雷丸蛋白酶体外抗猪囊尾蚴组织学变化的观察

目的：寻找一种高效、低毒和价廉的杀虫药物，特别是在中草药中发掘有效杀囊虫药。方法：采用人工发酵雷丸菌（ ＯｍｐｈａｌｉａｌａｐｉｄｅｓｃｅｎｓＳｃｈｒｏｅｔｅｒ）蛋白酶进行体外杀囊虫试验，并制成石蜡切片，Ｈ．Ｅ．染色后，作镜检，观察其组织结构的变化情况。结果：雷丸蛋白酶对猪囊尾蚴大体形态、组织结构均有明显的破坏作用，可侵入实质细胞层。结论：证实了雷丸蛋白酶是杀囊虫的有效成分。     

以融合蛋白为抗原的简化Western blot法诊断囊虫病

目的：为囊虫的诊断提供简便有效的方法。方法：猪囊尾蚴cDNA表达文库中筛选出的β－半乳糖苷糖－猪囊虫cDNA编码的融合蛋白为抗原，进行简化的Westernblot分析。结果：四个克隆的融合蛋白（cC1、cC2、cP1和cH1）联合使用，检测124例人囊虫病血清中的抗囊尾蚴IgG抗体，阳性率达93．7％，三个克隆的融合蛋白（cC1、cC2、和cP1）联合使用，检测38例猪囊虫病血清中的相应抗体，阳性率达100％，均高于各克隆融合蛋白单独使用的阳性率，且与其他寄生虫病血清无交叉反应。结论：以融合蛋白为抗原所进行的Westernblot分析具有高度灵敏性和特异性，且简便易操作。     

包虫和猪囊虫抗原免疫化学性质及酶联免疫印斑技术临床应用研究

用 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶联免疫印斑技术分别对人源细粒棘球蚴囊液、棘球蚴砂、猪囊尾蚴囊液抗原组分进行分析研究,并对两种病血清学交叉反应进行了试验。结果显示包虫囊液抗原有29条蛋白区带,有两条糖蛋白带。猪囊虫囊液抗原显示36条蛋白带谱,两条糖蛋白带。棘球蚴砂显示23条蛋白带谱。包虫病人血清与印有包虫囊液抗原的硝酸纤维膜反应显示23条反应带,其中特异带为6条。包虫病人、猪囊虫病人血清与此膜反应显示4条共同反应带。包虫病人血清与棘球蚴砂抗原膜反应显示4条主要特异反应带,包虫病人血清、猪囊虫病人血清与此膜反应显示1条共同反应带。猪囊虫病人血清与猪囊虫囊液抗原膜反应显示22条反应带,其中有5条特异反应带;包虫病人和囊虫病人血清与此膜反应显示3条共同反应带。     

囊虫散胶囊治疗脑实质型脑囊尾蚴病的临床研究

目的观察囊虫散胶囊治疗脑实质型脑囊尾蚴病的临床疗效。方法选择脑实质型囊尾蚴病300例，随机分为3组，分别用吡喹酮，囊虫散胶囊及囊虫散胶囊＋吡喹酮治疗，对疗效、不良反应、治疗前后囊尾蚴钙化灶变化进行对比分析；囊虫散注射皮肌囊尾蚴结节，观察囊虫散胶囊杀灭囊尾蚴作用。结果囊虫散胶囊组治愈率82．1％，吡喹酮组治愈率67．4％，中西药结合组87．6％，差异有显著性（P〈0．01）。不良反应发生率，囊虫散胶囊组最低。囊虫散注射皮肌囊尾蚴结节，杀虫总有效率为97．6％（41／42）。结论囊虫散胶囊治疗脑实质型脑囊尾蚴病效果显著，不仅具有杀虫作用，同时促进死虫吸收，而且不良作用小，安全可靠。     

