应用TCRr基因重排标记对小儿急淋微小残留病定量分析及其临床意义

探索应用ＴＣＲＲ基因重排标志及改良的极限稀释定量ＰＣＲ法检测小儿ＡＬＬ微小残留病（ＭＲＤ）的可行性,探讨其追踪骨髓ＭＲＤ变化的临床意义。方法：改良极限稀释定量ＰＬＲ法。结果：敏感度平均为４拷贝。对１４例初治阳性病人的导达到缓解（ＣＲ）时的ＭＲＤ定量检测结果显示,骨髓复发组ＭＲＤ定量值平均为０．３４３％,未复发组为０．００４％。１４例中６例ＣＲ时ＭＲＤ阴性,４例在追踪期内持阴性,２例转为阳性,化疗后     

儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及其临床意义

尽管目前儿童急性淋巴细胞白血病诱导缓解率已明显提高,但仍有部分患儿完全缓解后复发.微小残留病(MRD)的存在是导致其复发的主要原因.研究表明MRD的有无及其高低不但反映了个体对治疗的反应情况,还能用于临床危险度分型及移植后复发风险的评估.该文对MRD的检测方法及临床意义作一综述.     

急性淋巴细胞白血病微小残留病追踪检测的新方法

急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ，急淋）经治疗达到完全缓解后，复发的根源在于体内微小残留病（ＭＲＤ）的存在。动态检测体内ＭＲＤ，对于指导临床治疗和预防白血病复发具有重要意义。为了使急性淋巴细胞白血病ＭＲＤ的检测在达到灵敏和特异的同时，又能快速、经济和方便，...     

儿童急性白血病微小残留病检测的临床意义

目的探讨微小残留病(MRD)在儿童急性白血病的临床意义。方法对1996年2月~2005年3月在我科正规治疗的30例急性白血病患儿采用外周血,利用单克隆抗体直接免疫荧光标记法和流式细胞仪多参数分析技术进行MRD的检测,并动态随访。结果在已停药的14例患儿中,7例MRD持续阴性或由阳转阴,7例由阴性转阳性,其中2例复发;在维持治疗的16例中,缓解后MRD持续阴性者6例,缓解时MRD阳性者8例(其中2例分别于缓解后3月、8月复发,4例经治疗后转阴),缓解时MRD可疑阳性2例(其中1例转阳性)。结论诱导治疗能杀死大量的白血病细胞,但尚未彻底清除MRD;缓解期一定时间内的病人MRD阳性不一定复发;维持治疗的后期或停药后MRD持续阳性,则有可能复发,MRD持续阴性的患儿预后较好。因此,连续监测MRD对指导临床治疗、早期预测复发有重要意义。     

AP-PCR DNA指纹图在小儿急性白血病微小残留病检测中的应用

对急性白血病AP－PCRDNA指纹图改变及其在急性白血病微小残留病诊断中的应用为本文研究目的。方法：以31例急性白血病患儿为研究对象，取其骨髓或外周血标本，先用Percoll不连续密度梯度离心法分离出白血病细胞，以自身正常中性粒细胞为对照，分别选用3种引物AP1、AP2、AP3进行AP－PCR扩增，每例标本均重复一次，产物经变性聚丙烯酸胺凝胶电泳后银染显色，分析结果。结果：（1）在一定的反应条件下，所有标本均扩增出清晰条带，并且有很好的重复性；（2）58．1％（18／31）可见白血病细胞相对于成熟粒细胞的指纹图改变。图谱改变包括新增带、带缺失＼带密度改变。（3）AP1、AP2、AP3对所有31例标本异常检出率分另。1为41．9％、35．5％、38．7％，三种引物共检出18例异常，总检出率为58．1％。结论：AP－PCR是一种重复性好、简便易行的DNA指纹图技术，具有检出白血病细胞基因组微小改变的能力。有望成为检测微小残留病的一种新方法。     

