环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法

环氧树脂半薄切片肾小球基底膜六胺银染色法肖莎陈浦辉郭琳琅在肾脏疾病的研究中，肾小球基底膜银染色技术具有重要意义。如若采用半薄切片染色，在光镜下观察则可获得比石蜡切片更为清晰的结果。但因树脂包埋块为非水溶性质，故其半薄切片的特殊染色就较为困难。我们运用...     

骨髓活检塑料半薄切片的染色

半薄切片的操作过程及方法简单 ,尤其适用于骨髓活体检查 ,切片中的各系统细胞形态接近于涂片形态。因ＨＥ染色不能完全显示骨髓中的一些特殊成分 ,故导致分辨率不够理想。作者针对这一问题建立一种适用于作骨髓半薄切片的染色方法。1　配制方法1 1　染色液的配制　 (1)苏木精、姬姆萨　根据Ｈａｒｒｉｓ苏木精和Ｇｉｅｍｓａ染液的配制方法。 (2 )酸性品红溶液　 1 2 %浓度。1 2　染色方法及步骤　 (1)将骨髓塑料半薄切片 (2 μｍ)附贴于载玻片上在加热板上使充分干燥。 (2 )Ｈａｒｒｉｓ苏木精染色 5ｍｉｎ ,自来水或蒸馏水冲洗。 (3)Ｇｉ…     

电镜半薄切片应用于光镜研究的探讨

电镜半薄切片通常用于电镜超薄切片前的定位观察 ,我们在定位观察时发现 ,由于切片薄 ,结构显示清晰 ,可用于光镜研究 ,其观察结果优于石蜡切片。多年来 ,我们已将电镜半薄切片应用于实验研究和研究生课题实验。方法 :取材后将组织修为 1立方毫米左右 ,常规电镜样品处理 ,环氧树脂 6 18包埋 ,修块 ,L KBV型超薄切片机切片 ,切片厚度 1微米 ,脱树脂后 ,苏木精染色 ,H· E或甲苯胺兰染色 ,37℃温箱烤干 ,封片 ,观察。结果 :苏木精染色显示 ,细胞核呈紫兰色 ,胞浆淡兰色 ;H·E染色显示 ,细胞核为紫兰色 ,细胞质淡粉红色 ,但伊红染色较石蜡…     

几种半薄切片染色法的比较与改进

半薄切片是超薄切片前的一个重要步骤。光镜检查半薄切片,可确定电镜观察部位,判断组织固定和包埋的质量。半薄切片染色法很多,我们对几种常用方法进行了一些比较和改进,现将实践中的体会介绍如下,供参考。一、方法及结果:用Epon812包埋的组织块切成1微米或1.5微米厚的半薄切片,捞到滴有蒸馏水的载片上,在烘箱内烤干,待染色。1.甲苯胺兰染色法:将染液滴于切片上,在酒精灯上加热数秒钟,勿煮沸,流水冲洗,自然干燥,树胶封固后观察。不必经酒精及二甲苯,免切片皱缩不平。如染色适度,组织染成兰色,结构清楚,而树脂无色。2.苏木精—伊红染色法:锇酸固定、树脂包埋的组织,用此法难于着色,一般须先用氢氧化钾溶液脱去树脂,然后染色.为避免氢氧化钾液对组织可能产生的损伤,我们参考Chang法改用2.5%高碘酸处理切片,并用滴     

显示大鼠下颌下腺颗粒曲管细胞方法的探讨

本应用几种方法观察研究了大鼠下颌下腺颗粒曲管（GCT）细胞，包括石蜡切片Malory染色，树脂包埋半薄切片甲苯胺蓝染色，石蜡切片、半薄切片免疫组织化学法（PAP法，免疫金银法），和透射电镜观察。应用这些方法进行比较与印证，对GCT细胞的形态结构、功能及异质性特征等提出可靠的见解。本对上述几种方法步骤的具体条件和要领进行了探讨。     

