姜黄素对哮喘小鼠Nrf2及HO-1的含量变化与表达的影响

目的 了解姜黄素对哮喘小鼠核因子相关因子2(nuclear factorerythroid-2-related factor 2,Nrf2)及血红素氧化合酶(HO-1)的含量变化与表达的影响.方法 将45只Balb/c小鼠随机分为正常对照组、哮喘组及姜黄素干预哮喘小鼠.应用免疫荧光检测各组小鼠肺组织Nrf2及HO-1的表达;应用Western blot方法检测各组小鼠肺组织Nrf2及HO-1的蛋白含量;应用EMSA方法测定各组小鼠肺组织Nrf2与ARE的结合活力.结果 免疫荧光检测显示姜黄素干预组肺组织较哮喘组及正常对照组Nrf2及HO-1的表达均增高;各组小鼠肺组织胞浆内Nrf2的蛋白含量无明显差异(P＞0.05),姜黄素干预组肺组织胞核内Nrf2及HO-1蛋白含量较其余两组明显增高,差异有统计学意义(Nrf2,P＜0.05;HO-1,P＜0.01).姜黄素干预组小鼠肺组织Nrf2-ARE的结合活力明显高于哮喘组及对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 姜黄素可以增加哮喘小鼠体内Nrf2及HO-1的蛋白含量,减轻哮喘.     

黄芩苷预处理对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠的神经保护作用及机制

目的 探讨黄芩苷(BAC)预处理对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠神经元凋亡及核因子(NF)-κB P65蛋白和mRNA表达的影响,探讨神经元凋亡的调节机制.方法 健康Wistar大鼠随机分为对照组、EAE组、地塞米松(DXM)组、BAC组.各组于EAE模型制作当日分别给予预处理,每日1次,共7 d.观察各组发病率,记录神经功能评分.分别于第7、14、21天处死大鼠,留取脊髓行NF-κB P65免疫组化染色,TUNEL法检测神经元凋亡,提取总RNA检测NF-κB P65 mRNA的表达.结果 (1)对照组大鼠无发病,DXM组和BAC组发病率分别为56.25%、50.00%,较EAE组(87.50%)明显降低,差异有非常显著性(P＜0.01).DXM组、BAC组神经功能评分分别为1.56±0.34、1.46±0.20,与EAE组(2.78±0.31)相比明显降低,差异有非常显著性(P＜0.01).(2)对照组各时间点凋亡神经元少见,EAE组3个时间点神经元凋亡指数(AI)分别为23.25±1.82、63.00±4.66和31.50±3.63,DXM组为16.75±1.28、33.88±1.46及22.00±2.45,BAC组为15.25±1.67、34.25±3.28及21.88±3.09,差异有非常显著性(P＜0.01).(3)对照组偶见NF-κB P65阳性神经元.在3个时间点,EAE组、DXM组和BAC组脊髓内神经元NF-κB P65阳性率均较EAE组明显减低,差异有显著性(P＜0.05).(4)在3个时间点,对照组脊髓内NF-κB P65 mRNA灰度比值变化不明显.DXM组和BAC组脊髓内神经元NF-κB P65 mRNA灰度比值均较EAE组明显下降,差异均有非常显著性(P＜0.01).结论 BAC预处理能明显抑制大鼠脊髓内NF-κB P65的活化,减少神经元的凋亡,起到神经保护作用.     

