九种体外培养细胞系裸小鼠移植的研究

1969年 Rygaard 等首次将人结肠癌成功地在裸小鼠传代移植。此后,各种人癌手术标本、培养细胞及其它动物肿瘤在裸鼠移植成功的报道不断涌现,使之成为肿瘤研究的十分有价值的工具。我们从85年起,将人低分化鼻咽癌上皮细胞系移植于裸小鼠,建立了人低分化鼻咽癌裸鼠移植模型,同时又将其它数种人癌细胞系相继移植于裸小鼠,进行了人癌转移机制的初步研究。此外还应外单位要求接种了三种人及大鼠的培养细胞到裸小鼠,作可移植性鉴定。现就三年多来所做的九种培养细胞系裸鼠移植的实验研究报告如下。     

九种体外培养细胞系裸小鼠移植的研究

1969年Rygaard等首次将人结肠癌成功地在裸小鼠传代移植。此后,各种人癌手术标本、培养细胞及其它动物肿瘤在裸鼠移植成功的报道不断涌现,使之成为肿瘤研究的十分有价值的工具。我们从85年起,将人低分化鼻咽癌上皮细胞系移植于裸小鼠,建立了人低分化鼻咽癌裸鼠移植模型,同时又将其它数种人癌细胞系相继移植于裸小鼠,进行了人癌转移机制的初步研究。此外还应外单位要求接种了三种人及大鼠的培     

两株裸大鼠人肝癌模型的建立和生物学特性的观察

为了深入研究人肝癌,我室在大鼠肝癌模型研究的基础上,开展了裸鼠人体肝癌模型的研究。1982年建成我国第一株裸小鼠人肝癌移植模型。至今,5例人肝癌手术标本已成功移植于裸小鼠,并进行了肿瘤形态学、甲胎蛋白、铁蛋白、阳性扫描等多种研究。但裸小鼠人肝癌模型仍有一定的不足之处:1.所获瘤组织较少;2.所能提供的血量较少;3.裸小鼠难于施行某些外科小手术及肝内移植。为了弥补上述不足,我室于1983年引入     

卵巢癌裸鼠模型及其在实验研究中的应用

1969年丹麦学者Rygaard等首次报道将人结肠癌肿瘤移植于裸鼠获得成功，70年代初Giovanclla等相继将体外培养的人癌细胞系成功地移植于裸鼠，随着不同种类的人肿瘤组织及细胞株相继移植成功，裸小鼠已成为研究人肿瘤的理想动物模型和进行各项实验研究的重要工具。本文综述近年来卵巢癌裸鼠模型建立的影响因素及其在实验研究中的应用进展。     

六种人癌细胞系裸小鼠移植瘤转移的研究

人癌裸小鼠移植瘤是目前最接近人类肿瘤的人体外整体实验模型,但移植后能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。七十年代认为人癌裸鼠皮下移植多呈“良性”局限性生长,不发生或罕见转移。八十年代以来,有人癌裸鼠移植瘤转移的报道.并研究影响人癌裸鼠移植瘤转移     

人卵巢上皮癌裸鼠皮下移植瘤模型的建立及生物学性状的鉴定

目的　建立人卵巢上皮性癌裸鼠皮下移植瘤模型 ,为人卵巢癌的诊断及治疗诸方面提供理想的在体研究工具。方法体外培养人卵巢上皮癌细胞株SKOV 3 ,采用皮下注射方式接种至裸小鼠 ,待肿瘤直径达 0 .8cm～ 1.0cm时 ,将其切下剪成直径为1mm～ 2mm小块 ,再接种至另一裸鼠皮下进行传代。病理组织学检查或透射电镜观察肿瘤 ,并观察染色体特征 ,检测裸鼠血清和肿瘤组织中肿瘤标志物CA12 5、CEA、AFP的浓度。结果　成功地建立了人卵巢上皮性癌细胞株SKOV 3裸小鼠皮下移植瘤模型 ,并传至第二代 ,原代接种成功率为 69.2 % (2 7/ 3 9) ,鼠间传代移植成功率为 10 0 .0 % ,具备人肿瘤生物学特点 ,但未观察到转移行为。裸鼠血清CA 12 5浓度低 ,但在肿瘤冻融产物中较高。结论　建立的人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型具有人卵巢癌特征 ,可用于研究卵巢癌的生物学特性 ,为卵巢癌临床诊断及治疗研究提供有用工具。     

