同型半胱氨酸与白细胞黏附分子CD11b、CD18关系的体内外研究

目的 研究探讨同型半胱氨酸(HCY)与炎性指标白细胞黏附分子CD11b/CD18之间的关系.方法 体外研究:用免疫萤光流式细胞仪检测体外HCY和健康人血白细胞表面黏附分子CD11b、CD18的表达.体内研究:选择75例急性冠脉综合征(ACS)患者为ACS组,35例稳定性心绞痛(NACS)患者为NACS组,35名健康人为对照组.采用酶联免疫法测定血浆HCY水平,通过流式细胞仪采用直接免疫荧光法测定白细胞黏附分子CD11b/CD18的表达,同时对血浆C-反应蛋白(CRP)含量和白细胞计数等进行检测和分析.结果 ①HCY在体外明显增加CD11b和CD18在各种白细胞的表达,这种作用随HCY浓度升高而增强.②ACS组血浆HCY水平、平均白细胞表面黏附分子CD11b和CD18表达、CRP含量和白细胞计数显著高于NACS组和对照组(P<0.05).③与对照组相比,稳定型心绞痛组仅HCY水平轻度升高,余差异无统计学意义.结论 ①同型半胱氨酸导致体外白细胞黏附分子的表达;ACS患者同型半胱氨酸、CD11b/CD18,C-反应蛋白含量和白细胞计数明显升高.②炎症可能是ACS发生的重要原因之一,同型半胱氨酸、白细胞、及其CD11b/CD18表达和CRP等共同参与了ACS的发生.     

急性冠状动脉综合征病人同型半胱氨酸和黏附分子的改变

目的探讨急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrome,ACS)病人体内血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、分化群(cluster of differentiation antigen,CD)11b/CD18、C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)和白细胞计数的改变。方法选择ACS75例、稳定型心绞痛(stabe angina pectoris,SAP)35例,健康人35名为对照组,用酶联免疫法测定血浆Hcy,采用直接免疫荧光法用流式细胞仪测定CD11b与CD18表达,比较CRP、白细胞计数、血糖、血脂和血压改变。结果①ACS组和SAP组的血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白-胆固醇均高于对照组,而高密度脂蛋白胆固醇则低于对照组;而在ACS组和SAP组差异无统计学意义;ACS组收缩压和舒张压均高于对照组;②ACS组血浆Hcy(19±11)#mol/L、CD11b和CD18表达分别为(6.0±2.3)MC(平均荧光强度单位)和(27.7±4.3)MC,白细胞计数为(9.4±2.4)×109/L均高于SAP组(P<0.05)。CRP为3.75(0.5～7)mg/L,与SAP组比较,差异无统计学意义;SAP与对照组比较,仅Hcy轻度升高和CRP升高,余差异无统计学意义。结论ACS和SAP有血脂、血糖、血压改变,同时Hcy、白细胞计数及CD、CRP升高,表明炎性因素可能参与冠心病的发生。     

冠心病患者PTCA手术前、后CD11b/CD18的表达及临床意义

探讨不同类型 CHD患者白细胞粘附分子的变化和 PTCA对白细胞粘附分子表达的影响。选择行冠状动脉造影 （CA）和 PTCA术的患者 2 7例 ,将其分为 SAP组、UAP组及正常对照组。分别检测 CA或 PTCA术前、术后 6h,2 4h,48h的白细胞计数及 CD11b/ CD18在单核细胞和中性粒细胞 （PMN）膜上的表达。结果 :1CHD患者血液中单核细胞、PMN的 CD11b/ CD18表达较健康对照组均显著增加 （P<0 .0 1） ,其中 U AP组最为明显。 2 PTCA术后白细胞计数和单核细胞 CD11b/ CD18表达与术前无明显差异 ,而 PMN膜 CD11b/ CD18表达在 6 h开始升高 （P<0 .0 1） ,48h升高尤为显著。而 CA术前后各项检测指标均无差异。结论 :CHD患者 PMN、单核细胞膜上 CD11b/CD18的表达明显增加 ,粘附性增强 ,其增加程度与心肌缺血状态有关 ;PTCA术后 PMN膜 CD11/ CD18表达的上调 ,可能是冠脉再狭窄的原因之一。     

