酶联免疫吸附法(ELISA)测定乙型脑炎病人血清中特异性IgG(摘要)

本文研究TELISA在测定乙型脑炎病人血清中抗乙脑IgG的几个条件。比较了五种抗原,发现以高顺生株乳鼠脑悬液高速或超速离心的抗原最好。抗原的活性与附着塑料板的能力似与乙型脑炎表面血凝素有关。用这两种抗原做ELISA及血凝抑制试验,测定了31份乙型脑炎病人双份血清中乙脑特异性IgG。以抗体四倍增长作为判断标准,两种方法的结果绝大     

酶联免疫吸附法测定流行性乙型脑炎患者血清中IgM抗体

本文探讨了用ELISA双抗体夹心法,进行乙型脑炎患者血清中抗乙脑病毒IgM抗体的测定。用ELISA法及二巯基乙醇(2-ME)法测定临床诊断为乙脑患者急性期血清64份,以及经血凝抑制试验确诊为乙脑患者急性期血清33份,结果表明ELISA法比2-ME法敏感。     

上海市部分人群乙型脑炎抗体水平的调查

用超速离心纯化的乙型脑炎病毒抗原,建立了间接ELISA方法检测乙脑IgG抗体。该法敏感性优于常规的血凝抑制试验(HI)和间接免疫荧光法(IFA)方法,特异性为93.3％。用此法调查了上海市666份人群血清中的乙脑抗体。结果<10岁儿童阳性率为50％左右,市区和郊区接近:10～19岁市区和郊区阳性率分别为30.1％和77.8％;20～60岁者市区阳性率为65.9～89.7％,而郊区几乎全部阳性。对不同年龄,市区和郊区抗体水平差别的原因及其与接种乙脑疫苗和乙脑疫情的关系进行了讨论。     

流行性乙型脑炎三种血清学诊断方法的比较

<正> 流行性乙型脑炎(简称乙脑)的血清学诊断,过去主要依靠双份血清、采用补体结合试验、中和试验及血凝抑制试验进行确诊。不能满足临床早期诊断的要求。近年来国内外采用特异性IgM抗体测定,用于乙脑早期诊断已有不少报道。但对同一批、同一对象使用不同方法作综合对比的较少。为此,我们在1979年对临床上确诊的36例乙脑患者的血清,采用特异性IgM抗体测定、补体结合试验及血凝抑制试验三种血清学诊断方法进行了检测,并对其诊断价值加以比较。现将结果报告如下。     

血凝抑制试验用于流行性乙型脑炎的诊断——抗体诊断值的探讨

目前,流行性乙型脑炎(下称乙脑)的实验诊断,普遍采用补体结合试验。但其阳性率较低,出现时间较晚。应用血凝抑制试验诊断乙脑,阳性率较高,出现时间较早。补体结合抗体维持时间较短(半年至一年),若单份血清出现阳性结果,即表明为当年新感染。血凝抑制抗体能持续数年,故往年隐性感染亦可出现阳性结果。一般以双份血清血凝抑制抗体滴度有无升高4倍以上者,作为实验诊断的标准。本文目的在于探讨:根据单份血清的血凝抑制试验,能否作     

蝙蝠、恒河猴血清中乙型脑炎和基孔肯雅病毒抗体调查

<正> 流行性乙型脑炎(简称乙脑)和基孔肯雅病(Chikungunya)均由病毒引起,经蚊虫传播,严重危害人类健康的自然疫源性疾病。为进一步了解乙脑病毒和基孔肯雅病毒的宿主情况,我们用血凝抑制试验对采自云南的蝙蝠和恒河猴血清中进行了乙脑及基孔肯雅病毒抗体的检测。现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 血清采集:棕果编蝠(Rousettusleschenaulti)血清,采自云南省河口地区。恒河猴(Macaca mulatta)血清,采自西双版纳、临沧及思茅地区。采到的动物血清—30℃低温保存,以备检测。1.2 试验方法:采用微量血凝制试验。乙脑和基孔肯雅抗原及免疫血清由本实验室自制,抗原用4个血凝单位,用0.5%的鸽血球测定。     

酶联免疫吸附试验检测乙脑病毒抗原的研究Ⅰ实验方法的建立

采用ELISA双夹心法,通过对影响因素实验条件的研究,建立检测乙脑病毒抗原的方法。包被抗体(豚鼠抗乙脑病毒IgG)和第二抗体(兔抗乙脑病毒IgG),用提纯病毒免疫动物制备;以及稀释液中BSA含量提高为2％,显著地降低非特异性反应,并提高敏感性。特异性抑制试验,抗血清浓度越高OD值下降越多;两种乙脑病毒抗原分别与抗血清和正常血清中和后进行测定,阻抑百分率均>50％。敏感试验结果能测出≥5TCID_(50)组织培养病毒抗原和0.5ug/ml差速离心病毒抗原。     

