黑色素瘤细胞PRDM1对增殖、凋亡和迁移的影响

目的 探讨含PR/SET域蛋白1（PR/SET domain 1,PRDM1）表达水平与黑色素瘤患者预后的关系,及对黑色素瘤细胞增殖、凋亡、迁移的影响。方法 分别通过基因表达谱数据动态分析（gene expression profiling interactive analysis,GEPIA）数据库和基因集变异分析（gene seb camcer analysis,GSCA）数据库分析PRDM1在皮肤黑色素瘤和正常组织中的表达差异及其与预后的关系。在细胞水平上将黑色素瘤A375分为两组,分别为转染siRNA-PRDM1和空载对照siRNA-NC,流式细胞仪检测各组黑色素瘤A375细胞的增殖能力、抗凋亡能力,Transwell小室检测各组黑色素瘤A375细胞的迁移能力,Western blot法检测各组黑色素瘤A375细胞中MYC的表达水平。结果 与正常组织比较,PRDM1在黑色素瘤中低表达,且黑色素瘤患者中PRDM1高表达者预后较低表达者好。在黑色素瘤A375细胞中PRDM1低表达后细胞的增殖、迁移能力增强,而抗凋亡能力下降,且细胞中MYC蛋白表达水平上调（P<0.05）。结论 PRDM1在黑色素瘤组织中低表达,且与患者不良预后相关。PRDM1可能通过MYC抑制黑色素瘤细胞的增殖、迁移,促进凋亡,进而抑制黑色素瘤的生长发展。     

电磁辐射对Raji细胞损伤效应及其Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 比对性研究电磁脉冲(electromagnetic pulse,EMP)、S波段高功率微波(S-band high power microwave,S-HPM)和X波段高功率微波(X-band high power microwave,X-HPM)三种不同波段电磁辐射,对Raji细胞的损伤效应和对其Pax和Bcl...     

苦参碱诱导Raji细胞凋亡及其对Bcl-2表达的影响

目的:观察苦参碱(Matrine,Mat)对体外人淋巴瘤Raij细胞增殖及细胞凋亡的影响,探讨 Mat 诱导 Raji 细胞凋亡的作用机制.方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法观察Mat对Raji细胞增殖的影响;流式细胞术检测凋亡率;免疫细胞化学技术检测 Mat对Raji 细胞株 Bcl-2 蛋白表达的影响;RT-PCR法检测Bcl-2 mRNA表达.结果:不同浓度的 Mat 对 Raji 细胞均有一定的增殖抑制作用,且呈量效和时效关系;Mat能明显诱导Raji细胞凋亡;免疫细胞化学结果显示 Bcl-2 在实验组中的表达显著低于对照组.RT-PCR 显示 Bcl-2 mRNA 表达明显减弱,且随剂量增加越明显.结论:Mat 能抑制人淋巴瘤 Raji 细胞的增殖,促进细胞凋亡,其作用机制可能与下调 Bcl-2 表达有关.     

C-myc和Bcl-2在胆囊癌中的表达及意义

胆囊癌是我国消化道恶性肿瘤的常见类型,其治疗效果不佳的主要原因是其早期缺乏特异临床表现,而且胆囊癌患者的死亡率较高、预后差。近年来,人们对分子医学越来越重视,积极致力于从基因水平寻找一条早期发现、早期诊断、改善预后的有效途径。肿瘤的出现及其发展,凋亡调控失衡在其中扮演重要的角色。本文将在抑制凋亡抑制基因C-myc和Bcl-2在胆囊癌的异常表达及其在胆囊癌中的意义展开综述。     

