三氧化二砷对人胃癌细胞株转移基因表达的影响

目的：研究三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23、P53反PCNA基因表达的影响，从而探讨其抗肿瘤作用。方法：以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术时nm23和P53反PCNA基因编码蛋白的表达进行检测。结果：经As2O3作用的人胃癌细胞株nm23、P53反PCNA基因编码蛋白表达减少。结论：As2O3具有下调nm23、P53反PCNA基因编码蛋白表达，具有抗肿瘤的作用。     

三氧化二砷对人胃癌细胞株nm23、P53基因表达的影响

目的 观察三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞株nm23、P53基因表达的影响。方法 以As2O3作用于体外培养的人胃癌细胞株，通过免疫组化技术对nm23和P53基因编码蛋白的表达进行检测。结果 经As2O3作用的人胃癌细胞株nm23、P53基因编码蛋白表达减少（P〈0．05）。结论 As2O3具有下调nm23、P53基因编码蛋白表达作用。     

肿瘤转移抑制基因nm23/NDPK、p53和癌基因p21及增殖细胞核抗原的表达与胃癌浸润、转移的关系

目的：研究肿瘤抑制基因um23／NDPK、p53和癌基因p21及胃癌增殖细胞核抗原（PCNA）表达与胃癌浸润、转移的关系。方法：用链霉卵白素-生物素（SAB）免疫组织化学方法对55例经手术切除后的胃癌标本进行um23／NDPK、p53、p21和PCNA的检测。结果：55份胃癌标本中nm23／NDPK、p53、p21、PCNA阳性率分别为71％、29％、38％、84％，其中um23／NDPK、p21及PCNA表达与胃癌浸润深度有关，p21、PCNA阳性和nm23／NDPK表达降低者，癌细胞多已侵入浆膜及装膜外组织；um23／NDPK、p53、PCNA的表达与胃癌的淋巴结转移有关，um23／NDPK表达降低及p53、PCNA阳性者淋巴结转移明显增高（P＜0．05）。结论：胃癌组织中存在多种癌基因及抑癌基因表达异常，um23／NDPK的表过降低，p53、p21及PCNA阳性与胃癌浸润范围及淋巴结转移有关系。     

胃癌组织中Kail、nm23、PCNA表达及其与胃癌转移的关系

目的 探讨胃癌组织中Kail、nm23、PCNA的表达与胃癌侵袭转移的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测52例胃癌组织中Kail、nm23、PCNA的表达情况。结果 胃癌组织中Kail、nm23、PCNA的阳性表达率分别为57．69％、53．85％、80．77％。Kail基因的表达与胃癌淋巴结和远处转移有关，与浸润深度和临床分期无关。nm23在临床分期Ⅰ、Ⅱ期胃癌中的阳性表达率显著高于Ⅲ、Ⅳ期胃癌，在无淋巴结转移和远处转移组的阳性表达率显著高于有淋巴结转移和远处转移组。PCNA的表达与临床分期、胃癌浸润深度和淋巴结转移相关。结论Kail、nm23和PCNA的表达与胃癌淋巴结转移密切相关，nm23和Kail的表达在抑制胃癌转移中可能有协同作用。     

脑膜瘤生物学行为与预后评估中PCNA及nm23-H1蛋白的价值

目的：研究人脑膜瘤中增殖细胞核抗原(PCNA)和nm23-H1蛋白表达情况。方法：采用免疫组化的方法，对49例人脑膜瘤石蜡切片标本中PCNA和nm23-H1蛋白进行检测。结果：恶性脑膜瘤中PCNA标记指数(PCNA LI)显著高于良性脑膜瘤(t=5．55，P&;lt;0．05)和非典型性脑膜瘤(t=2．96，P&;lt;0．05)，恶性脑膜瘤nm23-H1表达明显低于非典型性脑膜瘤(P&;lt;0．05)和良性脑膜瘤(P&;lt;0．05)。复发组脑膜瘤PCNALI显著高于未复发组脑膜瘤(t=5．40，P&;lt;0．05)；而复发组脑膜瘤nm23-H1蛋白显著低于未复发组脑膜瘤(r=4．71，P&;lt;0．05)。结论：PCNA高表达与nm23-H1蛋白低表达同脑膜瘤的病理学分级相关。标计指数PCNA LI和nm23-H1蛋白对预测脑膜瘤的复发有一定的意义。     