谷氨酰胺对肠组织 NF-κB 及 TNF-α 的调节与肠损伤保护作用的关系

目的：本研究旨在探讨谷氨酰胺对肠损伤的保护作用是否与调节肠组织核因子-κB（NF-κB）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的分泌有关。方法：24 只日龄 10 d 的 Wistar 幼鼠随机分为正常对照组,内毒素血症组和谷氨酰胺组（n=8）。正常对照组采用生理盐水1 mL/kg腹腔注射;内毒素血症组给予LPS 5 mg/kg 腹腔注射;谷氨酰胺组给予力肽10 mL/kg＋LPS 5 mg/kg腹腔注射。于腹腔注射后3 h处死幼鼠,留取远端回肠组织。行苏木精-伊红染色,光镜下观察肠组织病理改变,RT-PCR 检测肠组织 NF-κB mRNA 的表达,Western blot 检测肠组织 NF-κB 蛋白表达,ELISA法检测肠组织匀浆 TNF-α 的含量。结果：光镜下对照组肠组织结构正常,谷氨酰胺组和内毒素血症组均可见间质和上皮细胞水肿,谷氨酰胺组较内毒素血症组明显减轻;谷氨酰胺组肠组织 NF-κB mRNA 和NF-κB蛋白表达均较内毒素血症组明显下降（均P＜0.01）;谷氨酰胺组肠组织TNF-α分泌较内毒素血症组明显减少（P＜0.01）。结论：谷氨酰胺减轻肠组织损伤的保护作用可能与其下调NF-κB mRNA和蛋白的表达,并降低炎症介质TNF-α的分泌相关。     

铜负荷大鼠肝脏脂质过氧化和凋亡损伤及姜黄素的保护作用

目的观察铜负荷大鼠肝脏脂质过氧化损伤和凋亡的变化,探讨姜黄素对铜负荷大鼠肝脏的保护作用及其机制。方法建立铜负荷大鼠模型,应用姜黄素进行干预,分别检测干预前后肝组织匀浆的丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力以及谷胱甘肽（GSH）含量,观察肝脏脂质过氧化损伤;电镜和原位末端脱氧核糖核苷酸转移酶分析法（TUNEL）观察大鼠肝脏凋亡改变;RT—PCR检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子（TNF-α）mRNA和白介素8（IL-8）mRNA的表达;酶联免疫吸附法检测肝组织匀浆TNF-α和IL-8含量。结果铜负荷组MDA值升高,SOD及GSH值下降,凋亡指数从（2．2±1．2）％上升到（16．7±2．5）％,TNF-α和IL-8 mRNA的表达及蛋白含量高于正常组,与正常组相比差异均有统计学意义（P〈0．01）。姜黄素组MDA值低于铜负荷组,SOD及GSH值高于铜负荷组,凋亡指数从（16．7±2．5）％下降到（10．4±1．2）％,姜黄素组TNF-α和IL-8 mRNA的表达及蛋白含量均低于铜负荷组,与铜负荷组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。电镜结果显示,姜黄素组大鼠肝脏线粒体肿胀、内质网扩张、溶酶体颗粒增多等改变轻于铜负荷组。结论过多的铜促进肝脏脂质过氧化损伤和诱导肝脏凋亡的发生,TNF-α和IL-8参与铜对肝脏的损伤过程。姜黄素对铜负荷肝损伤有保护作用。     

胰岛素样生长因子-1对新生大鼠神经细胞氧化损伤保护作用的研究

目的 探讨氧化应激状态下,胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对新生大鼠神经细胞氧化损伤的保护作用。方法 原代培养新生大鼠大脑皮层神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞,不同浓度H2O2（0~60 μM）诱导氧化应激细胞模型,LDH 法检测各种神经细胞损伤程度,MTT 法检测各种神经细胞活力;不同浓度H2O2（0~80 μM）诱导氧化应激神经元细胞模型,Western blot 检测IGF-1（25 ng/mL）施加前后神经元细胞内Akt 的磷酸化水平。结果 与未经H2O2 处理组相比,不同浓度H2O2 处理细胞24 h 后,大脑皮层神经元、少突胶质细胞及星形胶质细胞损伤程度均有升高、细胞活力均有降低;但神经元变化更为显著,与少突胶质细胞和星形胶质细胞相比,差异有统计学意义（均P2O2 处理大脑皮层神经元5 min 后,相比于未经H2O2 处理组,可见Akt 磷酸化水平呈H2O2 浓度依赖性降低（均P2O2 导致的神经元细胞Akt 磷酸化,与未经H2O2 处理组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,但是对高浓度H2O2 导致的Akt 磷酸化作用无明显效果,其磷酸化水平均低于未经H2O2 处理组（均P2O2 处理1 h 后,再加入25 ng/mL 的IGF-1,IGF-1 处理前后Akt 磷酸化水平均已恢复至未经H2O2 处理时的水平（均P>0.05）。结论 大脑皮层神经元对H2O2 诱导的氧化应激损伤较其他神经细胞敏感;IGF-1 对皮层神经元氧化应激损伤具有保护作用。     

