miR-125b抑制胶质瘤细胞增殖作用机制研究

目的 探讨 miR-125b抑制胶质瘤细胞增殖的分子作用机制。方法 选取2016年12月至2017年12月宁夏医科大学总医院收治的胶质瘤患者32例（男18例、女14例）,选择同期行脑内血肿清除术的脑出血或因颅脑损伤行颅内减压术的但脑组织正常患者31例为对照组（男15 例、女 16 例）。利用qPCR法检测miR-125b在胶质瘤组织和人胶质瘤细胞系 LN229的表达,通过转染miR-125b 模拟物,检测miR-125b对胶质瘤细胞LN229增殖的抑制作用,采用Targetscan、miRanda等预测软件对miR-125b的作用靶点进行预测,以双荧光素酶报告基因系统分析miR-125b与STAT3的相互作用,运用Western blot法检测miR-125b对胶质瘤细胞LN229中STAT3表达的影响。结果 与正常癌旁脑组织相比较,胶质瘤组织中miR-125b的表达水平明显降低,胶质瘤细胞系LN229中miR-125b的表达与正常星形胶质细胞明显降低,相比于NC 模拟物,转染miR-125b 模拟物之后LN229细胞的增殖显著抑制,双荧光素酶报告基因系统检测显示,miR-125b 可直接调控STAT3 转录活性,而且miR-125b显著抑制LN229细胞STAT3表达。结论 miR-125b可靶向STAT3的表达从而调控胶质瘤细胞的增殖。     

环状RNA＿000926通过靶向miR-411-5p调控宫颈癌细胞的增殖和凋亡

目的：探讨环状RNA＿000926(circ＿000926)对宫颈癌细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法:收集2019年5月至2020年9月河北医科大学第一医院手术切除的30例宫颈癌患者的癌及癌旁组织标本,以及人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和正常宫颈细胞Ect1/E6E7,用qPCR法检测组织和细胞中circ＿000926和miR-411-5p的表达水平。将circ＿000926过表达质粒及空白质粒、circ＿000926小干扰RNA及阴性对照寡核苷酸、miR-411-5p mimic和阴性对照质粒分别转染HeLa和SiHa细胞,分为pc-circ＿000926组、pc-NC组、si-circ＿000926组、si-NC组、miR-411-5p mimic组和miR-NC组。通过CCK-8法检测转染细胞的增殖活力,TUNEL法检测细胞的凋亡水平。通过双荧光素酶报告基因实验验证circ＿000926与miR-411-5p之间的靶向关系,WB法检测细胞中Ki67、BAX、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达。结果:与癌旁组织和Ect1/E6E7细胞相比,宫颈癌组织和He La...     

hsa＿circ＿0140180通过调控miR-1287-5p影响食管鳞状细胞癌细胞的迁移及侵袭能力

目的：探讨hsa＿circ＿0140180在食管鳞状细胞癌（ESCC）细胞中的表达水平及对其细胞恶性生物学行为的影响与分子机制。方法：收集2018年11月至2019年3月间在南充市中心医院胸心外科手术切除的6对ESCC组织和对应癌旁组织并进行全转录组测序,筛选出在ESCC组织中低表达的hsa＿circ＿0140180;建立过表达hsa＿circ＿0140180的TE-1和KYSE30细胞,qPCR法检测hsa＿circ＿0140180在人正常食管上皮细胞、ESCC细胞中的表达,以及过表达hsa＿circ＿0140180后TE-1和KYSE30细胞中miR-1287-5p的表达;CCK-8法和FCM检测过表达hsa＿circ＿0140180对TE-1和KYSE30细胞增殖和周期的影响;划痕实验和Transwell实验检测过表达hsa＿circ＿0140180对TE-1和KYSE30细胞迁移和侵袭能力的影响,双荧光素酶报告实验验证hsa＿circ＿0140180与miR-1287-5p的靶向关系。WB法检测过表达hsa＿circ＿0140180对TE-1和KYSE30细胞中EMT相关蛋白的...     