SYK基因激活对人胃癌SGC7901细胞株VEGF表达的影响

目的利用去甲基化酶5-氮-2’-脱氧胞苷（5-aza-CDR）对脾酪氨酸激酶（Syk）基因激活的作用,观察Syk基因的激活对人胃癌SGC-7901细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,从而研究Syk基因的激活对人胃癌SGC-7901细胞生长和转移的影响。方法检测用5-aza-CDR处理后的人胃癌SGC7901细胞株的生长情况、SYK基因的表达水平及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平,与未接触5-aza-CDR的对照组进行对比。结果经5-aza-CDR处理过的人胃癌SGC-7901细胞株的生长明显受抑;该细胞株SYK基因的表达水平较对照组明显升高,血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达水平较对照组明显减弱（P〈0.05）。结论 Syk基因的表达能够抑制人胃癌SGC-7901细胞株生长,抑制该细胞株VEGF的表达。血管内皮生长因子（VEGF）的表达抑制可能是SYK基因的激活,从而抑制该细胞株的生长和转移的机制之一。     

肿瘤转移抑制基因nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞株的转染及表达

目的:探讨nm23-H1基因对人膀胱癌T-24细胞株的转染及表达.方法:采用已经通过基因工程技术构建的nm23-H1基因的真核表达载体,利用电穿孔基因转染技术将nm23-H1基因导入人膀胱癌T-24细胞,利用G418筛选、免疫组织化学、流式细胞方法检测nm23-H1基因的转录和表达情况.结果:以电穿孔转染技术将nm23-H1基因转染T-24细胞后,经400ml/L的G418筛选后可形成抗性克隆;免疫组织化学和流式细胞结果显示转基因细胞中有nm23-H1蛋白的阳性高表达.结论:nm23-H1基因可被成功转染入人膀胱癌T-24细胞并能有效表达.     

沉默β-catenin表达对胃癌细胞5-Fu敏感性的影响

目的 探讨β-catenin表达下调对胃癌细胞5Fu敏感性的影响,并初步探讨其分子学机制.方法 将β-catenin-RNAi慢病毒及空载体慢病毒分别感染胃癌AGS及MGC803细胞,获得β-catenin低表达的稳定细胞株(AGS-RNAi、MGC803-RNAi)及空载慢病毒感染的阴性对照组细胞(AGS-Neg、MGC803-Neg);Western blot及RT-PCR验证β-catenin蛋白沉默效率;MTT法检查各组细胞对5-Fu敏感性的差异,同时Western blot检测各组细胞中5-Fu代谢酶(DPD、TS)及多药耐药相关蛋白(P-gp)的表达.结果 实验组与阴性对照组细胞中显示绿色荧光的细胞率约占80%,空白对照组细胞不显示荧光;与对照组比较:试验组细胞内β-catenin表达量在基因及蛋白双水平上均显著下调(P<0.05);实验组细胞对多个浓度的5-Fu敏感性均高于对照组(P<0.05),且实验组细胞中TS、P-gp的表达低于对照组(P<0.05),而DPD的表达则与对照组无明显差异(P>0.05).结论 沉默胃癌细胞中β-catenin蛋白的表达可提高胃癌细胞对5-Fu的敏感性,且其分子学机制有可能与细胞内TS及P-gp蛋白表达量有关.     

胃癌中CD44v6和nm23基因蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨CD44v6和nm23的表达与胃癌侵袭转移的关系，了解胃癌中CD44v6蛋白表达与nm23蛋白表达的相关性。方法：采用免疫组化S－P法检测CD44v6及nm23在胃癌中的表达情况。结果：CD44v6阳性表达率在进展期胃癌显著高于早期胃癌（P＜0．05），伴淋巴结转移组和肝转移组明显高于无转移组（P＜0．05），CD44v6表达与胃癌的侵袭转移倾向呈正相关（P＜0．05）;nm23阳性表达率在进展期胃癌明显低于早期胃癌（P＜0．05），伴淋巴结转移组和肝转移组显著低于无转移组，nm23蛋白表达与胃癌的侵袭转移倾向呈负相关（P＜0．05）。胃癌中CD44v6及nm23蛋白表达之间呈明显负相关关系（P＜0．01）。结论：胃癌组织中CD44v6和nm23蛋白的检测可用于胃癌转移的预测、恶性程度的评估和预后的判断。     

