Nogo受体在早期糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用

目的:探讨Nogo受体(nogo receptor,NgR)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜神经节细胞凋亡中的作用及机制。方法:链脲佐菌素诱导SD大鼠DM模型,实验分4组,对照组;DM组;siNgR组:DM大鼠玻璃体内给予NgR反义核苷酸序列;siRNA空白组:DM大鼠玻璃体内给予阴性核苷酸序列。1mo后TUNEL染色检测视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGC)凋亡,试剂盒检测视网膜丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,Western-blot检测视网膜NgR及caspase-3含量。结果:对照组、DM组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为3.74±0.49,7.21±0.96,6.41±1.34及4.02±0.53nmol/mg prot。与对照组相比,DM组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡增加,NgR及caspase-3表达上调,MDA含量升高(P<0.05),而siNgR组视网膜RGC数量、NgR及caspase-3表达、MDA含量较对照组均无明显变化(P>0.05)。结论:NgR表达增加是糖尿病RGC凋亡的重要原因之一,其机制可能与NgR诱导视网膜氧化应激、上调caspase-3表达有关。     

凋亡相关基因Bcl-2和Bax在糖尿病大鼠视网膜中的表达

目的 研究凋亡相关基因Bcl-2,Bax在早期糖尿病大鼠视网膜的表达，探讨其在糖尿病视网膜病变细胞凋亡中的作用。方法 选择健康成年Wistar大鼠40只，随机分成正常对照（CON），糖尿病1个月（DM1），3个月（DM3）及6个月（DM6）组，腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）诱发大鼠糖尿病，制备大鼠视网膜石蜡切片行免疫组化ABC法染色，并对染色结果进行计算机图像分析。结果 于CON及DM各组，Bax和Bcl-2二基因的蛋白均在视网膜血管表达，且随病程进展，其阳性反应强度逐渐增加，此外，Bcl-2阳性反应在DM3组于色素上皮细胞出现，在DM6组，再进一步扩大到视杆内节和节细胞，而Bax在DM6亦出现于节细胞。结论 凋亡相关基因Bcl-2和Bax在早期糖尿病大鼠视网膜血管和神经细胞的表达随病程的进展逐渐增强，二者在糖尿病视网膜细胞凋亡中起重要作用。     

细胞凋亡在STZ诱导糖尿病大鼠早期视网膜病变中的作用机制

目的观察链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠早期视网膜细胞凋亡情况及血管形态变化,分析细胞凋亡在糖尿病早期的作用机制。方法Wistar大鼠随机分为实验组及对照组各28只,实验组一次性腹腔注射1%STZ诱发糖尿病模型,成模后4、8、16、24周行视网膜形态学检测,TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果实验组大鼠早期视网膜血管无明显变化,24周时出现内界膜水肿,各层细胞排列不整,视网膜部分血管管径粗细不一。TUNEL阳性细胞最早于发病4周时出现在视网膜神经节细胞（RGCs）,数量呈时间信赖性,至24周时涉及到内核层的双极细胞、血管内皮细胞、周细胞等,凋亡指数与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。视神经节细胞层的凋亡指数明显高于内核层细胞（P〈0.05）。结论糖尿病所致的视网膜凋亡的损伤要远远早于微血管病变的发生,对抗凋亡的发生机制有可能成为预防及治疗糖尿病视网膜病变（DR）的新策略。     

凋亡相关信号通路在早期糖尿病视网膜病变中的研究进展

视网膜细胞凋亡是早期糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,
DR)的病理特征,而凋亡相关信号通路在此过程中起了关键作用。早期干预视网膜细胞凋亡的相关信号通路,保护视网膜细胞,对保存DR患者视功能和延缓DR的进展可能起重要作用。本文就迄今较为明确的与DR凋亡相关的信号通路,即线粒体通路、死亡受体通路、内质网应激通路等在早期糖尿病视网膜病变中的作用及研究进展作一综述。     

