中剂量rhG-CSF对正常供者外周血CD34+细胞动员效果

本研究探讨中等剂量600μg/d粒细胞集落刺激因子(GCSF)对正常供者CD34 细胞的动员效果及动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化。对2002-2004年我科31例健康供者给予rhGCSF600μg/d,在动员的第4天开始采集外周血干细胞(PBSC),并检测动员前后白细胞总数、动员后的有核细胞(NC)数、单个核细胞(MNC)数、CD34 细胞数及粒巨噬细胞集落形成单位(CFUGM),同时观察动员及采集过程中的不良反应。对12例供者GCSF动员前后外周血单个核细胞中T细胞亚群的变化进行了观察。结果显示:600μg/d组与既往使用的300μg/d组相比,rhGCSF动员后的外周血细胞中NC、MNC和CD34 细胞及CFUGM显著增加(P<0.05),受者造血重建时间缩短(P<0.05),动员和采集过程中的不良反应发生率无明显上升(P>0.05),无严重不良反应发生。动员后CD3 细胞在PBMNC中的比例较动员前下降(15.05±3.3)%,(P<0.05)。动员前后CD4 /CD8 淋巴细胞的比值无明显变化(P>0.05)。结论:600μg/d的GCSF对正常供者的动员效果好,受者造血重建快,无严重不良反应发生。动员后PBMNC中CD3 细胞的下降及CD4 /CD8 淋巴细胞比值无明显变化,从而使得移植后急性GVHD的发生率无明显上升。     

粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合动员异基因造血干细胞移植

背景：目前FDA已批准应用于临床外周血造血干细胞移植的动员剂只有粒细胞集落刺激因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子,其中粒细胞集落刺激因子单药应用是目前最主要的动员方案,但可引起供者骨骼肌肉酸痛、发热等不良反应。目的：回顾性分析以粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案的异基因造血干细胞移植临床效果。方法：选择2004-01/2009-10河南省人民医院血液科以粒细胞集落刺激因子与粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案进行血缘全相合异基因造血干细胞移植51例,分析移植物成分、造血重建及移植物抗宿主病的发生率。结果与结论：动员96h后CD34＋细胞占单个核细胞的比例为（0.97±0.13）%,CD34＋CD38-细胞占CD34＋细胞的比例为（37.49±4.03）%;移植后的快速造血重建与CD34＋细胞、CD34＋CD38-细胞输入量呈负相关。Ⅰ度、Ⅱ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病的发生率分别为25.5%,15.7%;局限性、广泛性慢性移植物抗宿主病的发生率分别为39.2%,21.2%。提示在血缘全相合异基因造血干细胞移植中,粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合可有效实现干细胞动员,所获CD34＋细胞完全可以满足快速造血重建的需要;输入较多的CD34＋细胞、CD34＋CD38-细胞可能利于快速造血重建。     

经粒系集落刺激因子刺激外周血CD34~+细胞动员效果相关因素的考察

目的探讨粒系集落刺激因子(G-CSF)动员健康供者外周血造血干细胞效果的影响因素。方法对24例健康供者皮下注射G-CSF动员造血干细胞,检测外周血T淋巴细胞亚群和血常规数据。结果经G-CSF刺激后,外周血CD3+(%)、CD3+CD4+(%)、白细胞计数、血小板均明显升高(P0.05);而动员第4天、第5天、第6天骨有核细胞密度、CD34+细胞百分比无明显差别。经相关性分析,性别、年龄、体质量与CD34+细胞百分比呈负相关(P0.05),白细胞计数呈正相关(P0.01)。结论在一定范围内男性供者优于女性供者,年龄越小,体质量越轻,白细胞计数越高,经G-CSF动员的外周血造血干细胞CD34+细胞百分比越高。     

