小肠结肠炎耶尔森氏菌主要毒力基因分析

目的了解南京地区从不同来源分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布情况。方法聚合酶链反应(PCR)技术进行不同血清生物型菌株的毒力基因检测。结果从血清型来看,分离到的9株血清型O:3菌株有7株的基因型分布为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。从生物型来看,共分离到致病生物型(3,4)菌株12株,其中9株毒力基因分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。结论本市小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型O:3菌均包含毒力基因,毒力基因主要分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。所有的致病生物型(3,4)菌株,均包含染色体上的毒力基因ail,毒力基因主要分布特征亦为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。ail与致病生物型之间存在明显关联。     

吉林省小肠结肠炎耶尔森氏菌脉冲场凝胶电泳分析

目的对小肠结肠炎耶尔森氏菌全DNA进行酶切，了解吉林省小肠结肠炎耶尔森氏菌在核酸水平的差异。方法用脉冲场凝胶电泳（PFGE）方法进行分析。结果用PFGE将33株小肠结肠炎耶尔森氏菌分成7个核型，其中0：3血清型分出5个核型；0：9血清型2个核型。结论提示脉冲场凝胶电泳分析可用于小肠结肠炎耶尔森氏菌遗传关系的研究，以及分析暴发流行和常规监测，追踪传染源。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌对宿主专职吞噬细胞功能的影响

一个由多组份蛋白复合体形成的跨膜孔状通道称为Ⅲ型分泌系统 ,它是多种动植物病原菌用来分泌蛋白、或把这些蛋白直接注入宿主细胞以起始生化信息传导的结构。致病性耶尔森氏菌质粒编码的Ｙｏｐ系统是Ⅲ型分泌系统的典型代表 ,主要由四部分组成 :(1)Ｙｓｃ分泌装置 ;(2 )一套转位蛋白 ,ＹｏｐＢ、ＹｏｐＤ、ＹｏｐＱ/ＹｏｐＫ和ＬｃｒＶ ;(3)一套控制和识别系统 :ＹｏｐＮ ,ＴｙｅＡ和ＬｃｒＧ ;(4)至少五种效应蛋白ＹｏｐＥ、ＹｏｐＨ、ＹｐｋＡ -ＹｏｐＯ、ＹｏｐＭ和ＹｏｐＰ〔15〕。Ｙｏｐ毒力系统及其它一些毒力因子使得致病性耶尔森氏…     

广东鼠疫静息期小肠结肠炎、假结核耶尔森氏菌流行病学调查

目的查明广东省鼠疫静息期动物间及蚤小肠结肠炎、假结核菌感染情况。方法采集鼠类回盲部内容物和猪、牛粪便分别放入改良PBS缓冲液中,置4℃增菌3周,经KOH溶液处理后,涂布IN培养基; 蚤类直接拉胃接种IN培养基,置28℃24 h,挑取可疑菌落鉴定。结果疫源地从鼠、猪粪、蚤、死猪分离出小肠结肠炎耶尔森氏菌61株,血清型0：3（40株）,0：9（21株）和假结核耶尔森氏菌1株。非疫源地从鼠分离出小肠结肠炎耶尔森氏菌2株、中间型耶尔森氏菌1株。结论广东目前动物间小肠结肠炎耶尔森氏菌感染普遍,猪感染率最高,局部已暴发流行,假结核耶尔森氏菌偏低,鼠疫处于静息期。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌致Graves’病作用的实验研究