葛根素对糖尿病视网膜病变中Bcl-2表达的影响

目的:通过分析凋亡细胞及凋亡通路中的关键因子Bcl-2表达的变化,阐明葛根素抗凋亡的作用和机制。方法:取成年健康大鼠60只,随机分为空白对照组、糖尿病(DM)组和DM葛根素干预组,ip链脲佐菌素建立DM大鼠视网膜病变模型,3mo时处死大鼠观察各组视网膜组织病理变化,并应用RT-PCR对Bcl-2进行定量分析。结果:DM大鼠HE染色可见神经节细胞减少,内外颗粒层平均光密度减低,有空泡形成,细胞排列紊乱稀疏。葛根素干预组细胞结构好转,未见空泡。RT-PCR可见Bcl-2在葛根素干预组表达明显高于正常组和DM组(P<0.05)。结论:葛根素可改善视网膜组织病理学变化,并增强Bcl-2的表达。     

早期糖尿病小鼠血清和视网膜VEGF的表达及意义

目的探讨非肥胖性糖尿病小鼠血清和视网膜血管内皮生长因子（VEGF）的表达及二者之间的关系。方法非肥胖性糖尿病小鼠随机分为正常对照组（2、4、6、8、12周组，n=20）和糖尿病组（2、4、6、8、12周组，n=20），每组取4只小鼠摘除眼球取血并分离视网膜。ELISA方法检测血清及视网膜VEGF的表达。结果与正常对照组相比，糖尿病组血清及视网膜VEGF表达水平明显增高。结论糖尿病早期血清及视网膜VEGF表达增高，二者呈正相关，血清VEGF含量可作为判定糖尿病视网膜病变（DR）程度的参考指标。糖尿病早期视网膜VEGF的表达与多种因素有关。     

转化生长因子β2 mRNA在糖尿病大鼠视网膜中的表达

糖尿病视网膜病变 (ｄｉａｂｅｔｉｃｒｅｔｉｎｏｐａｔｈｙ ,ＤＲ)的基本病理过程是微循环障碍导致的视网膜微血管的变化 ,其发生、发展与细胞增殖调控失常有关[1] 。转化生长因子 β(ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒβ ,ＴＧＦ β)就是一种重要的多功能调节因子 ,它可抑制内皮细胞增殖 ,也可促进新生血管管腔形成 ,并趋化成纤维细胞和单核细胞浸润[2 ] 。迄今未见对ＤＲ不同时期的ＴＧＦ β2 表达进行研究的报道。本研究应用链脲佐菌素 (ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ ,ＳＴＺ)诱导大鼠糖尿病模型 ,动态观察视网膜中Ｔ…     

非肥胖性糖尿病小鼠的早期视网膜病变

目的:研究早期糖尿病视网膜病变的小鼠模型。方法:NOD小鼠随机分为正常对照组(4,12wk组,n=8)和糖尿病组(4,12wk组,n=12),每组取4wk和12wk处死小鼠,光镜和电镜观察视网膜结构的改变。结果:糖尿病组4wk时毛细血管基底膜增厚,可见内皮细胞、周细胞和神经节细胞超微结构改变。12wk时基底膜明显增厚,内皮细胞、周细胞和神经节细胞凋亡增加。结论:在糖尿病早期发生了视网膜神经元细胞超微结构病变和微血管病变。     

bFGF在糖尿病小鼠视网膜上的表达

bFGF是一种潜在的有丝分裂原,相对分子质量为17 000~24 000。近年研究表明,它在糖尿病性视网膜病变(diabeticretinopathy,DR)的发生发展中起重要作用,但国内尚缺乏应用免疫组化技术系统地观察bFGF在糖尿病视网膜中表达情况的报道。本实验以期为这方面的研究提供基础理论依据。     

早期非肥胖性糖尿病小鼠视网膜细胞凋亡

目的:观察糖尿病早期视网膜细胞凋亡情况.方法:NOD雌鼠随机分为糖尿病组(n=10)和正常对照组(n=10),每组在4 wk和12 wk处死小鼠,摘除眼球并制作组织切片,用TUNEL法检测视网膜细胞的凋亡.电镜观察视网膜超微结构改变.结果:视网膜神经元病变和微血管病变在糖尿病早期都有发生,糖尿病组视网膜神经节细胞和内皮细胞凋亡数目明显较对照组增多(P＜0.01).结论:视网膜神经元凋亡可促进视网膜神经元病变的发生和发展.     

