黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤的保护作用

目的 研究黄芩素-7-甲醚对缺氧PC12细胞的保护作用。方法 将PC12细胞分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和黄芩素-7-甲醚组,培养24 h后,MTT法检测黄芩素-7-甲醚对细胞活力的影响;酶标仪法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活性以及细胞内丙二醛（malondialdehyde,MDA）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）和过氧化氢酶（catalase,CAT）水平;2'',7''-二氯荧光素探针法检测细胞内活性氧簇（reactive oxygen species,ROS）水平;实时荧光定量PCR和Western blot检测核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素氧合酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）的mRNA和蛋白的表达。结果 与正常对照组相比,缺氧导致PC12细胞活力显著降低,LDH、MDA和ROS水平显著升高,抗氧化酶SOD和CAT的活力显著降低。黄芩素-7-甲醚预处理能够逆转这些变化。此外,缺氧能够诱导细胞内Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达增加,而黄芩素-7-甲醚能够进一步提高Nrf2、HO-1的mRNA和蛋白表达。结论 黄芩素-7-甲醚对缺氧致PC12细胞损伤有一定的保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1通路,抑制氧化应激损伤有关。     

7-羟乙基白杨素对心肌细胞缺氧损伤的保护作用及机制研究

目的 探究7-羟乙基白杨素对心肌细胞缺氧损伤的保护作用及其信号转导机制。方法 将心肌细胞株H9C2传代后随机分为正常对照组(常氧条件培养24 h)、模型组(1%O₂浓度缺氧培养24 h)、白杨素组(1%O₂浓度缺氧培养24 h, 1.0×10^-6 mol·L^-1白杨素处理)、7-羟乙基白杨素组(1%O₂浓度缺氧培养24 h, 1.0×10^-6 mol·L^-1 7-羟乙基白杨素处理)。用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞增殖情况；用WST-1法测定超氧化物歧化酶(SOD)含量；用钼酸铵法测定过氧化氢酶(CAT)含量；用蛋白质印迹法检测血红素加氧酶1(HO-1)、过氧化氢酶(CAT)蛋白表达水平。结果 正常对照组、模型组、白杨素组和7-羟乙基白杨素组的细胞存活率分别为(100.00±4.48)%、(61.95±2.14)%、(86.01±3.60)%和(93.16±2.91)%;SOD活力分别为111.43±3.06、196.12...     

7-羟乙基白杨素对低压缺氧致PC12细胞损伤的改善作用及机制

目的 探讨7-羟乙基白杨素(7-HEC)对低压缺氧致PC12细胞损伤的改善作用及可能机制。方法 以大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞系PC12为对象，以低压缺氧(5%CO₂、94%N₂、1%O₂、54 004 Pa)条件培养，考察不同浓度7-HEC(100、10、1、0.1、0.01μmol/L)对低压缺氧细胞存活率的影响；检测7-HEC(1μmol/L)对低压缺氧细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性，凋亡率，周期，以及细胞中活化的胱天蛋白酶3(cleaved caspase-3)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达的影响。结果 与对照组比较，低压缺氧组细胞的存活率显著降低(P<0.01);10、1、0.1μmol/L的7-HEC可逆转低压缺氧导致的细胞存活率降低(P<0.05或P<0.01)。与对照组比较，低压缺氧组细胞上清液中LDH含量、细胞中MDA含量、凋亡率、G₁期细胞比例和细胞中cleaved caspase-...     

7-羟乙基白杨素对低压低氧致脑组织损伤的保护作用

目的 研究7-羟乙基白杨素（7-HEC）对低压低氧诱导大鼠脑组织损伤的保护作用。方法 将52只健康♂ Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、乙酰唑胺组、7-HEC组，每组13只。连续灌胃给药5 d，末次给药后，除正常组，将其余3组置于低压低氧动物实验舱，升至8 000 m海拔缺氧处理24 h。HE染色观察脑组织病理改变，酶标法检测脑组织中过氧化氢（H₂O₂）和丙二醛（MDA）水平，以及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和ATP酶的活力；Western blotting检测蛋白B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白抗体（Bax）及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3（caspase-3）的表达。结果 与正常组相比，低压低氧导致大鼠脑组织出现明显损伤，H₂O₂和MDA水平显著升高，抗氧化酶SOD、CAT和GSH-Px以及Na⁺-K⁺-ATPase和Ca²⁺-Mg²⁺-ATPase的活力显著降低。7-HEC预处理能够逆转这些变化。此外，低压低氧能够显著升高脑组织中促凋亡蛋白Bax和cleaved caspase-3表达，降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，而7-HEC能够下调Bax和cleaved caspase-3表达，上调Bcl-2的表达。结论 7-HEC对低压低氧致脑组织损伤具有明显的保护作用，其作用机制可能与其缓解氧化应激，抑制细胞凋亡，改善能量代谢有关。     

