几种合成的哒嗪衍生物抗微管及抗肿瘤活性的研究

哒嗪(5,6-diphenylpyridazin-3-one,PD)衍生物对微管体外聚合有不同程度的抑制作用,PD031至PD038对微管聚合的50％抑制浓度依次为23,10,4.5,56.48.30,>100,>100μmol/L。这些化合物对L1210白血病细胞和B16黑色素瘤细胞生长也有相应的抑制作用。进行了PD032对S-180和艾氏腹水癌的体内抗肿瘤作用的研究,100mg /kg×10(ip),治疗组小鼠生存期分别延长90％和227％,并且有3只及6只小鼠生存期超过60天。     

6-取代香豆素-3-甲酰胺头孢菌素的合成

文献报道某些6-取代香豆素-3-羧酸类化合物及其衍生物具有较强的生物活性或抗菌活性,本文合成了14个新的6-取代香豆素-3-甲酰胺头孢菌素化合物,由红外光谱、元素分析和核磁共振谱确证其化学结构。经抗菌试验,结果表明多数化合物对受试的革兰氏阳性菌有不同程度的抗菌作用,但对革兰氏阴性菌无效。     

7β-(4,7-二取代香豆素-3-乙酰胺基)头孢菌素衍生物的合成及抗菌活性

以4,7-二取代香豆素-3-乙酸为侧链酸,用酰氯法与7-ACA,7-ADCA,7-ACT及一系列的3-取代苯甲基头孢母核<5c-5f)进行缩合,合成了一系列7β-(4,7-二取代香豆素-S-乙酰胺基)头孢菌素衍生物(2a-2m)。并且研究了7-ACA的3位乙酰氧基被取代酚取代及2a的3位乙酰氧基被取代吡啶取代的亲核取代反应,分别合成了一系列3-取代苯甲基头孢母核(5c-5f)及3-取代吡啶离子甲基头孢菌素衍生物(2n,20)。体外抑菌活性试验结果表明,所合成的14个新的头孢菌素衍生物对包括青霉素耐药菌株在内的革兰氏阳性菌都有较强的抑菌作用。     

N,N′-双-[ω-芳酰胺基烃基]-哌嗪衍生物的合成

合成了14个N,N′-双-[ω-芳酰胺基烃基]哌嗪衍生物,经初步药理试验,9个化合物有一定的降低血压作用,其中化合物8及10作用较强而毒性小,其降低血压作用及耐缺氧试验与克冠二氮(艹卓)相似。     

结核分枝杆菌CE复合物对人单核-巨噬细胞的功能表型的影响及其作用机制

目的研究结核分枝杆菌早期分泌抗原CFP-10-ES-AT-6复合物(CE复合物)对人单核-巨噬细胞功能表型的影响及其作用的细胞信号传导通路。方法分别采用ELISA法以及流式细胞仪检测大肠杆菌克隆表达纯化的CE复合物在不同时间及浓度对人单核-巨噬细胞TNFα-产生对细胞表型的影响,并且应用各种细胞信号传导通路抑制剂来探讨CE复合物作用的细胞信号传导通路。结果结核分枝杆菌CE复合物能够在早期(6~8h)诱导人单核-巨噬细胞活化,大量产生TNFα-,但在晚期(>48 h),则没有此作用;细胞信号传导通路MEK1/2和p38MAPK的选择性抑制剂SB203580、PD98059、U0126能抑制CE的这种作用;CE复合物在早期(18 h)促进单核-巨噬细胞表面抗原提呈功能分子CD80、CD40的表达。结论CE复合物在感染早期可能通过激活MEK1/2和p38MAPK刺激单核巨噬细胞活化,但在晚期则没有此作用。在感染早期可能具有重要的抗结核保护作用。     

3-[p(ε—取代氨基烃氧基)苯甲酰]吲哚衍生物的镇痛和抗电休克活性

5-羟色胺是吲哚类脑内神经递质,参与脑内痛觉的调节。我们曾证实次甲二氧-3-(1-β-乙基-4-甲基哌嗪)吲哚衍生物有较强的抗电休克及镇痛活性。在吲哚母核的2位氢以甲基、苯基取代或不取代,得3个系列衍生物;在吲哚母核3位上带有碱性醚链的末端氨基氮上,以不同基团取代,共得21个化合物。本文对这些化合物进行了镇痛及抗电休克活性的筛选,并对它们进行了构效关系的分析。     

中国人红细胞葡萄糖6-磷酸脱氢酶变异型的研究——Ⅲ.Gd(-)苗族白沙型[Gd(-)Miaozu—baisha]

