锁阳药材的定性鉴别方法研究

 目的 建立锁阳药材的定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法对锁阳5种成分(+)-儿茶素、熊果酸、乙酰熊果酸、柑桔素、柑桔素-4'-O-吡喃葡萄糖苷进行定性鉴别;采用ELSD-HPLC方法对其醇溶物进行指纹图谱探索。结果 样品的TLC图谱斑点清晰,重复性好;样品指纹图谱相对保留时间的RSD小于0.5％。结论 本方法专属性强,为锁阳质量控制提供了可靠的定性鉴别方法。     

基于化学分析的薄荷药材商品规格划分的相关性研究

该文对比研究市售及不同产地35批薄荷药材挥发油指纹图谱、挥发油及6种共有萜类成分含量的差异,为从化学成分角度制定薄荷药材商品规格和等级划分标准提供实验依据.采用GC-MS分析了薄荷药材的化学成分;运用中药色谱指纹图谱技术建立了薄荷药材指纹图谱并进行了相似度、系统聚类及主成分分析;研究分析了薄荷药材中挥发油量与6种共有萜类成分含量的相关性.不同产地、来源薄荷药材的化学特征存在较大的差异,可以划分为L-薄荷醇型、胡薄荷酮型、香芹酮型、L-薄荷酮型4个化学类型,但其与产地的相关性并不明显;薄荷药材的指纹图谱在一定程度上能够区分药材的不同化学类型,但不能有效判断不同薄荷药材的产地来源;挥发油含量与6个共有萜类成分总含量及L-薄荷醇含量呈正相关.初步建议以薄荷药材中挥发油含量及6个共有萜类成分总含量或L-薄荷醇含量作为薄荷药材商品规格和等级划分的标准之一.该结果为从化学成分角度制定薄荷药材的商品规格和等级划分标准提供了参考.     

何首乌和夜交藤药材指纹图谱研究与评价

目的 建立何首乌、夜交藤药材指纹图谱分析方法,并依据指纹图谱对两种药材进行比较,为科学评价与有效控制何首乌、夜交藤药材质量提供新方法.方法 何首乌和夜交藤分别用甲醇和醋酸乙酯超声处理,提取液用HPLC进行测定.HPLC法采用C18色谱柱,乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱,检测波长分别为265和290 nm,体积流量1mL/min,柱温30℃.结果 建立了何首乌、夜交藤药材HPLC指纹图谱,并对不同产地何首乌、夜交藤药材进行了相似度比较.测定结果显示不同产地药材存在较大差异,化学成分组成及质量分数存在一定差异.结论 所建立的方法简便、可靠,可用于不同产地何首乌、夜交藤药材的指纹图谱测定和质量评价,为全面有效控制何首乌药材的内在质量提供了依据.     

何首乌药材质量评价研究

目的:采用HPLC特征图谱与主成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)含量综合评价何首乌药材质量。方法:采用HPLC/UV建立何首乌特征图谱分析方法,应用Diamond C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,甲醇和水梯度洗脱,检测波长280 nm;采用HPLC测定二苯乙烯苷含量,Waters Novapak C18(3.9 mm×150 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(13∶87)流动相,检测波长320 nm。结果:对十六个批次的何首乌样品进行了分析,建立了何首乌的高效液相特征图谱;各样品HPLC色谱峰检出率、图谱相似度与二苯乙烯苷含量呈正相关。结论:为何首乌的鉴定和质量评价提供了依据。     

何首乌标准饮片的HPLC特征图谱分析

目的:建立何首乌标准饮片的HPLC特征图谱,并与何首乌原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行对比分析。方法:采用HPLC,Waters BEH-C_(18)色谱柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇(A)-0. 1%磷酸水溶液(B)梯度洗脱(0～20 min,15%～30%A; 20～35 min,30%～40%A; 35～55 min,40%～75%A; 55～75 min,75%～100%A),柱温30℃,检测波长270 nm,流速0. 8 mL·min~(-1),进样量10μL;对何首乌标准饮片及其原形饮片、原料药材、对照药材的HPLC特征图谱进行相似度分析和聚类分析。结果:构建了由7个色谱峰组成的何首乌标准饮片HPLC特征图谱;何首乌标准饮片与原形饮片特征图谱的相似度达0. 999,优于原料药材、对照药材与原形饮片特征图谱的相似度;标准饮片与原形饮片的图谱在色谱峰个数上无明显差异,而对照药材与原形饮片图谱在峰个数上有明显差异;并且标准饮片与原形饮片、对照药材大体上聚为一类,而原料药材大体上聚为一类。结论:相比较原料药材和对照药材,所建立的何首乌标准饮片HPLC特征图谱能更好地反映原形饮片的内在质量,可用于何首乌饮片的质量控制。     