圣草次苷激活Nrf2信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤作用研究

目的 建立大鼠H9c2心肌细胞缺氧/复氧（H/R）损伤模型,考察圣草次苷改善心肌缺血再灌注损伤的作用机制。方法 利用无糖无血清培养基结合厌氧（94%N₂、5%CO₂、1%O₂）处理H9c2心肌细胞4h后,更换新鲜完全培养基再放入正常孵箱复氧24h,制备H/R损伤模型。在造模前12h给予圣草次苷（5、10、20μg·mL^-1）,细胞活力及乳酸脱氢酶（LDH）检测实验中选择灯盏乙素（20μg·mL^-1）作为阳性药,对照组及模型组给予等体积DMSO。MTT法测定细胞存活率;试剂盒检测细胞培养上清液中LDH水平;试剂盒检测细胞内丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力;TUNEL染色检测细胞凋亡;DCFH-DA和JC-1探针分别检测细胞内活性氧（ROS）和线粒体膜电位改变;Western blotting检测核蛋白中转录因子（NF）-E2相关因子2（Nrf2）和总蛋白中血红素氧合酶1（HO-1）、γ-谷氨酰半胱氨酸连接酶（GCL）水平。结果 与对照组比较,H/R损伤诱导的模型组细胞存活率明显下降,凋亡明显增加,LDH水平明显升高,细胞内MDA水平明显升高,SOD、CAT、GSH-Px活力明显降低,ROS释放明显增多,线粒体膜电位明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.01）;与模型组比较,圣草次苷可剂量相关性地改善上述变化,其中10、20μg·mL^-1组均差异显著（P＜0.01）。Western blotting结果显示,与对照组比较,模型组细胞Nrf2核转位以及HO-1、GCL表达水平无显著变化;与模型组比较,圣草次苷10、20μg·mL^-1显著增加Nrf2核转位及HO-1、GCL表达水平（P＜0.01）。结论 圣草次苷能够保护H/R诱导的H9c2心肌细胞损伤,其可能通过激活Nrf2抗氧化信号通路,增加细胞内源性抗氧化能力,抑制氧化应激损伤,保护线粒体功能以阻止细胞凋亡的发生。     

顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的 研究顺铂联合8-硝基白杨素对人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长的影响。方法 建立人卵巢癌COC1细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分成4组,每组5只：生理盐水组、8-硝基白杨素组、顺铂组、8-硝基白杨素+顺铂组。观察各组裸鼠移植瘤体积、重量及裸鼠体质量的变化;裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数的变化;FCM测定瘤组织细胞凋亡率;Western blot分析瘤组织细胞凋亡的可能分子生物学机制。结果 与顺铂组和8-硝基白杨素组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合作用COC1细胞裸鼠移植瘤后,移植瘤的体积、移植瘤的重量均明显降低(P<0.05);与顺铂组相比,顺铂联合8-硝基白杨素联合组裸鼠体质量无明显差异(P>0.05),裸鼠血清乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、肌酐值和外周血白细胞计数无明显差异(P>0.05);顺铂和8-硝基白杨素联合作用COC1细胞16 d后,COC1细胞发生凋亡,同时bcl-2蛋白表达降低,caspase-3蛋白表达增高。结论 顺铂联合8-硝基白杨素通过降低bcl-2蛋白表达,活化caspase-3蛋白表达来抑制人卵巢癌COC1细胞裸鼠移植瘤生长。     

