凋亡抑制蛋白Livin在胃癌组织中的表达

目的: 探讨一种新的凋亡抑制蛋白Livin的2种异构体在胃癌组织中的表达.方法: 采用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测胃癌组织中的Livin α和Livin β的表达.结果: 46例胃癌组织中Livin表达的阳性率为58.7%,相应的癌旁组织中Livin不表达或表达很低.结论: Livin的两种异构体在胃癌组织中的表达使其可能成为胃癌的分子标记物或胃癌治疗的新靶点.     

Survivin、caspase3蛋白在颊粘膜癌前病变中的表达及意义

目的 研究生存素survivin和半光酰天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteiny aspirate specific protease-3,caspase-3)在颊粘膜癌前病变中的表达情况,探讨凋亡抑制蛋白survivin和caspase-3在颊粘膜癌前病变中的表达特点及其相互关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测随机抽取的8例颊部正常组织、8例癌前病变石蜡切片中survivin和caspase 3的表达.结果 颊部癌前病变组中survivin表达阳性7例,阳性率为87.5%,Caspase 3阳性表达7例,阳性率为87.5%,8例正常组织中survivin 0表达,Caspase 3完全表达,survivin在颊粘膜正常组织和癌前病变中表达的差异有显著性统计学意义(p<0.05),Caspase 3的表达无显著性差异.结论 口腔颊颊粘膜正常组织和癌前病变中survivin过度表达,抑制细胞的凋亡可能导致癌前病变的发生.     

cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞凋亡的影响

目的 检测cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达及其与临床病理特征和胃癌细胞凋亡的关系.方法 采用免疫组化(SP)法检测45例胃癌组织、23例癌旁非典型增生组织及21例正常胃黏膜组织中cFLIP蛋白的表达;原位末端标记(TUNEL)法检测胃癌细胞凋亡情况.结果 cFLIP蛋白在胃癌组织中的表达在癌旁非典型增生组织及正常胃黏膜组织中的表达差异有显著性(P＜0.05).胃癌组织中出现cFLIP蛋白的高表达和细胞凋亡的低表达,cFLIP蛋白的表达水平与细胞凋亡指数(AI)成负相关(r=-0.0016,P<0.01).进一步分析发现,在胃癌组织中,肿瘤细胞分化越差,临床分期越晚,以及伴有癌细胞转移淋巴结中,cFLIP蛋白高表达.cFLIP蛋白的表达与患者年龄、组织学分型无关.结论 cFLIP蛋白与胃癌的发生、发展和转移密切相关并可能在抑制胃癌细胞凋亡中发挥重要作用.     

胃粘膜非典型增生的研究

胃粘膜非典型增生是胃癌前期病变，其发生与幽门螺杆菌感染、长期进食腌制食物有关。病理分型意见型不统一。ｒａｓ，ｃ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，ｂｃｌ－２，ｃ－ｅｒｂＢ－２，ｐ５３等基因在胃粘膜非典型增生，萎缩性胃炎，肠上皮化生、胃癌等疾病中的表达率各不相同。胃粘膜增殖细胞核抗原、端粒酶以及胃癌相关抗原ＭＧ７－Ａｇ的检测对胃粘膜非典型增生有一定的诊断价值，其治疗方法尚处于试验阶段。     

桑根酮C通过激活caspase3及caspase9诱导前列腺癌PC3细胞凋亡

目的 探讨桑根酮C诱导雄激素非依赖型前列腺癌PC3细胞凋亡的作用及其可能机制.方法 MTT法检测桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用:实验分6组,分别加入不同浓度的桑根酮C(0、1、5、20、50、100 μmol/L),作用24h检测细胞生长抑制率;20 μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、6、12、24、48h收集细胞,MTT法检测生长抑制率.流式细胞技术检测细胞凋亡率:20 μmol/L桑根酮C加入PC3细胞,分别于0、12、24、48 h收集细胞检测凋亡率.荧光分光光度计检测caspase 3的活性:20 μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在0、6、12、18、24、48 h收集细胞,检测caspases 3的活性.MTT法检测caspase 3、caspase 8及caspase 9抑制剂对桑根酮C抑制PC3细胞增殖的影响:实验分4组,分别加入DMSO、z-DEVD-fmk、z-LEHD-fmk及z-IETD-fmk,1h加入桑根酮C,24h收集细胞,MTT法计算细胞生长抑制率.结果 桑根酮C能抑制PC3细胞的增殖,呈剂量、时间依赖性,桑根酮C1、5、20、50、100 μmol/L作用PC3细胞24 h的增值抑制率分别为:4.86％、12.92％、52.34％、82.05％、87.45％,1mol/L组与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),其他组与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).半数有效抑制浓度IC50为18.76 μmol/L.20 μmol/L桑根酮C作用PC3细胞,分别在6、12、24、48、72 h检测增值抑制率为:10.57％、27.09％、51.88％、80.73％、87.99％,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).20 μmol/L桑根酮C可诱导PC3细胞的凋亡,在12、24、48 h的凋亡率分别为:7.43％、20.91％、37.56％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).检测caspases 3的活性18h比对照组增加了7.6倍,应用caspase抑制剂后发现caspase 3及caspase 9的抑制剂可显著逆转桑根酮C对PC3细胞增殖的抑制作用,抑制率从52.48％降到24.29％及28.81％,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.01).而caspase8抑制剂作用不明显,与对照组相比差异没有统计学意义(P＞0.05).结论 桑根酮C可通过激活caspase 3及caspase 9途径诱导PC3细胞的凋亡.     

