锌对应激大鼠海马金属硫蛋白亚型表达的调控作用及机制研究

目的　观察不同锌摄入水平对应激大鼠海马脑区不同金属硫蛋白亚型表达的影响。方法　将Wistar雄性大鼠随机分为 8组 :正常对照组、对喂组、缺锌组和补锌组及其相应的应激组 ,分别给予正常饲料、缺锌饲料和补锌饲料 ,以缺锌动物当日的饲料摄入量作为对喂动物次日的给料量。动物喂饲 1周后开始束缚应激 ,持续 4周。以血红蛋白镉饱和法测定脑组织金属硫蛋白含量 ,分离海马提取总RNA ,以RT PCR检测金属硫蛋白亚型MT -1mRNA和MT -3mRNA。结果　缺锌动物出现血锌含量明显降低 ,脑组织金属硫蛋白含量和海马金属硫蛋白mRNA的表达均出现降低 ,但其表达在缺锌应激组动物仍有明显升高 ;而补锌动物金属硫蛋白的表达有所增加 ,补锌应激组动物的表达增加更加明显。缺锌和缺锌应激组动物的血浆皮质醇、IL -1、IL- 6和NO水平也较其它组显著升高。结论　缺锌可降低动物脑和海马组织中金属硫蛋白的表达 ,但缺锌动物在接受应激刺激后 ,金属硫蛋白的表达仍可明显增加 ;而补锌可增加金属硫蛋白的表达 ,补锌应激使脑组织中金属硫蛋白的表达升高更为显著 ;应激对动物的损伤作用与其锌营养状况有关 ,缺锌可降低机体对应激的抵抗能力。     

应激对大鼠海马金属硫蛋白亚型表达的影响

目的 :　观察应激对大鼠海马脑区金属硫蛋白亚型表达的影响。方法 :　以束缚为应激原建立心理应激动物模型。将动物随机分为四组 :正常对照组 (Ctr)、束缚 1 w组 (R1 )、束缚 2w组 (R2 )和束缚 4w组 (R4)。取动物脑和肝脏以镉饱和法测定金属硫蛋白含量 ,取海马组织提取总 RNA,以 RT- PCR检测金属硫蛋白亚型 MT- 1 m RNA和 MT- 3m RNA,并取血测定血浆皮质醇和 IL- 6水平。结果 :　束缚应激后 ,大鼠体重增长明显减慢 ,血浆皮质醇、IL- 6水平显著高于Ctr组 ;海马脑区两种亚型金属硫蛋白 m RNA的表达水平升高 ,脑和肝脏金属硫蛋白含量也明显增加。结论 :　束缚应激可影响海马金属硫蛋白的表达 ,使其在蛋白质水平和 m RNA水平均出现明显升高 ,其可能机制是 ,在应激条件下皮质醇和 IL- 6等因子的上调对这种应激蛋白的表达发挥了诱导作用     

金属硫蛋白与应激

金属硫蛋白是一类低分子量、富含半胱氨酸的金属结合蛋白。它与应激及应激性疾病关系密切。本文从生理因素、创伤与感染、心理因素、化学因素等四个方面综述了各类应激对金属硫蛋白的诱导；并论述了金属硫蛋白对应激的保护作用及其要机理的研究近况。     

锌对小鼠肝金属硫蛋白合成的影响

本文研究了小鼠在宽的剂量范用内（１０，２０，４０，８０，１００，１２０，１４０，１６０，１８０，２００ｍｇ／ｋｇｂｗ）口服锌（Ｚｎ）盐时，对肝金属硫蛋白（ＭＴ）合成的影响。结果显示：因服用过量Ｚｎ（２＋），按剂量──效应关系发生肝ＭＴ的诱导合成，而且在肝Ｚｎ浓度和肝ＭＴ浓度之间存在正向关系。表明Ｚｎ是一个ＭＴ的诱导剂。在口服Ｚｎ８０～１００ｍｇ／ｋｇ的剂量范围时，无论是肝ＭＴ水平或肝Ｚｎ水平均有明显的改变。提示：在Ｚｎ诱导ＭＴ合成中，存在一个敏感的剂量范围。     

锌营养对大鼠应激反应及金属硫蛋白的影响

目的：在心理应激条件下，观察大鼠组织中金属硫蛋白（MT）水平的变化及其与锌营养状况的关系。方法：60只雄性Wistar大鼠随机分为6组：缺锌组（ZD）、喂对组（PF）、对照组（CT），以及相应的3个应激组（SZ、SP、SC）。以光－电刺激方法建立心理应激动物模型，观察应激对皮质醇激素、锌和金属硫蛋白的影响。结果：应激诱导动物脑和肝脏MT含量增加，而血浆锌出现不同程度下降。缺锌动物血锌浓度降低，肝脏和脑中金属硫蛋白的含量减少，而其整体应激反应强度增加。结论：维持良好的锌营养状况有助于诱导整体和脑组织产生应激蛋白，并提高机体对心理应激的适应能力。     