糖尿病大鼠视网膜PEDF表达与神经退行性改变

目的观察色素上皮源性因子(pigment epithelium-derived factor,PEDF)在糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠视网膜中的表达以及视网膜神经细胞损伤情况,探讨早期糖尿病视网膜病变发病机制。方法 72只SD大鼠随机分为正常对照组、DM0.5个月组、DM1个月组、DM3个月组及DM5个月组。DM组大鼠利用链脲佐菌素建立DM模型。RT-PCR及Westernblot检测各组大鼠视网膜PEDFmRNA及蛋白的表达,TUNEL法行原位细胞凋亡检查,透射电镜观察视网膜超微结构改变。结果 PEDFmRNA及蛋白在正常大鼠视网膜的表达量分别为0.410±0.016、0.420±0.030;DM0.5个月组表达未见明显改变,分别为0.399±0.032、0.399±0.032,与正常对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05);DM1个月组PEDFmRNA及蛋白表达开始减少,分别为0.344±0.044、0.375±0.028,与正常对照组比较,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01);DM5个月组PEDFmRNA及蛋白表达量约为正常对照组的1/2,差异均有显著统计学意义(均为P<0.01)。TUNEL染色显示凋亡阳性细胞主要位于视网膜神经节细胞层,随病程延长逐渐增多。透射电镜显示DM0.5个月组仅视网膜神经纤维层发生轻微超微结构损伤,随病程延长,视网膜全层发生神经退行性病变。结论在发生临床可见的微血管病变前,DM大鼠已发生视网膜神经退行性改变,PEDF在视网膜的表达逐渐减少,提示其可能在早期糖尿病视网膜病变的发生、发展中发挥重要作用。     

早期糖尿病视网膜病变视网膜血管管径变化的初步研究

目的 探讨2型糖尿病患者早期糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)视网膜血管管径的变化及其相关因素。设计病例对照研究。研究对象北京德胜社区糖尿病眼病随访研究的85例2型糖尿病患者(51～80岁)及年龄性别匹配的26例无糖尿病者(51～78岁)作为对照。方法 85例2型糖尿病患者根据DR情况分成两组:无DR(NDR)组(51例)、轻中度非增生性糖尿病视网膜病变(Nonproliferative diabetic retinopathy,NPDR)组(34例),26例无糖尿病者为对照组。使用计算机软件测量视网膜中央动脉管径当量(CRAE)和视网膜中央静脉管径当量(CRVE)。使用光学断层成像技术测量黄斑中心凹视网膜厚度。同时记录最佳矫正视力(BCVA)、糖尿病病程、身高、体重、糖化血红蛋白等数据。比较三组间CRAE、CRVE的差异,并分析可能的相关因素。主要指标CRAE、CRVE。结果 无糖尿病对照组右眼、NDR组右眼和NPDR组病变严重眼的CRAE分别为(151.91±13.65)μm、(156.73±11.53)μm、(154.08±9.82)μm(F=1....     

2型糖尿病患者糖尿病视网膜病变相关危险因素分析

目的：探讨2型糖尿病( type 2 diabetic mellitus,T2DM)患者糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)相关危险因素。

方法：回顾性分析2013-01/2017-04收治入院的1 013例T2DM患者病例资料,将DR患者纳入观察组,非DR患者纳入对照组。分析T2DM患者DR相关危险因素。

结果：经调查统计DR发生率为27.74%(281/1 013)。经单因素分析,两组患者性别、年龄、T2DM病程、血压、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇、肌酐以及24h尿蛋白比较,差异有统计学意义(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析,男性、年龄>60岁、T2DM病程>10a以及血压、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇以及肌酐和24h尿蛋白表达异常均是T2DM患者并发DR的危险因素(P<0.05)。

结论：T2DM患者并发DR风险较高,男性、年龄>60岁、T2DM病程>10a以及血压、糖化血红蛋白、高密度脂蛋白胆固醇以及肌酐和24h尿蛋白的高水平表达均可能是诱发DR的危险因素。     