人胚鼻咽上皮裸小鼠移植初步报告

裸小鼠是胸腺先天性发育不良,细胞免疫功能缺损的小鼠,用其进行异种组织移植成功率高。从七十年代起,就有人进行了人正常组织的移植,并在此基础上开展了诱癌实验。Shimasato等用甲基胆蒽在人支气管的裸小鼠皮下移植模型上成功地诱发了鳞癌。为了深入进行鼻咽癌病因发病学和组织发生学的研究,我们开展了人胚鼻咽组织的裸小鼠移植,以期建立一个稳定的移植模型。现报告初步结果。     

荷人肺癌小鼠皮下移植瘤模型的建立及其生物学特性初探

背景与目的 为了更好地研究肺癌的治疗方法,建立起可靠的动物评价模型迫在眉睫.本研究的目的是研究建立肺癌原代组织块小鼠移植瘤模型的成熟方法,观察移植瘤的肿瘤生物学特性,在建模方法及基本特征等方面来证明该肿瘤模型的合理性和科学性,以期为肿瘤研究提供更有效的实验动物模型.方法 取人新鲜完整肺癌组织块移植于NOD/SCID小鼠右侧前肢肩背部皮下,或经皮肺穿刺取得肿瘤小块移植于BALB/c裸小鼠肾包膜下.待皮下肿瘤增大,将其切下传代于裸小鼠右侧前肢肩背部皮下.观察移植瘤生物学特性,并取肿瘤行常规病理切片及CEA、细胞角蛋白、Ki67免疫组化检测,将原代肿瘤和移植瘤进行EGFR 18-21外显子和K-Ras 12,59外显子基因检测,采用流式细胞仪检测移植瘤细胞的细胞周期.结果 本研究进行了11例肺癌组织的NOD/SCID小鼠和裸鼠建模,建成3例可多次成功传代的腺癌、小细胞肺癌和鳞癌模型.传代移植成功率高.荷瘤小鼠生长情况良好,生存期长.各代移植瘤模型的组织病理学及免疫组化表型、EGFR和K-Ras基因检测均与来源肺癌组织相一致.移植瘤细胞周期中S期延长,提示瘤细胞有增殖活性.结论 本研究在国内首次利用新鲜的完整肺癌组织建成了荷肺癌NOD/SCID小鼠及裸鼠模型,并传代移植于裸鼠,建模成功率为27%.移植瘤较好地保留了人原发肺癌的恶性特征及组织病理学、生物学特性,是一种接近人体的肺癌模型,可为肺癌研究提供良好的实验平台.     

人胃癌组织块裸鼠原位移植/转移模型的建立

 目的　用肿瘤组织块原位移植 ,建立人胃癌裸小鼠原位移植 /转移模型。方法　以人胃低分化腺癌细胞系接种于裸小鼠皮下 ,形成稳定传代的皮下移植瘤 ,再取该肿瘤组织块原位移植于裸鼠胃壁 ,观察移植肿瘤的生长状况、移植成功率和自发转移的发生率。结果　原位移植成功率 (成瘤率 )为 1 0 0 %、局部淋巴结转移率 1 0 0 %、远处淋巴结转移率 90 %、肝转移发生率为 75%。荷瘤鼠的中位生存期为 1 4周 ,晚期出现消瘦和全身衰竭。结论　该裸小鼠原位移植 /转移模型的生物学行为与人胃癌自然生长和转移过程相似 ,可作为一种有价值的工具用于胃癌转移机理和抗转移实验治疗的研究。     

四年中裸鼠人体鼻咽癌生物学特性的稳定性——流式细胞分析术的应用

鼻咽癌是我国最常见的头颈部恶性肿瘤之一,至今仍有不少关于鼻咽癌生物学特性的问题尚未清楚。 将人体恶性肿瘤组织移植到先天性无胸腺裸小鼠来形成裸鼠人体肿瘤已成为当前癌症研究工作的重要方法之一;它的主要基础是裸鼠人体肿瘤具有其原发人体肿瘤相     

人原发性肝恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立

目的建立人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型,为探讨肝恶性淋巴瘤发病机制和实验治疗提供工具。方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜瘤组织块植入裸小鼠肝实质内,观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移,并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学、染色体核型和流式细胞分析。结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型（HLBL-0102）。移植瘤的组织病理学为原发性肝恶性淋巴瘤（非霍奇金B细胞性）,免疫组织化学显示,CD19、CD20、CD45和CD79a阳性,CD3、CD7阴性,甲胎蛋白（AFP）阴性,乙型肝炎病毒表面抗原（HbsAg）阳性,乳酸脱氢酶（LDH）1267．5U／L。染色体众数范嗣55—59条;移植瘤细胞DNA指数值1．57～1．61,均为异倍体。HLBL-0102住裸鼠体内生长3年,已经传至37代,共移植裸鼠283只,其肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活牢均为100％。人原发性肝恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长,瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉,无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及。结论HLBL-0102是首次建苞成功的人原发性肝恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,完整地模拟了人原发性肝恶性淋巴瘤患者的自然临眯病理过程,为研究原发性肝恶件淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型。     