circ＿0000615通过靶向miR-432-5p调控胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨circ＿0000615在胆管癌细胞中的表达及其对胆管癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响和可能的调控机制。方法:通过qPCR检测circ＿0000615在正常胆管上皮HIBEC细胞和胆管癌CCLP-1、QBC939、TFK-1和RBE细胞中的表达水平。双荧光素酶报告基因实验验证circ＿0000615与miR-432-5p的靶向关系。将si-NC、si-circ＿0000615(si-circ-1、si-circ-2)、inhibitor-NC和inhibitor-miR-432-5p转染至CCLP-1和QBC939细胞,转染细胞分为si-NC组、si-circ-1组、si-circ-2组、si-NC+inh-NC组、si-NC+inh-miR-432-5p组和si-circ-1+inh-miR-432-5p组,通过CCK-8、EdU和Transwell实验检测各转染组胆管癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:在胆管癌细胞中circ＿0000615呈高表达而miR-432-5p呈低表达(P<0.05或P<0.01);双荧光素酶报告基因实验证实circ＿0000615与...     

miRNA-34a对胶质瘤SHG-44细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)在人脑胶质瘤组织中的表达以及其对胶质瘤SHG-44细胞增殖和凋亡的影响。方法:20例胶质瘤组织标本均取自于青岛医学院附属医院神经外科(2007年01月至2010年12月),作为对照的正常脑组织取自5位重症脑外伤需行减压手术的患者。Real-time PCR检测胶质瘤组织中miR-34a的表达。体外转染miR-34a mimics至SHG-44细胞中,MTT实验、流式细胞术检测SHG-44细胞的增殖、细胞周期及凋亡。结果:miR-34a在人脑胶质瘤组织中的表达量明显低于正常脑组织,其在Ⅲ、Ⅳ期胶质瘤组织中表达量明显低于Ⅰ、Ⅱ期胶质瘤组织。miR-34amimics体外转染组与空白组相比,其细胞增殖抑制率明显提高[(37.24±5.72)%vs(4.19±0.63)%,P<0.01];miR-34amimics转染组SHG-44细胞G1期比例明显高于空白对照组[(61.78±2.01)%vs(50.91±1.19)%,P<0.05];且miR-34a转染组细胞凋亡率与空白组细胞相比显著升高[(15.28±3.65)%,vs(2.07±0.84)%,P<0.01]。结论:miR-34a在人脑胶质瘤组织中低表达,miR-34a可抑制SHG-44细胞的增殖、诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。     

Girdin对恶性胶质瘤细胞增殖和运动能力的影响

  目的  观察抑制恶性胶质瘤LN229细胞中Girdin蛋白的表达对细胞运动的影响, 并探讨其分子机制。   方法  用小RNA干扰技术降低恶性胶质瘤细胞株LN229中Girdin蛋白的表达水平, 通过Western blotting技术验证其降表达效率, 并筛选出稳定降表达的克隆命名为siGirdin/LN229, 阴性对照组命名为scr/LN229。利用增殖实验检测LN229细胞的存活率; 应用划痕实验和侵袭实验检测细胞的运动变化。通过慢病毒感染技术来提高Girdin在LN229细胞中的表达水平, 使用嘌呤霉素筛选2周建立稳定的细胞系, 并用Western blot验证Girdin表达水平。   结果  Western blotting验证小RNA干扰技术有效沉默了LN229细胞中Girdin的表达。增殖实验显示siGirdin/LN229细胞增殖能力下降(P < 0.05), 至第6天时实验组细胞数为(19.98±2.54)×104; 对照组细胞数为(61.04±5.26)×104。划痕实验发现细胞非定向运动能力减弱(P < 0.05), 24 h时实验组细胞运动的距离为(21.83±2.52)μm; 对照组为(44.16±2.89)μm。Western blotting结果表明LN229细胞中Girdin的表达增高, 增殖实验显示过表达Girdin对LN229细胞增殖能力无影响。体外细胞侵袭实验中实验组穿过Matrigel胶的细胞数为(14.67±2.08)个; 对照组为(32.67±3.06)个, 结果显示Girdin降表达后细胞的侵袭能力较对照组细胞显著下降(P < 0.05)。   结论  Girdin和胶质瘤细胞增殖和运动能力密切相关, Girdin蛋白表达降低可抑制LN229细胞的增殖、迁移和侵袭能力。      

miR-124通过靶向调控AURKA抑制胶质瘤细胞的增殖

目的:探索miR-124及AURKA对胶质瘤细胞增殖能力的影响并探索其机制.方法:通过PCR测定胶质瘤组织及非肿瘤组织中miR-124、AURKA的表达水平;将携带miR-124的脂质体miR-124 mimic、空载体miR-124转染入胶质瘤细胞系LN-229和T98G中,吸光度观察miR-124对胶质瘤细胞系LN...     