脑金属硫蛋白基因的表达调控及锌的影响

近年国外对脑金属硫蛋白（ＭｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎＭＴ）基因的表达与调控进行了许多研究，尤其发现微量元素锌（Ｚｎ）在脑ＭＴ表达和调控的过程中发挥重要作用。本文将其研究进展综述如下。     

锌金属硫蛋白抗甲基汞对细胞膜构象的影响

锌金属硫蛋白抗甲基汞对细胞膜构象的影响白求恩医科大学预防医学院（长春１３００２１）徐乐焱邱炳源袁兰河北省秦皇岛市卫生防疫站王振金属硫蛋白（Ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）是一类富含金属与巯基的小分子蛋白质，广泛存在于各种生物体内。ＭＴ在重金属解毒...     

镉、锌与金属硫蛋白抗体对金属硫蛋白的竞争结合

[目的]通过镉、锌与金属硫蛋白抗体（MT-Ab）对金属硫蛋白（MT）的竞争结合,探讨MT-Ab在镉致肾损伤过程中的作用机制。[方法]根据不同的实验处理分组,每组包含0、5、10、20、40mg／mL 5个不同实验浓度亚组。采用竞争ELISA法,按波长490nm处的光密度值判断竞争结合的程度。[结果]实验所用包被MT质量浓度为1μg／mL,MT-Ab浓度为32U。随着实验镉、锌离子浓度增加,光密度值下降。[结论]镉、锌与MT-Ab对MT的结合存在着竞争作用,MT-Ab可使CdMT解离产生游离镉离子,从而导致肾损伤效应。     

金属硫蛋白在大鼠成骨细胞对高锌和低锌耐受中的作用

实验旨在研究金属硫蛋白 (MT)在大鼠成骨细胞对高锌和锌缺乏的耐受中的作用。采用反义 MT寡核苷酸造成大鼠成骨细胞 MT低表达 ,采用银 /血红素饱和法测定细胞 MT含量 ,以受损细胞所释放乳酸脱氢酶的活性表示细胞毒性。结果显示 :反义 MT寡核苷酸显著降低成骨细胞对高剂量锌以及锌缺乏的耐受性 ,使细胞毒性增加 ,表明 MT在维系成骨细胞锌稳态以及对抗高剂量锌和锌缺乏的毒性中具有重要调节作用。     

锌诱导金属硫蛋白体内合成的实验研究

对孕兔皮下注射氯化锌溶液，探讨了不同浓度的氯化锌对孕兔肝脏和胚胎金属硫蛋白（ＭＴ）合成的影响。实验结果表明，低剂量的氯化锌２ｍｇ／ｄ（每公斤体重），能诱导兔肝内金属硫蛋白的合成增多，当每天给孕兔注射氯化锌２０ｍｇ／ｄ（每公斤体重）时，兔肝脏金属硫蛋白的合成可高出对照组８．３倍，胚胎内金属硫蛋白水平也有明显的升高，提示母体锌水平不但影响自身肝脏金属硫蛋白的合成，而且可影响胚胎金属硫蛋白的水平。     

心理应激时大鼠海马神经元的钙状态变化及锌的作用研究

目的 :　研究不同锌营养水平的大鼠在应激条件下的行为变化 ,观察海马细胞内游离钙 ([Ca2 + ]i)及活性钙调素 (Ca M)水平改变 ,以探讨其可能机制。方法 :　大鼠按体重随机分为缺锌组 (ZD)、缺锌应激组 (SZD) ,对喂组 (PF)、对喂应激组 (SPF) ,对照组 (CT)、对照应激组(SCT)。实验进行 1 w后 ,各应激组大鼠接受不规则光 -电刺激 ,2 5 min/ d连续 1 5 d后进行行为测定 ;分别用 Fura-2 / AM双波长荧光法和流式细胞术测定动物海马细胞 [Ca2 + ]i和活性 Ca M水平。结果 :　单纯缺锌大鼠在旷场中的中央格停留时间延长 ,修饰次数减少 ,海马细胞静息 [Ca2 + ]i浓度升高而 Ca M水平下降 ;与相应非应激组比较 ,各应激组大鼠在旷场中的水平和垂直运动减少 ,海马细胞 [Ca2 + ]i含量升高 ,以缺锌应激组最为明显 ;活性钙调素水平则呈相反变化。结论 :　光电应激导致实验大鼠在旷场中行为异常 ,并因机体缺锌而加重 ;推测海马细胞内 Ca2 + -Ca M体系的变化可能是其机制之一     