急性冠脉综合征患者血清E-选择素和白细胞CD11b/CD18表达的研究

目的观察血清E-选择素水平、中性粒细胞及单核细胞CD11b/CD18表达在急性冠脉综合征(ACS)患者中的变化,探讨其与斑块稳定性的关系.方法 30例ACS患者(ACS组)、24例稳定型心绞痛患者(SA组),30例冠状动脉造影阴性者作为对照组.酶联免疫吸附法检测E-选择素,流式细胞仪检测CD11b/CD18的表达.结果血清E-选择素水平、中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18的表达ACS组显著高于SA组(P<0.01)和对照组(P<0.01).结论 ACS患者血清E-选择素水平、中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18的表达增加与斑块不稳定性有关.     

急性冠状动脉综合征患者CD137水平的变化

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者CD137水平的变化。方法分别应用流式细胞术和ELISA对急性冠状动脉综合征(n=80)、稳定型心绞痛(n=40)和正常对照者(n=40)血单核细胞表达CD137及血清CD137水平进行检测。结果 ACS患者血单核细胞表达CD137(70.3±11.3 MFI)及血清CD137水平(30.2±8.1 ng/L)明显高于稳定型心绞痛患者(20.1±5.1 MFI和13.1±4.3 ng/L)和正常对照者(20.9±7.2 MFI和12.6±5.9 ng/L)。ACS患者治疗后血清CD137水平显著降低。而稳定型心绞痛患者PTCA后血清CD137水平明显高于PTCA前,但单核细胞CD137表达无显著差异。结论 CD137水平升高可作为冠心病病情演变的一个警示指标。     

急性冠脉综合征合并高同型半胱氨酸血症病人的临床特点分析及HCY对氯吡格雷抵抗的影响

目的探讨急性冠脉综合征(ACS)合并高同型半胱氨酸血症病人的临床特点及同型半胱氨酸(HCY)对氯吡格雷抵抗的影响。方法 201例初诊为急性冠脉综合征病人按照入院当日或次日清晨空腹生化中同型半胱氨酸水平分为两组:HCY正常组(154例)与高HCY组(47例)。采用检测ACS病人血清中氯吡格雷抵抗基因型CYP2C19来筛选出慢代谢型即氯吡格雷抵抗病人,从而分析HCY是否对急性冠脉综合征病人氯吡格雷抵抗有影响。结果高HCY组男性、血尿酸及血肌酐与HCY正常组比较差异有统计学意义(P 0.05);高HCY组氯吡格雷抵抗率高于较HCY正常组,差异有统计学意义(25.53%与12.99%,P 0.05)。结论男性、肌酐及尿酸升高病人更易出现高同型半胱氨酸血症,且急性冠脉综合征合并高同型半胱氨酸血症组病人氯吡格雷抵抗较同型半胱氨酸正常组更显著。HCY对急性冠脉综合征病人吡格雷药物抵抗有影响。     

急性冠脉综合征病人血浆同型半胱氨酸与血脂、炎性因子的相关性研究

目的探讨急性冠脉综合征（ACS）患者血浆同型半胱氨酸（Hcy）、血脂、细胞因子的相关性。方法采用高效液相色谱分析法测定入选者血清Hcy水平；采用酶连免疫吸附法测定细胞因子水平[血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素10（IL-10）]；采用酶法测定血浆甘油三酯（TG）、胆固醇（TC）、低密度脂蛋白（LDL—C）水平。进行对比和直线相关分析Hcy和二者的关系。结果ACS组病人Hcy（16．27±5．63）水平与对照组（11．13±2．58）比较P〈0．01；ACS组Hcy水平与IL-6正相关，相关系数r为0．60（P〈0．05），Hcy与血脂无相关性。结论Hcy可能通过促进炎性因子的产生而促进冠心病的发展和ACS的发生。     