叉头蛋白3蛋白表达与胃癌腹膜转移的关系

目的探讨胃癌组织中叉头蛋白3(Foxp3)蛋白表达与胃癌腹膜转移的关系。方法应用鼠抗人Foxp3单克隆抗体和免疫组织化学SP染色法检测65例同期伴腹膜转移的胃癌患者的癌旁正常胃黏膜、胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶中Foxp3蛋白的表达水平。结果胃癌原发灶、胃癌腹膜转移灶及淋巴结转移灶组织中Foxp3蛋白呈强表达,阳性表达率分别为78.5%(51/65)、80.0%(52/65)和88.6%(39/44);胃癌旁正常胃黏膜组织中Foxp3蛋白表达很弱,阳性表达率为20.0%(13/65)。正常胃黏膜组织中Foxp3蛋白阳性表达率显著低于胃癌原发灶、腹膜转移灶及淋巴结转移灶组织(P值均<0.05),后3者间的差异无统计学意义(P值均>0.05)。Foxp3蛋白的阳性表达率与年龄、性别不相关(P值均>0.05),而与组织分化程度呈负相关(r=-0.301,P=0.023),与有无淋巴结转移呈正相关(r=0.358,P=0.004)。结论胃癌病灶中的Foxp3蛋白可能成为术前判断胃癌是否发生腹膜转移及判断预后的生物学指标。     

FAM96B在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞增殖凋亡和侵袭转移的影响

目的 观察96序列相似的家庭成员B (FAM96B)在 80例胃癌组织中的表达,分析表达差异与胃癌生物学特征的关系,并探讨FAM96B对胃癌细胞系SGC7901细胞增殖及凋亡的影响.方法 采用Western blot法检测FAM96B蛋白在80例胃癌组织及配对癌旁组织中的表达,并统计分析 FAM96B蛋白表达差异与胃癌临床病理特征之间的相关性.采用脂质体转染法将含人FAM96B全长序列的pcDNA3. 1-myc-FAM96B重组质粒转染至SGC7901细胞中,分别采用 MTT法及流式细胞术检测FAM96B过表达对SGC7901增殖和凋亡的影响.结果 Western blot结果显示FAM96B在癌旁组织中的蛋白表达水平显著高于胃癌组织(t=25. 218,P<0.05).胃癌组织中FAM96B表达水平与胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期显著相关(P<0. 05),然而与患者性别、年龄、肿瘤大小无关.MTT细胞实验结果表明:FAM96B组吸光度值显著低于对照组(P<0. 05).细胞凋亡检测结果示:过表达FAM96B组的细胞凋亡率高于对照组(t=85. 585, P< 0. 05).结论 FAM96B在人胃癌组织中表达显著下降,其表达水平与胃癌的发生发展、侵袭转移有密切相关.过表达FAM96B可抑制胃癌细胞增殖且诱导其凋亡.     

MicroRNA-188在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探究microRNA-188在胃癌患者的组织和血液中的表达情况,并研究microRNA-188对人胃癌细胞MGC-803增殖和凋亡的影响及其机制。方法:收集10例胃癌患者的肿瘤组织和癌旁组织,应用PCR方法检测microRNA-545、microRNA-575、microRNA-1269、microRNA-99a、microRNA-452、microRNA-188的表达水平;收集健康志愿者和胃癌患者的血液,应用PCR检测这6种microRNAs的表达水平;应用转染试剂将microRNA-188 mimics、microRNA-188 AMO及其NC转染人胃癌细胞MGC-803, 24 h后应用CCK-8实验和TUNEL染色检测细胞增殖能力和凋亡情况;应用在线网站,预测microRNA-188的靶基因;应用q-PCR和Western blot实验检测microRNA-188对SIX1是否具有调控作用。结果:与癌旁组织相比, microRNA-188在胃癌组织中表达显著降低。与健康人相比,microRNA-188在胃癌患者的血液中显著降低。CCK-8结果显示,microRNA-188 mimics显著抑制胃癌细胞的增殖,而microRNA-188 AMO能够显著提高胃癌细胞的增殖能力。TUNEL染色结果显示,microRNA-188能够促进胃癌细胞发生凋亡,而其AMO能够显著抑制胃癌细胞发生凋亡。q-PCR和Western blot实验结果表明,microRNA-188能够显著降低其靶点SIX1的mRNA和蛋白水平。结论:MicroRNA-188在胃癌患者的组织和血液中的表达水平显著降低,且其通过抑制SIX1发挥调控胃癌细胞增殖和凋亡的作用。     