胶质瘤组织中miR-205-5p的表达及其对胶质瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨miR-205-5p在胶质瘤中的表达以及对胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的调控及可能的作用机制。方法 收集2018 年6 月至2019 年12 月于郴州市第一人民医院诊治的58 例新发神经胶质瘤患者的胶质瘤组织和癌旁组织标本。将miR-205-5p mimic转染至U251和T98G细胞,构建过表达细胞模型。采用RT-qPCR检测胶质瘤组织及细胞模型中miR-205-5p的表达水平并分析其表达水平与患者临床病理特征的关系,CCK-8法、平板克隆形成实验、划痕实验和Transwell小室实验分别检测胶质瘤细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭情况,Western blot检测过表达miR-205-5p对Runt相关因子2（runt-related gene 2,Runx2）蛋白表达水平的影响;用双荧光素酶报告基因实验检测miR-205-5p与Runx2的靶向关系。结果 miR-205-5p在胶质瘤组织和胶质瘤细胞U251和T98G中低表达（均P＜0.01）,其表达水平与肿瘤大小和病理分级有关（均P＜0.05）。过表达miR-205-5p可以显著抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力（均P＜0.05）。双荧光素酶报告实验证实Runx2基因是miR-205-5p的潜在靶基因。过表达miR-205-5p可明显下调胶质瘤细胞中Runx2蛋白的表达水平（P＜0.001）。结论 miR-205-5p在胶质瘤中低表达,过表达miR-205-5p可抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭,作用机制可能与靶向调控Runx2有关。     

miR-210在不同病理分级的脑胶质瘤中的表达差异及对肿瘤细胞的作用

目的:探讨microRNA-210（miR-210）在脑胶质瘤中的表达，分析其对脑胶质瘤细胞凋亡和侵袭能力的影响。方法:选取2015年3月至2019年4月在我院治疗的56例原发性胶质瘤患者为肿瘤组，同时选取因颅脑损伤行颅内减压和癫痫手术但脑组织正常的23例患者为对照组，取患者少量脑组织，采用实时定量PCR检测miR-210表达。收集肿瘤组患者病理资料，分析不同病理特征患者的miR-210表达差异。对提取的部分胶质瘤细胞，根据是否做miR-210抑制剂转染分为转染和未转染miR-210抑制剂两组，采用流式细胞仪和Transwell法检测两组的胶质瘤细胞凋亡及侵袭能力的变化。结果:肿瘤组的miR-210相对表达量明显高于对照组（P＜0.01）。WHO不同分级患者的胶质瘤组织中miR-210的表达比较有统计学意义（P＜0.01），其中Ⅳ级患者最高、Ⅰ级患者最低。转染和未转染miR-210抑制剂组的胶质瘤细胞凋亡率比较差异无统计学意义（P＞0.05）；转染miR-210抑制剂组穿膜细胞数明显低于未转染miR-210抑制剂组（P＜0.01）。结论:脑胶质瘤中miR-210呈高表达，其表达量与病理分级升高呈正相关，可促进脑胶质瘤细胞侵袭能力。     

miR-147对胶质瘤U87细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的:比较胶质瘤患者胶质瘤组织和瘤旁组织中miR-147表达水平的差异性,进一步分析miR-147与胶质瘤细胞生物学活性的相关性。方法:通过实时荧光定量PCR检测65例胶质瘤患者瘤组织和瘤旁组织中miR-147的表达水平;采用Lipofectamine 2000转染法转染胶质瘤细胞,分为miR-147 mimics组和NC组,检测两组转染效率;进一步通过CCK-8实验、流式细胞实验和Transwell实验比较两组细胞生物活性。结果:胶质瘤组织中miR-147表达水平显著低于瘤旁组织;与NC组比较,miR-147 mimics组细胞不论是增殖能力还是侵袭能力都明显降低,但是,miR-147 mimics组的细胞凋亡率升高。结论:胶质瘤组织中存在miR-147低表达的现象。miR-147在胶质瘤细胞中表达升高能够抑制细胞的增殖能力、降低其侵袭能力,并促使更多的细胞发生晚期凋亡。miR-147可能在胶质瘤中扮演着抑癌基因的重要角色。     

下调miR-93表达抑制人脑胶质瘤细胞生长和侵袭的研究

目的 验证下调miR-93表达对人脑胶质瘤细胞株的生长和侵袭抑制作用.方法 合成miR-93抑制物,应用脂质体转染人脑胶质瘤细胞以抑制其表达,实时定量PCR检测转染后miR-93表达情况,流式细胞术检测、四甲基偶氮噻唑法(MTT)试验和软琼脂克隆形成实验评价细胞生长变化,tran-swell实验检测细胞侵袭能力的变化.结果 转染miR-93抑制物后,细胞中miR-93高表达被明显抑制,细胞周期进展迟滞,S期细胞减少,生长速度减慢,克隆形成能力减弱,穿过matrigel胶的细胞数减少,侵袭能力被抑制.结论 下调miR-93表达可抑制胶质瘤细胞的生长和侵袭.     