儿童急性T淋巴细胞白血病微小残留病检测的临床意义

目的：探讨急性T淋巴细胞白血病（T-ALL）患儿微小残留病（MRD）监测的临床指导价值。方法采用多参数流式细胞术对2006年1月1日-2008年12月31日在北京儿童医院治疗的60例T-ALL患儿在治疗不同时间点进行追踪监测,分析不同MRD水平患儿的临床特征及预后。结果诱导治疗第33 d MRD≥1×10-4组患儿易复发,P＝0.03;诱导治疗第33 d MRD＜1×10-4组患儿预计5年无事件生存率（EFS）为100％,而MRD≥1×10-4组患儿5年EFS为（62.5±7.1）％,两组之间差异有显著性（P＝0.018）。结论监测T-ALL患儿MRD水平在评估早期治疗反应、监测复发以及估计预后中具有重要临床价值。     

白血病微小残留病定量检测方法的临床应用

随着现代联合化疗方案、干细胞移植等治疗方法的进展，儿童白血病的诱导缓解率和5a生存率均有了显著提高，但仍有约20％白血病患儿复发。诸多研究表明，微小残留病（MRD）是儿童白血病复发的主要原因。通过敏感度高、特异性强的方法定量检测MRD，对儿童白血病疗效的评价、化疗方案的确定、预后的判断、复发的监测和移植物的净化等方面均有重要意义。本文就对儿童白血病MRD定量检测方法及其临床应用作一综述。     

15例急性淋巴细胞性白血病微小残留病追踪检测结果分析

为探讨残瘤白血病细胞的存在与白血病患儿长期生存之间的关系,我们用非同位素的ＰＣＲ－ＲＮＡ转录本分子杂效法,选用Ｔ细胞抗原受体γ链（ＴＣＲγ）重排基因为标志,检测了２０例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患儿,并对其中具有ＴＣＲγ重排基因的１５例患儿进行了追踪检测,结果显示：化疗后早期（〈５月）大多数患儿都能检测到残留白血病细胞,长期缓解者微泪钱瘤病检测为阴性。结果表明,当临床达到完全缓解时,对每１例患者     

AP—PCRDNA指纹图在小儿急性白血病微小残留病检测中的应用

对急性白血病ＡＰ－ＰＣＲＤＮＡ指纹图改变及其在急性白血病微波残留病诊断中的应用为本文研究目的。方法：以３１例急性白血病患儿为研究对象，取其骨髓或外周血标本，先用Ｐｅｒｃｏｌｌ不连续密度梯度离心法分离出白血病细胞，以自身正常中性粒细胞为对照，分别选用３种引物ＡＰ１、ＡＰ２、ＡＰ３进行－ＰＣＲ扩增，每例标本均重复一次，产物经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后银染显色，分析结果，结果：（１）在一定的反应条件下，所     

儿童急性白血病肝功能损害及临床意义

为了研究白血病化疗过程中肝功能损害的病因，测定了56例急性白血病化疗前后肝功能，并提出了药物性肝脏损害及白血病细胞肝脏浸润的诊断方法。56例患儿中36例（64．3％）有肝功能受损，其中29例43例次发生药物性肝脏损害，白血病肝浸润9例，2例肝浸润时均无骨髓、中枢等复发证据。4例发生病毒性肝炎。对不同类型肝损害进行治疗，各种肝脏损害恢复时间平均为：药物性8．1天，白血病肝浸润7天，病毒性肝炎30天。结果表明：急淋患儿在诱导及强化治疗过程中易发生药物性肝炎，左旋门冬酰氨酶是引起药物性肝炎最主要药物，其次是6-巯基嘌呤、甲氨喋呤；肝脏可能是急淋白血病的庇护所，环磷酰胺试验治疗对肝脏浸润早期诊断具有重要诊断价值。     

PCR技术在儿童急性淋巴细胞白血病微小残留病的检测及临床意义

本文运用PCR技术，以IgH和TCRγ基因重排作为标志，检测了40例急性淋巴细胞白血病（ALL）微小残留病（MRD），其中有7例初治未缓解、12例部分缓解（PR）、13例完缓解（CR）的ALL患儿MRD检测阳性，另有8例（1例PR、7例CR）检测MRD阴性。文中发现CR时间越长，MRD阳性率越低，反之，CR时间越短，MRD阳性率越高。提示MRD可作为白血病治疗效果及判断预后的一个重要指标，CR后，MRD检测阳性有复发的危险，长期的MRD检测阴性，可作为临床停药观察的一个重要指标。PCR方法准确，先进，适于广泛推广应用。     