2型糖尿病初诊时视网膜病变的调查分析及中日比较

目的 调查２型糖尿病ＤＭ）初诊时糖尿病视网膜病变（ＤＲ）的患病率及危害因素,比较中国人与日本人ＤＲ患病率的异同。方法 应用日本ＤＭ研究机构设计的方案,以初诊ＤＭ患者为研究对象,调查分析ＤＲ的患病率及临床特征。结果 初诊时中日两组ＤＲ的患病率分别为１２．３０％和１４．４０％,ＤＲ与微量蛋白尿的患病率一致性仅为１１．２０％。两组的ＤＭ家族史,高血压、高血脂的患病率,体重指数（ＢＭＩ）,空腹胰岛素及胰岛素抵抗性存在着差异（Ｐ〈０．０１）。结论 ＤＭ初诊时已有较高的ＤＲ患病率,糖代谢异常与ＨｂＡｌｃ升高可能是ＤＲ的独立危害因素,提示的早期防治是阻止ＤＲ发生、发展的重要措施。     

Prevalence of diabetic retinopathy, proliferative diabetic retinopathy and non-proliferative diabetic retinopathy in Asian T2DM patients: a systematic review and Meta-analysis

AIM: To investigate the pooled prevalence of diabetic retinopathy (DR), proliferative DR (PDR) and nonproliferative DR (NPDR) in Asian type 2 diabetes mellitus (T2DM) patients. METHODS: We performed a systematic search online search using PubMed, EMBASE, Web of Science, the Cochrane Library, and China WeiPu Library to identify eligible studies that reported the prevalence of DR, PDR and NPDR in Asian T2DM patients. Effect size (ES) with 95% confidence interval (CI) was used to evaluate the prevalence of DR, PDR and NPDR in Asian T2DM patients, respectively. RESULTS: There were 41 references and 48 995 T2DM patients involved in this study. The prevalence of DR, PDR, and NPDR was 28%, 6%, and 27% in T2DM patients, respectively; while the prevalence of PDR and NPDR in DR patients was 17% and 83%, respectively. Subgroup analysis showed that prevalence of DR in T2DM patients from Singaporean, Indian, South Korean, Malaysian, Asian, and Chinese was 33%, 42%, 16%, 35%, 21% and 25%, respectively. In T2DM patients with NPDR from Indian, South Korean, Malaysian, Asian, Chinese, higher prevalence was found than that in PDR patients (45% vs 17%, 13% vs 3%, 30% vs 5%, 23% vs 2% and 22% vs 3%), as well as in DR patients (74% vs 26%, 81% vs 19%, 86% vs 14%, 92% vs 8% and 85% vs 15%). The prevalence of PDR in T2DM from India was higher than patients from other locations of Asia, and the same results were also observed in NPDR patients. CONCLUSION: In either T2DM Asian patients or DR patients, NPDR is more common than PDR. Based on our results, we should pay more attention to NPDR screening and management in T2DM patients, and we also recommend suitable interventions to prevent its progression.     

糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞凋亡及细胞形态学观察

目的观察糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞凋亡的发生时间、形态学特征及其随病程延长的发展变化。设计实验研究。研究对象Sprague—Dawley（SD）大鼠。方法健康雄性8周龄sD大鼠36只,18只建立糖尿病大鼠模型,18只为正常对照。于4、8、12周取视网膜组织,HE染色光镜下观察其病理结构改变,透射电镜观察视网膜神经细胞超微结构的变化,TUNEL法检测视网膜神经细胞的凋亡程度。主要指标视网膜光镜组织病理学、神经细胞超微结构及神经细胞凋亡情况。结果糖尿病组4周及8周时与同期对照相比光镜下大鼠视网膜组织病理学改变不明显,12周时大鼠视网膜较同期对照组视网膜神经节细胞数目减少,内核层相对变薄。糖尿病4、8、12周时大鼠视网膜透射电镜下可见视网膜神经细胞出现不同阶段的凋亡征象：胞浆浓缩、细胞体积缩小、染色质边聚、细胞核固缩、断裂等,主要发生于视网膜神经节细胞及内核层细胞,外核层细胞仅于糖尿病组12周时出现染色质浓集、分布不均。TUNEL检测发现糖尿病组4周时即出现视网膜神经细胞凋亡,主要发生于视网膜神经节细胞层及内核层,8周及12周时神经细胞凋亡细胞数量明显增多。结论糖尿病大鼠4周时即出现视网膜神经细胞凋亡,其凋亡程度与病程有关。（眼科,2010,19：125-129）     