三氧化二砷诱导食管癌细胞凋亡及其对C-myc和TGF-β1表达的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对体外培养的人食管癌细胞ECA109生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用.方法用MTT法检测药物效应,透射电镜及流式细胞仪观察As2O3处理ECA109细胞后细胞周期和细胞凋亡.细胞免疫化学观察As2O3处理ECA109细胞后,ECA109细胞TGF-β1及C-myc表达的变化.结果 （1）MTT法证实As2O3对ECA109细胞生长有抑制作用,并呈剂量-效应关系.（2）流式细胞仪分析As2O3处理ECA109细胞后细胞滞留于G2/M期,并可见凋亡峰.（3）透射电镜可见ECA109细胞出现典型的细胞凋亡及坏死形态学改变.（4）As2O3下调C-myc和TGF-β1表达.结论 As2O3对人食管癌细胞ECA109有抑制作用,其抑制作用可能通过下调C-myc基因表达,诱导食管癌细胞凋亡和坏死、阻抑细胞周期进程,抑制ECA109细胞增殖.同时通过下调TGF-β1表达阻止食管癌的恶性进程.     

c-Myc、Bcl-2和Bcl-6蛋白表达对原发中枢神经系统淋巴瘤的治疗选择和预后影响

目的 探讨c-Myc、Bcl-2和Bcl-6蛋白表达对原发中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous system lymphoma,PCNSL)的预后影响及在治疗方案选择上的指导意义。方法 回顾性分析56例PCNSL患者的临床资料,对其病理组织进行免疫组织化学染色(IHC)检测c-Myc、Bcl-2、Bcl-6、CD20、CD10及Mum-1,采用Kaplan-Meier法和COX多因素回归模型进行生存及预后分析,分析上述蛋白表达与预后及治疗方案选择的关系。结果 56例PCNSL患者中位总生存时间(OS)25个月,2年生存率为50.0%。COX多因素分析发现,Bcl-2蛋白阳性、c-Myc/Bcl-2蛋白双表达及未予HD-MTX治疗是影响PCNSL患者OS的独立不良预后因素。在予HD-MTX治疗的患者中,c-Myc/Bcl-2蛋白双表达和非双表达患者总体反应率(ORR)分别为42.1%和73.3%,差异有统计学意义(P=0.029)。联用布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)抑制剂患者中,非生发中心型(non-GCB)患者的ORR明显高于生发中心型(GCB型)(77.8% vs 16.7%,P=0.041)。结论 Bcl-2蛋白阳性表达、c-Myc/Bcl-2蛋白双表达是影响PCNSL患者预后的独立危险因素。HD-MTX为基础的联合化疗可明显延长PCNSL患者生存期,联合BTK抑制剂用于non-GCB型患者可获得较好的ORR。     

醋酸棉酚对Raji细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察醋酸棉酚对人Burkitt淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖和凋亡的影响.方法 采用台盼蓝染色和噻唑蓝(MTT)法观察醋酸棉酚对Raji细胞生长存活的影响,瑞氏染色法观察药物处理后细胞形态学变化,琼脂糖凝胶电泳和Annexin V-FITC标记流式细胞仪检测细胞凋亡,流式细胞仪分析细胞周期、检测细胞凋亡率及Bcl-2蛋白表达水平变化,比色法测定Raji细胞Caspase-3样蛋白酶活性.结果 5 μmol/L以上浓度醋酸棉酚能抑制Raji细胞生长增殖并诱导其凋亡,效应与药物浓度及给药时间呈正相关.醋酸棉酚作用后,Raji细胞被阻滞于G_0/G_1期.比色法显示Caspase-3样蛋白酶活化.流式细胞仪检测到Bcl-2蛋白表达下调,且与Caspase-3活化在时间上存在同步趋势.结论 醋酸棉酚能抑制aaji细胞增殖并诱导凋亡,其原因可能与调节细胞周期及下调Bcl-2蛋白表达有关.     

