浅谈ELISA试剂使用前的确认

<正>实验室对经血感染性指标进行有效检测,是确保临床输血安全的重要手段。酶联免疫检测(ELISA)是目前我国采供血机构用于献血者血液病毒筛查的法定方法。因此,ELISA试剂得到有效控制,是保证实验室测检结果准确的关键环节。而检测试剂有效性的确认是一项不可忽视的环节,在试剂使用前、中、后期都要对试剂的灵敏度、特异性进行严格监控,确保检测试剂的有效性。现将我们对ELISA试剂在使用前进行确认的一些粗浅认识介绍如下。     

化学发光酶免疫试剂与ELISA试剂检测HIV抗体的对比分析

经多年的检测实践和试剂评估结果证明,在种类繁多的HIV筛查试剂中,仍然缺乏其特异性和敏感性能与酶免试剂媲美的不同原理的艾滋病检测试剂。这对提高HIV检测质量无疑是一大缺陷。因此,寻求一种设计原理不同,敏感性和特异性均符合HIV筛查和复检试剂要求的艾滋病检测试剂,显得非常必要。本文对化学发光酶免疫试剂与ELISA试剂检测HIV抗体方法进行对比分析。     

血液筛查中使用ELISA试剂检测结果分析

在血液筛查中,检测试剂的质量是保证血液质量的重要因素之一。为了保证血液质量,本中心对在血液筛查中使用的ELISA检测试剂仍进行每批抽检,合格后用于实验室检测以保证血液检测结果准确,保证血液质量,现将结果报告如下。     

两种ELISA HIV—Ab检测试剂比较与分析

1 临床资料患者女性,52岁。心悸、气短、胸闷1周入院。BP21.3/13.3kPa(160/100mmHg),临床诊断:冠心病,原发性高血压。同步记录动脉心电图(图1),第1、2及最后一个心搏为窦性,MV1、MV3、MV5P波直立,心率60次/min,P-R间期0.16s,ST-T正常,Q-T间期0.36s,第3、4个心搏以房     

乙型肝炎血清学模式对ELISA一步法检测HBsAg的影响

目的：探讨ＥＬＩＳＡ一步法检测两种没乙型肝炎血清学模式标本ＨＢｓＡｇ吸光度值差异的原因。方法：将同一时间内ＥＬＩＳＡ一步法检测的所有ＨＢｓＡｇ阳性标本分为ＨＢｅＡｇ阳性与ＨＢｅＡｇ阴性两种血清学模式，地其原因清及１：１０稀释血清的ＨＢｓＡｇ吸光度值进行比较。结果：当用原血清ＥＬＩＳＡ一步法试验时，ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳笥标本的ＨＢｓＡｇ吸光度值显著低于ＨＢｓＡｇ阳性、ＨＢｅＡｇ阴性标本，而将标     

蟹类食物过敏症的ELISA检测试剂的研究

目的研制蟹类食物过敏症的ELISA检测试剂。方法以纯化的中华绒螯蟹主要过敏原蛋白为抗原包被酶标反应板,对包被浓度和包被时间、封闭液的种类与封闭时间、酶标二抗稀释度等ELISA条件进行优化。结果中华绒螯蟹过敏原蛋白的最适包被浓度为100ng/孔,最适包被条件为37℃孵育3h、4℃过夜;酶标反应板的封闭以20g·L-1脱脂奶粉、37℃孵育3h、4℃封闭过夜为最适条件;HRP标记羊抗人IgE抗体以1∶2 500为最适稀释度。结论以中华绒螯蟹的主要过敏原蛋白为诊断抗原制备ELISA检测试剂,适用于临床蟹类食物过敏症的实验诊断。     

