P33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

目的探讨抑癌基因p33ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达及其与突变型P53蛋白表达的相关性。方法应用免疫组织化学链霉卵白素-过氧化物酶复合物（SP）方法,检测64例膀胱移行细胞癌组织标本中P33^ING1b、突变型P53蛋白的表达,并与15例正常膀胱黏膜组织进行对照研究。结果64例膀胱移行细胞癌组织中,P33^ING1b蛋白的阳性表达率为64.06%,而正常膀胱黏膜组织中P33^ING1b蛋白阳性表达率为93.33%。P33^ING1b蛋白的表达与膀胱移行细胞癌的WHO肿瘤分级有相关性。根据Spearman相关分析表明P33^ING1b蛋白表达与P53蛋白表达正相关（P〈0.05）。结论P33^ING1b在膀胱移行细胞癌中的表达下降,可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,p33ING1b与p53基因具有协同作用,同时检测P33^ING1b与P53的表达水平,将有助于膀胱移行细胞癌的诊断与治疗。     

p33ING1b真核表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用

目的构建pCDNA3/p33ING1b真核表达质粒并探讨其对肝癌细胞SMMU7721生长的抑制作用.方法将p33ING1b cDNA正反义亚克隆至pCDNA3真核表达载体上,并经磷酸钙共沉淀法分别转染至SMMU7721细胞中.转染后48h,用0.8g/LG418筛选出阳性克隆,检测转染后细胞的生长曲线和软琼脂克隆形成率的变化及应用流式细胞仪分析细胞凋亡率的改变.结果重组pCDNA3/p33ING1b正反义表达质粒构建成功.经正义p33ING1b质粒转染的SMMU7721细胞生长速度减慢,快速增长期比对照组推迟2d,软琼脂克隆形成率为(69.0±12.0)‰,较转染空载体(90.0±10.5)‰及反义表达质粒(149.0±15.0)‰的SMMU7721细胞减少,细胞凋亡率(22.53%)亦比空载体组(8.95%)及反义组(7.75%)上升.结论重组pCDNA3/p33ING1b质粒能在SMMU7721细胞内表达,且能抑制SMMU7721细胞的生长并促进其凋亡.     

结直肠腺瘤细胞凋亡和增殖与bcl-2和P53蛋白表达的关系

目的 探讨结直肠腺瘤中细胞凋亡和增殖与 bcl- 2和 P53蛋白表达的关系。方法 对 45例结直肠腺瘤用原位末端标记（ TUNEL）法检测细胞凋亡;以增殖细胞核抗原标记增殖指数检测其增殖活性;用免疫组织化学法检测 bcl- 2和 P53蛋白表达。另选结直肠高分化腺癌和正常黏膜各 10例作为对照检测。结果 45例结直肠腺瘤细胞的凋亡指数（ AI）为（ 90. 85± 0. 24）％,结直肠腺癌细胞的 AI为（ 1. 86± 0. 15）％,两者 AI均高于正常结直肠黏膜（ P<0.01）,而腺瘤与腺癌AI值差异也有显著性（P<0.05）;bcl-2和P53蛋白的表达率与细胞AI呈显著负相关（r_s=-0.65和r_s=-0.60）,P53蛋白表达与细胞增殖活性呈正相关（r_s=0.86）,而bcl-2蛋白表达与细胞增殖无相关性。结论 bcl-2和P53蛋白过度表达与细胞凋亡抑制、增殖失控关系密切,在结直肠腺瘤癌变进展中起一定作用。上述指标的联合检测可以作为临床早期判断结直肠腺瘤癌变的重要参考指标。     

p33ING1b与p53在胆管癌中的表达及临床意义

目的:研究p33ING1b与p53在胆管癌中的表达情况,探讨它们与胆管癌临床病理参数间的关系,及两者的表达在胆管癌中的相关性。方法:采用免疫组织化学法,检测40例胆管癌组织与20例正常胆管组织中p33ING1b与p53的表达情况。结果:p33ING1b和p53在胆管癌中的阳性表达率分别为55.0%(22/40)和57.5%(23/40),而在正常胆管组织中阳性表达率分别为100%(20/20)和0(0/20),差异具有统计学意义(P0.01)。p33ING1b与p53在胆管癌中的表达与年龄、性别、胆红素水平、肿瘤直径大小及肿瘤所在部位无相关性(P0.05),而与肿瘤的分化程度、淋巴结转移、神经侵犯及肿瘤的TNM分期密切相关(P0.05)。p33ING1b与p53在胆管癌中的表达呈负相关(r=-0.472,P0.01)。结论:在胆管癌组织中,p33ING1b呈低表达,而p53呈高表达。提示p33ING1b与p53可能参与了胆管癌的发生、发展、浸润及转移的过程。     