目的　研究小肠结肠炎耶尔森菌（ Ｙ． Ｅ 菌） 感染和 Ｇｒａｖｅｓ’病发病的相关性。方法　用 Ｏ：３ Ｙ． Ｅ 菌免疫新西兰兔，研究 Ｙ． Ｅ 菌抗体（ Ｙ Ｅ Ａｂ） 和 Ｔ Ｒ Ａｂ 的相关性及其对 Ｆ Ｒ Ｔ Ｌ５ 细胞释放ｃ Ａ Ｍ Ｐ 的影响。结果　 Ｏ：３ Ｙ． Ｅ 菌免疫１２ 周后，其中４ 只兔（４／１０） 产生了 Ｙ． Ｅ 菌抗体（ Ｙ Ｅ Ａｂ） ，滴度为１ ：５０００ ～１ ：２５０００ ，同时免疫兔甲状腺功能（ Ｔ３ 、 Ｔ４） 也明显升高。交叉吸附试验表明 Ｙ Ｅ Ａｂ 和 Ｔ Ｒ Ａｂ 能竞争性地与 Ｔ Ｓ Ｈ 受体蛋白结合，另外， Ｙ Ｅ Ａｂ 阳性血清中提取的 Ｉｇ Ｇ 能刺激 Ｆ Ｒ Ｔ Ｌ５ 细胞释放ｃ Ａ Ｍ Ｐ。结论　在免疫学和细胞生物学水平证实了 Ｙ． Ｅ 菌感染与 Ｇｒａｖｅｓ’病发病有关。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌的随机扩增多态性DNA的分析

分别对从福建、浙江、沈阳等地分离到的18个血清型的115株小肠结肠炎耶尔森氏菌用随机扩增多态性DNA（RAPD）方法进行了分析，将其分为22个型别。结果提示RAPD方法比血清分型方法的优点是对于追踪传染源有更高的价值。     

耶尔森氏菌属铁的摄取和转运

耶尔森氏菌属中有三种致病性的细菌：鼠疫菌、假结核菌和小肠结肠炎菌。这些致病菌引起感染的过程中，一种普遍而重要的因素是病原菌具有侵袭能力，并能在宿主组织内增殖，细菌需产生为病原性所必需的各种毒力决定体。众所周知在环境发生变化时，细菌能迅速改变它们的新陈...     

基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法

目的 引入一种设计简易、特异性强、退火温度范围宽的双启动寡核苷酸引物（dual-priming oligonucleotide,DPO）设计,建立基于DPO引物特异性检测小肠结肠炎耶尔森氏菌的PCR方法.方法 以小肠结肠炎耶尔森氏菌16S 23SrRNA基因为靶基因,设计一对DPO引物,经过PCR反应体系优化,建立小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法.测定了检测灵敏度,以常规PCR方法作为参照,分析DP＆PCR方法的特异性及退火温度.结果 建立的小肠结肠炎耶尔森氏菌DPO-PCR检测方法的灵敏度为1.43×102 CFU/mL;与常规PCR方法相比,DP＆PCR方法在49～69℃退火温度范围内均能保持高效率扩增;特异性强,所测试17种病原菌中,仅小肠结肠炎耶尔森氏菌为阳性结果,且无非特异性扩增.结论 DPO-PCR方法不需要对引物参数特别是退火温度进行优化,特异性强,为致病微生物的快速准确检测提供了新方法.     

pYV质粒对小肠结肠炎耶尔森尔菌粘附侵袭上皮细胞及细胞毒…

小肠结肠炎耶尔森氏菌是一个重要的肠道致病菌，对其毒力质粒的研究已引起广泛关注，本文研究了含质粒和不含质粒菌株对上皮细胞粘附、侵袭、细胞毒性作用的差别，结果表明，质粒在该菌对上皮细胞的侵袭性方面没有明显影响，对粘附和细胞毒性作用却有较为明显的影响。     

温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因分布及遗传多样性研究

目的 了解温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌的毒力基因分布及遗传多样性特征。方法 对温州市食品及食源性疾病腹泻病人中分离得到的小肠结肠炎耶尔森氏菌进行生物型、血清型和耐药性分析,并基于全基因组测序进行菌株的毒力基因、多位点序列分型(MLST)、核心基因组多位点序列分型(cgMLST)分析。结果 71株食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌,94.4%(67/71)的分离株为生物1A型,生物血清型以1A/O∶5占比最高(29.6%,21/71)。分离株对14种抗菌药物的敏感率达到95.8%以上。共获得了16种126个毒力基因,其中2株菌株携带pYV质粒和染色体相关毒力基因。分离株以ST3型最常见(31.6%,12/38),cgMLST分析显示除具有相同ST型的菌株外,菌株无明显基因型簇形成。结论 温州市食源性小肠结肠炎耶尔森氏菌存在致病性菌株,菌株呈高度遗传多态性,需加强此类菌株的监测,以预防其引起食源性疾病的暴发。     