临床诊断梅毒的两种试剂比较

梅毒是常见性病中对人体造成较大危害的一种。目前 ,临床上常用梅毒明胶颗粒凝集试验 (采用 TPPA试剂盒 )来进行梅毒的确认。最近 ,一种酶结合免疫吸附测定法( EL ISA)检测梅素的试剂盒上市。为了比较这两种试剂在敏感性和特异性方面的差异 ,我们用已确认的梅毒血清进行了检测。现将结果报告如下。1　材料和方法1.1　材料 :1血清 :来自于山西省性病门诊经 TPPA试剂盒确认的 3 0例阳性和 60例阴性血清。 2 EL ISA试剂盒 :北京金伟凯医学生物技术公司。实验原理 :所用包被抗原和酶标抗原均为精致的基因工程表达的梅毒螺旋体特异性抗原…     

HBsAg ELISA定性检测影响因素观察

HBsAg是诊断乙型病毒性肝炎的最早应用指标,也是健康体检必查项目之一,大多数医院实验室采用ELISA法检测。为了确保该试验结果准确、可比性强,我们用2ng/ml HBsAg质控血清对部分可能影响结果的因素进行观察,报告如下。     

ELISA检测乙肝标志物的影响因素浅析

酶联免疫吸附试验（ELISA法）是目前检验科常用的免疫学检测方法之一,其基本原理是将已知抗原（或抗体）结合到某种固相载体表面,测定时将受检标本（抗原或抗体）和酶标抗原（或抗体）按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,     

乙肝检测中的质量控制

目的：探究ELISA法检测HBVM中造成误差的因素与防范对策。方法：用规范化的标准要求来检查对照临检工作中常被忽视的疏漏点。结果：找出出现检测误差的主客观因素、提出相应的防范对象。结论：乙肝检测要把好质量控制关。     

影响ELISA检测HBsAg错误结果的分析

目前国内临床多采用ELISA双抗体夹心法检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)，其基本原理：将包抗体被在载体后作固相抗体，加入代测标本，使其中的相应抗原通过免疫学反应结合到固相抗体上，洗去未结合的抗原；加入酶结合物与结合在固相抗体的抗原反应，洗去未结合的游离结合物；加入酶(常用辣根过氧化物酶)的相应底物，固相化的酶催化底物反应生成有色反应。在一定温度下一定时间后终止反应，     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学检测的探讨

目的探讨荧光定量PCR法检测HBV-DNA与ELISA法乙肝免疫学指标的相关性。方法采用ELISA法和荧光定量PCR技术分别对353例乙型肝炎患者血清进行免疫学指标的检测及HBV-DNA的定量检测。结果 ELISA法呈大三阳组患者的HBV-DNA阳性率及病毒平均拷贝数均高于小三阳组;HBeAg(+)组的阳性率及病毒平均拷贝数高于HBeAg(-)组;HBeAb(+)组有较低的HBV-DNA阳性率及病毒平均拷贝数。结论 HBV-DNA的含量与乙肝免疫学检测结果具有相关性。临床上应注意两者联合应用。     

应用ELISA检测注意的事项

酶结合免疫吸附测定 (ELISA)法在临床检验中应用广泛 ,它以免疫学反应为基础 ,将抗原抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合 ,由于抗原抗体反应在一种固相载体———聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行 ,每加入一种试剂温育后 ,可通过洗涤除去多余的游离反应物 ,从而保证试验结果的特异性和稳定性。ELISA操作简便 ,灵敏度高 ,但是其步骤较多 ,尤其是做乙型肝炎标志物的检测 ,各个环节稍不注意就会影响结果 ,现将我们在工作中的体会作一总结。1准备1 1将新鲜标本放入37℃水温箱1～2小时 ,再用2500r/min离心10分钟 ,使血清析出 ,注意…     

标本久置对ELISA法检测乙型肝炎表面抗原结果的影响

目的：探讨标本久置对酶联免疫吸附试验（ ELISA）法检测乙型肝炎表面抗原（ HBsAg）的影响。方法筛选HBsAg强阳性45例、弱阳性45例及阴性标本30例,用ELISA法对同一标本进行当天和隔日检测,并进行检测结果比较。结果 HBsAg阴性标本和HBsAg强阳性标本,当天和隔日血清检测结果（阴性或阳性）全部一致,差异无统计学意义（ P﹥0.05）;HBsAg弱阳性标本,隔日检测出现2例假阴性,当天和隔日血清OD值比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论标本久置会使HBsAg的免疫活性减弱,从而遗漏乙型肝炎表面抗原（HBsAg）弱阳性者。     