PRDM1在弥漫大B细胞淋巴瘤中表达和预后意义研究

目的:探讨阳性调控区Ⅰ蛋白(PRDM1)在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达和预后意义。方法:采用免疫组织化学方法根据CD10、BCL6和IRF4的表达将82例弥漫大B细胞淋巴瘤患者分为生发中心和非生发中心型,显微切割联合RT-PCR和W estern杂交方法检测患者PRDM1的表达情况并观察对CHOP和美罗华联合CHOP方案(R-CHOP)治疗后生存期的影响;利用半定量RT-PCR和W estern杂交观察PRDM1在B细胞淋巴瘤Namalwa细胞株中表达和美罗华、阿霉素以及美罗华联合阿霉素对其表达的影响,利用ELISA方法观察PRDM1表达与NF-κB活性的关系。统计分析软件SAS 8.2,P值小于0.05有统计学意义。结果:PRDM1存在α和β两种亚型,显著表达于弥漫大B细胞淋巴瘤非生发中心亚型的肿瘤细胞(73.5%比38.8%,39.4%比6.1%;P=0.0020和P=0.0009),而PRDM1β在CHOP方案治疗的非生发中心型患者中与短生存期相关,但在R-CHOP方案治疗组中未显示相关性;Namalwa细胞株中表达PRDM1β,美罗华和美罗华联合阿霉素均能够抑制PRDM1β表达,同时伴随NF-κB的失活。结论:PRDM1显著表达在弥漫大B细胞淋巴瘤非生发中心亚型中,PRDM1β可能与疾病的不良预后有关。     

苦参碱对Raji细胞凋亡及凋亡相关蛋白Fas/FasL表达的影响

目的：探讨中药苦参碱对人Burkitts淋巴瘤Raji细胞凋亡的作用及其可能机制.方法：应用MTT法测定苦参碱对Raji细胞生长的抑制作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;WesternBlot检测Fas,FasL,Caspase-3蛋白的表达量.结果：苦参碱0.2～1.6g/L作用Raji细胞24,48,72h后,对Raji细胞生长具有增殖抑制作用,且呈明显的量效和时效关系,48h半数抑制浓度（IC50）为1.34g/L.苦参碱0.4,0.8,1.6g/L组作用48h后,Raji细胞总凋亡率分别为15.10%,27.88%,48.08%,与对照组8.78%相比较差异具有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）.Western Blot检测结果显示Fas,FasL,Caspase-3蛋白表达水平随苦参碱浓度的提高而增加.结论：一定浓度苦参碱可诱导Raji细胞发生凋亡,其凋亡机制可能与上调Fas,FasL蛋白的表达以及激活Caspase-3有关.     

PRDM1在弥漫大B细胞淋巴瘤中表达和预后意义的研究

目的:探讨阳性调控区Ⅰ蛋白(PRDM1)在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达和预后意义。方法:采用免疫组织化学方法根据CD10、BCL6和IRF4的表达将82例弥漫大B细胞淋巴瘤患者分为生发中心和非生发中心型,显微切割联合RT-PCR和W estern杂交方法检测患者PRDM1的表达情况并观察对CHOP和美罗华联合CHOP方案(R-CHOP)治疗后生存期的影响;利用半定量RT-PCR和W estern杂交观察PRDM1在B细胞淋巴瘤Namalwa细胞株中表达和美罗华、阿霉素以及美罗华联合阿霉素对其表达的影响,利用ELISA方法观察PRDM1表达与NF-κB活性的关系。统计分析软件SAS 8.2,P值小于0.05有统计学意义。结果:PRDM1存在α和β两种亚型,显著表达于弥漫大B细胞淋巴瘤非生发中心亚型的肿瘤细胞(73.5%比38.8%,39.4%比6.1%;P=0.0020和P=0.0009),而PRDM1β在CHOP方案治疗的非生发中心型患者中与短生存期相关,但在R-CHOP方案治疗组中未显示相关性;Namalwa细胞株中表达PRDM1β,美罗华和美罗华联合阿霉素均能够抑制PRDM1β表达,同时伴随NF-κB的失活...     