苗族是我国南方人口较多的少数民族之一,我们于1983年3月到海南黎族苗族自治州元门及白沙公社3个苗族生产队进行萄糖-6-磷酸脱氢酶(C6 PD)缺乏症调查,对其中3例G6 PD缺乏的男性采血进行了G6 PD变异型鉴定,发现是一种新的变异型,定名为Gd(一)苗族白沙型[Gd(-)Miaozu-Baisha]现将结果报告如下。     

α-synuclein在帕金森病发病机制中的作用

帕金森病(parkinson disease,PD)是一种常见的神经变性疾病,以黑质多巴胺能神经元慢性进行性缺失和胞浆内嗜酸性包涵体(Lewy体)形成为病理特征。一直以来认为PD是环境因素引起的,随着家族性PD致病基因α-synuclein的发现,对PD的认识不断地加深,目前认为环境和遗传因素在PD的发生、发展中共同起作用。聚集的α-synuclein是PD和Lewy体痴呆以及其他神经系统变性疾病共有的特征,但是其致病作用还不     

6-氯/甲基-2/3-芳基取代喹喔啉衍生物的合成及抗肿瘤活性研究

目的合成6-氯/甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物,并测试其对SGC-7901和HepG2肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法以4-氯/甲基邻苯二胺为起始原料,通过与草酸二乙酯环合、氯代、亲核取代反应合成6-氯/甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物(3c-1~7m-1),并用MTT法测试所得目标化合物的抗肿瘤活性。结果合成得到15个相应的目标化合物,通过IR和1 H NMR确认结构。此类化合物对SGC-7901肿瘤细胞增殖抑制作用较HepG2细胞强,6-氯-2/3-芳基喹喔啉衍生物抗肿瘤活性多数大于6-甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物。6-氯-2/3-芳基喹喔啉衍生物(5c-1)和6-甲基-2/3-芳基喹喔啉衍生物(7m-1)对SGC-7901细胞增殖抑制IC50值分别为2.02和0.001 6μg/mL。结论目标产物(5c-1,7m-1)对SGC-7901肿瘤细胞增殖抑制活性好,可以进行结构优化,以期开发毒副作用小、耐受性好的新型抗肿瘤药物。     

一氧化氮供体型3-丁基苯酞衍生物的合成及抗血小板活性

目的:研究一氧化氮(NO)供体型3-丁基苯酞衍生物的合成和生物活性,寻找新型抗脑缺血药物.方法:使用不同的连接基团将3-丁基苯酞的开环衍生物2-(1-乙酰氧戊基)苯甲酸与一氧化氮供体连接,合成了目标化合物6a-6c、10a-10c和12a-12c,同时测定它们在体外释放NO的量.结果:合成了9个未见文献报道的目标化合物,其结构均经IR、1H NMR、MS和元素分析确证.它们均有一定的抗血小板活性且有不同程度的NO释放,其中化合物10b活性最强,明显优于阿司匹林和3-丁基苯酞(P＜0.01),其NO最大释放量为0.05 μmol/L,而活性最弱的化合物6c仅为0.01 μmol/L.结论:NO供体型3-丁基苯酞衍生物具有较强抗血小板活性,其作用机制可能与NO释放有关.     

PD98059对bFGF诱导的CAOV3细胞增殖的抑制作用

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)激酶MEK抑制剂PD98059对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导的人卵巢上皮性浆液性癌细胞株CAOV3细胞增殖的抑制作用.方法以不同浓度的bFGF和PD98059诱导CAOV3细胞,通过细胞计数法MTT比色法观察PD98059对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪测定细胞各周期细胞百分数的变化;利用[γ-32P]ATP掺入外源性底物的方法,液体闪烁测定ERK活性的变化.结果bFGF使该细胞株增殖比明显增加,而PD98059使该细胞株增殖比明显下降,在一定浓度范围内,其程度均随浓度增高而增强;CAOV3细胞受到bFGF刺激后,由G0 G1期进入S和G2 M期的细胞明显增多,在PD98059的作用下,由G0 G1期进入S和G2 M期的细胞明显减少,并在一定浓度范围内成剂量依赖性,与对照组比较,差异显著;随着bFGF浓度的增加,CAOV3细胞ERK活性随之升高,当bFGF浓度为75ng/ml时,ERK活性达到峰值,PD98059抑制细胞内ERK活性,与PD98059浓度呈剂量依赖效应.结论PD98059对bFGF引起的细胞增殖具有抑制作用,bFGF可能通过激活Ras-Raf-ERK信号转导途径来调控CAOV3细胞增殖,PD98059可有效阻滞此传导途径.     