应用重组人粒细胞集落刺激因子对不同人群骨髓CD34+细胞和T细胞亚群影响的动态观察

目的　探讨健康人及处于完全缓解的恶性肿瘤患者 ,在应用重组人粒细胞集落刺激因子(G CSF)期间 ,其骨髓CD34 细胞和T细胞亚群的动态变化特点。方法　 12例异基因外周血干细胞移植健康供者和 16例自体外周血干细胞移植患者 ,在接受G CSF(30 0 μg/d ,共 5d)动员外周血干细胞期间 ,应用流式细胞仪测定其骨髓CD34 细胞和T细胞亚群。结果　①恶性肿瘤患者未应用G CSF时 ,骨髓细胞中CD34 细胞的初始值为 (0 .5 2± 0 .31) % ,同等条件下正常供者骨髓细胞中CD34 细胞的测定值为 (1.2 0±0 .6 8) % ,两者有显著差异 (P <0 .0 1)。应用G CSF 4 8h后 ,两者的测定值分别为 (1.2 2± 0 .4 2 ) %和(2 .0 7± 0 .5 2 ) % ,CD34 细胞均较前有明显增加 (P <0 .0 1) ,且两者之间仍存在明显差异 (P <0 .0 1)。CD34 细胞的高峰值出现在应用G CSF 96h后 ,分别为 (2 .2 3± 0 .34) %和 (2 .4 4± 0 .5 4 ) % ,分别较未应用G CSF时差异显著 (P <0 .0 1) ,两者之间无差异 (P >0 .0 5 )。②无论是否应用G CSF ,恶性血液病患者的T淋巴细胞亚群比例均处于倒置状态 ,而正常供者的T淋巴细胞亚群则比例正常。随两者应用G CSF后CD34 细胞的逐渐增加 ,T淋巴细胞亚群变化不明显。结论　完全缓解的恶性血液病患者 ,在应用G CSF4 8     

粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合动员异基因造血干细胞移植

背景:目前FDA已批准应用于临床外周血造血干细胞移植的动员剂只有粒细胞集落刺激因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子,其中粒细胞集落刺激因子单药应用是目前最主要的动员方案,但可引起供者骨骼肌肉酸痛、发热等不良反应。目的:回顾性分析以粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案的异基因造血干细胞移植临床效果。方法:选择2004-01/2009-10河南省人民医院血液科以粒细胞集落刺激因子与粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案进行血缘全相合异基因造血干细胞移植51例,分析移植物成分、造血重建及移植物抗宿主病的发生率。结果与结论:动员96h后CD34+细胞占单个核细胞的比例为(0.97±0.13)%,CD34+CD38-细胞占CD34+细胞的比例为(37.49±4.03)%;移植后的快速造血重建与CD34+细胞、CD34+CD38-细胞输入量呈负相关。Ⅰ度、Ⅱ～Ⅳ度急性移植物抗宿主病的发生率分别为25.5%,15.7%;局限性、广泛性慢性移植物抗宿主病的发生率分别为39.2%,21.2%。提示在血缘全相合异基因造血干细胞移植中,粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合可有效实现干细胞动员,所获CD34+细胞完全可以满足快速造血重建的需要;输入较多的CD34+细胞、CD34+CD38-细胞可能利于快速造血重建。     

新型外周血CD34+细胞动员剂--抗CD49d单克隆抗体的实验研究

为了探讨外周血干细胞动员的新途径，用抗CD49d单克隆抗体和rhG-CSF及二者联合给小鼠皮下注射，动态观察小鼠外周血的白细胞总数和CD34^ 细胞数的变化，并将各种动员方法所获得的干细胞分别进行干细胞移植。结果发现，给予动员剂后小鼠的外周血白细胞总数和CD34^ 细胞比例明显升高，以rhG-CSF和抗CD49d单克隆抗体联合给药效果最佳。移植后各组小鼠均获造血重建，以联合动员组造血恢复速度最快。结论：抗CD49d单克隆抗体能有效动员小鼠外周血干细胞，与rhG-CSF具有协同作用。     