血凝抑试验和酶联免疫试验应用于乙型脑炎诊断的比较

目的：比较血凝抑制试验和酶联免疫试验在乙型脑炎实验诊断上的价值。方法：对医院送检病人血清,用两种方法做了对比。结果：共检测患者血清 70份,血凝抑制试验阳性 22份,阳性率 31.4％,酶联免疫试验阳性 26份,阳性率 37.1％。结论：两法均可测到 IgM抗体,但酶联免疫试验更为敏感。     

免疫荧光试验与反向被动血凝抑制试验测定乙型脑炎抗体对比分析

目的：比较两种乙型脑炎实验室诊断方法。方法：用间接免疫荧光法和反向被动血凝抑制试验检测疑似乙型脑炎患者的血清标本。用SPSS统计软件分析两者的特异性和敏感性。结果：50份临床疑似乙型脑炎患者的血清两种方法检测结果，IgG抗体检出率均为86％。无统计学意义。IgG抗体几何平均滴度RPHI法略高于IFA，但无统计学意义。IgM抗体阳性率IFA为78％；RPHI为76％。RPHI法的几何平均滴度为31，6。IFA的几何平均滴度为30，3，几何平均滴度无统计学意义。两种方法的相关性检测．相关系数分别为0．835和0，696。结论：IFA和RPHI法用于检测乙型脑炎抗体阳性检出率和几何平均滴度差异均无统计学意义。由于RPHI法无需特殊仪器设备。操作简便易行。IFA法除需要一台较好的荧光显微镜外，其操作简便，适于病人的早期诊断。     

重组乙脑抗原对乙型脑炎病毒IgG抗体反应活性的研究

目的对克隆表达的乙脑重组抗原反应原性、特异性以及稳定性等进行评价优化,用于乙脑血清Ig G抗体ELISA诊断试剂盒的研制。方法基于乙脑病毒(JEV)SA14-14-2株的抗原蛋白经克隆表达,灭活纯化后作为包被抗原,利用ELISA方法对其最佳包被浓度,稳定性,反应活性以及特异性进行一系列的评价。结果重组抗原在1∶500的稀释条件下,阳性血清/阴性血清值最大为6.647,具有最佳反应原性,因此此稀释度为最佳;在1∶500稀释条件下,能准确地反映出乙脑病人血清IgG的变化。重组抗原37℃保存6 d活性仍保持75%以上,具有较好的稳定性;与市售同类型试剂盒比较,符合率达到95%。重组乙脑抗原与27份人正常血清和31份登革热病毒IgG抗体阳性而乙脑病毒IgG抗体阴性的血清均无交叉反应,表明具有良好的特异性。结论重组乙脑抗原蛋白稳定性好,特异性强,具有良好的血清学检测价值。     

微量血凝抑制试验在猪流行性乙型脑炎病毒抗体检测中的应用

采用流行性乙型脑炎病毒高顺生毒株制备的血凝素,在黑龙江、辽宁、江苏、上海、广东等省市用微量血凝抑制试验检测猪流行性乙型脑炎。结果表明该法简便、快速、特异性好。但由于流行性乙型脑炎血凝素对pH值要求严格,以及正常哺乳动物的血清中都存在非特异性血凝抑制因子,因此在每次试验当天必须测定血凝素的最适pH值和血凝素在最适pH值中的血凝滴度,同时被检血清在试验之前也必须用白陶土或丙酮除去其中的非特异性血凝抑制因子。     

血凝抑制试验和酶联免疫试验应用于乙型脑炎诊断的比较

目的：比较血凝抑制试验和酶联免疫试验在乙型脑炎实验诊断上的价值。方法：对医院送检病人血清,用两种方法做了对比。结果：共检测患血清70份,血凝抑制试验阳性22例,阳性率31．4％,酶联免疫试验阳性26份,阳性率37．1％。结论：两法均可测到IgM抗体,但酶联免疫试验更为敏感。     

酶标抗体与酶标葡萄球菌A蛋白在ELISA中检测病毒抗体的比较

用酶标抗体(HRP-抗人IgG)与酶标葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)作ELISA检测临床疑似乙脑病人单份血清91份,及临床诊断疑似腺病毒感染病人单份血清63份,7例双份血清14份的结果,两种方法都有较高敏感性与特异性。HRP-SPA敏感性较HRP-抗人IgG低,而HRP-SPA非特异性反应较少,且制备简单,比较稳定,一种HRP-SPA可以检测多种动物血清,有可能替代HRP-抗人IgG在FLISA中应用。     

