肺表面活性物质蛋白B基因多态性与早产儿支气管肺发育不良的相关性

目的 研究肺表面活性物质蛋白B(Sp-B)基因单核苷酸多态性的分布及其与早产儿支气管肺发育不良(BPD)的关系.方法 采用前瞻性研究方法,选择42例BPD早产儿(BPD组)和65例非BPD早产儿(对照组)作为研究对象,应用PCR-限制性片段长度多态性技术检测SP-B-18A/C、SP-B 1580C/T、SP-B8714G/C位点的单核甘酸多态性,分析3个位点多态性与BPD的关系.结果 BPD组和对照组SP-B-18A/C基因型频率CC、AC、AA分别为35.7％、52.4％、11.9％和32.3％、47.7％、20.0％;SP-B 8714G/C:CC、GC、GG分别为26.2％、54.8％、19.0％和27.7％、58.5％、13.8％;1580C/T基因型CC、CT、TT分别为66.7％、26.2％、7.1％和40.0％、47.7％、12.3％.BPD组和对照组SP-B-18A/C等位基因:C位基因、A等位基因分别为61.9％、38.1％和56.2％、43.8％;SP-B 8714G/C:G等位基因、C等位基因分别为53.6％、46.8％和56.9％、43.1％;SP-B 1580C/T:C等位基因、T等位基因分别为79.8％、20.2％和63.8％、36.2％.SP-B-18A/C、SP-B1580C/T、SP-B 8714G/C 3个位点均存在多态性,与对照组比较,BPD患儿SP-B 1580C/T位点基因型以CC明显增多(x2=7.26,P＜0.05),C等位基因分布频率显著增高(x2=6.17,P＜0.05),携带C等位基因的个体患BPD的风险是非携带者的2.23倍(OR=2.23,95％CI:1.18～4.24).SP-B-18A/C、SP-B 8714G/C位点的基因型和等位基因分布频率均无明显变化,差异均无统计学意义(P均＞0.05).结论 SP-B 1580C/T多态性与BPD有关,SP-B 1580C/T可能是BPD的易感基因,携带SP-B 1580C等位基因的个体患BPD的风险增加.SP-B-18A/C、SP-B 8714G/C与BPD无关.     

肺表面活性物质蛋白B基因多态性与新生儿呼吸窘迫综合征易感性的研究

目的 探讨肺泡表面活性物质蛋白B（SPB）基因多态性与新生儿呼吸窘迫综合征易感性的关系。方法 收集华中科技大学同济医学院附属同济医院的新生儿呼吸窘迫综合征（NRDS）诊断病例为病例组,并按1∶2比例收集胎龄和出生体重相匹配的无明显感染症状早产儿为对照组。应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态（PCR RFLP）分析技术及基因测序技术检测SPB 18A/C及SPB1580C/T多态性,观察两组间基因型频率和等位基因频率的差异。并复习文献比较本研究汉族与其他种族人群等位基因频率的差异。结果 2008至2010年NRDS组91例,对照组182名进入分析。 ①SPB－18A/C基因在NRDS组AA,AC,CC基因型频率分别为11.0%、40.7%和48.4%,对照组分别为6.6%、31.3%和62.1%;两组基因型频率差异无统计学意义（P>0.05）;NRDS组A等位基因频率显著高于对照组（31.3% vs 22.3%）。②SPB1580C/T基因在NRDS组TT、TC和CC基因型频率分别为5.5%、63.7%和45.1%,对照组分别为30.8%、6.6%和48.4%;两组基因型频率差异无统计学意义（P>0.05）;NRDS组C等位基因频率显著高于对照组（79.1% vs 70.9%）。③本研究汉族人、美国人、巴西人和丹麦人SPB1580等位基因C频率分别为79%、35%、41%和46%,差异有统计学意义（P<0.05）,与日本人群等位基因C频率（72%）差异无统计学意义（P>0.05）;本研究汉族人、巴西人、美国人和丹麦人SPB－18等位基因A频率分别为31%、58%、57%和61%,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 本研究汉族人群SPB－18A/C及SPB1580C/T基因多态性是NRDS的危险因素。不同种族人群SPB1580C/T和SPB－18A/C基因多态性分布存在明显差异。     