丝胶对大鼠INS-1细胞Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨蚕茧提取物—丝胶对大鼠INS-1细胞Bcl-2蛋白表达的影响.方法:INS-1细胞分为三组,正常对照组、链脲佐菌素(STZ)损伤组和丝胶处理组.正常对照组细胞用不含药物的完全培养基培养;STZ损伤组细胞用完全培养基配制的STZ溶液(10mmol/L)培养24h;丝胶处理组细胞用完全培养基配制的同时含STZ(10mmol/L)和丝胶(300μ g/ml)的溶液培养24h.采用Western Blotting法检测各组INS-1细胞Bcl-2蛋白的表达情况.结果:与正常对照组相比,STZ损伤组INS-1细胞Bcl-2蛋白的表达明显降低(P＜0.05);与STZ损伤组比较,丝胶处理组细胞Bcl-2蛋白的表达明显升高(P＜0.05).结论:丝胶可能通过上调Bcl-2蛋白的表达抑制β细胞凋亡.     

膀胱移行细胞癌组织中E2F3、C-myc和Bcl-2的表达及其与膀胱癌相关性研究

目的:探讨膀胱移行细胞癌(BTCC)组织及正常膀胱黏膜组织中E2F3基因及其下游相关基因C-myc和Bcl-2的表达情况,同时分析E2F3、C-myc和Bcl-2的表达与临床病理参数之间的关系及3个指标之间的相关性,初步揭示BTCC发生、发展的分子机制。方法:检测不同病理分期及组织分级的BTCC标本和正常膀胱黏膜中E2F3、C-myc与Bcl-2蛋白的表达情况,分析E2F3 mRNA在不同组织中的表达情况,探讨BTCC组织中E2F3、C-myc与Bcl-2蛋白的表达之间的关系及三者与临床病理参数之间的关系。结果:E2F3表达阳性率在膀胱移行细胞癌与正常膀胱黏膜中的差异有显著性(P<0.05),且与肿瘤分级和分期密切相关(P<0.01)。肿瘤组织中E2F3 mRNA阳性表达而正常黏膜中E2F3 mRNA呈阴性表达。C-myc及Bcl-2在移行细胞癌组及正常膀胱黏膜中的表达率均有显著性差异(P<0.01)。其中移行细胞癌组C-myc表达与病理分级、组织分期有关(P<0.01),Bcl-2的表达率只与病理分级相关(P<0.01)。结论:E2F3与膀胱癌的恶性程度密切相关,其不仅是膀胱癌的诊断与预后指标,而且为膀胱癌的基因靶向治疗提供理论依据。E2F3与靶基因C-myc和Bcl-2的表达密切相关,E2F3可能通过与C-myc及Bcl-2协同作用共同参与了膀胱移行细胞癌的发生、发展。     

蛋白酶体抑制剂MG132对Raji细胞凋亡、细胞周期及UBE1基因表达的影响

 【目的】 探讨蛋白酶体抑制剂MG132对人Burkitt's淋巴瘤Raji细胞凋亡、细胞周期及泛素活化酶(UBE1)基因表达的影响。【方法】 5 μmol/L的MG132处理Raji细胞24 h,形态学观察细胞生长情况;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法分析细胞凋亡、PI单染法分析细胞周期;荧光定量RT-PCR检测UBE1 基因mRNA表达, Western blot 检测UBE1 蛋白表达。【结果】 MG132处理组细胞生长缓慢,死亡及凋亡多见,细胞凋亡率(26.06 ± 1.10)% 较对照组(0.30 ± 0.26)%上升(P < 0.05),G2/M期细胞比率(33.2 ± 1.2)%较对照组(12.5 ± 1.1)%升高(P < 0.05);MG132处理组UBE1 mRNA表达量(0.35 ± 0.05)较对照组(1.00 ± 0.08)下降(P < 0.05),抑制率为65%; UBE1蛋白表达量(0.93 ± 0.07)较对照组(1.62 ± 0.22)下调(P < 0.05),蛋白表达率为(58 ± 6)%。【结论】蛋白酶体抑制剂MG132可诱导Raji细胞发生凋亡和G2/M期阻滞,同时抑制UBE1的mRNA和蛋白表达,机制仍待深入研究。     

