检测人血清IgD的酶联免疫吸附试验

本文采用亲和层析法，从ＩｇＤ型骨髓瘤病人血清中分离得到高纯度的ＩｇＤ，以此为抗原免疫动物得到ＩｇＤ抗血清，经再次纯化后用于ＥＬＩＳＡ方法中的包被抗体及酶标记抗体。本文还介绍了用ＥＬＩＳＡ双抗体夹心法测定人血清ＩｇＤ含量，该法灵敏度为０．０１～０．０５μｇ／ｍｌ，精确度试验结果：批内平均变异系数为５．５％，批间平均变异系数为８．５％。１００例正常人血清ＩｇＤ定量检测，其均值为７３．６３μｇ／ｍｌ，与文献报道７５．５６μｇ／ｍｌ值相吻合。木文建立了特异、敏感、快速、简便的血清内ＩｇＤ定量检测的ＥＬＩＳＡ方法，适合于临床应用。     

重组抗原Em18双抗原夹心酶联免疫吸附试验法检测泡球蚴抗体的建立及初步评价

目的 建立双抗原夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)检测泡状棘球蚴抗体的方法.方法 重组抗原Em18(rEm18)作为包被抗原,以辣根过氧化物酶(HRP)标记rEm18抗原为检测抗原,建立检测人血清中泡状棘球蚴抗体的双抗原夹心ELISA方法;应用方阵滴定法对包被抗原、酶标抗原等条件进行优化,并对该系统的灵敏性、特异性、重复性进行初步分析评价.结果 rEm18最佳包被浓度为2.5μg/mL,HRP标rEm18稀释度为1∶800.灵敏度为92％(46/50),特异性为94％(47/50),假阴性率为8％ (4/50),假阳性率为6％ (3/50),批内变异≤9.55％,批间变异≤14.79％,与Em2-ELISA试剂盒检测结果有良好的一致性.结论 本研究成功建立了快速检测泡球蚴特异性抗体的ELISA法,其可以用于人泡球蚴病的早期诊断.     

酶联免疫吸附试验检测HBcAg

<正> 外周血中一般不能检出RBcAg。为了更直接地反映外周血中是否有乙肝病毒存在,1976年,Takahashi等建立了以IAHA检测HBcAg的方法;1981年前后,陶其敏和Rizzette等分别建立了两种以放射免疫技     

双抗体夹心酶免疫试验测定因子Ⅷ相关抗原

血浆因子相关抗原(ⅧR∶Ag)是血管性假血友病因子(VWF、ⅧR)的抗原决定簇,其测定对血管性假血友病的诊断、血友病甲携带者的普查及临床高凝状态的检测等方面都十分有用。ⅧR∶Ag 测定一般是沿用 laurell 氏电免疫法,但此法耗时长、其灵敏度仅微克水平,对0.06u/ml 以下微量ⅧR∶Ag 即不能检出,故对轻度降低的病例易致漏检、对重度     

单克隆抗体在酶联免疫吸附试验检测单纯疱疹病毒抗原中的实用性

单纯疱疹病毒(HSV)可以引起人类的龈口炎、角膜结膜炎、坏死性脑炎等疾病,并且与宫颈癌、唇癌等有关。HSV感染的临床表现多样,给诊断和治疗造成一定困难。需要敏感、快速的实验室诊断方法。酶联免疫吸附试验(ELISA)已公认是检测HSV抗原一种敏感、特异、快速的方法。我们在实验研究中发现,使用免疫动物多价血清(PolyAb)     

用斑点酶联免疫吸附试验筛选抗恶性疟原虫单克隆抗体及检测恶性疟抗原

用培养的恶性疟原虫免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与Sp2/0细胞融合,以海南恶性疟病人感染血中疟原虫为抗原,用斑点酶联免疫吸附试验检测,共得到10个针对恶性疟原虫红内期抗原的单克隆抗体株。其中1     

用斑点酶联免疫吸附试验筛选抗恶性疟原虫单克隆抗体及检测恶性疟抗原

以往筛选抗恶性疟原虫(Pf)单克隆抗体(McAb)常用间接免疫荧光(IFA)或ELISA,以培养的原虫为检测抗原。所得McAb检测培养的Pf抗原效果较好,但检测病人血中Pf抗原时阳性率较低。抗原分析显示这些McAbs多是针对滋养体、裂殖体或裂殖子抗原。为了得到能用于诊断的抗环状体期McAb,我们直接以病人血中Pf为检测抗原,用斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)进行筛选,结果如下。     

酶联免疫吸附试验检测肾综合征出血热病毒抗原最佳条件探讨

本试验表明:以McAb为包被抗体,HRP-SPA为酶标结合物可以将非特异性反应降低接近于零,以患者血清为第二抗体可提变试验敏感性,以OPD或TMB为底物,每步作用60分钟或40分钟、每孔加样0.1ml或0.05ml,结果无明显区别。     

以聚合OT为抗原用酶联免疫吸附试验诊断活动性结核病的研究

结核病是长期危害人民健康的严重疾患之一。目前我国的疫情仍然比较严重。全国每年死于结核病的人数将近30万,比其它各种传染病死亡人数的总和还多。另外每年还有上百万人因患结核病而丧失劳动能力。因此,这种现状亟待改变。而现有诊断方法,对发现病人和确定诊断均不很理想。有的阳性检出率低,费时长(如:细菌学检查,开放性结核痰菌培养加涂片的阳性率,在有经验的专科医院不过40%;细菌培养需4—8周才能有结果);有的可靠性差(如X线)。特别是对肺外结核的确诊更为困难。故在1982年全国结核病防治学术会议上,提出了从免疫的角度寻找特异性血清学     