组织内猪囊尾蚴循环抗原含量与虫体发育阶段之间的关系

为了解猪囊尾蚴在宿主体内产生的循环抗原含量与其虫体发育阶段之间的关系，本文应用抗猪囊尾蚴单克隆抗体，以反向间接血换法对不同感染密度和不同发育程度的猪囊尾蚴病猪进行了特异性循环抗原的检测。结果表明：（1）发育成熟的囊尾蚴：低密度感染6头猪，18份样品，血凝效价为1：2（＋＋）～1：64（＋＋＋＋），其囊尾蚴循环抗原蛋白含量为0．15～4．0μg／ml；中密度感染猪5头，10份样品，血凝效价1：8（＋＋）～1：128（＋＋＋＋），其循环抗原蛋白含量为0．4～6．4μg／ml；高密度感染猪3头，6份样品，血凝效价为1：128（＋＋）～1：256（＋＋＋＋），其检出的蛋白含量为6.4～12．8μg／ml；（2）发育幼稚期的囊尾蚴：高密度感染猪2头，4份样品，血凝效价为1：2（＋＋）～1：4（＋＋＋＋），其循环抗原蛋白含量为0．15～0．3μg／ml。显示处于同一发育程度的囊尾蚴，感染密度越高，其被检出的蛋白含量越高；高密度感染的幼稚期囊尾蚴，其产生的抗原明显低于中、高密度感染的成熟期囊尾蚴者。提示了囊尾蚴产生的循环抗原量并非单纯地随虫荷的增加而增高，而与虫体发育阶段有密切关系。     

脑囊虫病临床异质性、病理变化与免疫反应

脑囊虫病,由猪囊尾蚴寄生于中枢神经系统引起。脑囊虫病临床异质性表现为从无症状到颅内高压、脑积水、蛛网膜炎、癫痫,甚至死亡。脑囊虫病病理变化表现为血脑屏障破坏、脑实质肉芽肿形成、局部及外周多种免疫细胞共同参与。脑囊虫病的临床异质性与病理变化均与宿主抗猪囊尾蚴免疫反应密切相关。本文就与脑囊虫病临床异质性、病理变化相关的抗囊尾蚴免疫、影响因素(囊尾蚴发育阶段、大小、数量、位置、基因组学;宿主年龄、性别、遗传背景)与免疫机制等做一综述。     

猪囊尾蚴蛋白水解酶的初步研究

猪带绦虫病是人畜共患病。迄今国内外对囊虫病的研究主要报道特异性的诊断方法[1 ,2 ] 和诊断抗原[3 ,4] 。Ｍａｎｏｕｔｃｈａｒｉａｎ等[5 ] 克隆了肥头绦虫囊尾蚴囊液蛋白编码 5 6、74和 78ｋＤａ的保护性抗原基因。孙树汉等[6 ] 以囊虫病患者血清和病猪血清为探针筛选猪囊尾蚴ｃＤＮＡ文库 ,克隆了用于诊断的人特异性抗原、猪特异性抗原及人、猪共同抗原。关于猪囊尾蚴蛋白水解酶 ,目前尚未见研究报道。本文从猪囊尾蚴体内提取蛋白酶 ,研究其对各种底物的分解活性及酶抑制剂和二价阳离子对酶活性的影响。 河北省自然科学基金资助项目 (…     

猪囊尾蚴表面蛋白及其抗原性的初步测定分析

本文初步分析了猪囊尾蚴囊壁表面蛋白的特性。根据囊尾蚴漂洗液PAGE和SDS-PAGE考马斯亮蓝染色带分别显示了9条及14条蛋白区带,其中大部分与宿主骨骼肌组织的可溶性蛋白有一致的迁移率,但其中第5、7、10条蛋白带为其独有。漂洗液与囊液兔高免血清IE可出现1条沉淀弧;用漂洗液蛋白抗原对35例囊虫病人血清做ELISA,阳性率为60％。此外,对囊虫表面宿主蛋白的可能作用,做了初步探讨。     

