人工晶状体植入术后散光和视力的变化。方法:根据IOL-Master检测结果选择角膜最大屈光力轴行3.0mm透明角膜切口做白内障超声乳化术42眼作为观察组(A组),常规颞上(右眼)、鼻上(左眼)3.0mm透明角膜切口白内障超声乳化术68眼作为对照组(B组)。检测术前、术后1d;1wk;1,3mo角膜散光和视力变化。结果:A组术前、术后1d;1wk;1,3mo视力分别为0.2±0.24,0.73±0.37,0.78±0.38,0.94±0.36,0.76±0.13;B组为0.17±0.2,0.82±0.3,0.84±0.2,0.77±0.26,0.8±0.36;差异无统计学意义(P>0.05)。A组术前、术后1d;1wk;1,3mo角膜散光度分别为1.01±0.10D,1.33±0.13D,1.15±0.14D,0.90±0.13D,0.89±0.12D;B组为0.95±0.13D,1.25±0.15D,1.07±0.13D,0.87±0.12D,0.82±0.11D。术后1d;1wk;1mo与术前相比散光度均无统计学意义(P>0.05)。两组术后3mo散光度与术前相比差异有统计学意义(P<0.05)。两组术后3mo裸眼视力≥0.8者分别为21眼(50%)和32眼(47%),两者相比有统计学意义(P<0.05)。结论:沿陡轴透明角膜切口白内障超声乳化联合人工晶状体植入术有助于患者视力提高及减少术后角膜散光。     

不同透明角膜切口导致的角膜屈光力动态变化对比

目的:探讨白内障超声乳化术中,颞侧和上方2.8mm透明角膜切口引起的角膜屈光变化。方法:收集老年性白内障患者60例60眼,分成A组32例32眼(颞侧角膜切口组),B组28例28眼(上方角膜切口组)。检查术前、术后1d;1wk;1mo和3mo的视力、手术源性散光和角膜地形图。结果:A,B两组术前散光分别为0.67±0.31D,0.70±0.35D。术后1d;1wk;1,3mo,A组的散光分别为0.85±0.41D,0.75±0.38D,0.70±0.35D,0.68±0.33D;B组分别为1.18±0.46D,0.98±0.39D,0.80±0.31D,0.73±0.33D。术后各阶段散光均高于术前。A组的散光小于B组(P<0.05)。术后第1d各组散光最大,以后逐渐减小。术后1d;1wk;1,3mo,A组的手术源性散光(surgicallyin-ducedastigmatism,SIA)分别为0.65±0.30D,0.50±0.28D,0.43±0.21D,0.40±0.18D;B组分别为0.85±0.38D,0.71±0.35D,0.62±0.25D,0.49±0.20D。术后1d,A组SIA较B组小(P<0.05);各组SIA均随时间推移而减小,但A组SIA始终小于B组(P<0.05)。结论:颞侧切口操作方便,术后的角膜散光状态和手术性散光均小于上方切口。     

Single and multilayer amniotic membrane transplantation for persistent corneal epithelial defect with and without stromal thinning and perforation

AIMS: To evaluate the efficacy of amniotic membrane transplantation (AMT) in persistent corneal epithelial defect with or without stromal thinning and corneal perforation. METHODS: 28 patients (28 eyes) with persistent corneal epithelial defect unresponsive to medical treatment were given preserved human amniotic membrane transplants. The patients were divided into three groups: group A, persistent corneal epithelial defect 10 eyes; group B, epithelial defect with stromal thinning 13 eyes; and group C, corneal perforation five eyes. AMT was performed using one layer in group A and multilayers in group B and C. The causes of persistent epithelial defect were neurotrophic keratopathy (24 eyes), limbal deficiency (six eyes), exposure keratopathy (four eyes), and Mooren's ulcer (one eye). RESULTS: Success was noted in 82.1% (23/28 eyes) in all groups, with 80% (8/10 eyes), 84.6% (11/13 eyes), and 80% (4/5 eyes) in groups A, B, and C respectively, with a mean follow up of 10.9 months (1-30 months). The mean epithelialisation time after AMT was 2.1 weeks. The healing times of groups B and C are also significantly shorter than group A (p=0.017 and 0.018, respectively). Corneal stromal thickness was significantly increased in all cases in groups B and C (p=0.006). Those with corneal perforation in group C were completely healed by multilayer AMT. There was no difference in the epithelialisation time between successful cases treated by a single operation (17 eyes) or repeated operation (six eyes). Vision improved in 18.9% (8/28 eyes) and worsened as a result of cataract formation in 2.3% (1/28 eyes). Failure was noted in 17.9% (5/28 eyes), because of corneal infection (two eyes), neurotrophic keratopathy with and without limbal deficiency (two eyes), and intractable corneal perforation (one eye). No patient developed major immediate postoperative complications or graft rejection. CONCLUSION: Amniotic membrane can successfully treat refractory corneal epithelial defect by promoting epithelial healing and thus prevent corneal perforation. It can be used as a treatment for corneal perforation by restoring corneal stromal thickness so that emergency penetrating keratoplasty can be avoided.     

来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的影响

目的探讨来氟米特活性代谢物A771726对大鼠角膜移植排斥反应的抑制作用。方法建立SD-Wistar大鼠同种异体穿透角膜移植模型,随机分组。A组为空白对照组;B、C、D组分别为0．5％、1．0％及2．0％A771726滴眼液组;E组为Wistar大鼠自体移植对照组。术后比较各组角膜植片排斥指数（RI）及植片存活时间,并对植片进行组织学及免疫组织化学染色观察。结果A组角膜植片存活时间为（9．38±2．26）d,B组（10．13±2．41）d,C组（17．57±1．72）d,D组（17．50±2．14）d,E组（〉28．00）d。A组、B组分别与C组、D组植片存活时间差异有统计学意义（P〈0．01）。移植术后10d,A组、B组角膜植片发生排斥反应,植片高表达IFN-γ及ICAM-1;术后20d,C组、D组植片发生排斥反应,植片IFN-γ及ICAM-1表达增高。结论局部应用A771726滴眼液能有效抑制角膜移植排斥反应。