Salubrinal抑制脂多糖诱导H9C2心肌细胞凋亡的保护机制

目的 研究脓毒症中内质网应激诱导心肌细胞凋亡的机制.方法 建立脂多糖(lipopolysacchride,LPS)H9C2心肌细胞脓毒症模型.通过实时定量聚合酶链反应(RTq-PCR)和流式细胞技术分别观察LPS干预H9C2心肌细胞24 h后的促凋亡蛋白CHOP mRNA、线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和细胞凋亡的变化.使用内质网应激抑制剂Salubrinal预处理H9C2心肌细胞,观察以上指标变化.结果 LPS组CHOP mRNA表达(2.40±0.30)与对照组比较(1.00±0)显著上调(P＜0.05),LPS组MMP(1.07 ±0.33)与对照组(2.62±0.51)比较显著下降(P＜0.05),LPS组细胞凋亡率[(16.58±2.71)％]与对照组[(3.85±1.07)％]比较显著上升(P＜0.05).Salubrinal+ LPS组CHOP mRNA表达(1.60±0.23)与LPS组(2.40±0.30)比较显著下调(P＜0.05),Salubrinal+ LPS组MMP(1.85 ±0.31)与LPS组比较,显著上调(P＜0.05);Salubrinal+ LPS组细胞凋亡率[(6.05±1.48)％]与LPS组比较,显著下调(P＜0.05).结论 在H9C2心肌细胞脓毒症模型中,Salubrinal通过抑制LPS诱导CHOP mRNA的表达,减轻线粒体的损伤,从而降低心肌细胞凋亡率.脓毒症心肌细胞中内质网应激可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡.     

血红素加氧酶-1抗人血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞(HUVEC)并表达,研究血红素加氧酶_1(HO_1)保护细胞凋亡的作用。方法将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达。用CCLR破碎细胞后,SDS_PAGE鉴定表达量,采用TNF_α诱导细胞凋亡,以流式细胞仪测定细胞的凋亡率;采用Hemin和SnPP分别刺激细胞,促进和抑制HO_1在细胞中的表达。结果经Hemin处理后细胞的凋亡率均在20%以下,而SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升,最高可达到95%以上。实验数据显示HO_1基因表达被抑制时细胞凋亡率是诱导时的5~20倍。结论细胞凋亡率与质粒转染效率和HO_1表达量均成反比,提示HO_1对细胞有保护作用,可以抑制细胞凋亡,在临床具有广泛的应用前景。     

丙酮酸乙酯对内毒素致幼鼠感染性脑损伤的保护作用

目的探讨内毒素（LPS）致幼鼠感染性脑损伤模型的建立及丙酮酸乙酯（EP）对LPS所致幼鼠感染性脑损伤的保护作用及其可能机制。方法240只1月龄健康大鼠,随机分为9g/L盐水对照组（NS组）、LPS诱导脑损伤组（LPS组）、EP干预组（EP组）。LPS组颈外动脉注射LPS（1mg/kg）建立感染性脑损伤模型,NS组仅给予同量9g/L盐水;EP组在给予LPS的同时通过腹腔注射一次性给予EP（40mg/kg）。感染性脑损伤模型建立成功后,取各组脑组织标本,采用甲酰胺法检测其脑组织伊文思蓝（EB）水平,免疫组织化学技术检测其脑组织神经元特异性烯醇化酶（NSE）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、核转录因子（NF-κB）蛋白水平,并观察各组不同时间点脑组织形态及病理变化。结果与NS组比较,LPS组脑组织EB、NSE、GFAP、NF-κB蛋白的表达水平均于6h开始增加,24h达高峰,48h及72h各指标仍高于NS组（Pa〈0.05）,LPS病理改变显示胶质细胞肿胀、血管周围间隙增宽、炎性细胞浸润、神经元肿胀、细胞核固缩、空泡变性坏死等明显脑损伤。EP干预组脑组织EB水平、NSE、GFAP、NF-κB蛋白的表达水平显著下调（Pa〈0.05）。结论EP可减轻LPS所致的幼鼠感染性脑损伤,其机制可能与EP抑制NF-κB的活性,进而减轻炎性反应有关。     