H-E染色在环氧树脂半薄切片中的应用

半薄切片是进行超薄切片前的必要环节，有助于准确定位。常用的染色方法有甲苯胺蓝、吉姆萨染色法等。这些染色单一，仅能提供组织细胞着色深浅不同的蓝色，对特殊组织与特殊结构则不能选择性的染色。若经H-E染色则可提供更为详细的结构，弥补石腊切片的不足，且结构介于光镜和电镜之间，可应用到临床中，提高病理诊断水平。为此，我们在实验工作中摸索出改进的苏木素、伊红(H-E)染色法用于半薄切片，清晰地显示组织结构，提高切片分辨率。现介绍如下。     

肾穿刺石蜡切片厚度对肾小球系膜区及基膜PASM染色的影响

<正>肾穿刺活检组织病理诊断中，过碘酸六胺银染色(periodic acid-silver metheramine,PASM)是重要的检查方法，主要用于显示肾小球系膜区范围和基膜增厚以及“钉突”、“梯状”等病理变化，是肾小球疾病鉴别的重要手段之一^[1]。PASM染色质量对诊断有一定程度的影响。切片过厚肾小球结构重叠，难以分辨，半薄切片制片时不仅切片难度增加，且切片过薄高温孵育容易掉片。本实验经过多年研究找到一种最佳PASM染色的切片厚度，现报道如下。     

肾穿刺活检组织切片制备技术的改进

肾穿刺活检组织切片的制备是病理技术工作中一项特殊的技术,其制备质量的优劣在一定程度上关系到临床肾病诊治工作的开展。为提高肾穿刺活检组织切片制备技术、准确把握肾脏疾病的诊断与治疗,作者收集141例肾穿刺活检组织标本,在组织标本的切割分配与固定、半薄切片的制备以及常规染色、特殊染色和免疫组化染色方面,对肾穿刺活检组织切片的制备进行改良,效果良好,现介绍如下。     

锇酸显示肾球旁细胞法

作者试用电镜的半薄切片,经锇酸浸镀后再复染,这样就能清楚显示肾球旁细胞。本方法,操作简单,染色过程短,方法易掌握。同时在100x的光镜下能分辨肾球旁细胞内的颗粒,以及肾小球基底膜,肾小管等的微细组织结构,基本可达到科研和教学的要求。现将方法介绍如下:一、半薄切片的制备按常规的电镜样品制作过程进行,用环氧树酯(Epoxy resin)包埋剂(Epon812)包埋。二、用超薄切片机(玻璃刀装水槽)连续切片厚1微米,裱在载玻片上,放入45℃温箱内烤干,4-24小时。三、将切片脱去环氧树酯,浸入氢氧化钾无水酒精饱和液(氢氧化钾在     

改良的石蜡半薄切片制作方法

石蜡半薄切片,是介于常规石蜡切片与超薄切片两者之间的一种切片技术。它对于疾病状态下的细微组织结构、细胞内容和细胞排列层次等的分辨力,优于常规石蜡切片,逊于超薄切片。鉴于半薄切片机价格昂贵,电子显微镜又不能普及,因     

微波骨髓活组织快速半薄石蜡切片的制备

骨髓穿刺活组织检查（骨髓活检）是确诊血液疾病的主要技术之一。微波骨髓活检组织快速半薄石蜡切片的制备，把微波辐射应用到骨髓活检组织的固定、脱水、透明、浸蜡及其切片染色等主要步骤中，结果仅需２～３ｈ即可完成切片制作，而且制片质量近似骨髓组织塑料包埋切片技...     

人直肠肌间神经丛透射电镜的观察

目的研究人直肠肌间神经丛形态学的微观结构。方法采用国人成年直肠标本,经LKB-V型超薄切片机制成半薄切片,在直肠半薄切片上定位肌间神经丛后,进行超薄切片,厚度为50～70nm。醋酸铀、柠檬酸铅染色,JEOL-100CX透射电镜观察。结果在典型的肌间丛神经节可观察到3种细胞成分,即被囊细胞、胶质细胞和神经节细胞。根据神经节细胞间电子密度不同,可将神经节细胞分为明细胞和暗细胞两类。结论人直肠肌间神经丛含有与中枢神经系统相似的细胞成分,神经节内含有丰富神经胶质细胞,其与神经元的比例为2∶1,神经元发出“翼翅”状突起。     