Genistein和PD98059对aFGF及bFGF诱导的CAOV3细胞增殖的抑制作用

目的:探讨酪氨酸蛋白激酶(TPK)抑制剂genistein和细胞外信号调节激酶(ERK)激酶MEK1抑制剂PD98059对酸性及碱性成纤维细胞生长因子(aFGF,bFGF)诱导的人卵巢上皮性浆液性癌细胞株CAOV3细胞增殖的抑制作用.方法:以不同浓度的aFGF或bFGF刺激CAOV3细胞,施加不同浓度的genistein或PD98059,通过MTT比色法观察genistein及PD98059对细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞各周期细胞百分数.结果:aFGF和bFGF使该细胞株增殖比明显增加,genistein和PD98059使增殖比明显下降,genistein的抑制作用强于PD98059.CAOV3细胞受到aFGF或bFGF刺激后,由GO G1期进入S和G2 M期的细胞明显增多,genistein或PD98059作用下则明显减少,并在一定浓度范围内成剂量依赖性,与对照组比较差异显著.结论:CAOV3细胞株中aFGF及bFGF受体有TPK活性,genistein对aFGF及bFGF引起的细胞增殖具有抑制作用,且aFGF及bFGF可能通过激活TPK受体从而激活Ras-Raf-ERK信号转导途径调控CAOV3细胞增殖,PD98059可有效阻滞此传导途径.     

神经干细胞移植对帕金森病鼠旋转行为的影响

目的 :观察神经干细胞定向移植后对帕金森病 (Parkinsondisease,PD)鼠的旋转行为的影响。方法 :建立PD模型大鼠以及体外培养神经干细胞 ,然后将神经干细胞悬液立体定向移植到PD模型鼠黑质纹状体区 ,测定PD模型鼠旋转行为的变化 ,并与对照组相比。结果 :神经干细胞移植后PD模型鼠旋转行为比对照组明显减少。结论 :神经干细胞移植能减轻 6 羟基多巴胺对黑质纹状体多巴胺能神经元的损伤。     

依达拉奉、神经节苷酯对帕金森病模型大鼠的神经保护作用

目的 探讨依达拉奉(edaravone,Ed)、神经节苷酯(GW1)对帕金森病(PD)大鼠模型的神经保护作用.方法 采用立体定向一侧黑质致密部(SNC)、中脑腹侧被盖部(VTA)两点注射6-OHDA的方法 ,建立单侧PD大鼠动物模型.将老年大鼠分为正常组、生理盐水组(NS)、帕金森病模型组(PD)、PD+GM1组、PD+Ed组、PD+GM1+Ed组.14d后观察大鼠阿朴吗啡(APO)诱导的行为学改变及黑质多巴胺能神经元凋亡的情况.结果 正常组、NS组APO未诱导出大鼠旋行为,SNC未见细胞凋亡.PD各组APO诱导的旋转实验＞7 r/min,旋转次数(次)PD+GM1+Ed组(8.0±0.3)＜PD+Ed组(12.0±0.6)＜PD+GM1组(17.0±1.0)＜PD组(23.0±1.3)(P＜0.01);6-OHDA可诱导细胞凋亡,毁损侧SNC细胞凋亡数(个)PD+GM1+Ed组(27.63±2.38)＜PD+Ed组(38.42±3.54)＜PD+GM1组(49.36±3.12)＜PD组(62.61±4.03)(P＜0.01).结论 6-OHDA可导致大鼠行为改变,诱导SNC神经细胞凋亡,GM1、依达拉奉降低了这种损害,依达拉奉作用强于GM1,联合治疗作用最佳.     

吡啶斯的明试验对评价垂体hGH储备功能的价值

垂体hGH分泌受中枢神经介质调控。兴奋胆碱能系统可使hGH增加。本文试用胆碱酯酶抑制剂吡啶斯的明兴奋hGH,并与胰岛素兴奋试验进行比较,观察了13名正常青少年和10名垂体性侏儒症患者对两种兴奋试验的反应。结果显示口服吡啶斯的明2mg/kg体重能迅速有效地兴奋垂体hGH释放。其作用较胰岛素兴奋试验更强,是一项值得推荐的判定青少年垂体hGH储备功能的试验。     

