淋球菌外膜蛋白PI基因重组子的构建和表达

目的 扩增四株淋球菌外膜蛋白PI基因，构建pET30b-PI-NG重组子，在大肠杆菌中诱导表达外膜蛋白PI．方法 采集临床淋球菌四株，提取细菌基因组DNA，PCR扩增外膜蛋白PI基因，与克隆载体pBS-T连接，构建pBS-T-PI-NG重组子，测序，目的基因插入表达质粒载体pET30h中，构建pET30h-PING重组子，转化表达宿主大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导蛋白质表达，SDS-PAGE初步分析．结果 成功构建了四株淋球菌的pET30b-PI大肠杆菌表达重组子，经IPTG诱导表达后，其中三株获得表达的目的蛋白PI。结论 本研究为PI蛋白免疫学特性的研究、抗体制备、以及预防淋病疫苗的研制莫定了基础。     

沙眼衣原体外膜蛋白的研究进展

沙眼衣原体(Chlamydia trachamatis，Ct)主要外膜蛋白(MOMP)为Ct最重要的免疫原之一，由于其蛋白结构的特殊性，其已被进行广泛研究，它不仅可用于Ct基因型分型，而且为Ct疫苗研究中最重要的候选成分。现将Ct MOMP基因及蛋白的特性、MOMP的免疫学特性、MOMP的基因型分型及在临床诊断中的应用等作一综述。     

淋球菌外膜蛋白NspA基因重组子的构建与表达

目的构建淋球菌标准株外膜蛋白NspA基因重组子,在大肠杆菌BL21（DE3）中诱导表达外膜蛋白NspA。方法提取淋球菌标准株基因组DNA,PCR扩增其NspA基因,插入表达质粒载体pET-30c（＋）中,构建pET-NspA重组子,转化表达宿主大肠杆菌BL21（DE3）,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE和Western Blot检测表达蛋白。结果成功构建了淋球菌标准株的pET-NspA大肠杆菌表达重组子,经IPTG诱导表达后,该蛋白在大肠杆菌中高效表达。结论淋球菌外膜蛋白NspA在大肠杆菌中的成功表达,为研究该蛋白的免疫学性能、制备抗体和研制预防淋病的疫苗奠定了基础。     

淋球菌主要外膜蛋白PIA原核重组质粒的构建及序列分析

目的：构建携带淋球菌主要外膜蛋白PIA基因的pET重组质粒，分析其编码序列。方法：根据PIA已知序列设计——对引物，用PCR技术从淋球菌捷克标准株中扩增PIA；将目的基因PCR产物和质粒pET28a( )同时用BamHI和Hind Ⅲ限制性内切酶进行双酶切，纯化回收后将其连接并将重组质粒转化大肠杆菌DH5α。将构建的重组质粒pET28a( )-PIA通过PCR、质粒双酶切、DNA测序证实获得正确的重组克隆。结果：成功构建PIA基因原核重组质粒pET28a( )-PIA。序列分析表明，其携带的PIA基因序列与GenBank中公布的淋球菌(AF090818)的PIA序列具有很高的同源性，其同源性达到99．9％。结论：成功构建携带淋球菌主要外膜蛋白PIA基因重组表达载体，有助于更深入地分析其基因功能，为后期淋球菌的临床检测和基因疫苗研制打下基础。     

梅毒螺旋体外膜蛋白功能的研究进展

梅毒是一种严重影响人类健康的慢性传播性疾病,是由梅毒螺旋体感染所引起。梅毒螺旋体外膜蛋白(Omp)是一类具有关键性功能的蛋白。Omp在梅毒螺旋体的免疫原性、黏附宿主细胞以及转运营养物质等方面具有非常重要的作用。本文就梅毒螺旋体主要外膜蛋白的结构、功能等特性做一综述。     