儿童急性白血病血清IL—3的动态观察及临床意义

为研究血清IL— 3在急性白血病中的动态变化并探讨在白血病治疗过程中如何恰当选用IL— 3。采用酶联免疫吸附试验 (ELISA)方法测定 34例急性白血病患儿血清IL— 3水平 ,1 6例进行动态观察。结果 ,急性白血病患儿ANLL与ALL之间IL— 3水平无明显差异 (P >0 .0 5 )。完全缓解 (CR)后 ,血清IL— 3水平与治疗前比较 ,无显著性差异 (>0 .0 5 )。急性淋巴细胞白血病患儿治疗后高危型 (HR)组比标危型(SR)组血清IL— 3水平明显降低。经治疗CR后 ,有 1 0例IL— 3水平明显升高 ,6例明显降低 ;IL— 3变化与临床分型、获得CR时间及治疗效果有关。结果表明 ,IL— 3与白血病 (AL)治疗有关。建议 :在高危急淋患儿或完全缓解时间 >4周、骨髓衰竭、急性粒细胞白血病患儿应用IL— 3和化疗联合治疗。对缩短完全缓解时间及减少继发耐药 ,缩短骨髓抑制期时间 ,减少感染并发症可能起到重要作用。     

小儿急性白血病细胞染色体分析及其与临床预后关系的探讨

为探讨白血病患儿细胞遗传学改变和临床预后的关系，我们对41例急性白血病初诊患儿进行细胞遗传学研究，28例异常核型检出（68％），其中急性淋巴细胞白血病异常核型检出率为67％，急性非淋巴细胞白血病异常核型检出率为73％。急性白血病患儿染色体结构异常可视为预后不佳的标志，而正常二倍体核型及超二倍体核型的白血病（尤其是超过50条的急淋）则预后较好，还对其中11例患儿核型进行动态观察，提示细胞遗传学研究可作为白血病患儿诊断分型、指导治疗和判断预后的重要指标。     

小儿急性白血病多药耐药基因表达的动态观察及其临床意义

为探讨小儿急性白血病 (AL)多药耐药基因MDR1表达的临床价值 ,检测2 8例AL患者 4 8份标本的MDR1基因 ,并对其中 2 0例患儿进行了动态观察。结果 ,小儿急性白血病在治疗的不同阶段其MDR1的阳性率不同 :化疗前的阳性率为 2 5 % ,MDR1阳性与MDR1阴性患者的完全缓解率 (CR)分别为 33%和 92 % (P <0 .0 1) ,耐药组的阳性率为 80 % ,而非耐药组的阳性率为 16 % (P <0 .0 1)。复发组的MDR1阳性率为 75 % ,而持续缓解组的MDR1阳性率为 16 % (P <0 .0 5 )。正常人MDR1阳性率为零。结果表明检测MDR1对判断化疗效果和估计预后均有很重要的作用 ,同时可为临床合理选择化疗方案提供一个客观指标     

小儿急性白血病骨髓细胞糖皮质激素受体表达及其临床意义

本文应用放射配体结合法测定了３０例ＡＬＬ骨髓细胞ＧＣＲ为７８７３±３００２位点／细胞；１７例ＡＮＬＬ为６１１３±１６２２位点／细胞（Ｐ＜０．０５）。形态学分型Ｌ１型１７例，ＧＣＲ为７２６７±３１７８位点／细胞；Ｌ２型１３例，ＧＣＲ为７６５０±３３６２位点／细胞（Ｐ＞０．０５）。临床分型标危型ＡＬＬ１４例，ＧＣＲ为８９９８±１９６３位点／细胞；高危型９例为５８４７±３８８５位点／细胞（Ｐ＜０．０５）。对１８例ＡＬＬ经联合化疗完全缓解前后比较发现，ＧＣＲ分别为８１１５±３２５８位／细胞和４６６９±２１０６位点／细胞（Ｐ＜０．０１）。本实验同时测定了ＡＬＬ和ＡＮＬＬ患儿血浆皮质醇浓度，平均分别为１１２．２０±４１．１４ｎｇ／ｍｉ和１０４．６５±４３．４９ｎｇ／ｍｌ，相关系数分别为ｒ＝０．１５和０．１１，说明ＧＣＲ表达水平不受皮质醇含量的影响。     