帕金森病小鼠模型行为学检测方法的比较研究

目的比较目前常用的5种帕金森病(PD)小鼠模型行为学检测方法在PD研究中的作用。方法用MPTP建立C57BL小鼠PD模型,通过行为学检测(自主活动计数、滚轴实验、游泳实验、爬杆实验、悬挂实验)、免疫组织化学和荧光分光光度法,对比5种行为学检测方法的平均数与变异系数,观察MPTP对PD小鼠模型的行为学、黑质多巴胺(DA)神经元和纹状体酪氨酸羟化酶免疫反应阳性(TH-ir)神经纤维以及纹状体DA水平的影响。结果给与MPTP后,小鼠行为学计数降低,爬杆实验未能得到检测结果,悬挂实验变异系数很高,结果有明显的偶然性,滚轴实验结果变异系数中等,平均数呈现一定的上升趋势,自主活动计数中移动与站立和游泳实验的平均数则呈现明显的下降趋势,变异系数很低,而黑质DA神经元数目减少约58%,纹状体TH-ir神经纤维密度减低,纹状体DA水平明显降低约88%,两组相比差异有显著性(P<0.01)。结论MPTP所致的C57BL小鼠的神经病理、生化改变与PD患者近似,自主活动计数和游泳实验优于其他行为学检测方法。     

远志皂苷对脂多糖诱导的帕金森病模型大鼠的作用及机制研究

目的 通过模拟中药口服、疗程用药的方式,探究远志皂苷(Tenuigenin,TEN)对细菌脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型大鼠的作用及机制。方法 实验分5个组,通过动物行为学测试、大鼠黑质及血浆中炎性反应因子含量测定、黑质多巴胺(dopamine,DA)能神经元存活率检测和主要脏器组织形态学切片观察,研究TEN对炎症性PD模型大鼠的作用及机制。结果 TEN能够改善炎症性PD模型大鼠的行为学损伤,降低黑质DA能神经元的病死率,抑制黑质炎性反应因子含量,对主要脏器的组织形态学无影响。结论 TEN对PD模型大鼠具有神经保护作用,其机制与抗感染活性密切相关。     

PD98059通过诱导PUMA表达增强肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的敏感性

目的 体外实验探讨MEK1特异性抑制剂PD98059对奥沙利铂药物治疗作用的影响及PUMA在这一过程中的作用.方法 MTT法检测转染MEK1 active质粒后及不同药物处理后对LoVo细胞增殖率的影响;Western blot检测奥沙利铂和/或PD98059处理后PUMA蛋白的表达和ERK的活性;利用表达反义PUMA基因的细胞克隆抑制PUMA的表达后检测对PD98059和奥沙利铂诱导凋亡作用的影响.结果 在肠癌LoVo细胞中,ERK的激活增加细胞的增殖率;奥沙利铂可以抑制ERK的活性,并呈剂量依赖关系;PD98059可以协同奥沙利铂抑制细胞增殖率的作用;奥沙利铂和PD98059可以协同诱导PUMA的表达;抑制PUMA的表达可以减弱奥沙利铂和PD98059诱导的LoVo细胞的凋亡.结论 PD98059通过诱导PUMA表达增强肠癌LoVo细胞对奥沙利铂的敏感性.     

吡唑衍生物体外抗肿瘤活性研究

目的：研究吡唑衍生物对PC3、Bcap37、BGC8233种肿瘤细胞株生长的影响及其作用机制。方法：采用MTT比色法测定吡唑衍生物对3种肿瘤细胞生长的影响;AO／EB双染色,荧光显微镜观察细胞凋亡形态;利用Western Blot检测化合物对蛋白激酶磷酸化的影响。结果：吡唑衍生物对3种肿瘤细胞生长有一定的抑制作用,且具有浓度依赖性;吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）双染色可见吡唑衍生物F分别使PC3细胞变小、变圆,核染色质凝集,Bcap37细胞周围呈现亮绿色的荧光凋亡小体;Western Blot检测可知吡唑衍生物对EGF诱导的Erk1／2磷酸化没有抑制效果。结论：吡唑衍生物对3种肿瘤细胞生长有抑制作用,化合物F诱导PC3和Bcap37细胞凋亡,吡唑衍生物不能通过阻断Erk1／2磷酸化来抑制细胞增殖。     

新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖血脂的影响

目的：研究4个新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠血糖血脂水平的影响。方法：用四氧嘧啶制备糖尿病小鼠模型,研究不同结构的新型委陵菜黄酮衍生物A—D分别给予不同剂量灌胃给药（10、30mg·kg^-1）对糖尿病小鼠血糖、血脂的影响。结果：4个新型委陵菜黄酮衍生物均可显著降低糖尿病小鼠的血糖和血清甘油三酯水平。除衍生物B外,其它各给药组均能明显降低糖尿病小鼠的血清总胆固醇水平。结论：新型委陵菜黄酮衍生物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠均具有较好的降血糖和降血脂作用,衍生物D是更具有进一步研究价值的抗糖尿病候选化合物。