淋球菌外膜蛋白Porin I多抗的黏附抑制作用研究

目的:研究兔抗淋球菌外膜蛋白Porin I(P I)的多克隆抗体阻断淋病奈瑟菌对泌尿生殖道上皮的黏附作用。方法:将自行构建表达的淋球菌GST-P I融合蛋白作为抗原免疫新西兰兔,获得兔抗P I蛋白的多抗血清,纯化后得到P I-IgG抗体。建立淋球菌感染BALB/c小鼠模型,并通过观察阴道黏膜改变、分泌物涂片、冲洗液培养及阴道组织病理变化评价兔抗P I-IgG抗体对淋球菌黏附的影响。结果:经1 m g/m l兔抗P I-IgG处理后3 h再接种淋球菌的BALB/c小鼠生殖道黏膜未见红肿及脓液,分泌物涂片及阴道冲洗液未检及淋球菌,阴道组织病理检查也未见炎症细胞浸润。而低于浓度1 m g/m l及长于3 h兔抗P I-IgG处理的小鼠阴道组织病理可检及炎症细胞,但其它检查结果阴性。结论:纯化的抗淋球菌GST-P I融合蛋白的多克隆抗体,能有效抑制淋病奈瑟菌对小鼠泌尿生殖道上皮的黏附与感染,阻断作用及持续时间与抗体浓度有关。     

淋病病人精液中抗淋球菌抗体的作用

淋病病人精液中抗淋球菌抗体的作用郑和义近年来研究发现，人体血清中抗淋球菌外膜蛋白Ⅲ（ＰⅢ）抗体有阻断免疫血清杀灭血清敏感型淋球菌的作用［１］，并能增加人体对淋球菌感染的敏感性［２］。我们曾证实了淋病病人的精液存在多种抗淋球菌外膜蛋白的抗体［３］，本工...     

布鲁氏菌主要外膜蛋白特征及其应用研究进展

布鲁氏菌病是一种人畜共患传染病.外膜蛋白是布鲁氏菌重要的毒力因子,同时具有较好的免疫原性,能够刺激机体产生较强的免疫力,可以作为布鲁氏菌病诊断的抗原和布鲁氏菌病亚单位疫苗的候选物.本文对目前几种重要的布鲁氏菌外膜蛋白相关研究进展进行综述,以期进一步了解布鲁氏菌外膜蛋白的特性,为研制布鲁氏菌病的诊断试剂及相关疫苗提供参考价值.     

乙型肝炎病毒外膜蛋白的分子生物学研究进展

乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)外膜蛋白含PreS1、PreS2和S 3种蛋白,位于病毒颗粒的外表面,参与病毒颗粒的吸附、组装与成熟,在保护性免疫应答反应中起重要作用,HBV感染肝细胞所合成的外膜蛋白对肝细胞的生长、代谢,甚至是恶性转化产生一系列重要的生物学调节效应,外膜蛋白的变异使得HBV对受染肝细胞的影响非常复杂且成多样化,在病毒性乙型肝炎慢性化及其相关疾病演变过程的分子病理机制扮演重要角色。     

血管生成素样蛋白的研究进展

血管生成素样蛋白（ANGPTL）是近年来发现的一类新的分泌性糖蛋白。虽然ANGPTL与血管生成素（Ang）在组成上具有一定的同源性，也具有相似的结构域，但在功能上与Ang又有明显的不同。作为一类新的蛋白族群，ANGPTL的许多方面仍有待于研究。作者就ANGPTL的结构和功能等方面的研究情况作一综述，并对ANGPTL研究中存在的一些问题提出了一些看法。     

Tolosa-Hunt综合征的临床研究进展

Tolosa-Hunt综合征(Tolosa-Hunt syndrome,THS)又称痛性眼肌麻痹,是一种伴有头痛和眼肌麻痹的特发性眼眶和海绵窦炎性疾病。近年国内报道本综合征逐渐增多,作者对此做以全面综述。     

TNF-α信号传导通路的研究进展

肿瘤坏死因子(TNF)是一类具有多种生物效应的细胞因子,它通过和细胞膜上的特异性的受体结合,实现促进细胞生长,分化,调亡及诱发炎症等生物学效应。TNF-α属于TNF家族,可以激活Caspase蛋白酶、JNK和转录因子NF-κB三条信号通路,实现其细胞毒性,抗病毒,免疫调节和细胞凋亡等生物学功能。由于TNF-α与细胞自稳和许多人类疾病,如肿瘤等直接相关,有关TNF-α信号通路的研究成为近十年生物医学研究领域的热点。笔者着重综述TNF-α的三条信号通路的经典模式和及其研究新进展。1 TNF-α和TNF-R的生物学性质1·1 TNF-α主要是由激活的单…     