两种ELISA试剂检测献血者HBsAg结果分析

目的 探讨两种酶联免疫吸附试验ELISA试剂检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)结果的符合程度,并分析差异性的原因.方法 分别采用两种ELISA试剂(国产试剂A和进口试剂B)对HBsAg进行检测,同时采用PCR对血清HBV-DNA进行定量分析.结果 试剂A检测HBsAg阳性率为0.734％(159/21661),试剂B检测HBsAg阳性率为0.946％(205/21661),两组差异有统计学意义,两种方法阳性符合率为77.56％,均存在不同程度的漏检和假阳性.结论 进口试剂检测HBsAg灵敏度较高,国产试剂特异性较好.     

乙型肝炎病毒RNA检测试剂国家参考品的研制

目的：研制乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)RNA检测试剂国家参考品并制定其质量标准。方法：收集并筛选HBV RNA阳性和阴性血浆样本,制备HBV RNA候选参考品。采用不同企业的试剂进行协作标定,根据协作标定结果确定参考品的组成及制定质量标准,并考察其均匀性和稳定性。结果：HBV RNA检测试剂国家参考品由10份阳性参考品,10份阴性参考品,1份精密度参考品和1份灵敏度参考品组成。其质量标准：阳性参考品符合率为10/10;阴性参考品符合率为10/10;精密度参考品稀释10倍后重复检测10次,要求CV≤5%;最低检测限不高于2.1×10³ U·mL^-1。该参考品均匀性符合要求,室温(25℃)放置3 d、反复冻融3次均未影响参考品的稳定性。结论：研制了首批HBV RNA检测试剂国家参考品并制定了质量标准,为相关试剂的质量控制和评价提供依据。     

ELISA法检测血清HBV抗-HBc假阳性的原因探讨

目的探讨ELISA法检测乙肝病毒抗-HBc假阳性的原因,提高检测结果的准确度。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）,对410例血清先用一种试剂初检,再用另外两种试剂复检,初检呈阳性反应而两种试剂复检均为阴性者判为假阳性。结果在406份标本中用科华公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本348份,用英科兴创公司的试剂检测到抗-HBc阳性标本355份,二者符合率为98.0%。其中52份标本用两种试剂复查后抗-HBc均为阴性,假阳性占12.8%。结论用ELISA竞争法检测抗-HBc,由于非特异吸附和操作等多种原因易出现假阳性结果,尤其对于抗-HBs和抗-HBc同时阳性的标本应该复查抗-HBc。     

两步法ELISA试剂评估结果的比较

目的 对不同厂家ELISA两步法试剂盒进行质量比较.方法 通过不同类型血样标本及小同检测项目对3种厂家的ELISA试剂进行灵敏性、特异性、精确性等的对比.结果 在不同检测项目中,三种试剂的检测结果间存在统计学差异(P<0.05).选用C试剂进行HBV和TP的检测,选用B试剂进行HCV和HIV的检测结果较好.结论 各厂家...     

保证临床乙肝ELISA法检测质量的体会

保证临床乙肝检验的质量是关系到诊断乙肝的准确性问题，下面根据本人多年实践，对检验质量保证谈点粗浅体会：一、检测方法的选择：乙肝检测的方法较多，有检测HBsAg的反向血凝试验法、乳胶凝集试验、检测乙肝五项标志“两对半”的酶联免疫（ELISA）及放免法等。这些检测方法．据文献报道及实践比较，其中准确性、重复性较好、灵敏度高的．首推放免法及酶联免疫法。但放免法的条件要求较高，一般中、小医院选择ELISA法，它具有准确性高，重复性好、方法较简便易行、快速灵敏等优点．二、对不同厂家生产的检测试剂、器材的选择很重要…