健康供者特征对rhG-CSF预激的骨髓采集物CD34+细胞和T细胞亚群的影响

目的 探讨健康供者特征对rhG-CSF预激的骨髓(G-BM)采集物造血和免疫细胞成分的影响.方法 150名健康供者体内应用rhG-CSF 5 μ·kg-1·d-1连续4～5 d,第4,5天采集骨髓和外周血,用流式细胞术测定G-BM采集物中的CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的数量,并分析供者性别、年龄、体重、是否妊娠等特征对G-BM成分的影响.结果 150名健康供者G-BM所含有核细胞,淋巴细胞,CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD14+、CD34+细胞以及CD3+CD4-CD8-调节性T细胞的中位值分别为31 050(12 200～58 100)、2122(506～6618)、1344(307～4791)、692(145～3038)、616(112～2575)、986(265～2958)、63(11～505)和83(9～390)/μl.年龄≤38岁的供者G-BM中的有核细胞、CD34+细胞以及CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞的数量分别为33800(18600～57100)、76(22～505)和97(11～380)/μl,显著高于年龄＞38岁的供者[分别为28 000(12 200～58 100)、49(11～220)和65(9～389)/μl],P值分别为＜0.05,＜0.001和0.001.外周血单核细胞计数＞0.37×109 /L的供者G-BM中有核细胞的数量[33550(12 200～57 100)/μl]显著高于≤0.37×109 /L的供者[27 150(13 800～58 100)/μl](P=0.005).多因素分析显示年龄和外周血单核细胞是G-BM中有核细胞采集量的影响因素[HR值分别为0.41和2.87;P值分别为0.01和0.003];年龄是G-BM中CD34+细胞采集量的唯一影响因素(HR=0.26;P值=0.001);年龄还是G-BM中CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞数量的影响凶素[HR值为0.31;P=0.001].结论 年龄是影响G-BM中有核细胞、CD34+细胞和CD3+ CD4-CD8-调节性T细胞采集数量的因素,年龄≤38岁的供者更易采集满足临床需要的有核细胞和CD34+细胞;外周血单核细胞＞0.37×109 /L的供者采集的G-BM含有较多数量的有核细胞.     

粒细胞集落刺激因子动员2型糖尿病患者外周血CD34+细胞的变化

背景:与正常人比较,2型糖尿病患者外周血CD34+细胞含量已有明显下降.目的:分析2型糖尿病患者外周血动员后CD34+细胞比例的变化.方法:将234例2型糖尿病患者按病程分为5组(<1年,1~5年,>5~<10年,10~15年和≥15年),予以粒细胞集落刺激因子动员.动员5 d后,使用流式细胞仪检测外周血CD34+细胞的含量,并利用Person简单相关及多元回归方法分析其与病程、血脂、尿酸的关系.结果与结论:糖尿病者外周血动员后CD34+细胞水平与三酰甘油相关(r=-0.202,P=0.002),与载脂蛋白B相关(r=-0.276,P=0.000),与尿酸相关(r=-0.297,P=0.000).经统计分析发现,糖尿病者外周血动员后CD34+细胞数随糖尿病病程进展而逐渐下降.     

粒细胞集落刺激因子动员2型糖尿病患者外周血CD34~＋细胞的变化

背景：与正常人比较,2型糖尿病患者外周血CD34＋细胞含量已有明显下降。目的：分析2型糖尿病患者外周血动员后CD34＋细胞比例的变化。方法：将234例2型糖尿病患者按病程分为5组（〈1年,1～5年,〉5～〈10年,10～15年和≥15年）,予以粒细胞集落刺激因子动员。动员5d后,使用流式细胞仪检测外周血CD34＋细胞的含量,并利用Person简单相关及多元回归方法分析其与病程、血脂、尿酸的关系。结果与结论：糖尿病者外周血动员后CD34＋细胞水平与三酰甘油相关（r=-0.202,P=0.002）,与载脂蛋白B相关（r=-0.276,P=0.000）,与尿酸相关（r=-0.297,P=0.000）。经统计分析发现,糖尿病者外周血动员后CD34＋细胞数随糖尿病病程进展而逐渐下降。     

脐血中CD34+CD38+细胞含量对急性白血病患者移植后造血重建的影响

为了探讨非亲缘脐血移植中CD34+ CD38+ 细胞回输量对造血重建的影响 ,采用流式细胞术分析复苏后的CD34+ CD38+ 细胞数 ,并对 2 0例急性白血病患者的体重、中性粒细胞 (ANC)和血小板 (Plt)恢复时间进行测定。结果表明 :2 0例接受的CD34+ CD38+ 细胞输入量为 (9.85 - 32 5 .71)× 10 4/kg ,其ANC恢复 >5× 10 8/L的中位时间为 18 5 (11- 32 )天。在 19例患者中Plt恢复 >2× 10 10 /L的中位时间为 4 5 (12 - 118)天。CD34+ CD38+ 细胞输入量与ANC和Plt恢复时间存在相关 ,r值分别为 - 0 .5 77(P <0 .0 1)和 - 0 .5 0 3(P <0 0 5 )。结论 :CD34+ CD38+细胞含量与造血恢复时间相关 ,足量输入CD34+ CD38+ 细胞可能使植入提前     