血红素加氧酶 -1抗人血管内皮细胞凋亡的实验研究

目的 转染pcDNA3HO1入人血管内皮细胞（HUVEC）并表达,研究血红素加氧酶-1（HO-1）保护细胞凋亡的作用。方法 将构建好的质粒用DOTAP包裹转入细胞中表达：用CCLR破碎细胞后,SDS-PAGE鉴定表达量,采用TNF-α诱导细胞凋亡,以流式细胞仪测定细胞的凋亡率;采用Hemin和SnPP,分别刺激细胞,促进和抑制HO-l在细胞中的表达。结果 经Hemin处理后细胞的凋亡率均在20％以下,而SnPP处理后细胞的凋亡率大幅上升,最高可达到95％以上。实验数据显示HO-1基因表达被抑制时细胞凋亡率是诱导时的5～20倍。结论 细胞凋亡率与质粒转染效率和HO-l表达量均成反比,提示HO-l对细胞有保护作用,可以抑制细胞凋亡,存临床具有广泛的应用前景。     

姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用及其机制研究

目的　观察姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用 ,并从预处理后的脑组织氧自由基、细胞因子含量及HSP70表达三方面探讨其可能的作用机制。方法　SD大鼠随机分为 5组 :(1)正常对照组 (NS组 ,n =9) ;(2 )感染性脑水肿组 (PB组 ,n =12 ) ;(3)溶剂对照组 (DMSO组 ,n =9) ;(4)热休克预处理组 (HS组 ,n =9) ;(5 )姜黄素预处理组 (CUR组 ,n =13)。制备感染性脑水肿模型。用干湿法测定脑含水量 ;原子光谱吸收法测定脑组织钠、钾含量 ;比色法测定脑组织匀浆上清MDA、SOD含量 ;ELISA测定TNF α、IL 1β含量及Western印迹方法研究HSP70的表达。 结果　脑含水量、脑组织钠离子含量、脑组织匀浆上清MDA含量及TNF α、IL 1β含量 :PB组比NS组增高 (P<0 0 1) ,HS组、CUR组低于PB组 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。SOD含量PB组低于NS组 (P <0 0 5 ) ,HS组、CUR组高于PB组 (P <0 0 5 )。Western印迹分析经图像处理仪扫描显示CUR组、HS组、PB组高于NS组及DMSO组 ,其中以CUR组最高 (P <0 0 1)。结论　姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿具有保护作用 ,姜黄素的保护作用可能与抗脂质过氧化、抑制细胞因子的过度产生、诱导或加强HSP70的表达这三方面均有关。     

银苓Ⅰ号对铅处理Vero细胞活力和氧化损伤的影响

目的研究中药复方银苓Ⅰ号对铅处理Vero细胞活力和氧化损伤的影响作用。方法通过细胞活力、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)测定,观察银苓Ⅰ号对铅处理Vero细胞活力和氧化损伤的影响。结果Vero细胞暴露在125μmol/L醋酸铅环境中时,细胞活力显著降低,细胞培养液中SOD活性下降、MDA量增加;用不同质量浓度银苓Ⅰ号干预后,细胞活力、细胞液SOD活力均升高,MDA量降低。结论银苓Ⅰ号对铅处理Vero细胞活力和细胞氧化损伤具有保护作用,且有一定剂量依赖关系。     

槲皮素对柔红霉素致大鼠心肌细胞损伤的保护作用

目的探讨槲皮素（QUE）对柔红霉素（DNR）诱导心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法体外分离培养心肌细胞，分为空白对照组、DNR组、DNR＋QUE组、QUE组；孵育24h，显微镜下观察心肌细胞形态，流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率．检测培养介质中乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果与DNR组比，DNR＋QUE组脱落细胞减少，细胞碎片减少，细胞凋亡率降低（P〈0．05），LDH和MDA含量降低（P〈0．05），SOD活性增高（P〈0．05），且有剂量效应关系。结论25～100μmol／L槲皮素能减轻柔红霉素对心肌细胞损伤，具有细胞保护作用，机制可能与其抗氧化作用有关。     