基于Nrf2信号通路的三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞凋亡的保护作用机制研究

目的探讨三七总皂苷对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及分子机制。方法利用Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤模型,MTT法检测PC12细胞活力,试剂盒测定LDH漏出量、ROS水平、MDA含量、Caspase-3活力以及抗氧化酶SOD、CAT和GHS-Px活力,TUNEL染色检测细胞凋亡,JC-1染色观察线粒体膜电位,Western blot检测相关蛋白HO-1、Lamin-B、细胞核内Nrf2及总Nrf2的蛋白表达。结果三七总皂苷能够明显抑制Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞活力下降(P<0.01)和LDH漏出(P<0.01),减少ROS和MDA的产生(P<0.01),增加SOD、CAT和GSH-Px活力(P<0.01),稳定线粒体膜电位,抑制caspase-3的活化(P<0.01)。而且,三七总皂苷还能够上调PC12细胞细胞核Nrf2、总Nrf2和细胞质中HO-1的蛋白表达。HO-1抑制剂Sn PP能够抑制三七总皂苷的神经保护作用。结论三七总皂苷可能通过上调Nrf2/HO-1信号通路,从而抑制Aβ25-35诱导PC12细胞氧化应激和凋亡。     

淫羊藿苷对H2O2诱导的软骨细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的 探究淫羊藿苷（icariin，ICA）对H₂O₂诱导的软骨细胞氧化损伤的保护作用及相关机制。方法 分离SD新生大鼠软骨细胞，随机分为对照组、H₂O₂模型组、ICA低剂量组、ICA中剂量组、ICA高剂量组；采用CCK8法检测各组细胞增殖能力的变化；采用ELISA试剂盒检测各组细胞中活性氧（reactive oxygen，ROS）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）、过氧化氢酶（catalase，CAT）以及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的表达情况；流式细胞术检测各组细胞周期情况，并计算增殖指数（proliferation index，PI）；Hoechst染色观察各组细胞核凋亡情况；分别采用荧光定量PCR （qRT-PCR）和Western blotting检测凋亡相关因子及Nrf2/HO-1通路的表达情况。结果 与对照组相比，H₂O₂模型组细胞增殖能力降低，ROS、MDA含量升高，SOD、CAT及GSH-Px含量下降，细胞凋亡情况加重；经ICA干预后，软骨细胞的增殖能力上升，ROS、MDA含量下降，SOD、CAT及GSH-Px含量增加，并且ICA能够有效抑制软骨细胞凋亡，上调Nrf2和HO-1蛋白的表达。结论 ICA对H₂O₂诱导的软骨细胞氧化损伤具有保护作用，能够抑制软骨细胞凋亡，其机制跟Nrf2/HO-1信号通路有关。     

槲皮素对肝细胞氧化应激损伤的保护作用

摘要： 目的 探讨槲皮素对氧化应激 Chang liver 细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法 培养 Chang liver 细胞, 将细胞随机分为正常对照组、 H2O2组及槲皮素低、 中、 高剂量组。MTT 法检测肝细胞的存活率; 流式 细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二氯荧光素乙二酯(DCFH-DA)细胞内活性氧 （ROS） 荧光染色后, 荧光显微镜观察照 相及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平。试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、 过氧化氢酶（CAT）、 谷胱甘肽 过氧化物酶 （GSH-Px） 活性及细胞中丙二醛 （MDA） 的含量。采用 Western blot 法检测 Nrf2 蛋白的表达。结果 H2O2 组较正常对照组细胞存活率、 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性降低 (P < 0.05), 凋亡率、 平均荧光强度（MFI）及 MDA 升高 (P < 0.05)。不同剂量槲皮素组细胞存活率及细胞内 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性高于 H2O2组(P < 0.05), MDA、 凋亡率、 MFI 水平低于 H2O2组(P < 0.05)。槲皮素低、 中及高剂量组 Nrf2 蛋白均高于 H2O2组(P < 0.05)。结论 槲皮素对氧化 应激肝细胞损伤具有保护作用, 其机制可能与激活 Nrf2-ARE 通路, 进而增强下游抗氧化基因的表达有关。     