间接酶联免疫吸附试验检测不育者血清抗精子抗体

用ELISA法测定59对不育夫妇血清中ASA的阳性率。一方抗体阳性者19对(32.20%),其中女方阳性率占20.34%,男方占11.86%。生育组妇女和生育组男子血清抗体阳性率分别为3.33%及1.19%,与不育组妇女和不育组男子相比分别为P<0.05及P<0.01,均有显著意义。提示血清ASA的高低与是否生育有一定关系。     

酶联免疫吸附试验测定血清中抗变性DNA抗体

系统性红斑狼疮(SLE)是一种严重的自身免疫性疾病,临床表现复杂。一些不典型病例和早期病人常常不易确诊,并难与风湿性关节炎等病相鉴别,往往需要有实验室指标以助诊断,SLE患者血     

用血凝抑制试验和酶联免疫吸附试验检测单份血清诊断新近风疹感染

病毒感染的血清学诊断常规是检查双份血清,观察抗体效价是否升高。但有时由于错过急性期血清的采取,而使常规方法不能应用。妊娠早期风疹诊断非常重要,因之提出只检查恢复期血清进行血清学诊断的方     

用原位酶联免疫吸附法检测甲型肝炎病毒

目的　采用一种更加简单和敏感的检测方法对甲型肝炎病毒(HAV)进行检测。方法　用甲型肝炎病毒疫苗株H2M20K株和野毒株合34感染KMB17二倍体细胞,于96孔微量细胞板上培养,并在原位用HAV特异的单克隆抗体与单层细胞上的病毒结合,辣根过氧化物酶标记的抗鼠IgG作为指示,以细胞对照A值(OD)均数的18倍判为阳性。结果　病毒增殖动态显示,高峰期为20～25d,比ELISA终点滴定法提前4～6d;两种方法同时做13个样品的感染性滴度比较,结果差异无显著意义(t=1.13,P>0.05)。原位EIA较好地指示中和试验的结果;直接从12份粪便中分离病毒,经第一代培养检测有5份阳性。结论　EIA敏感性与ELISA法相似,由于原位EIA直接检测病毒细胞系统,有操作简单,重复性好等优点,可取代ELISA终点滴定法,同时也可望用于对其他病毒细胞系统的检测。     

用酶联免疫吸附试验诊断脑囊虫病

本文报道用酶联免疫吸附试验(ELISA)和补体结合试验(CF)对比检测患者血清中抗猪囊虫抗体。 一、试验方法 (一)酶联免疫吸附试验:从猪肉螩虫囊幼中取出囊虫液经处理后为抗原,将1:250稀释的抗原,包被聚苯乙烯塑料板,置37℃3小时,继放4℃过夜。洗涤后,加入待检稀释倍数的不同血清,同时作阴性、阳性及空白对照。加辣根过氧化物酶标记羊抗人IgG结合物,置37℃1小时。洗涤后,加底物溶液(联大茴香胺溶液),置37℃15分钟后,继     

诺氏猴疟原虫抗原酶联免疫吸附试验用于诊断疟疾

用E LISA作疟疾流行病学的血清学检测特异性强,敏感性与放射免疫相似。从感染弥猴或体外培养制备的恶性疟抗原作ELISA以诊断疟疾已获成功。由于恶性疟抗原在提纯方面尚存在问题,作者由诺氏猴疟原虫(P.knowlesi)裂殖体制备抗原,并评价用于诊断人体疟疾的可能性。     

酶联免疫吸附试验在丙型肝炎抗体检测中质量控制探讨

寻找适合酶联免疫吸附试验对丙型肝炎抗体检测的室内质量控制(internal quality controlling,IQC)的方法。采用Levey-Jennings质控图法、即刻法、加强即刻法(CV30%)对相同的20例数据进行处理。再用双质控法处理更换试剂批号和血清质控。和传统的质控方法比较,Levey-Jennings质控图法和即刻法对数据监控上均存在假失控和假在控。而加强即刻法显示良好效果。配合双质控法处理更换试剂批号和血清质控也很优秀。依据提出的质控方法进行室内质控,其当年室间质评结果全部合格。课题组的结论是控制变异系数的加强即刻法配合L-J质控图法更适用于酶联免疫吸附试验的IQC。     

酶联免疫吸附试验测定哮喘患者血清中特异性抗粉尘螨IgE的研究

本文介绍用酶联免疫吸附试验(简称ELISA)测定哮喘患者血清中特异性抗粉尘螨IgE,31例正常人全属阴性,而42例哮喘患者中有31例高于正常,与皮试符合率达80.9％,与EAST符合率达94.7％。本试验所需设备简单、便于推广、且对临床寻找过敏原,选择病人进行脱敏治疗有着重要意义。     

用酶联免疫吸附试验测定人血清Cu/Zn-SOD含量的研究及临床应用

本文报告一种具有高度特异性和敏感性的检测人血清SOD含量的免疫学方法,作者用辣根过氧化物酶标记人Cu/Zn-SOD抗血清IgG部份,经酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)测定了321例正常人及850例各种肾功能不全、肿瘤、糖尿病、高血压、肺部疾病患者血清中Cu/Zn-SOD含量,其中143例肾脏疾病患者血清Cu/Zn-SOD含量明显高于正常人。     

新疆出血热病毒的酶联免疫吸附试验

<正> 以往对新疆出血热(XHF)抗体的检测多采用中和、补结和反向间接血凝抑制试验,虽后者的敏感性优于前二者,但致敏血球的稳定性较差。我们于1983年改用ELISA双抗体夹心法和间接混合夹心法得到满意的结果。但为进一步测定多种动物