T淋巴细胞亚群检测在结核病诊治中的应用探讨

目的:观察分析T淋巴细胞亚群检测在结核病诊治中的应用价值。方法:选取本院2019年1月~2020年1月收治的108例肺结核患者一般资料作为实验组,再选取同期我院接收的108例健康体检者一般资料作为对照组。采用统计学分析两组研究对象的T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8、CD4/CD8)表达水平、外周血白细胞介素-1、外周血白细胞介素-6以及肺结核患者T淋巴细胞亚群检测结果与性别、年龄之间的关系。结果:肺结核患者T淋巴细胞亚群检测结果与性别比较差异无统计学意义(P>0.05),肺结核患者T淋巴细胞亚群检测结果与年龄比较差异有统计学意义(P<0.05);实验组CD3、CD4、CD4/CD8等T淋巴细胞亚群表达水平明显低于对照组,实验组CD8表达水平明显高于对照组,差异比较有统计学意义(P<0.05),实验组外周血白细胞介素-1、外周血白细胞介素-6水平明显高于对照组,差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论:外周血白细胞介素-1、外周血白细胞介素-6、T淋巴细胞是结核病患者细胞免疫的重要组成部分,检测外周血白细胞介素-1、外周血白细胞介素-6、T淋巴细胞可能为肺结核提供诊断依据,与此同时在肺结核患者的治疗和预后具有显著意义;结核病患者T淋巴细胞免疫功能下降,有可能是导致结核病患者病情持续加重的原因。     

绝对计数系统的临床应用评估

传统的CD4阳性淋巴细胞的检测方法是通过计数外周血总白细胞和淋巴细胞百分比来计算T淋巴细胞亚群的绝对数。这一方法需用手工或血细胞计数仪来计数总白细胞(WBC)和各分类白细胞，再用流式细胞仪或显微镜得出淋巴细胞亚群百分比，相乘得出CD4T淋巴细胞的绝对数。这种双平台方法由于多步骤测定方法，得到的结果误差很大，一定程度上限制了其临床应用。     

流式细胞术计数淋巴细胞亚群的全血质控品的研究

目的 研究流式细胞术（FCM）计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。方法 流式细胞术多色分析方法计数不同保存剂处理后、不同时间内血液中淋巴细胞亚群。结果 成功研制出FCM计数血液淋巴细胞亚群的全血质控品。在2～8℃冰箱内保存72d内，各种白细胞的光散射特点及CD45保持稳定，淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞群与细胞碎片分离良好，可通过光散射或荧光／光散射两种方式设门分析淋巴细胞亚群。本质控品在不同保存时间的变异较小，FCM计数血液淋巴细胞亚群的室内批间变异系数〈6．5％，全国56个实验室的室间质评变异系数〈13％。结论 本全血质控品可用于临床FCM计数血液淋巴细胞亚群全过程的室内质量控制和室间质量评价，对提高淋巴细胞亚群计数的质量，保证结果的准确性有重要意义。     

白细胞介素12对小鼠T淋巴细胞亚群分化的影响

目的观察白细胞介素12（IL-12）对小鼠T淋巴细胞亚群分化的影响。方法以RPMI-1640培养基培养小鼠脾淋巴细胞，实验组中加入10pg／ml和5pg／ml重组mIL-12，对照组不加，72h后以ELISA检测各组培养上清中IFN—γ和IL-4含量；流式细胞仪检测各组淋巴细胞中CD4T、CD8T细胞亚群变化。结果与对照组相比实验组脾淋巴细胞中T细胞总数、CD4T细胞比例及CD4T／CD8T比值显著增大，上清中Th1型细胞因子（IFN-γ）含量显著增加，而Th2型细胞因子（IL-4）含量则相应减少。结论IL-12可以诱导CD4T淋巴细胞亚群的分化增殖，调节Th细胞亚群平衡，使免疫应答向Th1漂移。     

滤过白细胞的输血对重症创伤患者T淋巴细胞亚群及炎症的影响

目的 探讨滤过白细胞的输血对重症创伤患者T淋巴细胞亚群及炎症的影响.方法 回顾性选取2019年1月至2020年9月于北京中医医院顺义医院诊治的重症创伤老年患者125例,41例输注滤过白细胞的成分血液患者作为研究组,42例输注全血患者作为对照组,42例不输血患者作为空白组.获取3组患者输注前后T淋巴细胞亚群(CD3+、C...     