小干扰RNA对肾癌细胞Ki67基因表达及其增殖的抑制作用

目的探讨小干扰RNA(siRNA)对人肾癌细胞增殖基因Ki67表达及其增殖、凋亡的影响。方法将Ki67 siRNA(100 nmol/L)转染人肾癌786-0细胞。采用RT-PCR、免疫印迹、免疫组化技术检测Ki67 mRNA及蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,免疫组化TUNEL法检测细胞凋亡。结果Ki67 siRNA处理组786-0细胞Ki67 mRNA表达(37．6±1．9)%、Ki67蛋白表达(46．4±0．9)%、免疫组化Ki67表达吸光度(A)值52．5±2．3,阴性siRNA对照组分别为(97．3±0．9)%、(95．3±0．9)%、114．5±4．9,2组比较差异均有统计学意义(P＜0．01)。Ki67 siRNA处理组细胞增殖抑制率(63．6±1．6)%、凋亡细胞阳性率(41．7±0．6)%,阴性siRNA对照组分别为(2．8±0．2)%、(10．3±1．4)%,2组比较差异有统计学意义(P＜0．01)。结论肿瘤增殖基因Ki67 siRNA能抑制人肾癌786-0细胞Ki67基因表达,进而抑制其增殖,促进其凋亡,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。     

结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究

目的 探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33／ING1在结直肠癌中的表达。方法 用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1 mRNA的表达水平，并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33／ING1蛋白的表达。结果 结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33／ING1蛋白阳性表达率分别为43．3％（26／60）、100％（60／60），两者比较差异有统计学意义（P＜0．01）。p33／ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57．6％（19／33）、25．9％（7／27），两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。在Dukes A、B期和Dukes C、D期患者癌组织中p33／ING1的阳性表达率分别为56．7％（17／30）、30．0％（9／30），两者比较差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 ING1及p33／ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关，临床分期越差者表达水平越低。     

ING1启动子甲基化在散发性结直肠癌中的研究

具有完整活性的抑癌基因可有效地抑制肿瘤发生。p53是目前研究得比较透彻的抑癌基因。文献报道p53发挥抑癌作用．需要ING1（inhibitor of growth）的参与。若ING1表达缺失或受到拮抗，p53的抑制生长作用即明显受到抑制。ING1具有抑制细胞生长、促进凋亡，参与细胞衰老调控等作用。我们发现，在散发性结直肠癌中，ING1基因的异常改变少见，癌组织中ING1的表达强度比相应的正常组织明显降低。     

肾癌相关蛋白G250mRNA在肾细胞癌中表达的研究

目的探讨肾癌相关蛋白G250 mRNA在肾细胞癌(RCC)中的表达及其临床意义.方法采用RT-PCR方法检测7例正常肾组织和33例RCC组织中G250 mRNA的表达.33例RCC中透明细胞癌28例,非透明细胞癌5例;T1 8例、T2 13例、T3 12例;G1 11例、G2 15例、G37例. 结果33例RCC组织中G250 mRNA表达阳性28例(84.8%),7例正常组织G250表达均为阴性,2组间差异有统计学意义(P＜0.01).肾透明细胞癌组织G250 mRNA表达率高于非透明细胞癌[96.4%(27/28)和20.0%(1/5),P＜0.05].T1、T2、T3 RCC G250 mRNA表达量分别为0.32±0.21、0.41±0.16、0.38±0.14,表达量与临床分期无相关性(P＞0.05).G1、G2、G3 RCC G250 mRNA表达量分别为0.48±0.32、0.23±0.16、0.11±0.11,表达量与病理分级呈负相关(P＜0.05).结论G250mRNA表达与RCC恶性程度有相关性,有望成为RCC诊断及预后判断的指标.     

Ki67基因短发夹状RNA表达载体对肾癌细胞生长的抑制作用

目的研究针对Ki67基因的短发夹状RNA(shRNA)表达载体pSilencer-Ki67对人肾癌细胞生长的抑制作用。方法将pSilencer-Ki67转染人肾癌786-0细胞,24、48、72、120、144 h后分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western blot技术检测Ki67 mRNA、蛋白表达,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖,原位末端标记法检测细胞凋亡。结果pSilencer-Ki67转染后48 h 786-0细胞Ki67mRNA表达(34．1±1．7)%、蛋白表达(42．6±1．7)%降低最明显,与空质粒对照组[(97．7±0．9)%、(97．3±1．6)%]比较差异均有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67处理后48 h细胞增殖抑制率(76．7±3．2)%最高,72 h凋亡细胞阳性率(74．3±5．9)%最高,与空质粒对照组[(7．0±0．5)%、(8．4±1．1)%]比较差异有统计学意义(P＜0．01)。pSilencer-Ki67的这些作用可持续144 h。结论pSilencer-Ki67能有效、持续抑制人肾癌786-0细胞生长,有望成为肾癌基因治疗的有效工具。     