重组人白介素11联合粒细胞集落刺激因子动员的自体外周血造血干细胞移植

本研究旨在探索重组人白介素11（rhIL—11）联合重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员外周血造血干细胞进行自体外周血干细胞移植的作用。16例预行自体外周血干细胞移植的非霍奇金淋巴瘤及急性髓系白血病患者随机分为实验组（rhIL-11联合rhG—CSF动员）及对照组（rhG—CSF动员），两组均在动员性化疗后血象下降至最低值有回升迹象时应用rhIL—11及rhG—CSF；rhG—CSF5μg/（kg·d）动员中位时间5．5天，rhIL—1150μg/（kg·d）动员中位时间4天；动员后观察外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD34^＋细胞、CFU—GM集落数的变化；按常规进行自体外周血干细胞移植后，观察粒细胞及血小板植活时间及单采血小板输注量。结果显示：实验组及对照组动员后外周血白细胞和血小板计数，以及干细胞采集物单个核细胞、CD54^＋细胞及CFU—GM集落数无显著性差异（P〉0．05）。自体外周血干细胞移植后，实验组中性粒细胞数≥0.5×10^9／L的中位时间为10．5天，对照组中为13天．实验组比对照组提前2.5天（P〈0．05）。实验组血小板数≥20×10^9／L的中位时间为11.5天，对照组为13天，实验组比对照组提前1.5天（p〈0．05）。实验组输注单采血小板中住数为3.5单位，对照组为5单位，实验组比对照组减少1．5单位（P〈0．05）。实验组使用动员剂的不良反应主要有低热、乏力、感冒样症状、食欲不振、头晕、肌肉酸痛等，对照组仅出现低热，患者对以上症状均可以耐受，停药后症状自行消失。结论：rhIL—11联合rhG—CSF动员外周血造血干细胞安全有效，在自体外周血干细胞移植后造血重建较快，单采血小板输注量少。     

rhG-CSF动员的外周血采集物与稳态骨髓中CD4^＋CD8^＋初始及记忆T细胞亚群的比较

本研究探讨重组人粒细胞集落刺激因子（rhG—CSF）动员的外周血采集物（G—PB）与稳态骨髓（SS—BM）中CD4^＋、CD8^＋初始、记忆T细胞亚群的差异。依据细胞表面CIM5RA和CD62L的表达将CD4^＋、CD8^＋T细胞划分为初始T细胞（naive，CIM5RA^＋CD62L^＋）、中心记忆T细胞（centralmemory，TCM，CIM5RA—CD62L^＋）、效应记忆T细胞（effeetor memory，TEM，CIM5RA^-CD62L^-）、终末分化效应记忆T细胞（terminally difierentiated effeetor memory，TTTp，CIM5RA^＋CD62L^-）。用流式细胞仪测定G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞的比例组成，并计算每微升采集物中各细胞亚群的绝对数量。结果表明：G—PB中CD4^＋、CD8^＋T细胞的比例组成及CD4^＋／CD8^＋比值均高于SS—BM（P〈0．05）；G—PB中CD4^＋初始T细胞的比例显著低于SS—BM（P〈0．001），而CD4^＋TEM比例显著高于SS—BM（P〈0．001）；G—PB中CD8^＋初始和记忆T细胞亚群的比例与SS—BM无显著差异（P〉0．05）；与SS—BM相比，G—PB中CD4^＋CD62L^＋T细胞的比例明显降低（P=0．001），每微升G—PB移植物中的各淋巴细胞亚群均明显高于SS—BM（P〈0.001）。结论：G—PB与SS—BM中CD4^＋、CD8^＋初始和记忆T细胞亚群在相对和绝对数量方面存在明显的差异，这种差异可能影响G—PB和SS—BM移植后急性、慢性移植物抗宿主病发生率及其程度的异同。     