胶体金标记免疫层析法检测O∶9型小肠结肠炎耶尔森菌

目的建立一种简便快速的胶体金标记免疫层析(GICA)条用于检测标O∶9血清型小肠结肠炎耶尔森氏菌。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗小肠结肠炎耶尔森菌单克隆抗体,以硝酸纤维膜作为抗小肠结肠炎耶尔森氏菌单克隆抗体的包被载体,制成GICA检测条。被检小肠结肠炎耶尔森菌与检测卡上金标记抗体(Au-Ab)结合后,利用硝酸纤维膜的层析作用,与膜上的固相抗体结合形成可见的红色条带。结果GICA小肠结肠炎耶尔森菌检测条灵敏度可达104~105CFU/ml,与其他所选择肠杆菌科细菌均未发现交叉反应,仅与布鲁菌出现交叉。检测了50株O∶9血清型小肠结肠炎耶尔森氏菌,符合率为100%。结论GICA小肠结肠炎耶尔森菌检测条对小肠结肠炎耶尔森菌特异性强;简便快速,不需任何仪器设备;结果易于判断,可望用于标本快速筛查。     

吉林省啮齿动物感染耶尔森氏小肠结肠炎菌调查研究

目的 调查吉林省啮齿动物感染耶尔森氏小肠炎菌情况。方法 采用细菌分离和生化试验鉴定。结果 共检测来自吉林省镇赉、通榆、洮南和长春双阳地区的啮齿动物和家兔类粪便915份，检出小肠结肠炎菌15株，其中血清型0：9生物型2型11株，血清型为0：3生物型3型为4株。结论 吉林省啮齿动物中存在小肠结肠炎流行。     

中国致病性小肠结肠炎耶尔森菌生物分型研究

目的初步了解我国致病性小肠结肠炎耶尔森菌O∶3、O∶9血清型菌株的生物型分布,掌握我国致病性小肠结肠炎耶尔森菌的生物学特征。方法用文献报道方法对1986-2008年从我国不同地区的腹泻病人、家禽家畜、鼠类、食品、环境等各类宿主中分离到的427株致病性小肠结肠炎耶尔森菌进行生物分型。结果 427株致病性小肠结肠炎耶尔森中213株属于生物2型(49.9%),全部为O∶9血清型;208株属于生物3型(48.7%),其中191株为O∶3血清型,17株为O∶9血清型;6株属于生物4型(1.4%),全部为O∶3血清型。没有发现生物1A型、1B型与5型的致病性菌株。结论我国O∶3血清型致病性小肠结肠炎耶尔森菌以生物3型为主、O∶9血清型致病性菌株以生物2型为主,没有生物1B型菌株,与国外致病性菌株的生物血清型分布有一定差异。     

徐州地区小肠结肠炎耶尔森菌病原学初步研究

目的了解徐州地区小肠结肠炎耶尔森菌分布及病原学特征。方法对本地区分离到的菌株进行血清学分型、生化、药敏试验,并使用聚合酶链反应(PCR)技术检测毒力基因,同时对致病性血清型(O∶3和O∶9型)菌株进行脉冲场凝胶电泳分析。结果2014份标本中共检出32株(分布17个血清型)小肠结肠炎耶尔森菌,总检出率为1.59%。致病菌株占18.75%,携带ystB基因的占21.87%。32株小肠结肠炎耶尔森菌分为3个生物型别,其中1A型占78.12%,3型18.75%,2型为3.12%。本地区分离的3株O∶3血清型菌株的PFGE带型相同。结论该地区存在致病性小肠结肠炎耶尔森菌以及由此引起的腹泻疾病,尤其O∶3型菌株属于我国O∶3血清型小肠结肠炎耶尔森菌的主要克隆系,本地区应当进一步加强该菌的监测工作。     