裸小鼠人胃癌原位移植模型的浸润转移特征

目的：建立裸小鼠人胃癌原位移植模型并观察其浸润转移特征。方法：BALB／C-nu／nu裸小鼠12只，以SGC-7901人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤为材料，通过手术将瘤组织块移植到裸小鼠胃壁，待动物自然灏临死亡时进行系统解剖。结果：原位移植瘤全都成功，且所有动物均出现局部浸润及淋巴结转移，肝脏转移率为66．7％，50“的荷瘤鼠发生腹水，肿瘤晚期与周围脏器发生粘连，荷瘤鼠死于全身衰竭，中位数生存期为18周。结论：裸小鼠人胃癌席位模型的浸润转移特性接近临床病人，是研究人胃癌浸润转移的理想手段。     

MicroRNA-129-2对人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠移植瘤的抑制及其可能的机制

目的：探讨microRNA-129-2（miR-129-2）对人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法：建立人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,按皮下注射的药剂将32只模型小鼠用随机数字表法分为4组：对照组（皮下注射生理盐水0.2 ml/d）、空白质粒组\[(50 μg/只,0.2 ml/次,1次/d\]、顺铂（cisplatin,DDP）阳性对照组(1 mg/kg, 0.2 ml/次,1次/d）、miR-129-2组\[(50 μg/只,0.2 ml/次,1次/d\],共治疗5周,记录裸鼠体质量、肿瘤体积、肿瘤质量。流式细胞术检测各组移植瘤组织S+G2-M期细胞比例,免疫组化和Western blotting方法检测miR-129-2对移植瘤组织中转录因子SOX4表达的影响。结果：成功建立CNE1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,治疗第22天起,miR-129-2组移植瘤的体积和质量均显著低于对照组和空白质粒组（P<0.01）,而与DDP组始终无明显差异（P>0.05）;5周后,miR-129-2组荷瘤小鼠的体质量显著高于其他3组（均P<001）。miR-129-2组移植瘤组织S+G2-M期细胞比例显著低于与对照组和空白质粒组（P<0.01）,与DDP组无显著差异（P>0.05）。移植瘤组织SOX4表达显著高于瘤旁组织, miR-129-2组和DDP组移植瘤组织内SOX4蛋白表达均较对照组显著降低（均P<0.01）,且miR-129-2组SOX4蛋白表达显著低于DDP组 （P<0.05）。结论： miR-129-2对人鼻咽癌CNE1细胞裸鼠皮下裸移植瘤的生长有明显的抑制作用,其机制可能与SOX4表达下调有关。     

CD44粘附分子在鼻咽癌中的表达与转移的关系

本实验用抗生笺素蛋白－生物素过氧化酶复合体方法检测了３０例转移及非转移鼻咽癌组织中肿瘤细胞的ＣＤ４４表达，同时检测了将克隆株裸鼠体内连续传代获得的裸移植瘤组织和回复培养细胞ＣＤ４４粘附分子的表达。ＣＤ４４粘附分子的表达与鼻咽癌裸鼠移植瘤转移关系密切。     

人小肠原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型的建立

目的 建立人小肠原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型,为探讨其发病机制和实验治疗提供工具。方法 将5例人小肠恶性淋巴瘤新鲜组织植入裸鼠小肠黏膜层内,观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移,并进行形态学(光镜、电镜、免疫组织化学)、染色体核型和流式细胞分析。结果 有3例原位移植获得成功。依据新的WHO恶性淋巴瘤分类标准,建成1株人小肠原发性(非霍奇金B细胞)恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型(HSIL-1)、1株人小肠原发性(非霍奇金B细胞)恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植高转移模型(HSIL-2)和1株人小肠原发性(非霍奇金T细胞)恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型(HSIL-3)。免疫组织化学显示,HSIL-1和HSIL-2的CD19、CD20、CD22、CD40、CD45、CD72阳性,HSIL-3的CD3、CD7、CD45RO阳性。染色体众数范围55～69条,为亚三倍体核型。移植瘤细胞的DNA指数为1.46～1.71,均为异倍体。HSIL-1、HSIL-2和HSIL-3分别传至32代、27代和21代,共移植裸鼠443只,其肿瘤移植生长率、液氮冻存复苏成活率和自发转移率均为100％。移植瘤在裸鼠小肠内呈侵袭性生长,破坏肠壁各层组织结构,出现血道、淋巴道及种植性转移。原位移植瘤与来源人小肠恶性淋巴瘤细胞一致。结论 3株人小肠原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型完整地模拟了人小肠原发性恶性淋巴瘤患者的临床过程,为研究小肠恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供了理想的动物模型。     