肺表面活性物质蛋白B基因多态性与新生儿呼吸窘迫综合征易感性的相关性研究

目的：研究肺表面活性物质蛋白（SP）B基因单核苷酸多态性分布以及与新生儿呼吸窘迫综合征（RDS）的关系。方法：选择88例RDS早产儿和未并发RDS的早产儿103例作为研究对象,采用DNA提取试剂盒提取DNA,应用聚合酶联反应-限制性片段长度多态性技术检测SP-B-18A/C、SP-B 1580C/T两个位点的单核苷酸多态性,分析两个位点多态性与RDS的关系。结果：SP-B -18A/C、SP-B 1580C/T两个位点在病例组和对照组中均存在多态性,与未并发RDS的早产儿对照组比较,RDS患儿SP-B 1580C/T位点基因型以CC型明显增多,（χ2=12.26,P0.05）。结论：SP-B 1580 位点C/T多态性与RDS有关,SP-B 1580C/T可能是RDS的易感基因,携带SP-B 1580位点C等位基因的个体患RDS的风险增加。SP-B-18A/C与RDS无关。     

肺泡表面活性物质蛋白B基因多态性与支气管肺发育不良易感性的关系

目的 了解肺泡表面活性物质蛋白B(SPB)-18A/C和SPB 1580C/T基因多态性与支气管肺发育不良(BPD)易感性的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态分析技术及基因测序技术检测57例BPD患儿及103例同胎龄无BPD早产儿的SPB-18及SPB 1580基因多态性,比较2组SPB-18及SPB 1580基因型和基因分布的差异.结果 1.SPB-18A/C基因型在BPD组与对照组AA、AC、CC基因型频率分别为14.0%、45.6%、40.4%和4.9%、31.1%、64.1%;A等位基因增加新生儿患BPD的风险:AC/CC与AA/CC 的OR值分别为2.3(95%CI 1.2~4.7,P=0.02)和4.7(95%CI 1.4~16.2,P=0.01);2.SPB 1580C/T基因型在对照组和BPD组TT、CT、TT分布分别为6.8%、45.6%、47.6%和12.3%、40.4%、47.4%,对照组和BPD组比较差异无统计学意义(χ2=1.50, P＞0.05).结论 中国武汉汉族人中SPB-18基因多态性是BPD的危险因素,基因型为AA者是BPD易感人群.SPB 1580 C/T基因多态性与BPD发病无明显相关性.     

肺表面活性物质蛋白-C基因186位点多态性与内蒙古地区蒙古族与汉族新生儿呼吸窘迫综合征相关性分析

目的：研究肺表面活性物质蛋白( surfactant protein,SP)-C基因多态性,以186位点为重,研究内蒙古地区蒙古族与汉族新生儿呼吸窘迫综合征( respiratory distress syndrome of newborn, NRDS)的相关性,分析两族是否具有基因位点差异性。方法选择151例NRDS患儿( NRDS组)与151例正常新生儿(对照组)作为研究对象,应用PCR及基因分析技术检测186位点,分析其多态性与NRDS的关系。结果在内蒙古地区,不论蒙古族还是汉族,SP-C基因186位点基因型均可检出3种基因型：即AA、AG及GG型。其中,蒙古族NRDS组和对照组患儿此3种基因型频率分别为：19.6％、33.3％、47.1％和23.5％、27.5％、49.0％,NRDS组和对照组A等位基因频率分别为36.3％和37.3％, G等位基因频率分别为63.7％和62.7％。汉族 NRDS 患儿和对照组此3种基因型频率分别为：14.0％、28.0％、58.0％和10.0％、30.0％、60.0％, NRDS 组和对照组患儿 A 等位基因频率分别为28.0％和25.0％,G等位基因频率分别为72.0％和75.0％。内蒙古地区蒙古族与汉族NRDS患儿SP-C基因型及等位基因频率在不同性别、出生体重、胎龄、分娩方式等中无明显关联( P>0.05)。对比蒙古族与汉族NRDS患儿在SP-C基因186位点上基因型和等位基因分布,并未发现SP-C基因186位点多态性具有种族上的统计学差异( P>0.05)。结论内蒙古地区NRDS患儿SP-C 186位点基因多态性无明显的种族相关性。     

肺表面活性物质结合蛋白基因的克隆

从正常人肺组织抽提总ＲＮＡ，通过反转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术，扩增出肺表面活性物质结合蛋白（ＳＰ－Ｂ、ＳＰ－Ｃ）基因片段，分别为２４０ｂｐ、１１０ｂｐ。又通过ＰＣＲ产物的回收、克隆、连接、转化、酶解以及ＤＮＡ序列分析，证明所克隆的基因片段与已发表的人成熟ＳＰ－Ｂ、Ｃ的ｃＤＮＡ序列完全一致，未发现有任何突变。提示本研究为利用基因工程手段得到ＳＰ及其与人工合成磷脂重组成有效的外源性肺表面活性物质奠定了基础，同时也证明ＲＴ－ＰＣＲ技术是很有效的ｃＤＮＡ克隆化手段，具有简便快捷的优点。     