bcl-2 RNAi表达载体的构建、鉴定及其对Raji细胞的干扰效果

目的 构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,并研究其对B细胞淋巴瘤Raji细胞的干扰效果.方法 根据GenBank提供的bcl-2 cDNA序列,设计并合成两对短发夹结构的互补DNA序列,经退火形成互补双链,克隆至载体pGenensil-1构建重组质粒,予以酶切和DNA测序鉴定.脂质体介导重组质粒转染Raji细胞,采用RT-PCR法观察重组质粒对bcl-2 mRNA表达的影响,流式细胞仪测定细胞凋亡.结果 酶切及测序鉴定表明,成功构建bcl-2 shRNA的质粒表达载体pGenesil-1-bcl-2-544和pGenesil-1-bci-2-1009.转染Raji细胞48 h后,RT-PCR结果显示Raji细胞中bcl-2 mRNA表达分别下调了(31.95±3.02)%和(47.57±2.88)%,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示Raji细胞凋亡率分别为(14.25±0.84)%和(11.96±0.79)%,明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 成功构建bcl-2特异性RNAi真核细胞质粒表达载体,它能有效沉默bcl-2基因在B细胞淋巴瘤中的表达并促进B细胞淋巴瘤Raji细胞凋亡.     

IP_6诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其对Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的研究肌醇六磷酸（IP6）对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用及其对相关蛋白表达的影响。方法将不同浓度IP6作用于体外培养的HepG2细胞,应用Hoechst 33258染色在荧光显微镜下观察HepG2细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测IP6对HepG2细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化。结果荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学改变;IP6作用后的HepG2细胞凋亡率升高且与药物剂量呈依赖关系（F=342.15,q=2.98～28.53,P〈0.05）;与0 mmol/L IP6组相比,1.0、2.0、3.0 mmol/L IP6组均有效抑制Bcl-2的表达（F=110.21,q=5.88～16.92,P〈0.05）,上调Bax的表达（F=26.00,q=2.97～8.19,P〈0.05）。结论 IP6可能通过调控Bcl-2及Bax蛋白的表达而诱导HepG2细胞的凋亡。     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞HIF-1α、Bcl-2和bax表达的影响

目的探讨精索静脉曲张（VC）对青春期大鼠生精细胞HIF-1α、Bcl-2和bax的影响。方法通过部分结扎左肾静脉方法制作左侧精索静脉曲张模型（EV）,雄性wistar大鼠36只,随机分为6组,EV持续2周、4周、8周组和相应的接受假手术的对照组（每组6只）。于造模成功后2周、4周、8周取实验组及对照组左侧睾丸,并用免疫组化方法检测睾丸组织HIF-1α、Bcl-2和bax的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡并计算生精细胞的凋亡指数（AI）。结果实验组HIF-1α、bax较对照组表达明显升高（P〈0.05）,而实验组Bcl-2表达较对照组明显下降（P〈0.05）。实验组AI较对照组明显升高（P〈0.05）。结论精索静脉曲张可致大鼠睾丸组织缺氧,从而诱导睾丸组织细胞凋亡增加,影响睾丸生精功能。     

C-myc和hMLH1蛋白在新疆维吾尔族妇女宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测新疆维吾尔族妇女宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌中C-myc和hMLH1蛋白表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测C-myc与hMLH1在慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和宫颈癌组织中的表达水平,并探讨宫颈癌组织中C-myc和hMLH1蛋白表达与各临床病理特征的关系。结果 C-myc在慢性宫颈炎、CIN、宫颈癌中的阳性表达率分别为26.7%(8/30)、50.0%(30/60)和69.2%(36/52),差异有统计学意义(P<0.05)。hMLH1在慢性宫颈炎、CIN和宫颈癌组织中的阳性表达率依次为66.7%(20/30)、56.7%(34/60)和30.7%(16/52)差异有统计学意义(P<0.05)。在宫颈癌组织中,C-myc蛋白与肿瘤分化程度、临床分期以及有无淋巴结转移相关;hMLH1蛋白表达下调与宫颈癌分化程度及是否有淋巴结转移密切相关,表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 C-myc和hM-LH1蛋白与宫颈癌的发生、发展可能相关,二者联合检测可能为宫颈癌的早期诊断和治疗提供新的方向。