HIF-1α和P53蛋白的表达对肾透明细胞癌预后的影响

目的本研究旨在探讨缺氧诱导因子1α（HIF-1α）和P53蛋白在人肾透明细胞癌组织中的表达及其对患者预后的影响。方法应用免疫组化方法检测65例肾透明细胞癌组织中HIF-1α和P53蛋白的表达情况,通过生存曲线法比较阳性组和阴性组患者的预后情况。结果 HIF-1α和P53蛋白表达的阳性率分别为40.0%（26/65）和52.3%（34/65）;HIF-1α表达与肾透明细胞癌的组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关（P〈0.05）;HIF-1α蛋白阳性组患者的生存期明显较阴性组短（P=0.004）;P53蛋白表达与肾透明细胞癌患者性别、年龄、肿瘤大小、组织学分级、临床分期、淋巴结转移及生存期均无关（P〉0.05）;HIF-1α蛋白P53蛋白的表达之间存在相关性（r=0.402,P=0.001）。结论 HIF-1α的表达与肾透明细胞癌患者的预后相关,其阳性表达提示患者预后不良;检测HIF-1α表达水平有助于肾细胞癌预后评估。     

结直肠癌中抑癌基因ING1的表达研究

目的探讨抑癌基因ING1及其蛋白p33/ING1在结直肠癌中的表达。方法用RT-PCR检测35例散发性结直肠癌中ING1mRNA的表达水平,并应用S-P法检测60例散发性结直肠癌及正常黏膜组织中p33/ING1蛋白的表达。结果结直肠癌组织、正常黏膜组织中p33/ING1蛋白阳性表达率分别为43.3%(26/60)、100%(60/60),两者比较差异有统计学意义(P<0.01)。p33/ING1在无淋巴结转移组及淋巴结转移组中的阳性表达率分别为57.6%(19/33)、25.9%(7/27),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。在DukesA、B期和DukesC、D期患者癌组织中p33/ING1的阳性表达率分别为56.7%(17/30)、30.0%(9/30),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论ING1及p33/ING1蛋白的低表达与散发性结直肠癌发生、发展密切相关,临床分期越差者表达水平越低。     

Fas—L与P53在膀胱肿瘤中的表达及临床意义

目的 探讨膀胱肿瘤中免疫逃避作用引起的细胞凋亡与P53的关系。方法 采用免疫组织化学方法检测33例移行细胞癌,8例膀胱腺癌及11例膀胱炎组织石蜡切片中Fas-L与P53的表达。结果 P53及Fas-L在膀胱炎及肿瘤中的表达具有显著性差异(P<0.05)。在膀胱腺癌与移行细胞癌中P53、Fas-L的表达无显著性差异(P>0.05)。C_1、G_2、G_3级中P53表达具有显著性差异(P<0.05),Fas-L的表达无显著性差异(P=0.07)。在膀胱肿瘤中,20例P53阳性患者中14例Fas-L阳性(70％),P53与Fas-L表达无显著性差异(p=0.238)及相关性(p=0.393)。结论 P53可能通过免疫逃避作用使肿瘤细胞凋亡下降,但不是唯一因素。     

p33ING1b蛋白在胆囊癌中表达的研究

目的 探讨抑癌基因p33ING1b在胆囊癌组织中的表达情况并探讨其临床意义.方法 采用P免疫组化法测定p33ING1b蛋白在20例慢性胆囊炎及30例胆囊癌石蜡标本的阳性表达率及其与临床分级分期的相关性.结果 p33ING1b在胆囊癌中的表达率为53.33％ (16/30)明显低于胆囊炎的100％ (20/20),差异有...     