YAP调控人胶质瘤细胞生长的体外研究

  目的   研究YAP（Yes-associated protein）调控人脑胶质瘤细胞系LN229细胞生长的作用。   方法   采用YAP干扰RNA（siRNA）敲低LN229细胞中YAP的表达,Western Blot法鉴定肿瘤细胞中YAP是否已被敲低;MTT比色法测定YAP敲低后对肿瘤细胞增殖的影响;Transwell实验检测胶质瘤细胞侵袭能力的变化;流式细胞术和Annexin Ⅴ标记法分别检测胶质瘤细胞周期及凋亡的变化。Western Blot法检测相关蛋白。   结果   经Western Blot法检测证实转染YAP siRNA后LN229细胞中YAP被有效敲低;敲低LN229细胞中YAP表达,可以抑制胶质瘤细胞增殖,阻滞细胞周期于G₀/G₁期,并可抑制细胞侵袭能力,促使细胞凋亡数显著增加。促增殖蛋白Ki-67、促侵袭蛋白MMP-9、促周期进展蛋白Cyclin D1以及凋亡相关蛋白Bcl-2表达明显下调。   结论   敲低人胶质瘤细胞中YAP活性可以抑制肿瘤细胞增殖和侵袭,促进凋亡,为进一步探究Hippo-YAP信号通路在胶质瘤中的分子病理机制中的作用提供依据。      

DNA甲基化对miR-133a表达及胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨miR-133a在胶质瘤细胞中的表达及DNA甲基化对其的调控机制并初步探究miR-133a对胶质瘤细胞增殖及凋亡的影响。方法:通过RT-PCR检测胶质瘤组织与正常对照脑组织中miR-133a的表达差异;MSP实验检测胶质瘤组织与正常对照脑组织中miR-133a基因甲基化程度;BSP实验检测正常胶质细胞株HEB与胶质瘤细胞株A172、U87、U251中miR-133a基因的甲基化水平;去甲基化试剂AZA与胶质瘤细胞株A172、U87、U251共培养72 h后,RT-PCR检测上述3株胶质瘤细胞中的miR-133a表达变化;MTT及Annexin V-FITC凋亡实验分别检测AZA处理后的3株胶质瘤细胞的增殖与凋亡能力变化。结果:RT-PCR实验表明与正常对照脑组织相比,胶质瘤组织中miR-133a表达显著下降;MSP实验结果显示,与正常对照脑组织相比,胶质瘤组织中miR-133a基因的甲基化水平明显增高;BSP实验结果显示与正常对照胶质细胞株HEB相比,胶质瘤细胞A172、U87、U251中miR-133a基因的甲基化水平显著增加;RT-PCR实验显示与去甲基化试剂AZA共培养72 h后,胶质瘤细胞株A172、U87、U251细胞中miR-133a的表达显著增加。MTT与Annexin V-FITC凋亡实验结果表明,去甲基化试剂AZA处理后,胶质瘤细胞A172、U87、U251的增殖能力明显下降,细胞的凋亡发生率显著增加。结论:胶质瘤细胞中DNA甲基化通过调控miR-133a的表达而沉默后者发挥抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡的功能。     

外泌体来源的miR-181a促进胶质瘤的血管生成

目的:探讨外泌体来源的miR-181a对胶质瘤血管生成和肿瘤进展的影响.方法:选用2017年8月至2019年12月海南医学院第二附属医院手术切除的83例胶质瘤和13例瘤旁组织标本,以及胶质瘤细胞U87、A172、U251、LN229、U373和小神经胶质细胞HM,用qPCR法检测瘤组织和细胞中miR-181a的表达水平...     

circ＿RNF111靶向miRNA-361-5p对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡能力的影响