小鼠脾脏B淋巴细胞纯化培养方法的建立

背景:B淋巴细胞是机体免疫系统重要的参与者,目前的研究主要采用磁珠、补体等方法进行B淋巴细胞的分离纯化,但是这些方法费用高或者细胞损伤大、纯度低,体外分离、培养B淋巴细胞的方法还有待进一步改进。目的:探讨从小鼠脾脏细胞中对B淋巴细胞同时进行分离、培养的方法。采用加入白细胞介素4、脂多糖或者CD3单克隆抗体及其组合,探讨体外分离、培养小鼠脾脏B淋巴细胞的适宜条件。方法:体外分离培养小鼠脾脏细胞,随机分为7组,分别用白细胞介素4,CD3,脂多糖,白细胞介素4+CD3,白细胞介素4+脂多糖,CD3+脂多糖组进行干预、将未给予刺激的脾细胞作为对照组。用流式细胞仪检测在不同培养条件下小鼠脾脏细胞T、B淋巴细胞及其亚群的变化。结果与结论:与对照组比较,白细胞介素4组淋巴细胞在培养后第3-5天数量达到高峰;脂多糖组在培养初期无明显作用,第3天开始淋巴细胞数量有明显的增加,第5天达到高峰;培养体系中加入CD3单克隆抗体,可导致T淋巴细胞消失,培养2 d后,可得到较为单一的B淋巴细胞,其细胞数量在第3天达到高峰。其中B220+IgD+成熟B淋巴细胞亚群数量显著增加。体外培养24 h后,各组B220+CD93+Transitional B淋巴细胞亚群均完全消失。结果说明,体外培养的小鼠脾脏细胞加入CD3单克隆抗体和白细胞介素4可以去除T淋巴细胞,并维持成熟B淋巴细胞的生存和增殖。     

矽肺患者T淋巴细胞亚群变化的研究

矽肺是二氧化硅微粒进入肺部引起的病变,其中涉及T淋巴细胞等细胞和生物活性物质。已有研究表明,矽肺患者全血T淋巴细胞亚群存在相应变化,但矽肺不同期别T淋巴细胞亚群是否变化一致,长期接触未发病者的T淋巴细胞亚群有何变化还有待研究,为此本研究采用流式细胞术检测矽肺患者全血T淋巴细胞亚群的水平。     

抗T淋巴细胞单克隆抗体对再生障碍性贫血患者细胞免疫功能的调节作用

为了探讨再生障碍性贫血(AA)的免疫发病机制及抗T淋巴细胞单克隆抗体(MdAb-T)的免疫调节治疗作用,采用酶联免疫法和放射免疫法,检测30例AA患者McAb-T治疗前后周围血T淋巴细胞亚群,血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素2(IL-2)水平及其中10例AA外周血单个核细胞(PBMNC)体外诱生TNF-α和IL-2水平的变化。结果表明:治疗前AA患者T淋巴细胞亚群CD4/CD8比值降低或倒置(P<0.001);淋巴细胞HLA-DR抗原表达增高(P<0.001);血清TNF-α水平显著增高(P<0.01);PBMNC诱生的TNF-α和IL-2水平均明显高于正常对照(P<0.01)。治疗后T淋巴细胞亚群比例恢复正常,血清TNF-α和PBMNC诱生的TNF-α和IL-2水平降低,与对照组比较无显著差异(P>0.05)。T淋巴细胞亚群比例失调和TNF-α与IL-2等造血调控因子异常分泌在AA发病机制中起重要作用。McAb-T能发挥特异性的免疫调节作用,解除T淋巴细胞及相关细胞因子对造血功能的直接或间接抑制作用。     

RMPP患儿外周血IL-6、淋巴细胞亚群及23 SrRNA基因突变位点A2603G或(和)A2604G检测意义

目的 通过对0～6岁难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿进行外周血白细胞介素-6(IL-6)及淋巴细胞亚群检测,结合肺炎支原体23SrRNA基因突变位点A2603G或(和)A2604G检测,分析外周血IL-6水平及淋巴细胞亚群与RMPP相关情况.方法 肺炎支原体23SrRNA基因突变位点A2603G或(和)A2604G...     