裸小鼠移植瘤的转移研究

Rygaad和Povlsen 1969年首次将人结肠癌在裸小鼠移植成功,迄今大多数人恶性肿瘤均可在裸小鼠移植。大量研究表明裸小鼠人癌移植瘤是目前人体外最接近人类肿瘤的整体实验模型。但人癌裸小鼠移植后,能否保持其原浸润转移的恶性生物学行为,研究结果意见不一。利用人癌裸小鼠移植瘤模型研究人类肿瘤     

裸小鼠体内人肝癌常位移植模型的研究

人肿瘤常位移植模型及研究肿瘤的重要方法，笔者用人肝癌裸鼠异位移植瘤株ＬＴＮＭ４，首先于１９９１年７月５日建立成功裸小鼠常位移植瘤模型。移植成功率９７．８％（８９／９１）。该模型保持了人肝癌的组织学主分泌代谢功能。应用于抗癌物肝靶向制剂的抑瘤作用研究中，显示常位移植瘤优于异位移植瘤，解决了抗肝癌靶向制剂应用研究的难题，为原发性肝癌的研究建立了最佳模型。     

人子宫内膜癌瘤组织块活体移植瘤动物模型的建立

目的:研究建立人子宫内膜癌的组织块活体移植动物模型方法。方法:将生长状态良好的Ishikawa细胞浓度调整至1.5×107/ml,接种于BALB/c nude裸鼠腋下皮下(Ⅰ组),Ⅱ组生理盐水对照,观察其生长情况,待成瘤5-10mm时建立成瘤模型,收集Ⅰ组瘤组织块行活体移植于Ⅲ组小鼠,留取组织标本行病理检查。结果:成功建立了人子宫内膜癌Ishikawa细胞的BABL/c裸鼠皮下移植瘤模型和活体移植瘤模型,形成的肿瘤具备人肿瘤生物学特点。结论:建立的瘤组织块活体二次传代移植人子宫内膜癌的BABL/c nude小鼠皮下移植瘤模型具有人子宫内膜癌特征且成瘤率更高,为大批建立子宫内膜癌单位模型研究子宫内膜癌的发病机制和药物治疗提供了实验动物模型。     

ELAM-1在鼻咽癌裸鼠移植瘤中的表达及其与转移的关系

目的 建立裸鼠鼻咽癌转移模型并探讨 E-选择素（ELAM-1）与鼻咽癌转移的相关性。方法 将鼻咽癌5-8F细胞悬液注射于裸鼠左后肢爪垫，观察裸鼠状态、成瘤情况并测量裸鼠体重及移植瘤长短径；采用连续病理切片苏木精-伊红染色观察移植瘤及转移情况，将16只人鼻咽癌荷瘤裸鼠分为转移组和非转移组；采用免疫组织化学法检测两组移植瘤组织中ELAM-1的表达。 结果 16只裸鼠均成瘤，成瘤率为100.0%，其中10只裸鼠出现转移瘤，转移率为62.5%。建模前，两组裸鼠体重差异无统计学意义［（13.83±0.56）g vs （14.62±0.30） g，t=1.026，P=0.071］。建模后4~7周，裸鼠瘤体体积呈指数增长，且转移组移植瘤增长速度较非转移组快，非转移组裸鼠瘤体体积小于转移组［（198.91 ± 163.29） mm³ vs （268.76 ±174.31） mm³，t=4.376，P=0.005］。ELAM-1在鼻咽癌裸鼠移植瘤、淋巴结转移灶及远处转移灶中的表达均为阳性，主要表达于细胞膜。转移组移植瘤光密度值高于非转移组（0.4497±0.0705 vs 0.0435±0.0082，t=4.388，P＝0.001）。结论 本研究成功构建稳定性好、转移率高的鼻咽癌裸鼠移植瘤转移模型，且ELAM-1在裸鼠移植瘤中高表达，可促进鼻咽癌裸鼠移植瘤生长和转移。