目的 探讨circ＿RNF111靶向miRNA-361-5p对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖和凋亡能力的影响。方法 取80例NSCLC患者的肿瘤组织及相应癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测circ＿RNF111和miRNA-361-5p的相对表达量,并分析不同临床特征NSCLC患者肿瘤组织中circ＿RNF111和miRNA-361-5p的表达情况。采用双荧光素酶报告实验检测circ＿RNF111和miRNA-361-5p的靶向关系。将siNC、si-circ＿RNF111、miRNA-NC、miRNA-361-5p mimic分别转染至A549细胞,分别作为si-NC组、si-circ＿RNF111组、miRNA-NC组、miRNA-361-5p mimic组;将si-circ＿RNF111分别与anti-miRNA-NC、miRNA-361-5p inhibitor共转染至A549细胞,分别作为si-circ＿RNF111+anti-miRNA-NC组、si-circ＿RNF111+miRNA-361-5p inhibitor组,采用噻唑蓝（MT...     

环状RNA circ＿104939在肺腺癌组织中的作用研究

目的:探讨环状RNA circ＿104939在肺腺癌组织中的临床意义。方法:采集10例肺腺癌病人的肿瘤组织和癌旁组织进行环状RNA测序分析，以肿瘤组织表达明显增高的环状RNA circ＿104939作为研究对象。利用qRT-PCR检测30对肺腺癌组织与癌旁组织中circ＿104939的表达量，验证测序结果。用qRT-PCR检测和分析circ＿104939在肺腺癌细胞系(HCC-78、A549、KTA-7以及PC-9)和正常人支气管上皮细胞BEAS-2B中的表达差异。siRNA敲减circ＿104939后，用MTT、平板划痕实验、Transwell实验、流式细胞术检测细胞周期实验分别检测肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)增殖、迁移、侵袭以及细胞周期的变化。利用RNA pulldown和荧光素酶报告实验验证circ＿104939的可能靶标miR-191-5p。siRNA敲减circ＿104939后，将肺腺癌细胞(KTA-7和PC-9)分别皮下注射到裸鼠体内构建荷瘤小鼠模型，检测移植瘤体积以及质量。结果:相比癌旁组织，肺腺癌组织中的circ＿104939表达显著增高(P<0.01);c...     

miR-1290通过抑制干扰素调节因子-2调控非小细胞肺癌的增殖

  目的  探讨微小RNA-1290（miR-1290）在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）组织中的表达及其相关调控机制。  方法  采用实时荧光定量PCR检测成都市双流区第一人民医院2014年6月至2017年6月41例NSCLC患者癌组织、癌旁组织以及NSCLC细胞株A549、H460及正常支气管上皮细胞BEAS-2B中miR-1290表达;qPCR、Western blot检测癌组织、癌旁组织IRF2 mRNA和蛋白表达;将A549和H460细胞分为miR-1290 mimic组（转染miR-1290 mimic）、miR-1290 inhibit组（转染miR-1290 inhibit）和miR- 1290 NC组（不转染）。分别于转染24、48、72、96 h后采用CCK-8法检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成数,Transwell小室检测细胞侵袭数,双荧光素酶报告基因实验检测miR-1290与干扰素调节因子-2（interferon regulatory factor,IRF2）3′-UTR结合情况,qPCR检测不同miR-1290表达水平的A549和H460细胞IRF2 mRNA表达。  结果  癌组织miR-1290相对表达量明显高于癌旁组织,IRF2 mRNA和蛋白相对表达量明显低于癌旁组织,差异具有统计学意义（P < 0.05）;NSCLC组织miR-1290表达与IRF2 mRNA、蛋白表达呈显著负相关（P < 0.05）。NSCLC患者中,淋巴结转移者miR-1290表达明显高于无淋巴结转移者,Ⅲ/Ⅳ期患者miR-1290表达明显高于Ⅰ/Ⅱ期,差异具有统计学意义（P < 0.05）。转染72、96 h后,A549和H460细胞miR-1290 mimic组增殖能力明显高于miR- 1290 NC组,miR-1290 inhibit组增殖能力明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。A549和H460细胞中miR-1290 mimic组细胞克隆数和侵袭细胞数明显高于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组克隆数和侵袭细胞数明显低于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。双荧光素酶报告基因实验显示miR-1290能与IRF2 3′-UTR结合,明显降低荧光值（P < 0.05）。A549和H460细胞中,miR-1290 mimic组IRF2相对表达量明显低于miR-1290 NC组,miR-1290 inhibit组IRF2相对表达量明显高于miR-1290 NC组,差异具有统计学意义（P < 0.05）。  结论  miR-1290在NSCLC组织和细胞中高表达,miR-1290可能通过与IRF2结合,促进肿瘤细胞的增殖和侵袭。      