不同程度肝硬化患者血T细胞亚群及补体系统检测的意义

2001年10月至2003年12月，作对89例不同程度肝硬化患进行了外周血淋巴细胞亚群及补体C3、C4、B因子的检测，发现不同程度肝硬化患外周血淋巴细胞亚群及补体C3、C4、B因子存在着一定的变化。     

干扰素刺激基因、巨噬细胞移动抑制因子在肿瘤细胞和肿瘤微环境中淋巴细胞的表达水平

目的探讨干扰素刺激基因(STING)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)在肿瘤细胞和肿瘤微环境中淋巴细胞的表达水平。方法回顾性分析80例乳腺癌患者临床资料,酶联免疫吸附测定法检测STING、MIF在肿瘤细胞和肿瘤微环境中淋巴细胞的表达水平。结果肿瘤微环境淋巴细胞Th1、Th2、Th17及CD8中STING、TBK1和IRF3、MIF及TNF-α的表达均显著高于肿瘤细胞中的表达,而IL-2和IL-6的表达显著低于肿瘤细胞表达(P0.05)。结论 STING、MIF在肿瘤细胞中表达显著高于肿瘤微环境淋巴细胞中的表达。     

肺癌患者IL—6及T淋巴细胞亚群检测的实验研究

目的：观察肺癌患者IL－6水平及外周血T淋巴细胞亚群,探讨其免疫功能与临床意义的关系。方法：采用ELISA方法检测患者血清IL－6水平。用单克隆抗体检测肺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群。结果：I、Ⅱ期肺癌组与正常对照组比较,T淋巴细胞亚群（CD3、CD4、CD8）无明显差异,IL－6水平增高;Ⅲ、Ⅳ期肺癌组与正常对照组比较CD3、CD4水平下降,而CD8与IL－68水平明显增高。结论：肺癌患者IL－6及外周血T淋巴细胞亚群水平检测可反映机体免疫功能状态。对临床分析肿瘤发展状况,判断其预后及疗效有一定的意义。     

SARS患者白细胞及T细胞亚群的变化

[目的]探讨严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血白细胞和T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。[方法]用全自动血细胞分析仪检测44例SARS患者外周血白细胞计数及分类．用流式细胞仪检测SARS患者外周血T淋巴细胞亚群;并与正常对照组比较。[结果]与对照组比较．SARS组患者白细胞总故显著下降,淋巴细胞百分数和绝对数显著下降．粒细胞绝对数显著下降,粒细胞百分数显著增如：CD、CD2^-和CD8^-细胞绝对数显著下降,CD3^-、CD4^-、CD8^-细胞百分数和CD4^-／CD8^-比值与对照组比较无显著性差异。1年后,恢复期SARS患者的上述各项指标均恢复正常。[结论]SARS冠状病毒感染损伤患者中性粒细胞和细胞免疫功能,但这种损伤是可逆的。     

流式细胞术检测人外周血产生IL-22的淋巴细胞亚群及其在结核病患者中的应用

目的建立用流式细胞术(FCM)检测人外周血产白细胞介素22(IL-22)的不同淋巴细胞亚群的方法,并探讨其在结核病(TB)患者中的应用,以了解产IL-22的淋巴细胞亚群在抗结核感染免疫中的作用。方法采集22例TB患者和18名健康对照者外周血,与相同体积RPMI-1640培养液混匀,加入佛波醇酯(PMA)和钙离子霉素,混匀后于37℃5%CO2静置培养2 h,再加入莫能霉素后继续培养4 h,收集细胞,用荧光素标记进行细胞表面抗原和胞内细胞因子染色,用FCM检测表达IL-22、IL-17的不同淋巴细胞亚群比例。结果 PMA浓度为100 ng/mL,钙离子霉素浓度为1μg/mL,刺激培养2 h可最有效刺激IL-22的产生;TB患者外周血中产IL-22的γδT细胞比例(7.37%)明显高于正常人(1.81%,P<0.05),而在CD4+T、CD8+T、自然杀伤(NK)细胞和B细胞等其他细胞亚群中,产IL-22的阳性细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05);Th22和Th17细胞比例在TB患者和健康对照者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论建立了一套简便、完整、可靠的FCM检测产IL-22的淋巴细胞亚群的方法,产IL-22的γδT细胞在抗结核感染免疫中可能发挥免疫效应。     

标本前处理因素对流式细胞术检测淋巴细胞亚群的影响

目的:探讨抗凝剂、保存时间和保存温度等分析前因素对流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群的影响。方法:随机采集健康人全血10份,分别用乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)和肝素钠2种抗凝剂抗凝,4℃及室温(18℃~22℃)保存,在不同时间点(0.05)。结论:在检测总淋巴细胞亚群比例及绝对计数时,肝素钠抗凝的全血标本应保存在室温下,并在48 h内完成检测;EDTA-K2抗凝全血标本则可在4℃及室温下保存,在48 h内完成检测。     