RNA干扰Rac1基因表达抑制胃癌细胞增殖及促进凋亡的机制研究

目的 RNA干扰抑制Rac1基因的表达对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及机制。方法 Western blot检测胃癌组织及相应的癌旁组织中Rac1基因的蛋白表达;将NC-siRNA、Rac1-siRNA转染至人胃癌SGC-7901细胞,不经任何处理的细胞作为空白对照组,48 h后,Western blot检测各组细胞中Rac1的蛋白表达;CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测ki67、PCNA、Cleaved caspase3、Notch1、Hes1蛋白表达。结果 Rac1在胃癌组织中的蛋白表达显著高于癌旁组织(P0.01);RNA干扰SGC-7901细胞中Rac1基因后能显著降低Rac1的蛋白表达;与对照组及NC-siRNA组比较,Rac1-siRNA组细胞存活率及ki67、PCNA、Notch1、Hes1蛋白表达显著降低,细胞凋亡率及Cleaved caspase3蛋白表达显著升高(P0.01)。结论 Rac1基因在胃癌组织中高表达,RNA干扰抑制Rac1基因表达后能显著降低细胞的增殖及诱导细胞凋亡,其机制与抑制Notch1信号通路有关。     

p53蛋白、增殖细胞核抗原与胃癌生物学行为及预后的关系

目的通过检测p53蛋白、增殖细胞核抗原(PCNA)在胃癌组织中的表达情况，从分子水平探讨p53蛋白、PCNA与胃癌生物学行为及预后的关系，寻找有助于胃癌预后判断的客观指标。方法9l例胃癌组织均取自泸州医学院附属医院手术切除标本，临床病历资料来源于附院信息科，资料以信访、电话或门诊随访方式获得。p53蛋白和PCNA的检测采用SABC法免疫组化染色。结果①9l例胃癌组织中p53蛋白阳性率为62．6％，PCNA强阳性率为65、9％。②p53蛋白表达与肿瘤的大小无关，与浸润深度相关。③PCNA表达与胃癌的大小、浸润深度呈正相关。①p53蛋白、PCNA的表达与胃癌的淋巴结转移状况呈正相关。⑤p53蛋白、PCNA的表达与胃癌的分化程度、组织类型显著相关。⑥p53蛋白阳性的胃癌患者术后2年生存率明显低于p53蛋白阴性者?PCNA强阳性表达的胃癌患者术后2年、3年、5年生存率均明显低于PCNA弱阳性表达者。结论p53蛋白阳性、PCNA强阳性表达的胃癌患者预后不良，可用p53蛋白和PCNA作为胃癌预后判断的客观指标，而PCNA比p53蛋白更为敏感。     

细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中表达的预后价值

目的：研究细胞周期素E和增殖细胞核抗原在胃癌中的表达及与胃癌预后的关系。方法：采用免疫组化S-P法检到128例胃腺癌组织中cyclin E蛋白和PCNA的表达，分析其表达状况及生存率与临床、病理参数的相关性。结果：128例胃癌中57例cyclin E蛋白阳性表达(占44．5％)，PCNA LI≥50％者60例(占47％);cyclin E蛋白表达水平和PCNA LI均与肿瘤大小、浸润深度、淋巴结转移、脉管侵犯、运距离转移及TNM分期呈正相关(P＝0．001)，与肿瘤组织学分级无相关性(P＞0．05)。PCNA LI与cyclin E表达呈相关性(P＝0．001)。多因素分析PCNA与cyclin E蛋白表达水平分别是独立的预后指标。结论：PCNA和cyclin E的异常表达与胃癌生物学行为密切相关;cyclin E异常表达合并PCNA LI≥50％的胃癌患者手术后预后最差。     