三七总皂苷对顺铂损伤HK-2细胞增值和氧化指标的影响

摘 要 目的：观察三七总皂苷(PNS)对顺铂(DDP)损伤的人肾近曲小管上皮细胞（HK-2）增殖和氧化指标的影响。 方法: 体外培养HK-2细胞株,使其细胞数约为1×10⁶个/ml,接种于96孔培养板,分为空白组、模型组、阳性药物组和PNS高、中、低剂量组6组。加入终浓度为6.25 μg.L^-1DDP 20μl建立DDP损伤HK-2细胞模型,各组分别给予生理盐水、氨磷汀和不同浓度的PNS处理48 h。MTT法测定细胞存活率;比色法测定乳酸脱氢酶（LDH）活性;裂解细胞,取上清液采用紫外分光光度法监测细胞内谷胱甘肽（GSH）含量,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶（SOD）活性,TBA法测定MDA含量;荧光素DCFH DA探针法测定细胞内ROS含量。结果: 与空白组比较,模型组的细胞存活率、细胞悬液中的SOD酶活性和GSH PX含量减低,细胞培养液中的LDH活性、细胞悬液中MDA含量和HK-2细胞内ROS水平显著升高,差异均具有显著统计学差异（P<0.05）;与模型组比较,阳性组和PNS高、中、低剂量组的细胞存活率、细胞悬液中的SOD酶活性和GSH PX含量明显升高,细胞培养液中的LDH活性、细胞悬液中MDA含量和细胞内ROS水平显著降低,且作用均有浓度依赖性,差异均具有显著统计学差异（P<0.05）。结论:PNS能促进DDP损伤HK-2细胞的增殖,降低培养液中LDH水平和细胞内的ROS水平,改善其细胞内氧化水平,对DDP损伤的HK-2细胞具有保护作用。其保护机制可能与其抗氧化作用有关。     

美洲大蠊提取物对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨美洲大蠊提取物(PAS840)对大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞氧化损伤模型的保护作用及机制。方法:采用H₂O₂刺激PC12细胞建立神经细胞氧化损伤模型,实验分为正常组(Con)、模型组(Mod)、PAS840低中高剂量组(20,50,125 μg·mL^-1的PAS840培养基溶液进行处理),采用倒置显微镜观察细胞形态并采用CCK-8法检测各组细胞存活率,生化试剂盒检测各组超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、乳酸脱氢酶(LDH)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)的水平;DCFH-DA荧光探针检测各组活性氧簇(ROS)的水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;JC-1法染色检测各组细胞线粒体膜电位(MMP);RT-qPCR检测各组Nrf2/HO-1通路因子(Nrf2、Keap1、HO-1和NQO1)、凋亡因子(Bcl-2、Bax和Caspase-3)、炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6)、乙酰胆碱酯酶(AchE)和过氧化氢酶(CAT) mRNA的表达水平;Western blot法检测各组Nrf2、HO-1、Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白的表达水平。结果:PAS840可显著提高氧化损伤细胞的存活率、MMP及SOD、GSH-Px和GSH的水平,降低LDH、MDA和ROS的水平;显著降低Keap1、TNF-α、IL-1β、IL-6和AchE mRNA表达的同时,显著增加CAT和NQO1 mRNA的表达,显著降低Nrf2、Bax和Caspase-3的mRNA及其蛋白表达,显著增加HO-1和Bcl-2的mRNA及其蛋白表达。结论:PAS840可以抑制H₂O₂诱导的PC12细胞凋亡,减轻炎症,其机制可能与降低ROS、调控Nrf2/HO-1通路因子减轻细胞的氧化损伤程度有关。     

Nrf2 mediates the protective effect of edaravone after chlorpyrifos‐induced nervous system toxicity

We aim to confirm the impairment of chlorpyrifos (CPF) in PC12 cells, evaluate the protective effect of edaravone on CPF‐induced injury, and try to unravel its underlying mechanism perspective from Nrf2 signaling pathway. Viability of PC12 cells treated with CPF and edaravone (Ed) were evaluated by MTT assay. Cell apoptosis was observed by the Hoechst 33342 stain. The level of reactive oxygen species (ROS), the content of malondialdehyde (MDA), and the activity of superoxide dismutase (SOD) were detected to evaluate the oxidative stress injury. The expression of Nrf2 was detected by Western blot; profoundly, RNA interference was conducted to construct Nrf2 gene knockdown PC12 cells and to uncover its underlying mechanism. MTT results showed CPF injured PC12 cells in a concentration‐dependent manner. Increased ROS and MDA content, decreased total SOD activity, or even apoptosis were occurred in PC12 cells when treated with CPF. Interestingly, CPF‐induced cell injury was conspicuously reversed after Ed administration. Nrf2 signaling pathway was activated after Ed treatment and the neuroprotective effect of Ed was not significant in cells after Nrf2 gene knockdown. In conclusion, Ed exerts neuroprotective effect on CPF‐induced oxidative stress injury and its mechanism was correlated with the Nrf2 signaling pathway.     