动脉样硬化患者CD11a、CD11b和CD18表达的初步研究

目的：探讨动脉粥样硬化和白细胞功能相关抗原（LFA－1即CD11a/CD18）以及巨噬细胞分化抗原（Mac-1即CD11b/CD18)等细胞粘附分子表达的关系。方法：用碱磷酶抗磷磷酶（A－PAAP）桥联酶免疫细胞化学染色法检测冠心病患者外周血单个核细胞表面的CD11a、CD11b和CD18。结果心病患者CD11a、CD11b、CD18阳性细胞数显著增高,血浆LDL水平与CD11a、CD18阳性单个核细胞数明显相关,正常人单个核细胞经各因素处理后除内毒素对CD11b外其它被测细胞粘附分子阳性细胞数可升至病人水平,且冠心病患者单个核细胞之细胞粘附分子也以相同的反应性再度增高。结论单个核细胞表面CD11a、CD11b和CD18特别是CD11a和CD18的表达增强可能和动脉粥样硬化的发生有关。     

冠心病患者白细胞膜黏附分子CD11b/CD18表达的研究

目的探讨冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜黏附分子CD11b/CD1s的表达.方法对60例冠心病患者(冠心病组)采用流式细胞仪直接免疫荧光法与20例正常者(正常组)比较检测中性粒细胞和单核细胞膜黏附分子CD11b/CD18的表达.结果冠心病组中性粒细胞和单核细胞膜黏附分子CD11b/CD18表达较正常组均增加,有显著性差异(P＜0.05),环磷酸腺苷葡胺对不稳定性心绞痛患者干预后,其表达显著增高,有极显著性差异(P＜0.01).结论冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜黏附分子CD1tb/CD18表达明显增加,其增加程度与心肌缺血的类型有关.     

冠心病患者中性粒细胞和单核细胞CD11b/CD18表达的研究

目的 :探讨不同类型冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达的变化。方法 :选择经冠状动脉造影确诊的 49例心绞痛患者 ,30例急性心肌梗死患者和 2 0例正常人 ,用流式细胞仪直接免疫荧光法检测中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达。结果 :冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达较正常对照组均显著增加 （P<0 .0 1） ;不稳定性心绞痛和急性心肌梗死患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达显著高于稳定性心绞痛患者 （P<0 .0 1）。与正常对照组比较 ,心绞痛患者组中性粒细胞和单核细胞计数无变化 （P>0 .0 5 ） ,而急性心肌梗死组明显增加 （P<0 .0 1）。急性心肌梗死患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达与梗死范围无关。结论 :冠心病患者中性粒细胞和单核细胞膜 CD11b/CD18表达明显增加 ,其增加程度与心肌缺血的类型有关。     

肿瘤坏死因子、白细胞介素8、可溶性细胞间粘附分子1和CD11b/CD18在良恶性胸腔积液的价值

目的 研究结核性及恶性胸腔积液患者及血清中肿瘤坏死因子（TNF）、白细胞介素－8（IL－8）、胸液中可溶性细胞间粘附分子1（sICAM-1）及外周血多形核白细胞（PMN）上粘附分子CD11d/CD18在参与胸膜病变的病理生理过程中的作用和在鉴别诊断上的价值。方法 采用放射免疫分析法（RIA法）、双抗体夹心ELISA法及流式细胞仪技术,检测31结核性、31例恶性胸腔积液患者胸液和（或）血清中TNF、IL－8、sICAM－1和CD11d/CD18表达水平,并与31例健康献血者对照。结果 结核性和恶性胸腔积液患者血清中TNF、IL－8含量以及PMN上CD11d/CD18表达显著高于正常对照组（P＜0．01）, 结核性胸液中TNF与IL－8水平和血PMN上CD11d/CD18表达明显高于恶性胸液患者（P＜0．01）,结核性胸粹中sICAM－1水平明显低于恶性胸液（P＜0．01）。胸腔积液中TNF与IL－8、sICAM－1水平呈显著正相关（r＝0．74和r＝0．79,P＜0．01）,血清TNF与PMN上CD11d/CD18的表达呈显著正相关（r＝0．61,P＜0．01）,胸腔积液中sICAM－1水平与血PMN上CD11d/CD18的表达呈显著负相关（经作曲线拟合,Y=1442．31－36．85X∧2＋0．25X∧2,R∧2＝0．59,F＝19．83,P＜0．01）。结论 细胞因子TNF、IL－8和粘附子sICAM－1、CD11b/CD18相互联系,在结核和肿瘤性胸膜病变的免疫 理生理过程中起着重要作用。它们在结核性和肿瘤性胸腔积液患者的表达水平不同,可作为临床上鉴别诊断的参考指标。     