我省健康人群中首次检出加里福尼亚脑炎抗体

本文报告应用血凝抑制法检测温州市近郊某工厂工人加里福尼亚脑炎及流行性乙型脑炎抗体,其阳性率分别为3.85%及17.31％。血清流行病学研究首次证实我省健康人群中除乙脑病毒感染外,同时存在加脑病毒感染。对其中一份加脑血凝抑制抗体效价为1:40的阳性血清标本送加拿大鉴定,其检测结果与我们一致。     

日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的产生及其特性鉴定

用细胞融合方法获得了6株分泌日本乙型脑炎病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞系,经与4种黄病毒作交叉免疫荧光反应,可以将它们分为三组:日本乙型脑炎病毒种特异性,亚组特异性及黄病毒属特异性。通过功能性抗病毒分析(血凝抑制、中和及小鼠被动保护),提出该病毒表面(囊膜糖蛋白)至少存在6种抗原决定簇。经交叉血凝抑制反应,发现国内分离的日本乙型脑炎病毒毒株间在血凝素抗原性上存在明显差异。     

乙型脑炎血清学早期诊断方法的探讨

乙型脑炎(下称乙脑)是一种严重危害儿童健康的急性传染病,目前在我国仍广泛流行,由其它病毒引起的脑炎也时有发生,所以,乙脑的早期特异性诊断成为临床和卫生防疫工作者关注的问题。乙脑血清学的诊断,历来多用补体结合试验(FC)、中和试验(NT)和血凝抑制(HI)试验,近些年来发展了酶联免疫吸附     

应用三种血清学方法诊断流行性乙型脑炎

在1977年我区流行性乙型脑炎(简称乙脑)流行期间,应用红血球凝集抑制试验、补体结合试验和特异性IgM抗体测定三种血清学诊断方法,检测了市传染病医院收住的乙脑患者的血清,并对三种血清学方法的诊断价值加以讨论。材料和方法 1.血清采自石家庄市传染病医院收住的乙脑患者,大部分采得急性期(发病一周内)及恢复期(发病2～4周)双份血清,少部分只采得急性期单份血清,所得血清试验前均保存于低温冻箱。     

乙型脑炎、麻疹胎传母体抗体的调查

86对母婴血清标本用间接酶联免疫测定法(ELISA)测定了乙型脑炎抗体,118对用血凝抑制(血抑)试验测定了麻疹抗体。结果发现,脐血乙型脑炎抗体阳性率为79.1％,母血为74.4％,几何平均滴度在脐血显著高于母血(t=5.1857,P<0.01),比值为1.2∶1。脐血和母血的麻疹血抑抗体阳性率分别为86.4％及84.8％,几何均值也是前者高于后者(t=4.0349,P<0.01),比值为1.3∶1。 108份婴儿血清标本测定结果显示,0～3个月婴儿乙型脑炎抗体阳性率为35％,4～9个月仅为13％,10个月及以上的婴儿全部阴性。此结果与近年上海市小于1岁组乙型脑炎发病率最高相一致,提示应考虑提早乙型脑炎疫苗的接种年龄。     

云浮市婴幼儿乙型脑炎抗体水平分析

目的了解云浮市婴幼儿乙型脑炎抗体水平. 方法在云浮市随机抽取8足月～10岁儿童共536份血液标本,采用反向被动血凝抑制试验（RPHI）检测乙脑IgG抗体. 结果受检儿童乙脑抗体阳性率为89.1% ,GMRT平均值为149.7.各年龄组乙脑抗体阳性率和 GMRT差异无显著性.但随着年龄的增长,阳性率有逐渐降低的趋势. 结论加强儿童乙脑基础免疫工作,对预防和控制乙脑爆发有积极意义.     

酶联免疫吸附试验检测乙脑IgM,IgG抗体的研究

本文报导了间接微量酶联免疫吸附试验检测乙脑病毒抗体的实验条件和方法。抗元系用乙脑病毒感染的幼鼠脑,经鱼精蛋白和聚乙二醇处理的半提纯抗元,将抗元包被于国产聚苯乙烯微量塑料板,应用马抗人IgG辣根过氧化物酶结合物和马抗人IgM辣根过氧化物酶结合物检测人血清中乙脑病毒特异性IgM IgG抗体;与HI、CF试验比铰,三种方法结果基本一致,有一定相关性。经阻断试验,取代试验等ELISA结果是特异性的。ELISA和HI试验检测IgG抗体敏感性相近;ELISA检测IgM抗体比2ME—HI试验的敏感性稍高,是一种帮助乙脑早期诊断比较理想方法。ELISA检测病人血清较HI、CF试验快速、简便、节省材料、而且被检血清不需事先处理等优点,有可能代替HI、CF试验供检测乙脑病毒抗体,作为常规诊断之用。