二氮嗪对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨二氮嗪对窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的保护作用.方法 以HK-2为研究对象,以200 mL/L新生儿窒息后血清作为攻击因素处理HK-2细胞.将HK-2细胞分为对照组、窒息组、二氮嗪组.对照组加入100 mL/L胎牛血清培养液;窒息组加入等量200 mL/L新生儿窒息后血清培养液;二氮嗪组将.二氮嗪加入等量200 mL/L新生儿窒息后血清培养液,使终浓度为100 μmol/L.倒置相差显微镜下观察HK-2细胞的形态学改变并照相,四甲基偶氮唑蓝比色法检测HK-2细胞活力,生物化学法检测细胞培养液LDH漏出率.结果 对照组细胞贴壁良好,呈铺路石样,为扁平的多角形,分裂相多,细胞排列紧密,连接成片,数量多.与对照组相比,窒息组细胞受损明显,形态改变,由典型的扁平多角形细胞变为不规则圆形或椭圆形,细胞间空隙加大,连接松散,细胞间可见较多细胞碎片;细胞活力下降,LDH漏出率增加(P<0.05).与窒息组相比,二氮嗪组细胞损伤状况明显得到改善,细胞生长状况明显好转,形态明显变好;细胞活力增加,LDH漏出率降低(P<0.05),但未恢复至对照组水平.结论 二氮嗪具有减轻窒息后血清诱导的HK-2损伤的作用.     

重组人促红细胞生成素对新生鼠慢性高氧肺损伤防治的作用

目的探讨重组人促红细胞生成素(rhEPO)对新生鼠慢性高氧肺损伤防治的机制。方法新生Waster大鼠生后随机分组Ⅰ空气对照组;Ⅱ空气 rhEPO组;Ⅲ高体积分数氧对照组;Ⅳ高体积分数氧 rhEPO组。Ⅲ、Ⅳ组暴露高体积分数氧中(FiO285%),Ⅱ、Ⅳ组于生后d0和d2予rhEPO注射液1200U/kg,背部皮下注射。在实验d14观察生存率、体质量、肺质量、肺组织病理改变、放射状肺泡计数(RAC),免疫组织化学法检测肺组织血管内皮标志-CD31及血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果Ⅳ组病理改变减轻,生存率提高,体质量、肺质量、RAC和肺微血管数目高于Ⅲ组[(25.88±2.59)vs(18.8±3.93)P<0.001;(0.37±0.07)vs(0.25±0.05)P<0.001;(7.37±0.93)vs(5.03±1.2)P<0.001;(4.1±1.3)vs(2.1±1.3)P<0.001],肺组织VEGF表达增加(P<0.001)。结论rhEPO对慢性高氧肺损伤有保护作用,机制可能与其保护并促进肺微血管形成并增加VEGF的表达有关。     

黄芪注射液对新生儿窒息后血清诱导人近曲肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的探讨黄芪注射液对新生儿窒息后血清攻击人近曲肾小管上皮细胞（HK-2）损伤模型的保护作用。方法以人HK-2为研究对象。实验共分为对照组、模型组和黄芪干预组。黄芪干预组设立5个质量浓度亚组，预处理24h。以200mL／L窒息血清作为攻击因素，观察不同质量浓度黄芪干预组间细胞形态学变化，LDH漏出率和细胞活力情况[四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）]。结果与对照组比较，模型组细胞形态发生改变，LDH漏出率增加、细胞活力降低，均具有显著性差异（Pa〈0．05）；与模型组比较，黄芪干预组细胞形态得到明显改善，LDH漏出率降低、细胞活力增加，均具有显著性差异（Pa〈0．05），5～40mg／L保护效应逐渐增加，40mg／L时保护效果最强，〉40mg／L时保护效应反而下降。结论黄芪注射液具有减轻窒息血清所致HK-2细胞损伤的作用。     