Expression of the CD11/CD18 cell surface adhesion glycoprotein family and MHC class II antigen on blood monocytes and alveolar macrophages in interstitial lung diseases

The expression of molecules of the CD 11/CD18 cell surface adhesion glycoprotein family and HLA/DR antigen was studied on peripheral blood monocytes (PBM) and alveolar macrophages (AM) in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid from patients with sarcoidosis, idiopathic pulmonary fibrosis (IPF), and extrinsic allergic alveolitis (EAA). Patients with these interstitial lung diseases showed increased numbers of macrophages in BAL fluid. This was probably caused by an increased influx of PBM to the alveoli since the numbers of cells with a monocytic morphology were also significantly increased in BAL samples from patients with interstitial lung disease, most prominently in IPF and EAA.The increased influx of PBM into the alveoli in patients with interstitial lung diseases was not reflected by an increased expression of the CD11/CD18 leukocyte function antigens on PBM.In healthy volunteers as well as in those with sarcoidosis, IPF, and EAA, the percentages of AM positive for CD11b (the C3bi complement receptor) and CD11c were lower than among PBM. This indicates that the expression of these cell surface adhesion molecules is downregulated during maturation and migration of PBM to the alveoli. The absolute numbers of AM positive for CD11b were increased in BAL fluid of IPF and EAA patients compared to healthy volunteers. EAA patients also showed increased absolute numbers of AM positive for CD11a and CD11c. This differentially increased expression of these leukocyte function antigens on AM suggests the influence of locally produced cytokines. Offprint requests to: H. C. Hoogsteden     

Increased production of hydrogen peroxide and expression of CD11b/CD18 on alveolar macrophages in patients with active pulmonary tuberculosis

Setting: Alveolar macrophages (AM) are important in host defense against Mycobacterium tuberculosis (TB). β2-integrin, especially CD11a/CD18 and CD11b/CD18, are implicated in leukocyte migration, antigen presentation, phagocytosis, and production of reactive oxygen speciesObjective: To explore the functional relevance of β2-integrin expression to intracellular H₂O₂ capacity of AM in TB patients.Design: In a prospective study, AM retrieved from 18 active pulmonary TB patients and 18 normal subjects were assessed for β2-integrin expression and intracellular H₂O₂ metabolism capacity by loading with anti-CD11a/CD18, anti-CD11b/CD18 monoclonal antibodies and 2′,7′ dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA) respectively, and analyzed by flow cytometry. AM from 8 normal subjects were stimulated with tumor necrosis factor-alpha (TNF-α, 10⁵ units/ml) to examine the relationship between H₂O₂ production and CD11b/CD18 expression.Results: The magnitude of DCFH oxidation and CD11b/CD18 expression of AM was higher in TB patients than in normal subjects. The CD11b/CD18 expression was related to the magnitude of DCFH oxidation, but not to lymphocyte numbers or subpopulations (CD4, CD8, CD25). Stimulation of AM with TNF-α increased H₂O₂ production and CD11b/CD18 expression. Pretreatment with CD11b/CD18 monoclonal antibodies inhibited TNF-α-induced H₂O₂.Conclusion: AM in TB patients possessed a higher capacity of oxidant metabolism. The increased CD11b/CD18 expression may be related to the increased respiratory burst response in AM against mycobacterial invasion.     