新生儿呼吸窘迫综合征肺表面活性物质蛋白B不同表达水平分析

目的探讨肺表面活性物质蛋白B(SP-B)参与新生儿呼吸窘迫综合征(RDS)发病的可能机制。方法选择无血缘关系的60例因RDS死亡的新生儿为RDS组,其中≤31周亚组、32～36周亚组及≥37周亚组每组各纳入20例;选择无血缘关系的60例因其他疾病死亡的新生儿为对照组,胎龄与RDS组以1:1相匹配。所有研究对象均在死后30min内取肺组织,采用免疫印迹方法分析SP-B蛋白在肺部的表达,实时定量-聚合酶链反应(RT-PCR)方法分析肺部SP-B信使RNA(mRNA)表达。SP-BmRNA和SP-B蛋白缺陷的频率采用统计学分析。结果 RDS组8例肺组织SP-B蛋白表达减少或缺失,其中6例完全缺失;对照组1例肺组织SP-B蛋白表达减少;此9例均分布在≥37周亚组。RDS组SP-BmRNA相对表达量显著低于对照组[(2.55±1.90)比(3.74±1.12),t=4.145,P<0.001];≤31周亚组RDS组与对照组差异无统计学意义[(2.35±1.34)比(2.66±1.14),t=0.776,P>0.05];32～36周亚组和≥37周亚组中,RDS组均低于对照组[32～36周亚组:(2.23±1.22)比(3.80±0.25),t=5.661,P<0.001;≥37周亚组:(3.08±2.74)比(4.75±0.49),t=2.682,P<0.05]。SP-B蛋白和mRNA水平成同向表达减少。结论转录和翻译水平均介入了SP-B蛋白的最后表达,SP-BmRNA和SP-B蛋白减少参与了RDS发病。     

20例汉族新生儿呼吸窘迫综合征肺表面活性物质蛋白遗传缺陷的研究

目的探讨汉族群体新生儿呼吸窘迫综合征发病的遗传机制,为进一步开展基因治疗NRDS提供科学实验依据。方法选择彼此无关的汉族NRDS20例作为NRDS组,选择彼此无关的汉族20例其他病例作为对照组,年龄与NRDS组相匹配,这些患儿可患有先心病、支气管肺发育不良、持续肺动脉高压。所有研究对象在临床确诊或住院后取血样本,NRDS组和对照组在患者死后30min内取肺组织。采用免疫组化技术检测SP—B在肺部的表达,PCR技术分析筛选SP-B基因Intron 4的遗传缺陷变异体。结果20例NRDS患儿中,26周2例、34周1例、42周2例SP-B蛋白在肺部的表达明显较同胎龄对照组少;而对照组随着胎龄的增加,SP-B在肺部的表达增加,但在NRDS组却无这种规律可寻,进一步对这5例进行基因分析发现,2例42周的NRDS患儿SP—B基因Intron 4 121ins2遗传缺陷变异体。临床资料表明,42周胎龄的NRDS患儿病情重。结论SP—B减少参与了NRDS的发病,汉族群体NRDS存在SP-B基因intron 4 121ins2遗传缺陷变异体,进一步在国内研究SP-B遗传缺陷变异体可望为疾病基因组样本库积累资料。     

肺表面活性物质蛋白-C基因遗传多态性与内蒙古地区蒙古族新生儿呼吸窘迫综合征的相关性研究

目的：研究肺表面活性物质蛋白( surfactant protein,SP)-C基因多态性,尤以外显子4(T138N)、5(S186N)位点为重与内蒙古地区蒙古族新生儿呼吸窘迫综合征(neonatal respiratory distress syndrome,NRDS)的关系。方法采用前瞻性研究方法,选择51例NRDS患儿(病例组)与51例正常新生儿(对照组)作为研究对象,应用PCR基因分析技术检测候选基因SP-C外显子4和5有无突变现象,并检测外显子4(T138N)、5(S186N)位点基因多态性,分析多态性与NRDS的关系。结果 SP-C外显子4和5未发现基因突变现象。在内蒙古地区蒙古族,SP-C外显子4(T138N)位点均可检出3种基因型：即AA、AC及CC型,SP-C外显子4(T138N)位点基因多态性病例组与对照组相比差异无统计学意义(χ2=0．454,P=0．797)。外显子5(S186N)位点可检出3种基因型：即AA、AG及GG型,SP-C外显子5(S186N)位点基因多态性病例组与对照组相比差异无统计学意义(χ2=0．493,P=0．782)。结论内蒙古地区蒙古族新生儿SP-C基因型及等位基因频率与性别、出生体重、胎龄、生产方式等无明显关联。内蒙古地区蒙古族NRDS患儿的SP-C外显子4和5未发现基因突变现象。 SP-C基因外显子4(T138N)、外显子5(S186N)位点基因多态性未发现与内蒙古地区蒙古族NRDS患儿有相关性。     