姜黄素对应激状态下大鼠胃溃疡的防治作用

目的 探讨姜黄素对应激状态下大鼠胃溃疡的防治作用及机制.方法 将40只雄性SD大鼠随机分为:正常对照组、溃疡模型组、姜黄素组、奥美拉唑组,每组10只.采用水浸-束缚方法建立大鼠胃溃疡模型,检测各组胃黏膜溃疡指数(UI)、胃液p11值和壁细胞H+,K+-ATP酶活性,观察其胃黏膜组织病理变化,采用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 与正常对照组比较,溃疡模型组UI(35.63±3.34)明显升高,胃液pH值(1.35±0.09)明显下降,壁细胞H+,K+-ATP酶活性(9.45±0.34)mmol/(g·h)明显升高(Pa<0.01),镜下可见胃黏膜出血坏死,溃疡形成.与溃疡模型组比较,姜黄素组UI(15.13±2.42)明显下降,胃液pH值(1.81±0.23)明显上升,壁细胞H+,K+-ATP酶活性(8.13±0.59)mmol/(g·h)明显下降(Pa<0.01),镜下胃黏膜损伤程度较轻,未见溃疡形成.姜黄素组与奥美拉唑组比较无显著差异(Pa>0.05).胃液pH值和壁细胞H+,K+-ATP酶活性水平呈明显负相关(r=-0.884 P<0.01).结论 姜黄素可有效地减轻大鼠胃溃疡模型的胃黏膜损伤,抑制壁细胞H+,K+-ATP酶活性,减少胃酸分泌,对胃溃疡有良好的防治作用.     

谷酰胺对高体积分数氧肺损伤新生大鼠的保护作用

目的探讨谷酰胺对新生大鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的保护作用。方法将足月2日龄新生SD大鼠24只随机均分为空气组、谷酰胺组和高氧组,每组8只。空气组新生大鼠不做处理,谷酰胺组新生大鼠实验前腹腔注射0.75 g·kg-1·d-1谷酰胺溶液,高氧组新生大鼠腹腔注射等容量9 g·L-1盐水,连续3 d;高氧组与谷酰胺组新生大鼠置于氧体积分数大于900 mL·L-1模型箱内,空气组新生大鼠置于同一室内常压空气中。分别于实验开始3 d、6 d比较各组新生大鼠体质量,于实验开始6 d无菌条件下处死新生大鼠,取肺组织,24 h后制成石蜡标本,观察病理改变及热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果 1.高氧组6 d存活率明显低于空气组(P<0.05);谷酰胺组6 d存活率与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。高氧下暴露3 d,3组体质量比较差异无统计学意义(P>0.05);高氧暴露6 d,高氧组体质量明显低于空气组(P<0.01),谷酰胺组体质量与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.高氧组肺水肿程度最严重,其肺湿质量/干质量值明显高于空气组(P<0.05);谷酰胺组肺湿质量/干质量值与空气组比较差异无统计学意义(P>0.05)。3.高氧暴露6 d,高氧组肺泡内有出血和大量渗出的炎性细胞、大量粉染的蛋白性液体,肺泡壁严重充血水肿;谷酰胺组肺泡内极少量红细胞渗出,肺泡腔内见粉染的水肿液,肺泡壁增厚。4.高氧暴露6 d,高氧组、谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量均较空气组显著增加(Pa<0.01),谷酰胺组肺组织HSP70蛋白表达量较高氧组显著增加(P<0.01)。结论预防性使用谷酰胺可明显改善高氧肺损伤新生大鼠的生存率,有利于新生大鼠的生长发育;预防性使用谷酰胺能增加高氧肺损伤新生大鼠肺组织HSP70的表达,表明谷酰胺对高氧肺损伤的保护作用与HSP70表达相关。     