褪黑素对糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞凋亡的影响

目的研究褪黑素对糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞凋亡的影响。方法将54只健康雄性8周龄SD大鼠,随机分为正常对照组、糖尿病组及褪黑素组各18只,各组再按4周、8周、12周3个时间点随机分为3小组,每组各6只大鼠。正常对照组不进行干预;糖尿病组大鼠给予一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg·kg-1,以诱导糖尿病大鼠模型;褪黑素组在成功建立糖尿病大鼠模型后给予褪黑素(10mg·kg-1·d-1)灌胃进行干预。每只大鼠取左眼眼球,制作石蜡组织病理学切片,应用TUNEL法检测视网膜神经细胞凋亡情况。结果正常对照组4周、8周、12周均未见视网膜神经细胞凋亡。糖尿病组4周可见视网膜神经细胞凋亡,糖尿病组8周和12周视网膜神经节细胞凋亡指数较同期正常对照组大鼠均明显升高,糖尿病组4周、8周、12周凋亡指数分别为(0.48±0.53)%、(5.66±2.10)%和(11.83±1.58)%,8周及12周与同期正常对照组相比差异有统计学意义(均为P=0.000)。褪黑素4周组与同期糖尿病组神经细胞凋亡情况无明显差异,褪黑素组8周及12周较同期糖尿病组神经细胞凋亡情况有不同程度的减轻,视网膜神经节细胞凋亡指数有所下降,褪黑素组4周、8周、12周凋亡指数分别为(0.30±0.74)%、(1.67±0.54)%和(7.73±0.95)%,褪黑素组8周及12周时与同期糖尿病组相比差异有统计学意义(均为P=0.000)。结论褪黑素能够通过减轻糖尿病大鼠早期视网膜神经细胞的凋亡,达到神经保护的目的。     

2型糖尿病住院患者糖尿病视网膜病变的相关危险因素分析

目的:探讨2型糖尿病视网膜病变(DR)的发病危险因素。方法:选择2014-01/06收治的2型糖尿病患者380例,分为DR组126例和对照组即糖尿病无视网膜病变(NDR)组254例,进行询问病史、体格检查、实验室检查和相关辅助检查,采用Logistic回归分析法对DR的相关危险因素进行单因素及多因素分析。结果:单因素Logistic回归分析结果表明,病程、收缩压、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白、尿蛋白、眼压、颈动脉内中膜厚度、周围神经病变是DR发生的相关危险因素。对以上因素进行多因素Logistic回归分析,只发现病程是DR发生的相关危险因素。结论:DR的发生是多因素共同作用的结果,病程是DR发生的独立危险因素。     

Expression of phosphorylated c-Jun N-terminal protein kinase (JNK) in experimental glaucoma in rats

To examine the expression of phosphorylated c-Jun N-terminal kinase (JNK) in cells in the retinal ganglion cell layer of glaucoma, intraocular pressure (IOP) of adult Wistar rats was elevated unilaterally by repeated trabecular argon laser photocoagulation 5 days after intracameral injection of India ink. Animals were euthanized after 3 days, and 1, 2, and 5 weeks of IOP elevation. Immunohistochemistry with specific antibodies against phosphorylated JNK was performed on retinas. Retrograde labeling using Fluorogold and fluorescence immunohistochemistry was performed on retinas 5 weeks after IOP elevation. TdT-mediated biotin-dUTP nick end labeling (TUNEL) was performed on the retinal sections to determine the rate of cell death. There was increased IOP (52.3%) from 3 days to 5 weeks after repeated trabecular laser photocoagulation. Mean number of TUNEL-positive cells in the retinal ganglion cell layer of eyes with experimental glaucoma was 0.43, 0.36, 0.57, and 0.19 per retinal section at 3 days, and 1, 2 and 5 weeks, respectively. No TUNEL-positive cells were noted in controls. In parallel to TUNEL, significantly increased numbers of phosphorylated JNK-labeled cells in the retinal ganglion cell layer were noted at 3 days (9.95 versus 4.15; P=0.005), 1 week (7.65 versus 4.00; P=0.006), 2 weeks (9.13 versus 4.48; P=0.032), and 5 weeks (8.06 versus 4.96; P=0.017) of IOP elevation when compared with contralateral control eyes. Fluorogold labeled RGCs were co-localized with increased phosphorylated JNK immunoreactivity. Some TUNEL-positive cells were phosphorylated JNK immuno-positive. Phosphorylation of JNK occurs in experimental glaucoma and may play a role in retinal ganglion cell death.