P53 mRNA及P53蛋白在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达及意义

目的：研究抑癌基因Ｐ５３及其表达产物Ｐ５３蛋白在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达，比较Ｐ５３ｍＲＮＡ及Ｐ５３蛋白的表达关系。方法：应用免疫组织化学方法及核酸分子原位杂交方法检测Ｐ５３ｍＲＮＡ及Ｐ５３蛋白的表达情况。结果：原位杂交显示，Ｐ５３ｍＲＮＡ在肾上腺嗜铬细胞瘤中表达为２４．１％（７／２９），在肾上腺恶性嗜铬细胞瘤中表达为１４．３％（１／７）；免疫组织化学显示，Ｐ５３蛋白在肾上腺嗜铬细胞中表达为７９。     

胃肠道腺癌P-糖蛋白和P53蛋白表达的关系

目的 探讨多药基因产物Ｐ糖蛋白（Ｐ－ｇｌｙｃｏｐｒｏｔｅｉｎ,Ｐ－ｇｐ）和Ｐ５３蛋白在胃肠道腺癌中协同表达的意义。方法 应用免疫组织化学方法检测术前未进行化疗的２５９例胃癌和１４０例结肠癌组织中的Ｐ－ｇｐ和Ｐ５３蛋白的表达。结果 Ｐ－ｇｐ和Ｐ５３在胃癌中的表达分别为２６．２５％（６８／２５９）和３７．０７％（９６／２５９）;在结肠癌在的表达分别为２３．５７％（３３／１４０）和４０％（５６／１４０）     

P53基因及P53蛋白在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达

目的：研究抑癌基因Ｐ５３及其表达产物Ｐ５３蛋白在肾上腺嗜铬细胞瘤中的表达，比较Ｐ５３ｍＲＮＡ表达与Ｐ５３蛋白表达的关系。方法：应用免疫组织化学及核酸分子原位杂交方法检测Ｐ５３基因及其产物的表达情况。结果：原位杂交显示，Ｐ５３ｍＲＮＡ在肾上腺嗜铬细胞瘤中表达为２４．０％，在恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中为１４．０％；免疫组织化学显示，Ｐ５３蛋白在肾上腺嗜铬细胞癌中表达为７９．３％，在恶性肾上腺嗜铬细胞瘤中为     

肾盂输尿管癌中P53表达的临床意义

通过免疫组化ＳＰ法，对４６例肾盂输尿管癌石蜡切片进行Ｐ５３基因表达的研究。结果：肾盂输尿管癌Ｐ５３表达阳性率为５４．３％，同时发生尿路上皮多器官癌Ｐ５３表达阳性８６．７％，肾盂或输尿管单发癌Ｐ５３表达阳性率为４８．６％。     

胃癌组织中P15蛋白和血管内皮生长因子表达及其相关性的研究

目的　研究胃癌组织中P15蛋白和血管内皮生长因子 (VEGF)的表达及相关性。方法　应用SP免疫组织化学方法检测了 16 0例胃癌和 5 2例胃良性病变中P15蛋白和VEGF的表达情况。结果　P15蛋白在胃癌中阳性率为 43 8% (70 /16 0例 ) ,在胃良性病变中的阳性率为 6 9 2 % (36 /5 2例 ) (P <0 0 5 )。VEGF在胃癌中的阳性表达率为 75 0 % (12 0 /16 0例 ) ,在胃良性病变中的阳性表达率为 7 7% (4/5 2例 ) (P <0 0 0 1)。P15蛋白阳性 /VEGF阴性表达率于胃癌中为 11 3% (18/16 0例 ) ,胃良性病变中为 6 9 2 % (36 /5 2例 ) (P <0 0 0 1) ;P15蛋白阴性 /VEGF阳性表达率于胃癌中为 42 5 % (6 8/16 0例 ) ,胃良性病变中为 7 7% (4/5 2例 ) (P <0 0 0 1)。结论　胃癌中存在P15蛋白下调和VEGF上调 ,且两者具有相关性。     

转移相关基因nm23和P53及S100A4在晚期胃癌中的表达及与侵袭转移的相关性研究

目的探讨转移相关蛋白（nm23和P53及S100A4）在晚期胃癌转移发展过程中的意义。方法应用组织芯片和免疫组织化学方法研究nm23、P53和S100A4在74例胃癌患者的癌、癌旁、淋巴结转移、远处转移（肝脏、胰腺、卵巢等）组织中的表达。结果同癌旁组织相比，癌组织中P53和S100A4表达明显升高（P〈0．01），而nm23的表达明显降低（P〈0．05）；同癌组织相比，淋巴结中nm23的表达明显降低（P〈0．05）。远处转移组织S100A4表达明显升高（P〈0．01）。3者的阳性表达与胃癌的部分恶性生物学行为有关。癌组织中nm23^＋／P53^＋、P53^＋／S100A4^＋和nm23^＋／S100A4^＋的基因表型比例分别为48例（64．9％）、50例（67．6％）和39例（52．7％），其中P53^＋／S100A4^＋、nm23^＋／S100A4^＋和nm23^＋／P53^＋／S100A4^＋均与胃癌的高转移潜能相关。结论nm23和S100A4在肿瘤转移中发挥了重要作用；联合检测nm23、P53和S100A4的表达可用于评定胃癌的转移潜能。