肺癌患者IL-6及T淋巴细胞亚群检测的实验研究

目的 :观察肺癌患者IL -6水平及外周血T淋巴细胞亚群 ,探讨其免疫功能与临床意义的关系。方法 :采用ELISA方法检测患者血清IL -6水平。用单克隆抗体检测肺癌患者外周血中T淋巴细胞亚群。结果 :Ⅰ、Ⅱ期肺癌组与正常对照组比较 ,T淋巴细胞亚群 (CD3 、CD4、CD8)无明显差异 ,IL -6水平增高 ;Ⅲ、Ⅳ期肺癌组与正常对照组比较CD3 、CD4水平下降 ,而CD8与IL -6水平明显增高。结论 :肺癌患者IL -6及外周血T淋巴细胞亚群水平检测可反映机体免疫功能状态。对临床分析肿瘤发展状况 ,判断其预后及疗效有一定的意义。     

重型和普通型严重传染性非典型肺炎患者淋巴细胞亚群改变初步分析

目的 研究传染性非典型肺炎(SARS)重型和普通型患者外周血淋巴细胞亚群异常变化，以期完善诊断标准。方法 采用多色荧光标记流式细胞术结合血液分析仪检测155例SARS患者的外周血淋巴细胞及其亚群的表达情况。结果 普通型组与重型组比较，外周血白细胞、淋巴细胞、CD3 CD4 、CD3 CD4-CD8-、NK、CDl9 CD5 、CD45RA CD4 、CD45RO CD4 、CD28 CD4 、CD28 CD8 、CD28 CD8-、CD95 CD4 等亚群的绝对值差异有显著性，两组均低于健康人，且重型组低于普通型组。结论 SARS患者的大部分淋巴细胞及亚群均受到破坏，以T淋巴细胞功能减低最为显著。外周血淋巴细胞各亚群的绝对值和百分比对于反映SARS患者免疫功能的改变情况均有意义。外周血淋巴细胞各亚群检测有望成为新的SARS实验诊断与监测指标。     

流式细胞仪检测样品保存时间的探讨

目的探讨流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)的条件,确定流式细胞术检测T淋巴细胞亚群及HLA-B27样品的有效保存时间。方法采集健康人外周血,将标记荧光抗体的样品用2%甲醛固定并保存于4℃冰箱,于不同时间进行检测。结果固定样品保存至第9天,辅助性T淋巴细胞(CD4+)、抑制性/细胞毒性T淋巴细胞(CD8+)、CD4+CD8+细胞数下降差异有统计学意义(P<0.05),而HLA-B27细胞数变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论固定样本4℃的在8 d内检测T淋巴细胞亚群及12 d内检测HLA-B27结果差异无统计学意义,这对于临床诊断和基础研究具有很大的实际意义。     

骨髓增生异常综合征骨髓单个核细胞内负调控因子的研究

为研究MDS患者细胞凋亡与骨髓内不同T细胞亚群胞内负调控因子的关系，采用胞内细胞因子染色技术对骨髓内不同亚群T细胞胞内的TNF—α和IFN-γ水平进行检测和分析，用RT—PCR技术测定BMMNC的凋亡基因Fas的mRNA水平。结果表明，MDS患者骨髓内产生TNF-α增多的淋巴细胞为CD4^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RO^ 细胞，产生IFN-γ增多的为CD4^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RO^ 、CD8^ CD45RA^ 细胞，但均以CD8^ CD45RO^ 细胞为主；MDS患者T淋巴细胞产生的IFN-γ与Fas mRNA存在相关性，而TNF—α与Fas mRNA相关性不强。结论：MDS患者造血微环境中不仅T淋巴细胞亚群失调，而且各亚群分泌负调控因子增多；MDS患者髓内IFN-γ主要来自于T淋巴细胞。     

桑夏苓术汤治疗脑卒中相关性肺炎的效果

目的 探讨桑夏苓术汤对脑卒中相关性肺炎(SAP)患者血清炎症因子和外周血淋巴细胞亚群的影响.方法 将110例SAP患者根据随机数字表法分为2组,对照组55例实施常规治疗,观察组55例在对照组基础上服用桑夏苓术汤.治疗前后检测血清炎症因子、外周血淋巴细胞亚群水平,比较2组疾病改善情况及临床疗效.结果 2组治疗后C反应蛋白...