western blot 法诊断囊虫病的应用研究

目的：探讨四种猪囊尾蚴（Ｃｙｓｔｉｃｅｒｃｕｓｃｅｌｕｌｏｓａｅ）特异性抗原ｃＣ１、ｃＣ２、ｃＰ１、ｃＨ１（分子量分别为２８ｋＤａ、１８ｋＤａ、１４ｋＤａ、３４ｋＤａ）混合应用诊断人囊虫病的价值。方法：以猪囊尾蚴ｃＤＮＡ表达文库中筛选出的β－半乳糖苷酶－猪囊虫特异性抗原ｃＤＮＡ编码的融合蛋白（ｆｕｓｉｏｎｐｒｏｔｅｉｎｓ，ＦＰ）为抗原，作简化的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ（ｉｍｐｒｏｖｅｄＷｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ，ＩＷＢ）分析，检测１０７例囊虫病、４０例华支睾吸虫病、２４例包虫病和３４例健康人血清对融合蛋白的反应。同时应用粗制抗原（ｃｒｕｄｅａｎｔｉ－ｇｅｎ，ＣＡ）进行ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ对比检测。结果：在简化Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测中，ＦＰ被１０７例囊虫病患者血清中９４例（８７．９％）血清所识别，与华支睾吸虫病、包虫病患者及健康人血清无交叉反应，特异性为１００％。以粗制抗原作ＥＬＩＳＡ、ＩＨＡ检测囊虫病人血清中的ＩｇＧ抗体阳性率分别为８４．１％和７４．８％，与华支睾吸虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为２．５％、１２．５％；与包虫病患者血清存在交叉反应，假阳性率分别为８．３％、１６．７％；与健康人血清也存在交叉反应, 假阳性率分别为8. 8%、11. 8% 。结论: β－半乳糖苷酶2猪囊尾蚴FP 诊断囊虫病具有较高敏感性和高度的特异性。     

囊虫病快速免疫色谱测试法的建立和初步应用

目的：建立一种敏感，特异，简便快速的囊虫病免疫诊断方法。方法：以胶体金标记抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体，将另一抗猪囊尾蚴抗原单克隆抗体在硝酸醋酸混合纤维素膜上固定成一条线，制成免疫测试条，待测抗原与金标单克隆抗体结合后沿着硝酸醋酸混合纤维素膜移动，与膜上的特异性单克隆抗体结合形成肉眼可见的褐红色线，结果：当猪囊尾蚴囊液抗原量为5ng时，测试条仍呈阳性反应，检测脑囊虫病患者脑脊液（CSF）的阳性率为82．60％，检测健康人CSF的阴性符合率为100％，将本法检测CSF结果与ELISA比较，两方法的敏感性和特异性相似，结论：本方法敏感，特异，操作简便快速，试剂稳定，重复性好，在囊虫病的诊断中具有很好的应用前景。     

山东省带绦虫病与囊虫病重点疫区流行现状调查研究

目的 了解山东省带绦虫病与囊虫病在重点疫区的流行情况。方法 １９９９年对聊城等４市地的５县（区）１５个乡（镇）４３个行政村的３１１２４人进行了调查，结果 人群带绦惠恨，囊虫感染率５．１／万，有较明显的职业分布特征。人群血清猪囊尾蚴特异性Ｉｇｇ，抗体阳性率１．３８％，商品猪血清囊尾蚴抗体阳性率０．３８％。结论 初步搞清了山东省重点疫区带绦虫病与囊虫病的流行现状，并对该病的各流行环节做了分析，为该病的     

猪囊尾蚴感染仔猪淋巴细胞凋亡率的变化

猪囊尾蚴之所以能够在宿主体内寄生,可能与宿主的免疫力降低有关。为了探讨猪囊尾蚴病的发病机制,本文研究了猪囊尾蚴发育过程中宿主淋巴细胞凋亡率的变化。1 材料与方法1.1 材料 猪带绦虫虫卵由黑龙江省“驱绦灭囊”办公室、哈尔滨医科大学寄生虫学教研室、吉林农业大学囊虫病研究所提供。病人服用“驱绦丸”后,排出的新鲜、成熟的孕卵节片(经鉴定为猪带绦虫节片),作为供试虫卵。15头仔猪由黑龙江省政     