褪黑素在脂多糖致幼鼠脑损伤中的保护作用

目的 探讨褪黑素(MT)在不同时间点对脂多糖(LPS)致幼鼠脑损伤中的保护作用及意义.方法 160只1月龄Spragne-Dawley幼鼠(100-120 g)随机分为4组:LPS组、对照组、MT提前15 min给药组(A组)和MTO h给药组(B组).每组40只,各组均按观察时间分为24、48 h 2个时间点,各时间点20只,均有10只不注射伊文思蓝(EB),待观察至相应时间点采用免疫组织化学方法检测各组幼鼠脑组织神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测神经细胞的凋亡阳性细胞数,余幼鼠于相应时间点经右颈外静脉近心端注入EB,采用甲酰胺法测定相应时间点脑组织中EB水平.结果 各组幼鼠脑组织24、48 h NSE阳性区面积、凋亡阳性区面积及EB水平比较,差异均有统计学意义(F=705.44,369.96,1 719.05,890.55,1041.46,219.06 Pa<0.01).A、B组幼鼠脑组织24、48 h NSE阳性区面积、凋亡阳性区面积及EB水平比较,差异均无统计学意义(t=0.474,0.588,0.842,0.855,0.732,0.90 Pa>0.05).结论 LPS可诱导幼鼠脑组织神经细胞凋亡;MT可抑制脑组织凋亡阳性细胞表达,具有显著的抗凋亡作用.实用儿科临床杂志,2009,24 (10):777-779     

褪黑素抗氧化应激作用与器官保护

褪黑素(MT)是松果体合成分泌的神经内分泌激素。近年研究表明其是迄今已知的最强的自由基清除剂。MT抗氧化应激作用对机体的器官损伤有明显的保护作用,尤其是缺血再灌注损伤。通过对MT作用机制的研究,可为MT应用于临床疾病的防治提供理论依据。     

高温相关丝氨酸蛋白酶A2抑制剂I对早产鼠高体积分数氧肺损伤的保护作用

目的 研究高温相关丝氨酸蛋白酶A2(Omi/HtrA2)特异性抑制剂(Ucf-101)对早产鼠高体积分数氧(高氧)肺损伤的保护作用.方法 72只新生早产Wistar大鼠在出生12 h随机分为对照组、高氧组、高氧+Ucg101组,每组24只.高氧+Ucf-101组新生大鼠高氧暴露前10 min,按1.5μmol·kg-1腹腔注射Ucf-101,对照组和高氧组新生大鼠在相同时点注射等量的9g·L-1盐水;高氧组和高氧+ Ucf-101组新生大鼠持续暴露于950 mL·L-1氧气中,对照组新生大鼠置于同一室内常压空气中.分别于暴露1d、3d、7 d时,每组取动物8只,留取肺组织标本.左肺制作石蜡切片,采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测Omi/HtrA2、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)在各组肺组织的表达;采用原位末端标记法检测肺细胞凋亡情况.右肺制作冷冻切片,采用间接免疫荧光双染色法,在激光共聚焦显微镜下观察Omi/HtrA2在细胞内的转位.结果 1.高氧组和高氧+ Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2、Caspase-9随着高氧暴露时间延长表达量呈增高趋势,与对照组比较差异有统计学意义(Pa＜0.05);高氧+ Ucf-101组与高氧组比较,Omi/HtrA2、Caspase-9在同一时间点表达量明显降低,差异均有统计学意义(Pa＜0.01).高氧组和高氧+ Ucf-101组XIAP较对照组明显减少,差异有统计学意义(P＜0.01);高氧+Ucf-101组各时间点XIAP的表达量均显著高于高氧组,差异有统计学意义(P＜0.01).2.与对照组比较,高氧组和高氧+ Ucf-101组肺组织细胞凋亡率明显增加(P＜0.01);高氧+ Ucf-101组与高氧组比较,同一时间点凋亡率显著减低(P＜0.01).3.高氧组和高氧+Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2胞内转位率明显高于对照组(P＜0.0t),高氧+Ucf-101组肺组织Omi/HtrA2转位率较同一时间点的高氧组明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 Ucf-101可能通过减少Omi/HtrA2在肺细胞胞质中的表达和线粒体的转位而抑制肺细胞凋亡,减轻早产鼠高氧肺损伤.