锌对幼鼠脑发育的影响

本文用配伍比较的方法研究锌对幼鼠脑发育的影响及其作用机制。本实验用低锌饲料复制了缺锌的幼鼠动物模型，并对此进行了迷官学习能力的测定、大鼠脑内ＤＮＡ、ＲＮＡ浓度和游离氨基酸水平的检测以及脑部超微结构的观察。结果表明，缺锌影响大鼠的脑发育，学习能力下降。这些变化可能与脑内ＤＮＡ、ＲＮＡ合成减少，游离氨基酸水平的变化有关。补充锌剂后，缺锌大鼠生长加速，脑内ＤＮＡ、ＲＮＡ浓度及游离氨基酸水平可恢复正常，同时，其学习能力也恢复正常。提示锌对脑发育及其功能有重要作用。在脑发育的关键时期，避免缺锌具有重要的实际意义。     

锌对热应激大鼠免疫力与白细胞凋亡的影响

为探讨高温所致免疫功能改变机制，本研究通过不同水平锌对热应激大鼠免疫学指标白细胞介素２（ＩＬ－２）和血液白细胞（ＷＢＣ）凋亡的影响进行了研究。结果表明：适当补锌可以促进脾脏淋巴细胞ＩＬ－２的生成，而低锌则使其生成减少；适当补锌可以防止血液ＷＢＣ凋亡，而低锌则可促进ＷＢＣ凋亡。结论：锌对ＷＢＣ凋亡的影响可能是高温影响机体免疫功能的重要机制之一。     

缺锌和补锌对运动大鼠锌营养状况的影响

通过建立大鼠缺锌模型，观察缺锌及补锌对游泳大鼠血清、肝脏锌含量和五种含锌金属酶活性的影响。结果表明：（１）血浆锌浓度和碱性磷酸酶（ＡＫＰ）活性是评价机体锌缺乏的灵敏指标；（２）血浆ＡＫＰ活性同时也是评价运动大鼠锌缺乏的较好指标，而血管紧张素Ｉ转换酶、酸性α－Ｄ－甘露糖苷酶５－核苷酸酶等不太理想；（３）运动时，缺锌大鼠血浆锌金属酶活性多数变化剧烈，表明机体内环境遭受较大破坏。而补锌后上述指标均接近正常水平，说明适量补锌有助于改善机体缺锌状况，维持机体内环境的稳定     

缺锌和补锌对大鼠血清锌、铜及血脂水平影响的研究

健康雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠４５只，先进行２５天锌缺乏实验，继之２１只大鼠再进行１５天锌补充实验。结果显示，缺锌可致大鼠血清总胆固醇（ＴＣ）及低密度脂蛋白胆固醇（ＬＤＬ－Ｃ）含量增高，而血清锌（Ｚｎ）、高密度脂蛋白胆固醇（ＨＤＬ－Ｃ）及其亚组分ＨＤＬ２－Ｃ含量明显下降，并且血清Ｚｎ含量与上述各指标均呈很好的剂量反应关系。适量补锌（１２ｍｇ／ｋｇ和３０ｍｇ／ｋｇ）均可使大鼠的各项指标完全恢复，而大剂量补锌（２５０ｍｇ／ｋｇ）则使ＨＤＬ－Ｃ及ＨＤＬ２－Ｃ有延迟恢复的趋向。血清铜（Ｃｕ）含量始终无明显改变。提示，膳食锌含量缺乏可致血脂代谢紊乱，而大剂量补锌又可使血脂恢复延迟，因此，膳食中Ｚｎ含量应有适当的剂量范围。     

中毒剂量锌对大鼠小肠粘膜超微结构的影响

目的：阐明中毒剂量锌对肠粘膜免疫屏障结构的影响及其机理。方法：通过建立常锌（ＺＮ）、中毒剂量锌（ＺＰ）大鼠模型,应用病理形态学手段（电镜）对大鼠肠道粘膜的超微结构进行研究。结果：第４周末和第７周末血浆、红细胞膜和肠组织的锌含量ＺＰ组明显高于ＺＮ组（Ｐ＜０．０５）。第四周末和第七周末ＺＰ组光镜下肠粘膜未见异常改变;但是电镜下见肠道粘膜超微结构的严重损害。结论：中毒剂量锌可以引起肠道粘膜超微结构的严重损害;屏障功能削弱,大鼠小肠粘膜的免疫防御能力降低。     