survivin和caspase-3在胃癌中的表达以及与凋亡的关系

目的 :评价胃癌组织中survivin和caspase 3的表达情况以及与细胞凋亡的关系。　方法 :采用免疫组化的方法 ,对 6 0例无术前放、化疗史的胃癌患者的手术标本进行survivin和caspase 3检测 ,并用原位末端标记法标记凋亡细胞。　结果 :survivin主要在癌组织中表达 ,caspase 3在正常粘膜的表达高于癌组织 ,survivin的表达强度与组织学分级及临床病理分期有关 (P <0 .0 1 )。caspase 3的表达强度随组织分化程度增高而增强 ;而在不同临床病理分期间无显著差异 (P >0 .75 )。胃癌组织中survivin与caspase 3的表达无直线相关关系 ,survivin阳性组凋亡指数明显低于阴性组 (P <0 .0 0 5 ) ,survivin阴性、caspase 3阳性组平均凋亡指数最高为 1 .5 3%。　结论 :survivin的表达与胃癌分化程度及病理分期密切相关 ,可作为提示预后的重要指标。survivin作为凋亡抑制蛋白显著抑制癌组织的细胞凋亡 ,但不能完全抑制caspase 3的表达     

IEX-1蛋白在胃癌中的表达及其意义

目的揭示即刻早期反应X-1（IEX-1）蛋白在胃癌组织及细胞系中的表达,探讨其对人胃癌细胞凋亡和增殖的影响。方法采用免疫组织化学法检测100 例胃镜活检标本中IEX-1 蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链反应和Western blot 检测人正常胃黏膜细胞GES-1 和胃癌细胞MKN28 中-1 基因和蛋白的表达,同时转染IEX-1 的过表达质粒pcDNA3-FLAG-IEX-1 和干扰质粒pLL3.7-si-IEX-1,分别采用流式细胞术及四甲基偶氮唑盐比色法检测IEX-1 对细胞周期、凋亡及增殖的影响。结果胃癌组织中IEX-1 蛋白表达水平高于正常胃组织和慢性胃炎组织（p <0.05）,且随着病情进展,IEX-1 表达水平有逐渐升高的趋势。相对于人正常胃黏膜细胞GES-1,胃癌细胞MKN28 中-1 基因和蛋白表达更高（p <0.05）。与对照组相比,IEX-1 蛋白表达增高后S 期细胞比例升高,G2期细胞比例降低,细胞增殖率升高,凋亡减少（p <0.05）,而干扰IEX-1 蛋白表达后,G1期细胞升高,G2期细胞比例下降,细胞增殖率下降,细胞凋亡增加（p <0.05）。结论IEX-1 蛋白在胃癌组织中呈高表达,在人胃癌细胞中上调IEX-1 蛋白能促进细胞增殖,发挥抗凋亡能力,干扰IEX-1 蛋白表达能阻滞细胞周期进程,并诱导凋亡。     

Pokemon蛋白在胃黏膜不典型增生和胃癌中的表达

目的探讨Pokemon蛋白在胃黏膜不典型增生与胃癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组化SP法检测43例不典型增生胃黏膜及87例胃癌组织中Pokemon蛋白的表达,以20例正常胃黏膜为对照。并联系临床病理学指标进行相关分析。结果在正常胃黏膜中Pokemon不表达或弱表达,在不典型增生胃黏膜中,阳性表达率及强度较正常胃黏膜有所增加,并随不典型增生程度的加重而增加,在胃癌组织中表达最高,并与胃癌分化程度及有无淋巴转移和肝转移有关。结论Pokemon蛋白的表达与胃癌的发生密切相关,可能参与了胃黏膜不典型增生及胃癌的发生发展。     