McAb4F8、McAb1F11与囊尾蚴抗原作用免疫印渍分析

将猪囊尾蚴囊液抗原（ＣＣＦＡ）和脑囊虫病病人脑脊液（ＰＣＳＦ）进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳分析，发现在ＣＣＦＡ中有１４条蛋白带，范围在２８～７６ｋＤａ。脑囊虫病病人ＣＳＦ中有６条蛋白带，范围在３３～８３ｋＤａ。用ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ与ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１ＦＩ１１免疫印迹试验，证明ＣＣＦＡ中５０、５３、６３和７０ｋＤａ蛋白带与两株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅能被ＭｃＡｂ１Ｆ１１识别。ＰＣＳＦ中的６条蛋白带中有３条（５３，６３和７０ｋＤａ）与２株ＭｃＡｂ均有反应，另一条蛋白带３３ｋＤａ仅与ＭｃＡｂ１Ｆ１１反应。２例对照脑脊液中未出现反应带。结果显示ＭｃＡｂ４Ｆ８和ＭｃＡｂ１Ｆ１１均抗ＣＣＦＡ和ＰＣＳＦ中的主要蛋白带。     

IFAT和McAb—LAT诊断囊虫病的诊断

本文采用猪囊尾蚴冰冻切片抗原间接荧光抗体试验（ＩＦＡＴ）和抗猪囊尾蚴单克隆抗体乳胶凝集试验（ＭｃＡｂ－ＬＡＴ）对囊虫病患者进行特异性抗体和抗原的检测，囊虫病患者抗体检出率为８３．７１％，分型抗体检测，混合型及脑型检出率明显高于皮肌型（Ｐ〉０．０１）；患者循环抗原的检出率为７３．０５％，脑型患者囊虫活动期的循环抗原的阳性率明显高于囊虫钙化期（Ｐ〈０．０１），药物治疗３个月以上患者循环抗原的阳性率降为     

猪带绦虫Tsl4-3-3.6蛋白多克隆抗体制备及在不同发育阶段的表达北大核心CSCD

目的制备猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体,并检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫及囊尾蚴阶段的表达情况。方法合成Ts14-3-3.6基因全长,然后克隆至pCznI原核表达质粒,转化至大肠埃希菌ArctieEx-press中并诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析,通过Ni柱亲和纯化获得Ts14-3-3.6重组蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰兔,制备抗Ts14-3-3.6多克隆抗体,以此为一抗采用Western blot检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段的表达。结果pCznI一Ts14-3-3.6重组表达质粒构建成功,诱导表达的Ts14-3-3.6重组蛋白存在于包涵体中,相对分子质量约29.43X102。Western blot检测纯化带有His标签的Ts14-3-3.6重组蛋白能被His标签抗体识别;用该蛋白免疫新西兰兔获得效价为1:512000的多克隆抗体;分别以提取的猪带绦虫成虫和囊尾蚴总蛋白为抗原进行Westernblot,均出现与Ts14-3-3.6多克隆抗体、囊虫病人血清及囊虫病猪血清反应条带,即均有该蛋白的表达。结论成功制备猪带绦虫Ts14-3-3.6重组蛋白并获得较高纯度的特异性高效价多克隆抗体。Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段均有表达。     

灭囊灵对体外培养的猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响

目的　探讨灭囊灵杀灭猪囊尾蚴的作用机理。方法　应用PAGE和薄层扫描技术 ,观察灭囊灵对体外培养猪囊尾蚴虫体蛋白质组分及含量的影响。结果　灭囊灵组囊尾蚴蛋白经PAGE可分离出 17～ 2 5条蛋白带。经薄层扫描分析 :灭囊灵 0 6ml、1 2ml和 2 4ml三个剂量组在 70～ 75区段蛋白扫描无峰 ;0 6ml组在 10 5～ 110区段峰值最高 ,1 2ml和 2 4ml剂量组在 110～ 115区段峰值最高。峰面积积分值占 8%以上者为高峰带 ,0 6ml和 2 4ml组可见 6个高峰 ,1 2ml组可见 5个高峰。以上三项指标与原囊尾蚴和空白对照组均有明显差别。结论　灭囊灵对猪囊尾蚴虫体蛋白组分和含量均有明显影响     