pYV质粒对小肠结肠炎耶尔森氏菌粘附侵袭上皮细胞及细胞毒性作用的影响

小肠结肠炎耶尔森氏菌是一个重要的肠道致病菌,对其毒力质粒的研究已引起广泛关注。本文研究了含质粒和不含质粒菌株对上皮细胞（Ｈｅｐ－Ⅱ）粘附、侵袭、细胞毒性作用的差别。结果表明,质粒在该菌对上皮细胞的侵袭性方面没有明显影响,对粘附和细胞毒性作用却有较为明显的影响。     

携带ystB基因小肠结肠炎耶尔森菌分子流行病学研究

目的了解我国携带ystB基因小肠结肠炎耶尔森菌的分子流行病学特征。方法通过PCR扩增ystB基因;通过血清凝集实验和生化反应分析其血清型及生物型;使用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对其进行分子分型,并将带型进行聚类分析;ATBG-5试剂条测定菌株的耐药情况。结果所分析250株小肠结肠炎耶尔森菌均为生物1A型;包括至少23种血清型;通过PFGE分型,250株细菌共产生167个型别;多数菌株对阿莫西林、头孢噻吩、替卡西林等抗生素耐药,所有菌株对环丙沙星以及阿米卡星敏感。结论ystB基因仅出现在生物1A型小肠结肠炎耶尔森菌中;多数菌株对阿莫西林和部分头孢菌素类抗生素高度耐药,可能与这些菌株表达β-内酰胺酶有关;PFGE不能对携带ystB基因小肠结肠炎耶尔森菌进行有效的分子分型。     

六安市小肠结肠炎耶尔森菌检测及其分子生物学研究

目的调查本地腹泻病人和家畜家禽、昆虫苍蝇中小肠结肠炎耶尔森菌的感染及携带情况;通过对小肠结肠炎耶尔森菌的病原学和分子生物学研究来探讨动物带菌与人群之间的相互关系;为制定相应的防治对策提供科学依据。方法按照中国CDC编制《小肠结肠炎耶尔森菌实验室的病原学分离鉴定手册》第二、三版规定的程序进行病原学和分子生物学试验、研究。结果近年来自1 521份腹泻病人、家畜家禽等标本中分离出小肠结肠炎耶尔森菌109株,其阳性检出率分别为4.11%和11.04%;所有菌株均经生物梅里埃API 20E生化试验鉴定确认;不同标本中均检出致病性小肠结肠炎耶尔森菌,其毒力基因分布为ail+、ystA+、yadA+、virF+、rfbC+、ystB-,而非致病性菌株上述毒力因子均为阴性;致病性小肠结肠炎耶尔森菌PFGE分子分型检测证实腹泻病人,家畜家禽标本中的菌株带型类聚图高度一致。结论本地腹泻病人、家畜家禽和苍蝇标本均检出致病性和非致病性小肠结肠炎耶尔森菌;不同标本中分离的致病性小肠结肠炎耶尔森菌菌株毒力基因分布相同,均携带毒力质粒,PFGE分子分型检测基因组带型类聚图高度一致,从而可以认为猪是本地人群小肠结肠炎耶尔森菌病的重要传染源之一,牛、犬等在本病传播中的地位尚不能确定,有待进一步的调查与探讨。     

2种致病性耶尔森氏菌与鼠疫菌EV株的相互拮抗作用

目的研究3种对人致病性耶氏菌在试管内的拮抗作用,以探讨目前雷州半岛的鼠疫疫源性。方法分别将小肠结肠炎菌、假结核菌与鼠疫菌EV株等量同时混合接种于赫金格尔溶解血肉汤,在不同时间点取样并进行菌落计数。结果小肠结肠炎菌0：3、0：9、猪盲株、假结核519株抑制了EV株,而EV株抑制了假结核277株。结论所选3种致病性耶尔森氏菌株存在相互拮抗作用。