抑癌基因对大肠肿瘤早期诊断及预后判断的价值

目的探讨抑癌基因与大肠肿瘤发生过程的关系，以及对大肠癌早期诊断及预后判断的价值。方法150例大肠肿瘤标本，其中腺癌50例，腺癌伴转移16例，腺瘤伴癌变24例，腺瘤伴异型增生28例、腺瘤32例，采用免疫组化SP法检测p53、p16、nm23和PCNA基因的表达情况。结果p53、p16、nm23、PCNA基因蛋白在大肠腺瘤、腺瘤伴异型增生、腺瘤癌变、腺癌、腺癌伴转移中的表达差异显著。结论p53和p16检测有助于大肠肿瘤早期诊断，nm23和PCNA为预后判断的重要指标。     

Cath-D、PCNA、nm23蛋白在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的研究组织蛋白酶D(Cath-D)、PCNA、nm23蛋白表达与宫颈鳞癌的分化、浸润及淋巴结转移的关系,并探讨Cath-D和PCNA、nm23蛋白表达的相互关系。方法应用免疫组织化学检测10例正常宫颈组织(NEC)、20例宫颈上皮内瘤变(CIN)、48例宫颈鳞癌组织(ICC)中Cath-D、PCNA、nm23蛋白的表达。结果在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为Cath-D 83.33%、PCNA79.19%、nm23蛋白77.08%,阳性表达率及表达强度与宫颈鳞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和预后有关,Cath-D与PCNA及nm23蛋白表达呈正相关。结论在宫颈鳞癌的分化、侵袭性生长及转移过程中,癌细胞中的Cath-D扮演了一个重要角色,而且在肿瘤细胞中Cath-D与PCNA、nm23蛋白可同时过高表达,具有相互协同作用可能,是宫颈鳞癌高度恶性和预后不良的重要生物学指标。     

环指蛋白44基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的调节作用及机制

目的 探讨环指蛋白44(RNF44)基因表达对胃癌细胞增殖和凋亡的调节作用及机制。方法 检测胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞RNF44的基因和蛋白表达;胃癌MKN45细胞株和AGS细胞株分别转染shRNF44病毒和oeRNF44病毒,测定RNF44的基因和蛋白的表达、细胞增殖和细胞凋亡情况、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白表达情况;测定AKT通路抑制剂LY294002对RNF44基因过表达AGS细胞株增殖、凋亡和AKT信号蛋白的影响;采用MKN45细胞株构建裸鼠皮下瘤模型,观察肿瘤生长情况、肿瘤组织Ki-67表达情况以及AKT和p-AKT蛋白表达情况。结果 正常胃黏膜GES-1细胞RNF44的基因和蛋白表达水平最低,胃癌MKN45细胞株RNF44的基因和蛋白表达水平最高。MKN45细胞株经RNF44基因干扰慢病毒转染后,RNF44的基因和蛋白表达水平降低,细胞增殖能力降低,早期和晚期凋亡率均增加,RNF44和p-AKT蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。AGS细胞株经RNF44基因过表达慢病毒转染后,RNF44的基因和蛋白表达水平升高,细胞增...     

葡萄糖神经酰胺合酶与白血病细胞耐药的关系

本研究旨在观察葡萄糖神经酰胺合酶（glucosylceramide synthase，GCS）基因及其蛋白在人白血病细胞的表达及其与肿瘤多药耐药的关系。首先以β—actin基因为内参照物，采用RT—PCR方法分析了53例耐药／非耐药白血病患者外周血标本，并对药物敏感的HL-60细胞株和对阿霉素耐药的HL-60／ADR细胞株中GCS基因的表达水平进行检测，同时与多药耐药基因（mdr1）的表达进行比较。继而采用Western blot法分析HL-60细胞株及HL-60／ADR细胞株中GCS蛋白及P-gP蛋白的表达情况。结果表明：白血病患者耐药组临床标本中的GCS基因扩增条带光密度相对比值明显高于非耐药组（P〈0．05），且GCS基因扩增条带光密度值显著增强时往往伴有mdr1基因的高表达，两者呈正相关（P〈0．01、r=0．6）。HL-60／ADR细胞株GCSmRNA及蛋白均过度表达，且明显高于HL-60细胞株，与此同时，HL-60／ADR细胞株的mdr1mRNA和P-gP的表达亦显著增高。结论：GCS可能在白血病多药耐药中起着重要作用。     