粒系集落刺激因子对急性髓系白血病原代细胞mdr1基因表达的调节作用

研究多药耐药基因(mdr 1)与急性髓系白血病(AML)细胞分化之间的关系。采用常规分离白血病细胞,体外培养7天,然后通过形态学、细胞化学、细胞功能(NBT)、细胞免疫化学(APAAP)和逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及MTT技术观察了细胞分化和mdr1表达变化以及AML细胞对柔红霉素敏感性反应。结果表明,AML细胞分化成熟后mdr1表达水平下降,并且随mdr1水平下降,AML细胞对柔红霉素敏感性增加。结论提示,AML细胞分化与mdr1之间有密切的内在联系,利用分化诱导剂粒系集落刺激因子从基因水平逆转白血病耐药是一种行之有效的方法。     

应用SCF＋IL—2等细胞因子从脐血CD34^＋细胞扩增T细胞

肿瘤和艾滋病（ＡＩＤＳ）的基因治疗或免疫治疗的研究需要大量的Ｔ细胞克隆。尽管Ｔ细胞来源于ＣＤ３４＾＋细胞,但由于需要胸腺组织的参与,使其在体外扩增大量细胞克隆非常困难。本研究用脐血单个核细胞作为辅助细胞,在ＳＣＦ＋ＩＬ－２等细胞因了的作用下,人脐血ＣＤ３４＾＋在此培养条件下,不断产生ＣＤ４＾＋或ＣＤ８＾＋Ｔ细胞至少持续３周。在培养扩增过程中,发现ＣＤ４＾＋和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞的比例有一个不断变化的动     

化疗联合G-CSF动员的骨髓及外周血CD34+细胞表达粘附分子的变化

探讨化疗合G－CSF动员前，后患骺髓及外周血CD34^ 细胞表达CD44，CD49d，CD62L及趋化因子CXCR4的动态变化，用免疫荧光直接三角标记和流式细胞术测定G－CSF动员前，后骨髓及外周血CD34^ 细胞的CD44，CD49d，CD62L及趋化因子CXCR4的表达，观察输注各表达亚群细胞数与移植后造血重建的关系。结果发现，动员后骨髓中CD34^ CD44^ 和CD34^＋CD49d^ 细胞的百分比较动员前明显降低, 而外周血中二的比例则显升高；动员前，后骨髓中CD34^＋CD62L^＋和CD34^＋CXCR4^ 细胞的变化并不明显，而外周血中前明显增加，后则显减少。输入CD44^＋，CD49d^ ，CD62L^ 及CXCR4^ 的CD34^＋细胞的量与移植后血中中性粒细胞和血小板恢复的时间未表明有显的相关，结论：G－CSF动员可下调骨髓CD34^＋细胞的CD44，CD49d，CD62L及CXCR4的表达，从而进入外周血循环，输注这些细胞的临床意义有待累积更多病例的分析。     

人骨髓间充质干细胞体外支持脐血CD34+细胞增殖的研究

为了研究人骨髓间充质干细胞(MSC)作为滋养层细胞体外支持脐血CD34+细胞扩增的作用,将MSC和胎儿骨髓来源的成纤维细胞样骨髓基质细胞系(HFCL)经60Coγ线照射后分别制备细胞滋养层,比较不同滋养层细胞和添加或不加细胞因子对脐血CD34+细胞增殖数及LTC-IC数的影响.结果表明,无论有无添加细胞因子(rhFL、rhSCF、rhTPO),HFCL滋养层组培养12天扩增细胞数明显高于MSC滋养层组,以第0天细胞数为100%(下同),有细胞因子组为(9797±361)%vs(7061±418)%,无细胞因子组为(5305±354)%vs(1992±247)%,均P＜0.01.MSC滋养层组CD34+细胞扩增数与HFCL滋养层组相比无显著差异[(825±305)%vs(820±191)%,P＞0.05],但在细胞因子存在时低于HFCL滋养层组[(939±212)%vs(1617±222)%,P＜0.01].MSC滋养层组维持脐血中LTC-IC的能力明显优于HFCL滋养层组[第5周CFU-GM数(129.95±8.73)个/105接种细胞数vs(89.81±10.29)个/105接种细胞数,P＜0.05];细胞因子存在时,其作用更为明显[第5周CFU-GM数(192.93±4.95)个/105接种细胞数vs(90.47±14.28)个/105接种细胞数,P＜0.01].MSC与HFCL按一定比例混合,可提高扩增效率.当MSC与HFCL之比为41时,集落形成数量最高,达(186.89±11.11)个/105接种细胞数,明显高于比例为32(131.45±13.02)个/105接种细胞数和二者单用组[前者(138.92±14.84)个/105接种细胞数,后者(64.63±6.11)个/105接种细胞数;均P＜0.01].结论MSC维持脐血中LTC-IC集落形成的能力优于基质细胞系HFCL,HFCL支持脐血CD34+细胞的增殖能力优于MSC,MSC加上适量HFCL可显著提高CD34+细胞扩增效率.     