趋化因子受体CCR7在人胃癌组织中的表达及其与胃癌转移的关系

目的 观察趋化因子受体CCR7在胃癌中的表达情况,探讨CCR7表达水平与临床病理特征的关系.方法 采用Real-time PCR、Western blot及免疫组化技术检测CCR7在60例胃癌组织及相应的癌旁组织中的表达分布情况,并分析其表达差异与胃癌临床病理特征的相关性.结果 在60例胃癌组织中,CCR7在胃癌组织中mRNA表达水平均显著高于癌旁组织(P＜0.05).免疫组化检测结果显示CCR7在胃癌组织中的蛋白表达定位于细胞质,且CCR7蛋白在癌旁组织与胃癌组织中的阳性表达率分别为25％(15/60)和73％(44/60).经x2检验,两者差异有统计学意义(x2=24.000,P＜0.001).Western blot结果显示CCR7蛋白在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织.胃癌组织中CCR7表达水平在胃癌浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期差异有统计学意义(P＜0.05),在患者性别、年龄及肿瘤大小差异无统计学意义.结论 CCR7在胃癌组织中高表达,其表达水平与胃癌侵袭转移密切相关,有望成为胃癌治疗新靶点.     

宫颈鳞癌中erbB3、erbB4基因蛋白表达与细胞凋亡和增殖的相关性研究

目的　探讨原癌基因erbB3、erbB4与细胞凋亡和增殖的关系 ,为该基因作用机制提供新线索。方法　分别采用免疫组化、DNA末端标记技术 (TUNEL法 )和HE染色检测 5 0例宫颈鳞癌中erbB3、erbB4基因蛋白表达及凋亡指数 (AI)和增殖指数 (MI)。结果　宫颈鳞癌中erbB3、erbB4表达率分别为 5 2 .5 %、44 .0 % ,AI、MI值分别为 5 .5 0± 4.10和 4.18± 3 .63 ,随着宫颈癌恶性程度增高、FIGO分期进展、肿瘤体积的增大和淋巴结转移组 ,erbB3、erbB4表达率增加 ,AI、MI值也增高 ,但差异仅在分化程度上有显著性 (P <0 .0 5 )。双变量相关分析显示erbB3、erbB4表达与AI、MI间无相关性 (r3=0 .10 98、0 .12 3 6,r4 =0 .2 15 1、0 .2 5 5 8,P >0 .0 5 )。结论　erbB3、erbB4和AI、MI预示着宫颈癌恶性潜能 ,但不能作为预后有用指标。erbB3、erbB4的作用机制可能不是通过细胞凋亡或增殖起作用     

去乙酰化酶3在胃癌中的表达及其临床意义

目的 探讨胃癌组织中去乙酰化酶3（SIRT3）的表达情况及其临床意义. 方法 应用Western免疫印迹法检测20例胃癌组织及癌旁正常组织中SIRT3的表达水平;免疫组织化学方法检测50例胃癌石蜡切片中SIRT3的表达,分析其与病人年龄、性别、浸润深度、分化程度、淋巴结转移等临床病理特征的相关性. 结果 Western blot和免疫组化检测均显示SIRT3在胃癌组织中的表达较癌旁正常组织低,SIRT3的表达与胃癌浸润深度、分化程度、TNM分期相关（P＜0.05）,与性别、年龄、淋巴结转移无相关性（P＞0.05）. 结论 SIRT3在胃癌的发生和发展中可能起重要作用,它的表达水平有可能作为评估胃癌恶性程度的一个重要指标.     

肝细胞肝癌组织中p34cdc2表达及其与细胞增殖和凋亡的关系

目的:探讨p34cdc2激酶在肝细胞肝癌(HCC)发生发展中的作用及与增殖和凋亡的关系. 方法:收集HCC(含癌旁组织42)标本47例,正常肝组织10例,采用免疫组织化学SP法显示p34cdc2激酶的表达并结合增殖与凋亡特征进行分析. 结果:在肝癌组织、癌旁肝组织及正常肝组织细胞中p34cdc2表达定位于胞质中,在癌组织中过表达,差异有统计学意义(P＜0.01). 肝癌、癌旁组织中的增殖指数(PI)分别为(30.34±4.46)%与(27.88±5.89)%,肝癌组织明显高于癌旁组织(P＜0.05);肝癌、癌旁组织中的凋亡指数(AI)分别为(8.62±2.28)%与(7.38±2.61)%,肝癌组织明显高于癌旁组织(P＜0.05);p34cdc2蛋白阳性组PI(49.26±4.81)%显著高于阴性表达组(23.07±4.15)%(P＜0.05),AI无明显差异(P＞0.05). 结论:HCC中增殖与凋亡均高于癌旁组织;p34cdc2和PCNA一样可作为反映HCC细胞分裂增殖能力的有效指标;p34cdc2并不是HCC凋亡所必须.