单核细胞增生性李斯特菌在食品安全中的研究近况

单核细胞增生性李斯特菌（L．monocytogenes LM）是李斯特菌属（Listeria）中的一种，LM广泛分布于自然界，在肉类、蛋类、禽类、海产品、乳制品和蔬菜类都能检出。LM感染严重时可引起血液和脑组织疾病。许多国家为了确保食品安全，已采取相应措施来控制食品中LM的污染，并制定了相应的标准。现将该菌在食品安全中的研究近况综述如下。     

钩端螺旋体膜蛋白研究进展

问号钩端螺旋体（Leptospira interrogans）在全球分布广泛，危害极大，已发现25个血清群，273个血清型。钩体病是世界上流行最广的人兽共患病之一，人体感染后，轻者似感冒，重者可有明显的肝、肾、肺及中枢神经系统损害，甚至死亡。至少已发现200多种动物为问号钩端螺旋体携带者，动物大多呈隐性感染，钩体在感染动物中可长期存在，持续随尿排出，污染水源和土壤。目前的疫苗通常采用灭活的全菌，而血清学诊断通常采用活菌，主要抗原成分是菌体表面的脂多糖（LPS），不幸的是不同血清型钩体LPS的抗原性不一样。象沙门菌一样，LPS的不同反映出钩体对宿主的不同适应性，每一动物宿主都与特定的钩体血清型相联系。如大鼠与Ietemhemorchagiae，小鼠与Ballum，牛与Hardio，猪与Pomona、Bratislava，而狗倾向于Canicola。LPS的宿主特异性可能是钩体免疫逃避的机制，允许钩体长期呆在动物的肾脏中而不引起炎症反应。     

重组降钙素研究进展

应用基因工程法可以制备出重组降钙素类似物。通过这种方法可得到生物活性高、免疫原性低的降钙素。该文综述了用基因工程法制备降钙素的研究进展。     

幽门螺杆菌外膜蛋白的基因克隆及表达

目的：克隆及表达幽门螺杆菌（Hp)相对分子质量为18000的外膜蛋白基因,为Hp的疫苗开发,快速诊断试剂盒的研究奠定基础。方法：用PCR从Hp染色体DNA扩增该外膜蛋白的基因片段,将目的基因,pQE30质粒同时分别经限制性内切酶BamHⅠ,HindⅢ酶切,纯化,连接,转染,筛选以及表达含插入片段的重组载体。结果;经酶切,测序分析插入的基因片段为表达Hp相对分子质量为18000外膜蛋白基因,与文献相比：有2％碱基发生变异,以1．68％氨基酸残基改变,同源性可达到98％以上,SDS－PAGE显示;表达产物相对分子质量为18000,可溶性表达占全菌的18％以上;ELISA法显示：该蛋白可被Hp全菌抗血清识别。结论：Hp外膜蛋白基因克隆表达产物具有良好的抗原性,将有可能成为一种有效蛋白质疫苗以及快速诊断试剂盒用于Hp感染的防治和检测。     

沙眼衣原体主要外膜蛋白生物信息学分析

目的：分析和预测E血清型沙眼衣原体（Ct）主要外膜蛋白（MOMP）的结构和功能。方法：采用计算机辅助生物软件和网络数据库,从SwissProt蛋白质数据库中检索MOMP氨基酸序列,用Expasy服务器分析预测MOMP蛋白理化性质、二级结构,同时用Pcons服务器分析模拟蛋白质空间结构。结果：分析显示,Ct MOMP蛋白为一跨膜16次的酸性蛋白质,其空间结构为β-桶状膜蛋白,推测其功能为孔蛋白。结论：通过对MOMP生物信息学分析获得该蛋白的特性,为进一步研究Ct的感染与发病机制、研制Ct亚单位疫苗以及研究MOMP新的功能域等提供理论依据。     

桩核修复新进展

根管治疗后的患牙大多有较严重的牙体缺损,容易发生冠根折裂。为了防止治疗失败,在修复时要考虑到无髓牙的薄弱易折性,给予适当的加强和弥补,良好的修复重建是十分必要的。桩核可以较好地恢复冠部缺损．为冠部固位提供支持力。根管治疗后的牙齿何时使用桩核,使用什么类型的桩核,许多临床工作者并不是十分清楚。纤维加强型树脂桩核具有一些理想的物理机械性能,它的出现冲击了桩核的一些经典理论,预示着很好的发展潜力。树脂水门汀粘接技术的迅猛发展也间接地推动了桩核的发展。本文总结以上几方面文献的研究结果。希望对口腔临床工作者全面了解桩核有所帮助,为临床工作提供依据。