急性白血病患儿血清肿瘤坏死因子a的活性变化及临床意义

用放射免疫方法测定了2O例正常儿童及40例急性白血病（AL）患儿化疗前后血清肿瘤坏死因子（TNF－a）浓度。结果；在AL诊断时，TNF－a水平显著升高1当患儿获得部分缓解至完全缓解时，TNF－a水平呈梯形降低，其最低值仍高于健康儿童（P＜O．01～0．05）；22例急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿TNF－a水平在任何阶段都比18例急性非淋巴细胞白血病（ANLL）患儿低（P＜0．o1）；TNF－a水平和临床疗效之间显示负相关性。因此，作者们认为测量TNF－a水平可作为一项判断AL疗效和预后的临床指标。     

ASSOCIATION BETWEEN DEFB1 GENE HAPLOTYPE AND HERPES VIRUSES SEROPREVALENCE IN CHILDREN WITH ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA

Recent studies investigated the role of an unusual immune response to infective agents in the etiology of acute lymphoblastic leukemia (ALL) in children. Human β-defensin-1 (hBD-1) is an anti-microbial peptide of the innate immune system, which exerts a killing role against pathogens. In the present study, three polymorphisms have been genotyped, namely, -52G/A, -44C/G and -20G/A, of DEFB1 gene, coding for hBD-1, in 40 ALL patients and 40 healthy children, and tested for an association between genetic variants of the protein and seroprevalence of antibodies for herpes viruses. The seroprevalence of cytomegalovirus (CMV), herpes simplex viruses (HSV) and Epstein-Barr virus (EBV) IgG antibodies in leukemic children was higher than that in controls (CMV: 61.5 vs. 27.3%, p = .008; HSV: 50 vs. 24.2%, p = .04; EBV: 61.3 vs. 46.2%, p = ns, respectively). Carriers of the GCA haplotype were found to have a significantly higher rate of immunization against CMV and HSV in ALL children compared to controls (CMV: 68 vs. 29%, p = .006; HSV: 56 vs. 26%, p = .04, respectively). No such observation was made when we analyzed the immunization against Epstein-Barr virus (EBV) by GCA haplotype in case and controls (58 vs. 40%, p = ns). These findings suggest that leukemic patients carrying untranslated variants of hBD-1 display a higher susceptibility to herpes viruses infections than controls.     

NEUTROPENIC ENTEROCOLITIS IN CHILDREN WITH ACUTE LYMPHOBLASTIC LEUKEMIA

Neutropenic enterocolitis is an acute, life-threatening inflammation of the small and large bowel, often seen in children with malignancies during periods of prolonged or severe neutropenia. During the period 1990-1995, 180 children were treated at the authors' center for acute lymphoblastic leukemia using a standard chemotherapy protocol. Among them, 11 children (6.1%) aged 4 to 12 years, were diagnosed clinically to have neutropenic enterocolitis. Eight had severe neutropenia (absolute neutrophil count &lt; 10⁸/L and 5 had prolonged neutropenia (&gt; 7 days duration). The symptoms included diffuse abdominal pain (10 children), oral mucositis (7), hematochezia (7), diarrhea (6), hematemesis (5), and right lower quadrant tenderness (4). Three children had radiological evidence of free intraperitoneal gas and an additional 3 children were found on surgical exploration to have cecal perforation. Laparotomy was performed on 8 children (73%), 4 of whom survived. Among the 3 children managed conservatively, 1 died awaiting surgical exploration, while the other 2 did well. The overall survival was 55%. The authors recommend an approach to management that respects the heterogeneity of the disease.