荠苧黄酮对低压低氧小鼠心肌组织损伤的改善作用与机制研究

目的:研究荠苧黄酮对低压低氧小鼠心肌组织损伤的改善作用与机制.方法:将60只小鼠随机分为正常对照组、缺氧模型组、芦丁组和荠苧黄酮组,连续灌胃(ig)给药5 d,最后1次给药后,在模拟海拔8 000 m 环境停留12h,测定血清中肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶(lactic dehydrog...     

白果内酯在PC12细胞中对NO诱导的细胞毒性的保护作用(英文)

目的:研究白果内酯在PC12细胞中对NO诱导的细胞毒性的保护作用。方法:以MTT法及LDH法检测细胞存活率;同时检测细胞的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及脂质过氧化水平。结果:NO供体SIN-1(50-300μmol·L~(-1))可导致PC12细胞死亡,可使PC12细胞脂质过氧化水平升高。白果内酯预孵育可减少NO诱导的细胞死亡;可抑制脂质过氧化水平升高。白果内酯预孵育本身可使SOD及CAT酶活性升高。结论:白果内酯对NO诱导的细胞毒性作用具保护作用,该保护作用可能与白果内酯升高细胞内SOD和CAT的活性有关。     

7-羟乙基白杨素对高原脑水肿的作用机制初探

目的 研究7-羟乙基白杨素（7-HEC）对高原脑水肿（HACE）的可能作用机制。方法 建立大鼠高原脑水肿模型,测定大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）的活性及丙二醛（MDA）的含量,采用蛋白质印迹法检测细胞凋亡、周期及自噬相关蛋白的表达水平,探究7-HEC对高原脑水肿的保护作用及其机制。结果 与对照组相比,缺氧模型组大鼠脑组织中MDA含量显著上调,SOD活力显著下调,周期蛋白CyclinD1、CyclinE1、CDK6、CDK2,凋亡蛋白Bcl-2、PARP,自噬蛋白LC3-B相对表达下调,凋亡蛋白Bax,自噬蛋白P62的相对表达上调,差异均具有统计学意义（P<0.05）;与缺氧模型组相比,7-HEC给药组MDA含量下调,SOD活力显著上调,周期蛋白CyclinD1、CyclinE1、CDK6、CDK2,凋亡蛋白Bcl-2、PARP,自噬蛋白LC3-B的相对表达上调,凋亡蛋白Bax,自噬蛋白P62的相对表达下调,差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 7-HEC对高原脑水肿具有一定的保护作用,其机制可能与调控细胞周期、自噬、凋亡以及氧化应激等通路有关。     

丹皮酚对过氧化氢诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用(英文)

目的探讨丹皮酚对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法建立H2O2致PC12细胞损伤模型,采用MTT法测定细胞存活率,流式细胞术测定细胞凋亡率及细胞内活性氧含量,化学比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量及细胞内丙二醛(MDA)含量。结果PC12细胞经H2O2100μmol.L-1处理10 h可致细胞存活率下降,并能诱导细胞凋亡,LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量明显增加;丹皮酚(12,25和50μmol.L-1)预处理1 h可提高细胞存活率,减少细胞凋亡、LDH释放量及细胞内活性氧和MDA含量。结论丹皮酚对H2O2诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

Improving effect and mechanism of fisetin on cell model of diabetic cerebral microangiopathy