儿童特发性间质性肺疾病与肺表面活性物质-B基因多态性的相关性研究

目的 探讨肺表面活性物质(surfactant protein,SP)-B外显子4(T131I)位点的基因多态性与儿童特发性间质性肺疾病的相关性.方法 收集2013年10月至2016年9月在深圳市儿童医院和广西医科大学附属第一医院住院诊断为特发性间质性肺疾病的患儿共67例为病例组,选择同期与特发性间质性肺疾病无关的因呼吸道感染在深圳市儿童医院住院的102例患儿为对照组,采用SP-B全外显子和侧翼区高通量测序法对所有病例采集的标本进行检测,分析外显子4(T131I)位点的基因型和等位基因分布.结果 病例组和对照组SP-B基因外显子 4(T131I)位点的基因型均可检出3 种,CC、CT及TT型,病例组所占比例分别为67.16%、25.37%、7.46%,对照组分别为56.86%、35.29%、7.84%,两组基因型分布的差异无统计学意义(χ2=1.981,P=0.371);病例组C等位基因频率为79.85%,对照组为74.51%,差异无统计学意义(χ2=1.288,P=0.256).对照组SP-B基因外显子 4(T131I)位点的基因突变频率为43.14%(44/102),与人类基因组千人人群数据库基因突变频率平均值52.00%比较,差异无统计学意义(P>0.05);与欧洲千人人群数据库基因突变频率53.88%、南亚千人人群数据库基因突变频率45.50%和美洲整体人群数据库基因突变频率41.93%比较,差异无统计学意义(P>0.05),而与东亚千人人群数据库基因突变频率26.39%和非洲千人人群数据库基因突变频率80.18%比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 SP-B 基因外显子4(T131I)位点的基因多态性与儿童特发性间质性肺疾病易感性不存在相关性,外显子4(T131I)位点的基因突变频率与种族人群和地域具有一定的差异性.     

Shank3基因单核苷酸多态性与中国汉族儿童孤独症的关联

目的 探讨Shank3基因单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族儿童孤独症之间的关系.方法 采用PCR与限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法对82例孤独症儿童及80例健康儿童Shank3基因上的2个SNPs位点rs9616915和rs13057681的基因型和等位基因进行测定.采用病例-对照方法分析SNPs位点等位基因的分布,对孤独症组和健康对照组SNPs位点进行Hardy-Weinberg平衡检验.结果 1.健康对照组和孤独症组儿童观察值和预期值间差异均无统计学意义(Pa>0.05),即健康对照组和孤独症组均符合Hardy-Weinberg遗传平衡法则.2.二组儿童rs9616915和rs13057681位点等位基因频率和基因型分布上差异无统计学意义(rs9616915:基因型χ2=0.452,P>0.05;等位基因χ2=0.217,P>0.05;rs13057681:基因型χ2=0.256,P>0.05;等位基因χ2=0.173,P>0.05).结论 Shank3基因rs9616915和rs13057681SNPs片段与中国汉族儿童孤独症的发病无关,孤独症的易感基因有待于进一步研究.     

Use of CPAP and Surfactant Therapy in Newborns with Respiratory Distress Syndrome

Respiratory distress syndrome (RDS) is a major disease burden in the developing countries. Current evidence supports early continuous positive airway pressure (CPAP) use and early selective surfactant administration as the most efficacious interventions in the management of RDS, both in developed and developing countries. In developing countries, it is recommended to increase institutional deliveries and increase the coverage of antenatal steroids in women in preterm labor as preventive measures. Establishing intervention of CPAP and surfactant therapies in the Level II special care newborn units (SCNUs) and Level III units requires focus on training nursing staff and pediatricians across the board. These approaches would pave the way in optimizing the care of the preterm infants with RDS and decrease their mortality and morbidity significantly.     

Post-natal Development of Protein C in Full-term Newborns

ABSTRACT. The purpose of this study was to determine the concentration of Protein C in the blood of full-term healthy newborns. The levels of Protein C, evaluated by electroimmunoassay, were low in the first 5 days of life and lower than the critical adult thrombotic level. The antigenic activity increased progressively from the 2nd week of life and the adult values were reached after the 6th month. The reduction of Protein C levels may impair the ability of the newborn to control consumptive disorders, thus exposing the infants to the risk of thrombotic conditions in neonatal age.     