miR-423-5p调控PDCD5表达增强神经胶质瘤细胞替莫唑胺耐药性

目的：探讨miR-423-5p在人脑神经胶质瘤组织和细胞中的表达及其调控程序性细胞死亡蛋白5（programmed cell death protein 5,PDCD5）增强胶质瘤细胞对替莫唑胺（temozolomide,TMZ）的耐药性。方法：收集2017年1月至2018年12月北 华大学附属医院神经外科手术切除的20例脑神经胶质瘤患者的瘤及瘤旁组织标本,以及胶质瘤细胞系U251、 U87、SHG-44和人 脑小胶质细胞株HMC-3, 用qPCR法检测胶质瘤组织及细胞系中miR-423-5p和PDCD5的表达水平。用合成的miR-423-5p mimics 和miR-NC分别转染U251和U87细胞,同时用不同浓度（50、100、150和200 μmol/L）的TMZ处理细胞,检测转染细胞对TMZ的 耐药性,用MTT法、克隆形成实验检测转染细胞的增殖活力,用Western blotting检测U251、 U87细胞中c-caspase 3、Bcl-2和 PDCD5蛋白的表达。用双荧光素酶报告基因实验验证 miR-423-5p 与 PDCD5 的靶向关系。结果：miR-423-5p 在脑神经胶质 瘤组织和胶质瘤细胞系中均高表达（均P<0.01）。与miR-NC组比较,miR-423-5p mimics组U251和U87细胞的增殖能力明显增 强（均P<0.01）, 对TMZ的耐药性增强。双荧光素酶报告基因实验证实miR-423-5p可与PDCD5 3'' UTR结合,抑制PDCD5的表 达。结论：miR-423-5p高表达增强胶质瘤细胞对TMZ的耐药能力,其可作为临床胶质瘤治疗的潜在新靶点。     

环状RNA hsa＿circ＿0001922对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制

目的 探讨环状RNA hsa＿circ＿0001922对前列腺癌细胞PC-3增殖、迁移和侵袭的影响及其潜在分子机制。方法 qRT-PCR、RNA FISH分别检测hsa＿circ＿0001922在前列腺癌细胞PC-3中的表达水平及定位。靶向抑制hsa＿circ＿0001922后,使用克隆形成、Transwell实验及划痕实验检测PC-3细胞增殖、迁移和侵袭的能力;qRT-PCR、Western blot检测抑制hsa＿circ＿0001922后EMT通路相关分子表达水平。结果 环状RNA hsa＿circ＿0001922在前列腺癌细胞PC-3中表达上升(P<0.01)且存在于细胞质和细胞核中。靶向抑制hsa＿circ＿0001922后,细胞增殖、迁移和侵袭能力明显减弱(P<0.05),E-cadherin mRNA表达水平上升(P<0.05),而Vimentin mRNA水平下降(P<0.05)。Western blot检测结果与上述一致(均P<0.05)。结论 环状RNA hsa＿circ＿0001922可能通过EMT途径促进PC-3细胞的增殖、迁移及侵...     

EGF上调hMena的表达促进人胶质瘤细胞迁移能力的体外研究

背景与目的:有研究表明hMena可通过EGF启动细胞内多条信号传导道路,指导细胞迁移、黏附、增殖、分化、凋亡等过程。本研究探讨EGF通过上调hMena的表达对胶质瘤细胞迁移运动能力的影响。方法:Western blot检测经100ng/mLEGF处理的人胶质瘤细胞系LN229细胞hMena的表达情况,观察细胞形态的变化,划痕实验与Transwell检测细胞迁移运动能力。结果:100ng/mL EGF可上调人胶质瘤细胞系LN229细胞中hMena的表达(P<0.05),经EGF处理后LN229细胞伪足明显增多,穿过transwell小孔的细胞数为73.67±6.57,显著高于对照组(38.00±5.51)(P<0.05),划痕损伤后迁移的距离为(106.71±5.49)μm,显著高于对照组细胞迁移距离(69.67±6.12)μm,(P<0.05)。结论:EGF可以上调hMena的表达,并增强细胞的迁移运动能力。