OBJECTIVE To explore the effect and mechanism of fisetin on prevention and treatment of diabetic cerebral microangiopathy at the cellular and molecular level. METHODS In vitro experiments, high glucose(HG, 25 mmol·L~(-1)) and palmitic acid(PA, 200 μmol·L~(-1))were used to intervene in the mouse brain microvascular endothelial cells to establish the model of diabetic brain microangiopathy. Groups are divided into control, model(25 mmol·L~(-1) HG+200 μmol·L~(-1) PA, HG+PA) and fisetin(1, 5, 10 and 20 μmol·L~(-1)) groups. The effect of fisetin on hyperglycemic and hyperlipid-induced cell damage was detected by cell counting kit-(CCK-) 8 assay, cytotoxicity was detected by LDH assay. After treatment, the changes of oxidative stress related factors(ROS, NO, i NOS, MMP-2, MMP-9, TIMP-1, MDA, SOD, CAT) were detected by ELISA. RESULTS Compared with the control group, the cell viability of model group was significantly reduced(P<0.01), indicating that the model was successful y prepared.LDH content, the expression levels of ROS, NO, i NOS,MMP-2, MMP-9, TIMP-1 and MDA in the model group significantly increased(P< 0.01), while the expression of SOD and CAT in the model group decreased significantly(P<0.01). Compared with the model group, the activity of the cells, in the fisetin group was significantly increased(P<0.01). LDH content, the expression levels of ROS,NO, i NOS, MMP-2, MMP-9, TIMP-1 and MDA were decreased in the fisetin group(P<0.01), the expression of SOD and CAT, were significantly increased(P<0.01).The expression levels of antioxidant proteins HO-1 and NQO1 were significantly increased in the fisetin group(P<0.05). CONCLUSION Fisetin can improve the cell injury induced by HG and PA, which mimic the diabetic cerebral microvascular lesions, and its mechanism might be related to inhibiting the production of endogenous ROS in cells, activating the expression of antioxidant proteins and inhibiting the production of related oxidative factors.     

Neuroprotective effect of isoliquriitin on corticosterone-induced apoptosis in PC12 cells

OBJECTIVE Isoliquiritin,a flavonoid glycosides compound,possess a broad spectrum of pharmacological activities including antioxidant,antiinflammatory. However,rare studies in the field of isoliquiritin antidepressant-like effects have been carried out,the molecular mechanism also remains unclear. In this study,the model of corticosterone-damaged rat adrenal pheochromocytoma(PC12)cells has been used to generate an in vitro experimental model of depression. The aim was to investigate thecytoprotective efficiency and potential mechanisms of isoliquiritin in corticosterone-damaged PC12 cells. METHODS The cells were treated with 400 μmol·L~(-1)corticosterone in the absence or presence of isoliquiritin for 24 h; cells viability and lactate dehydrogenase(LDH) leakage were then determined,Hoechst 33342/PI and Annexin V/PI double staining were performed to evaluate the cytoprotective efficiency of isoliquiritin. Next,intracellular calcium([Ca~(2+)]_i),mitochondrial membrane potential(MMP),reactive oxygen species(ROS),malondialdehyde(MDA),the activity of superoxide dismutase(SOD)and catalase(CAT),and Western blotting analysed for the expression of Bcl,Bax,caspase-3 and cytochrome C(Cyt-C) were investigated to explore the potential mechanisms. RESULTS The results of the present study showed that pretreatment of PC12 cells with isoliquiritinsignificantly prevented the corticosterone-induced cell apoptosis. In addition,isoliquiritin increased the activity of SOD and CAT,decreased the contents of ROS and MDA. These findings suggest that isoliquiritin provided a protective action against corticosterone-induced celldamage by reducing oxidative stress. Furthermore pretreatmented with isoliquiritin reduced corticosterone-induced mitochondrial dysfunction by preventing mitochondrial membrane potentials dissipation.Our findings indicated that isoliquiritin might exert its therapeutic effects viaregulating mitochondrial dysfunction. Moreover isoliquiritin strongly attenuated [Ca~(2+)]_i overload and down-regulation of Bax,caspase-3 and Cyt-C protein expression,up-regulation of Bcl protein expression. CONCLUSION Isoliquiritin has acytoprotective effect on corticosterone-induced cytotoxicity in PC12 cells,which may be related to its antioxidant action,inhibition of [Ca~(2+)]_ioverload and inhibition of the mitochondrial apoptotic pathway.