制作运动终板电镜标本的一种简单方法

在运动终板的超微结构形态学研究中,由于在半薄切片中寻找到运动终板比较困难,因而在电镜下难以观察到运动终板,特别在长肌中要在电镜下观察到运动终板更加困难。由此导致在电镜制样时,工作量大;在电镜观察时,失败概率高。我们在工作实践中,逐步摸索出一种比较容易观察到运动终板的制样方法,即将长肌及其支配神经进行整体包埋,以神经进入肌束处为标志进行半薄切片,便于在半薄切片中寻找到运动终板,然后进行定位,再进行超薄切片观察的方法,现简要报道如下:1　标本的取材　捣毁蟾蜍脑脊髓,处死蟾蜍。剥皮去内脏后,将蟾蜍下半身固定于蛙板上,腹…     

J_(B—4)包埋半薄切片与石蜡切片的比较

半薄切片是基于电镜的发明及对细胞学亚细胞结构的研究而发展起来的一种制片技术,特别是近20余年来,随着乙烯系高分子化合物的研究成功,大大推动了半薄切片在光学显微镜中的应用。目前,     

一种改良包埋模具和改良载玻片的设计与应用

在常规病理技术中[1,2],石蜡切片是诸多操作环节中非常重要的关键技术,能够为常规HE染色、特殊染色、免疫组化染色[3]及分子筛查等检测技术提供不同规格要求的组织切片。若宫腔刮出物、小脑占位组织、椎管内取出物等组织中的小灶组织疑有恶变或性质不能确定,可通过对原组织蜡块深切、连切、薄切等方式再进行常规HE染色,也可对重新切片的组织进行特殊染色、免疫组化染色等检测方法,以明确小灶组织的性质。     

胆固醇组织化学方法的改良

Schultz组化方法显示胆固醇对多种组织都是常用的。但按原方法要费时半月,且因要以冰冻切片作捞片,在染色过程中极易使切片破损,对本即松散的组织捞片,甚至可使得染色反应无法进行。我们对此方法做了重要改进,大大缩短了时程(后半月余减至4～5天),并把捞片改为恒冷切片后直接粘贴于载片或盖片上,大大改善了切片在染色过程中的完整性,使松散组织亦可进行染色。现将改良方法简介如下:1.取新鲜材料恒冷切片20μm,直接敷贴于载片上,空气干燥。2.CCF液     

单用正丁醇的石蜡半薄切片制作方法

单用正丁醇石蜡半薄切片法,是在原改良法的基础上再作适当改良,除继续以正丁醇代替酒精脱水外,同时取代氯仿透明,用原切片机切2μm石蜡半薄切片,亦获得同样结果。此方法国内未见报道,现介绍如下。     

HE染色在环氧树脂半薄切片中的应用

目前 ,对Ｅｐｏｎ812包埋的半薄切片进行光镜观察 ,其染色多数采用盐基性染料如美蓝、甲苯胺蓝、结晶紫、硫堇和碱性品红等无需脱脂的单色染色法。虽然方法简单、时间短 ,但效果很差 ,细胞核、细胞质、细胞膜与细胞间质的区别不明显 ,有时结构不清、难以定位 ,而且染色后的切片易褪色 ,不易做长期保存。笔者应用ＨＥ染色法 ,染色效果比较理想 ,特别对临床肾活检超微病理诊断定位有重要意义。现将方法和体会介绍如下。1　染色方法1.1　常规环氧树脂Ｅｐｏｎ812包埋 　组织经 3%戊二醛前固定 2ｈ ,1%锇酸后固定 1 5ｈ ,梯度乙醇 (5 0 %、70 %…     

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用

微波在肾穿刺活组织检查快速病理诊断中的应用师锁柱程庆砾陈香美朱宁陈振玉肾穿刺活组织检查（肾活检）是目前确诊肾小球疾病及肾间质病变的唯一方法。由于肾活检标本小、切片薄（厚２μｍ），在固定、浸蜡、包埋、切片及染色等方面要求较高，加上染色种类较多（每例病人...     

胰淋巴管的微细分布

为探讨胰小叶内是否存在淋巴管，用５′－核苷酸酶－碱性磷酸酶双重染色，半薄、超薄切片，光镜和电镜下观察了兔胰淋巴管的微细分布。结果表明，胰的淋巴管仅见于胰小叶间的结缔组织内。在胰小叶内，包括胰岛内均无淋巴管，只见到丰富的血管