全蝎乙醇提取物体外对猪囊尾蚴的作用

目的 :证实全蝎乙醇提取物杀灭猪囊尾蚴的作用。方法 :采用 15%新鲜猪胆汁常水溶液作为培养基 ,加入全蝎 ( Scorpion)乙醇提取物 ( 2 6mg/ ml,相当于 4 g生药量 ) ,对猪囊尾蚴进行体外培养实验。结果 :表明全蝎乙醇提取物具有显著杀灭猪囊尾蚴的作用。对全蝎乙醇提取物体外培养 4 h、 6h、 8h后的猪囊尾蚴的组织学观察表明 ,猪囊尾蚴在接触药液 4 h后 ,有明显的病理改变 ,并随着与药液接触时间的延长而加重。光镜下观察可见的特征是 :微毛剥脱至消失 ,皮层肿胀、坏死或变性 ,实质层钙质小体扩大、空虚和外移 ,已孵出的头节顶突和吸盘肿胀变形、吸沟变宽。结论 :全蝎乙醇提取物体外能破坏猪囊尾蚴皮层微毛和头颈节片而达到杀灭作用。     

福建省绦、囊虫病流行现状调查

目的 了解福建省猪带绦虫病、囊虫病流行现状。方法 随机选择5个县（市、区）16个村（点）。检测受检者血清猪带绦、囊虫抗体，阳性者询问病史。结果共查16371人，人群抗体阳性率为2．28%（89／3899）；人体猪带绦虫感染率为0．02％（3／16371）。结论 福建省流行猪带绦、囊虫病，应引起重视。     

脑囊虫病药物治疗研究进展

脱囊虫病是发展中国家的重要公共卫生问题。在拉丁美洲、非洲、亚洲猪条带绦虫流行区患病率高达总人口的2％－4％，约占癫痫病患病因的50％。据对猪囊尾蚴抗原免疫印迹试验阳性CT进行随访的结果表明，18％（3／17）患脑囊虫病，脑囊虫病患家庭成员中12％的血清反应阳性^[4]。     

猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体制备及在不同发育阶段的表达

目的制备猪带绦虫Ts14-3-3.6蛋白多克隆抗体,并检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫及囊尾蚴阶段的表达情况。方法合成Ts14-3-3.6基因全长,然后克隆至pCznI原核表达质粒,转化至大肠埃希菌Arctic Express中并诱导表达,采用SDS-PAGE和Western blot对表达产物进行分析,通过Ni柱亲和纯化获得Ts14-3-3.6重组蛋白。将该重组蛋白免疫新西兰兔,制备抗Ts14-3-3.6多克隆抗体,以此为一抗采用Western blot检测Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段的表达。结果 pCznI-Ts14-3-3.6重组表达质粒构建成功,诱导表达的Ts14-3-3.6重组蛋白存在于包涵体中,相对分子质量约29.43×10~3。Western blot检测纯化带有His标签的Ts14-3-3.6重组蛋白能被His标签抗体识别;用该蛋白免疫新西兰兔获得效价为1∶512 000的多克隆抗体;分别以提取的猪带绦虫成虫和囊尾蚴总蛋白为抗原进行Western blot,均出现与Ts14-3-3.6多克隆抗体、囊虫病人血清及囊虫病猪血清反应条带,即均有该蛋白的表达。结论成功制备猪带绦虫Ts14-3-3.6重组蛋白并获得较高纯度的特异性高效价多克隆抗体。Ts14-3-3.6蛋白在猪带绦虫成虫和囊尾蚴阶段均有表达。