动脉粥样硬化患者CD_(11a)、CD_(11b)和CD_(18)表达的初步研究

目的　探讨动脉粥样硬化和白细胞功能相关抗原 (LFA 1即CD11a/CD18)以及巨噬细胞分化抗原 (Mac 1即CD11b/CD18)等细胞粘附分子表达的关系。方法　用碱磷酶抗碱磷酶 (A PAAP)桥联酶免疫细胞化学染色法检测冠心病患者外周血单个核细胞表面的CD11a、CD11b和CD18。结果　冠心病患者CD11a、CD11b、CD18阳性细胞数显著增高 ;血浆LDL水平与CD11a、CD18阳性单个核细胞数明显相关 ;正常人单个核细胞经各因素处理后除内毒素对CD11b外其它被测细胞粘附分子阳性细胞数可升至病人水平 ,且冠心病患者单个核细胞之细胞粘附分子也以相同的反应性再度增高。结论　单个核细胞表面CD11a、CD11b和CD18特别是CD11a和CD18的表达增强可能和动脉粥样硬化的发生有关     

不稳定型心绞痛患者白细胞CD11b/CD18表达的变化

目的：观察不稳定型心绞痛患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18表达的变化。方法：选择经冠状动脉造影确诊的不稳定型心绞痛32例和正常人20例，用流式细胞仪直接免疫荧光法检测中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18表达。结果：不稳定型心绞痛患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18表达较正常对照组均显著增加（P＜0.01）；且CD11b／CD18表达的增加与心绞痛的发作有关，而与冠状动脉狭窄程度和病变支数无关。结论：不稳定型心绞痛患者中性粒细胞和单核细胞膜CD11b/CD18表达明显增加，其增加程度与心绞痛的发作有关。     

CD40基因多态性对急性冠状动脉综合征易感性的影响及其机制

目的 探讨急性冠状动脉综合征(ACS)与白细胞分化抗原40(CD40)、可溶性白细胞分化抗原40配体(sCD40L)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)的表达水平、白细胞计数、CD40-1C/T基因多态性的相关性,以及激活剂干扰素(IFN)-γ和抑制剂氟伐他汀对外周血单个核细胞CD40表达的影响.方法 随机选择160例经冠状动脉造影确诊的ACS患者和92例冠状动脉造影阴性人群,采用酶联免疫吸附试验、微粒子增强透射免疫分析技术、流式细胞分析技术检测血清sCD40L含量、血清hs-CRP,外周血白细胞计数水平.采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和DNA测序技术,检测CD40-1C/T基因型和等位基因频率.随机选择40例冠状动脉造影结果为阳性的ACS患者,密度梯度离心法分离单个核细胞并原代培养,用100 ng/ml IFN-γ及10 μmol/L氟伐他汀对单个核细胞进行干预,流式细胞术检测单个核细胞培养24 h后表达CD40的水平.结果 ACS组的炎性细胞因子CD40[(4.59±2.07)MFI]、sCD40L[(7.58±2.34)μg/L]、hs-CRP[(5.24±1.34)mg/L、血白细胞计数水平(8.56×109/L±3.10×109/L)明显高于对照组[CD40:(2.08±1.19)MFI,sCD40L:(3.12±0.67)μg/L,hs-CRP:(0.88±0.90)mg/L,白细胞计数:6.12×109/L±1.41×109/L;均P＜0.01];ACS患者CC基因型频率为28.1%(45/160),明显高于对照组[13.0%(12/92),P＜0.01];C等位基因显著增加ACS的患病风险(OR=1.608,95%CI:1.12～2.32,P=0.011);基础状态下单个核细胞培养24 h后,CD40表达水平升高,且CC基因型单个核细胞CD40表达水平[(14.78±4.56)MFI]明显高于CT、TT基因型[(11.98±4.12)MFI,(9.86±3.83)MFI,P＜0.05];IFN-γ刺激状态下,单个核细胞表面CD40表达水平明显升高,且CC基因型升高的幅度(2.96倍)明显高于CT(2.37倍)和TT基因型(2.08倍),均P＜0.05;另外,氟伐他汀和IFN-γ共同作用,发现氟伐他汀可显著抑制IFN-γ诱导的CD40表达,但CC、CT、TT基因型单个核细胞经氟伐他汀干预后,其CD40表达水平差异无统计学意义(抑制率分别为30.3%、26.3%、29.3%,P＞0.05).结论 ACS的发生可激活炎症反应;CD40-1C/T基因多态性与ACS有相关性,C等位基因可能是ACS的易感相关基因;CD40-1C/T多态性可以影响单个核细胞CD40表达水平,氟伐他汀可显著抑制IFN-γ刺激后CD40的表达,但对不同基因型单个核细胞的保护作用无明显差异.