蛋白质与锌不同摄入水平对大鼠锌吸收与存留影响的研究

WAK纯品系断奶雄大鼠30只,随机分为6组。喂纯合成饲料。第1、2、3组饲料含锌分别为6、15和24ppm,含蛋白质均为10％。第4、5、6组饲料含蛋白质分别为5％、10％和20％,含锌量均为15ppm。喂养50天后按体重每100g灌胃~(65)Zn 1.5μCi,即日起连续收集5天粪尿,用~(65)Zn示踪法测定各组动物锌吸收与存留情况。结果表明:低锌组大鼠锌吸收率与存留率显著增高;低蛋白组大鼠锌吸收率与存留率显著降低,提高蛋白质摄入水平可明显改善锌的吸收与存留;大鼠尿锌排出率很低,作为研究锌代谢指标的意义不大。本文并对锌吸收与存留的测定方法进行了讨论。     

锌缺乏对生长期雄性大鼠海马泛素C末端水解酶L1表达的影响

[目的]观察缺锌对生长期大鼠海马泛素C末端水解酶L1(UCH-L1)表达的影响。[方法]将SD大鼠随机分为正常组、缺锌配喂组和缺锌组,正常组喂饲常锌饲料(32.5mg/kg),缺锌配喂组喂饲高锌饲料(73.5mg/kg),缺锌组喂饲缺锌饲料(1.2mg/kg)。饲养4周后处死动物,取海马组织,RT-PCR法检测UCH-L1mRNA的表达水平,Westernblot法检测UCH-L1蛋白的表达水平。[结果]与正常组和缺锌配喂组比较,缺锌大鼠海马中UCH-L1mRNA和蛋白的表达水平均显著下调。[结论]缺锌大鼠海马UCH-L1的表达异常,可能是缺锌导致认知损伤的重要机制之一。     

抗性淀粉对大鼠锌营养状况的影响

目的 :　研究抗性淀粉 ( RS)对大鼠锌营养状况的影响。方法 :　 ( 1 )正常大鼠锌代谢 :3组 Wistar大鼠分别用基础饲料 (对照组 )、含有 1 3%或 2 6% RS的饲料喂养 1 8d,收集尿样、粪样 ,及血样 ,测定锌含量 ,计算锌表观吸收率。 ( 2 )高糖 ( 5 0 % )饮食大鼠锌营养状况 :3组 Wistar大鼠分别用基础饲料、高糖淀粉饲料 ( S- DS)及高糖抗性淀粉饲料 ( S- RS,含 1 4% RS)喂养 1 2 w。收集尿样 ,血样、肝脏、胰脏、肾脏等样品 ,测定锌含量。结果 :　 ( 1 )正常大鼠锌表观吸收率分别为 :对照组 5 6.5 9% ,1 3% RS组 5 0 .1 1 %及 2 6% RS组 5 4 .40 %。 ( 2 )高糖饲料使 S- DS组大鼠餐后血糖和糖化血红蛋白升高 ,空腹胰岛素水平降低 ;血锌和胰脏锌显著低于对照组 ( P<0 .0 5 )。 S- RS组血糖状态正常 ,尿锌排出低于 S- DS组 ,红细胞锌高于 S- DS组 ,且肾锌增高 ( P<0 .0 5 )。结论 :　 RS不影响正常大鼠锌表观吸收率 ,却可通过调节血糖维持高糖饮食大鼠锌营养状况。     

心理应激对大鼠叶酸和同型半胱氨酸的影响及补充叶酸的调节作用

目的明确应激状态下机体血浆和脑脊液中同型半胱氨酸(Hcy)浓度及组织叶酸含量的变化,探讨叶酸在应激状态下对Hcy水平的调节作用。方法以束缚作为应激原建立大鼠心理应激模型,动物分为对照组、束缚3w组,束缚3w同时补充叶酸组。认识心理应激对机体Hcy和叶酸水平的影响,及应激状态下补充叶酸对机体Hcy水平的调节作用。结果心理应激动物叶酸代谢发生了显著的变化,血浆叶酸水平显著低于对照组,小肠粘膜上皮、肝脏、皮层和海马组织中叶酸的含量也明显降低。补充叶酸可以显著升高心理应激后机体的叶酸水平,降低心理应激所致的血浆同型半胱氨酸水平升高。结论应激状态下机体叶酸含量的降低可能是同型半胱氨酸水平升高的重要原因之一。