Cath—D、PCNA、nm23蛋白在宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的研究组织蛋白酶D（Cath-D）、PCNA、nm23蛋白表达与宫颈鳞癌的分化、浸润及淋巴结转移的关系,并探讨Cath-D和PCNA、nm23蛋白表达的相互关系。方法应用免疫组织化学检测10例正常宫颈组织（NEC）、20例宫颈上皮内瘤变（CIN）、48例宫颈鳞癌组织（ICC）中Cath-D、PCNA、nm23蛋白的表达。结果在宫颈鳞癌组织中的阳性表达率分别为Cath-D83．33％、PCNA79．19％、nm23蛋白77．08％,阳性表达率及表达强度与宫颈鳞癌的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和预后有关,Cath-D与PCNA及nm23蛋白表达呈正相关。结论在宫颈鳞癌的分化、侵袭性生长及转移过程中。癌细胞中的Cath-D扮演了一个重要角色,而且在肿瘤细胞中Cath-D与PcNA、rim23蛋白可同时过高表达,具有相互协同作用可能,是宫颈鳞癌高度恶性和预后不良的重要生物学指标。     

P53、c-erbB - 2、Rb和PCNA的表达在胃癌起源中的意义

目的：检测针对胃癌基因蛋白产物（p63、c-erbB-2和Rb)和核增殖抗原（PCNA）的抗体，以间接了解不同基因蛋白产物的变化在胃癌起源过程中所处的不同阶段。方法：对15例正常黏膜，16例轻度肠化生、15例中度肠化生、13例重度肠化生和14例胃癌组织标本连续切片同步进行免疫组化ABC法染色。结果：4种蛋白产物过度表达均主要见于胃癌组织。p53基因蛋白产物的阳性率除重度肠化生组外非胃癌各组与胃癌组之间差别均有统计学意义（P＜0．05）。c-erbB-2基因蛋白产物的阳性率在非胃癌各组与胃癌组之间均有显著差别（P＜0．01）。PCNA免疫组化标记指数值在非胃癌各组与胃癌组之间差别显著（P＜0．05）。Rb基因蛋白产物的表达在非胃癌各组和胃癌组织间无明显差别（P＞0．05）。结论：p53蛋白可在胃癌的早期诊断中起作用，其改变在胃癌发生的早期即居于肠化生阶段的癌前变化过程中。c-erbB-2蛋白可用作胃癌肿瘤诊断的标记物，其改变在胃癌的起源过程中属一晚期变化，居于癌前变化的肠化生阶段之后。PCNA的变化在胃癌的起源过程中属一晚期改变，发生在胃癌前变化的肠化生阶段以后。Rb基因在胃癌起源中作用有限。     

紫杉醇对胃癌细胞株SGC7901的杀伤作用及机制分析

目的探讨紫杉醇作用人胃癌细胞株SGC7901后,对细胞的杀伤作用和杀伤机制。方法通过MTT观察不同浓度紫杉醇对SGC7901细胞凋亡的影响,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化的方法检测bax和c-myc基因的表达情况。结果紫杉醇诱导胃癌细胞株的凋亡增加,其中凋亡基因bax的表达增高,bax的蛋白表达也增高;而促进细胞无限增殖的c-myc基因表达降低,同时c-myc蛋白表达降低。结论紫杉醇对胃癌细胞株生长有明显的抑制作用,紫杉醇通过bax和c-myc基因的表达变化诱导胃癌细胞株的凋亡。     

CD44V6和nm23-H1在胃癌中的表达及预后价值

目的：探讨CD44V6和nm23-H1在胃癌的浸润、淋巴结转移过程中的作用机理和在预后方面的价值。方法：用免疫组织化学LSAB方法，检测CD44V6和nm23-H1蛋白在65例胃癌中的表达情况。结果：CD44V6的阳性表达率随胃癌浸润的加深而升高，与淋巴结转移和TNM分期呈正相关，CD44V6阳性者术后3年生存率低于阴性者（P〈0．05）。nm23-H1的表达与胃癌的浸润、淋巴结转移和TNM分期呈负相关，与预后呈正相关。结论：CD44V6和nm23-H1的表达与胃癌的发生、发展和预后等密切相关，可作为判断胃癌预后的指标。