血管内皮生长因子对早产鼠肺泡表面活性物质结合蛋白B的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)对早产鼠肺泡Ⅱ型细胞(AECⅡ)发育和肺泡表面活性物质结合蛋白B(SP-B)表达的影响。方法孕19d Wistar大鼠剖腹取胎鼠,原代培养AECⅡ,分成VEGF-165组、地塞米松组、VEGF加地塞米松组和对照组,检测各组AECⅡ和SP-B表达。结果VEGF-165组、地塞米松组与VEGF加地塞米松组SP-B阳性表达,对照组阴性表达。结论VEGF-165能促进早产鼠肺泡细胞SP-B表达与分泌,可促进肺发育和肺成熟。     

温州地区汉族支气管哮喘患儿白三烯受体927T/C位点基因多态性

目的 研究白三烯受体(CysLT1)中927T/C(rs320995)位点基因多态性在温州地区汉族儿童中的分布特征及其对哮喘临床特征的影响.方法 采用DNA测序法检测122例汉族哮喘患儿(哮喘组)和100例汉族健康体检儿童(健康对照组)CysLT1 927T/C位点的基因多态性;采用MS/Paedtric 肺功能仪检测肺功能.结果 1.二组均存在927T/C位点基因多态性,哮喘组CC、CT和TT基因型频率分别为33.6%、18.9%和47.5%,健康对照组分别为19.0%、17.0%、63.0%,二组基因型频率分布比较差异有统计学意义(χ2=6.769,P=0.034);哮喘组男童基因型与健康对照组比较差异有统计学意义(χ2=17.776,P=0.000),哮喘组女童基因型与健康对照组比较差异亦有统计学意义(χ2=9.676,P=0.008).2.哮喘组C、T等位基因分别为43.0%和57.0%,健康对照组分别为28.0%和72.0%,二组比较差异有统计学意义(χ2=10.747,P=0.001).哮喘组男童等位基因与健康对照组比较差异有统计学意义(χ2=16.396,P=0.000),哮喘组女童等位基因与健康对照组比较,差异无统计学意义(χ2=0.015,P=0.902).3.哮喘组中,927T/C位点3种基因型特应性体质、家族特应性及哮喘严重程度比较,差异均无统计学意义.结论 1.温州地区汉族儿童CysLT1基因927T/C位点基因多态性与温州地区汉族人群哮喘易感性相关,且在性别上无明显差异.2.该位点C等位基因的男童携带者患哮喘的危险性为T等位基因携带者的2.755倍,但哮喘患病率与C等位基因的女性携带者无明显相关.3.温州地区汉族儿童中CysLT1基因927T/C位点基因多态性与特应性体质、家族特应性及哮喘严重程度无明显相关.     

血清S100B蛋白和脑脊液胆红素水平在新生儿高未结合胆红素血症中检测的意义

目的探讨高未结合胆红素血症新生儿血清S100B蛋白和脑脊液(CSF)胆红素水平检测的意义。方法 2008年6月-2010年6月在本院住院的高未结合胆红素血症新生儿86例,根据有无高危因素(溶血、感染、低蛋白、小日龄)分为有高危因素组(42例)和无高危因素组(44例),并选取同期住院无黄疸新生儿作为对照组(30例)。每组患儿在入院时即用ELISA法检测其血清S100B蛋白水平,并检测其CSF及血清胆红素水平,同时对每例患儿进行听力筛查和新生儿行为能力测定(NBNA),对上述结果在3组间进行比较。结果高危因素组血清胆红素水平与CSF胆红素水平呈正相关(P<0.01);无高危因素组血清胆红素水平与CSF胆红素水平无相关性(P>0.05)。高危因素组CSF胆红素水平和血清S100B水平与NBNA评分均呈负相关(Pa<0.05);无高危因素组CSF胆红素水平和血清S100B水平与NBNA评分均无相关性(Pa>0.05)。3组NBNA评分、血清胆红素水平、CSF胆红素水平及血清S100B水平比较,差异均有统计学意义(Pa<0.05)。3组患儿听力筛查异常率比较有统计学差异(P<0.01),组间比较Scheffé可信区间法提示无高危因素组患儿听力筛查异常率显著低于高危因素组(0.133～0.249)。结论高危因素组血清S100B蛋白和CSF胆红素水平明显升高,提示新生儿期高未结合胆红素血症对有高危因素患儿的神经系统可造成损伤。