人白细胞介素－6受体cDNA的克隆

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术，从人的外周血单个核细胞中扩增出人ＩＬ－６受体的特异性ｃＤＮＡ片段，经琼脂糖电泳证实扩增片段大约为１４００碱基对。运用ＤＮＡ重组技术，将获得的片段连接到ＰＵＣ１８质粒中，经转化、筛选、酶切鉴定构建出重组质粒ｐＵＣＩＬ－６受体；经序列分析证实为编码人ＩＬ－６受体的ｃＤＮＡ片段。     

人神经营养因子—4／5基因的克隆及序列测定

目的：从人胎盘组织基因组ＤＮＡ中,克隆人神经营养因子－４／５（ｈＮＴ－４／５）基因。方法：经ＰＣＲ扩增出的ＤＮＡ片段用ＰｓｔⅠ单酶切后,酶切图谱与文献报道一致。再将大量扩增后的目的ＤＮＡ片段连接于测序载体Ｍ１３ｍｐ１８,用手工测序和ＡＢＩ３７３Ａ ＤＮＡ自动序列分析仪自动测序。结果：两项分析结果都确证所得到的目的基因与天然ｈＮＴ－４／５编码序列一致。结论：首次成功地从人胎盘组织克隆出人神经营养因子     

人白细胞介素—6受体cDNA的克隆

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术座人的外周血单个核细胞中扩增出人ＩＬ－６受体的特异性ｃＤＮＡ片段，经琼脂糖电泳证实扩增片段大约为１４００碱基对。运用ＤＮＡ重组技术，将获得的片段连接到ｐＵＣ１８质粒中，经转化，筛选，酶切鉴定构建出重组质粒ｐＵＣＩＬ－６受体。     

用限制性内切酶分析溶组织内阿米巴的致病性

用ＳＨ－３，ＳＨ－５，ＳＨ－６，ＳＨ－７和ＳＨ－８５株溶组织内阿米巴的ＤＮＡ增殖３５个周期，将其基因ＤＮＡ用内切酶ＨｉｎｆＩ和ＥｃｏＴ２２Ｉ进行消化后，作琼脂糖凝胶电泳分析，显示，５株虫株ＤＮＡ经３５个循环周期后产生５３１－ｂｐ的产物；经ＨｉｎｆＩ消化后，ＳＨ－３，ＳＨ－５，ＳＨ－６和ＳＨ－７的基因ＤＮＡ产生３个相同的片段，而显示其均与非致病性虫株ＳＡＷ１４２的电泳谱完全相同；而ＳＨ－８基因ＤＮ…     

人外周血细胞线粒体DNA中存在特大片段缺失突变

了解线粒体ＤＮＡ大片段缺失突变及其意义。方法采用６种方法提取人外周血细胞ＤＮＡ,,其中１种方法先分离线粒体,再抽提线粒体ＤＮＡ。以得到的人外周血细胞ＤＮＡ为模板进行ＰＣＲ扩增,其产生经琼脂糖凝胶回收后与ｐＧＥＭ－Ｔ载体连接、转化、测序。结果６种方法抽提ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增后,产物电泳行为相同,发现人血细胞线粒体ＤＮＡ存在１３１６２ｂｐ特大片段缺失突变。结论此缺失首首发现的,经测序证明为人线粒体ＤＮ     

嗜肺巴氏杆菌蛋白及抗原图谱初步分析

为了应用ＲＦＬＰ分析猪线粒体ＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ的多态性。应用ＰＣＲ对西双版纳近交系小耳猪、广西巴马小型猪、贵州小型香猪、大约克夏猪、荣昌猪和长白猪血液总ＤＮＡ样品中线粒体ＤＮＡ控制（ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ）进行扩增,２３种限制性内切酶消化,琼脂糖凝胶电泳检测。结果发展ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ酶切多态性贫乏。因此根据现用酶,应用ｍｔＤＮＡ Ｄ－ｌｏｏｐ ＰＣＲ－ＲＦＬＰ分析,尚不能做猪品种品系鉴     

卡介苗基因组的克隆

以质粒ｐＧＣ１９为载体克隆了卡介苗（即卡介菌，ＢＣＧ）ＤＮＡ。Ｓａｕ３Ａ１部分酶解ＢＣＧ ＤＮＡ，通过琼脂糖电泳分离２￣９ｋｂＤＮＡ片段。ＢａｍＨ１酶切质粒ｐＵＣ１９，碱性磷酸酶去磷酸化，２￣９ｋｂＤＮＡ片段与ｐＵＣ１９载体用Ｔ４连接酶连接转化大肠杆菌ＨＢ１０１，在含氨苄青霉素（Ａｍｐ）、５－溴－４－氯－３－吲哚－β－Ｄ－半乳糖苷的ＬＢ平板上获得Ａｍｐ白色转化子。随机挑选１２个转化子快速提取重组子     

含抑癌基因p16转移载体的构建

目的：为获得高表达有活性的ｐ１６蛋白,构建含ｐ１６ｃＤＮＡ的重组转移载体。方法：ＥｃｏＲＩｘｈｏＩ双酶切克隆质粒ｐＢＬＵＥＳＣＲＩＰＴ－ｐ１６,低融点琼脂糖回收０．８ｋｂ的Ｐ１６ＣＤＮＡ片段,插入质粒ｐＳＸＩＶＶＩ＾＋Ｘ３,构建含Ｐ１６的重组载体ＰＸ３－Ｐ１６,并对重组子以菌落原位杂交和酶切电泳两种方法进行鉴定。结果：电泳证实低融点琼脂糖回收的片段为０．８ｋｂ。菌落原位杂交筛选８个阳性克隆,酶切电     

人端粒酶亲和纯化方法的建立及其初步鉴定

建立一种亲和纯化人端粒酶的手段,方法酶切鉴定人端粒酶ＲＮＡ质粒,所切下的ｈＴＲｃＤＮＡ片段用生物素标记后与链霉亲和素琼脂糖珠耦连,用高端粒酶活性的胃肿瘤细胞提取液与之反应,利用端粒酶核糖核蛋白的特性,形成链霉亲和素琼脂糖珠－生物素标记ｈＴＲｃＤＮＡ－ｈＴＲ－端粒酶蛋白组份复合物,核酸解离液洗脱后获得亲和纯人端粒酶。     

人Vigilin基因5＇端EcoRI片段的克隆及限制性酶切图谱分析

为了解人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因结构和探讨Ｖｉｇｉｌｉｎ蛋白的功能，在人基因组Ｖｉｇｉｌｉｎ基因全长克隆的基础上，在５＇端ＥｃｏＲＩ片段亚克隆（Ｖｉｇ－ＣＧ５－７Ｅ），并从１３个限制性核酸内切酶中选出６种对亚克隆ＤＮＡ进行部分酶切和分子杂交，组建了克隆Ｖｉｇ－ＣＧ５－７ＥＤＮＡ的详细限制性酶切图谱，从而为克隆Ｖｉｇｉｌｉｎ基因的转录调控序列提供合适的酶切位点。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

颅咽管瘤切除术后并发症的处理

目的　讨论颅咽管瘤切除术后并发症的处理原则。方法　分析 36例颅咽管瘤切除术后并发症的临床资料。结果　术后并发尿崩症者 14例、高热 11例、电解质紊乱 8例、消化道出血 3例、癫痫 5例 ,死亡2例。结论　颅咽管瘤术后并发症较多 ,加强早期监测和处理 ,可进一步提高该病的治愈率     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。