外周血CD34+细胞计数预测造血干细胞收获量

目的了解外周血CD34+细胞计数与造血干细胞收获量的关系.方法用流式细胞仪Pro-COUNT方法检测了16例造血干细胞移植患者单采前外周血和采集物中CD34+细胞百分率、绝对数,用血细胞计数仪计数白细胞数.分析各项检测指标与CD34+细胞收获量(×106/kg体重)的相关性.结果外周血白细胞计数、CD34+百分率、CD34+细胞计数与CD34+细胞收获量的相关系数分别为-0.307,0.738,0.665.经相关系数t检验,单采前外周血白细胞计数与CD34+收获量无相关性(P＞0.05),而外周血CD34+百分率和绝对计数与CD34+收获量密切相关(P＜0.01).结论外周血CD34+计数可准确预测采集效果,确定干细胞采集时机.     

转染外源性FasL的CD34+细胞诱导同种抗原特异性T细胞凋亡的实验研究

为探讨通过Fas/FasL途径选择性去除移植物中成熟T细胞的可能性 ,本研究借助反转录病毒途径 ,以FasL基因转染骨髓CD34+ 细胞 ,与经过富集的T细胞进行单向混合培养 (刺激细胞 /效应细胞比例为 5∶1) ,加入或不加入IFN γ ,IL 2 ,应用原位末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术 (FCM)检测培养 5天后的细胞凋亡率 ,并比较两种细胞因子对移植物中CD34+ 细胞的影响。以转染外源FasL的CD34+ 细胞为刺激细胞 ,T细胞凋亡率为 (12 .1±1.5 ) %〔对照组为 (3.2± 1.1) % ,P <0 .0 1〕 ;经IFN γ或IL 2作用后 ,转染细胞诱导T细胞的凋亡率分别上升至(2 0 .1± 2 .3) % ,(17.6± 1.3) % (P <0 .0 1) ;且IL 2对CD34+ 细胞Fas抗原的表达无明显影响。上述结果表明 ,转染外源FasL的骨髓CD34+ 细胞可诱导同种抗原特异性T细胞凋亡 ,IFN γ和IL 2增强上述致细胞凋亡作用 ,且IL 2更有利于临床应用 ;提示该方案可选择性清除移植物中同种抗原特异性T细胞 ,可望为临床上防治移植物抗宿主病 (GVHD)提供新的途径     

非整合型质粒重编程脐带血CD34~＋细胞形成诱导性多潜能干细胞的研究

本研究探索和优化非整合质粒的方法,将人脐带血来源的CD34＋（CB CD34＋）细胞进行重编程,建立无病毒的iPS技术体系。利用细胞核转染仪将质粒pEB-C5和pEB-Tg转入短暂培养后的CB CD34＋细胞中,使其进行重编程形成iPSC,14 d后观察到2×106CB CD34＋细胞中约有200个类似ES细胞特征的克隆出现,并对产生的iPSC进行体内外多能性鉴定及细胞核型检测。结果表明,重编程后的CB CD34＋细胞的多能性基因表达与ESC类似,细胞核型正常,外源基因无插入,且具有体内分化成三胚层的全能性。结论：利用非整合型质粒的方法重编程CB CD34＋细胞形成iPSC,该方法无外源基因插入、重复性好、操作简单、且效率较高,为建立相对安全的iPSC提供了一个行之有效的途径,为深入探索iPSC应用于临床药物的筛选、组织工程和再生医学研究等提供了很好的研究材料。