基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别法和薄层色谱生物自显影评价不同生长期毛菊苣药材质量

目的 建立不同生长期(花前期、开花期和成熟期)毛菊苣Cichorium glandulosum地上部位药材的HPLC指纹图谱,结合化学模式识别法和薄层色谱(TLC)生物自显影技术评价毛菊苣药材质量,为其进一步研究与开发提供依据。方法 采用PolyPack C₁₈-AQ色谱柱,以甲醇(A)-乙腈(B)-0.3%磷酸溶液(C)为流动相进行梯度洗脱,检测波长为254 nm,体积流量为1.0 mL/min。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012)》建立不同生长期毛菊苣地上部位药材的HPLC指纹图谱并分析相似度。应用聚类分析(cluster analysis,CA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和偏最小二乘法-判别分析(partial least squares-discriminant analysis,PLS-DA)筛选不同生长期下毛菊苣地上部位药材中具有的差异性化学成分。利用TLC-生物自显影技术对不同生长期毛菊苣药材进行体外抗氧化作用研究。结果 不同生长期下20批次药材HPLC指纹图谱共匹配出12个共有峰,指认出3号峰为秦皮乙素、6号峰为异槲皮苷、7号峰为3,5-O-二咖啡酰奎宁酸。CA将20批不同生长期下药材分为4类;PCA确定了3个主成分因子,累积方差贡献率为78.143%,PCA结果与CA结果基本一致;PLS-DA结果显示色谱峰11、2、6(异槲皮苷)、3(秦皮乙素)和5号峰可作为不同生长期毛菊苣药材质量的差异标志物。样品展开斑点和TLC-生物自显影说明花前期和开花期药材相比成熟期药材具有良好的抗氧化活性作用。结论 利用建立的指纹图谱可为毛菊苣地上部位药材规范化种植以及质量评价提供实验依据。     

千里光药材的HPLC指纹图谱及ESI-MS分析

目的：建立千里光Senecio scandens药材的质量评价方法。方法：采用HPLC-UV对12批千里光药材的指纹图谱进行比较研究，用LC-ESI-MS技术对其共有峰进行分析。结果：获得千里光药材的HPLC指纹图谱，并检出8个共有峰，LC-ESI-MS分析结果表明共有峰主要为绿原酸或黄酮类成分的吸收峰。结论：建立的HPLC指纹图谱可用于千里光的质量评价。     

何首乌药材的薄层色谱指纹图谱质量评价初步研究

目的:建立不同采集地何首乌药材薄层色谱指纹图谱。方法:采用薄层扫描法,定量扫描石油醚-乙酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)和三氯甲烷-甲醇-水[6.5∶2.25∶0.42,pH=4.0(以醋酸-醋酸钠缓冲液调节)]两种展开系统中不同采集地何首乌药材薄层色谱。结果:两种展开系统共获得14个共有指纹峰,依此建立的指纹峰峰高柱状图可直观反映何首乌药材内在质量。结论:薄层色谱指纹图谱可快速有效地区别不同产地的何首乌,并评价其质量。     

根茎类中药精准煮散饮片探索实例—制何首乌

目的：本文对制何首乌精准煮散饮片用药形式进行探索研究。方法：比较制何首乌饮片及煮散饮片的出膏率;比较3批制何首乌饮片及采用相同饮片制备的煮散饮片质量的均一性,并对其化学指纹图谱进行相似度评价,采用相对峰面积比较共有峰含量和质量均一性。应用ITS2序列作为DNA条形码对何首乌原药进行鉴定。结果：制何首乌精准煮散饮片出膏率为原饮片的2.5倍;3批原饮片煎煮液二苯乙烯苷平均含量为3.56±2.61g·mg^-1,RSD为73.28%,煮散饮片煎煮液二苯乙烯苷平均含量为13.23±0.37g·mg^-1,RSD为2.82%;煮散饮片与原饮片的指纹图谱相似度基本一致,但煮散饮片各共有峰的含量、均一性明显提高。ITS2序列对何首乌药材可实现准确鉴定。结论：制何首乌煮散饮片显著提高煎煮率及质量均一性,可节约资源,提高临床疗效。     

3种来源藏紫菀药材的形态学与薄层色谱鉴别研究

对来源于缘毛紫菀Aster souliei、萎软紫菀A. flaccidus和块根紫菀A. asteroides的藏紫菀药材进行了鉴别研究。参照《中国药典》2010年版附录相关方法,对药材进行了性状观察和描述,拍摄了药材照片;对药材粉末进行了显微观察,描述了主要显微特征,并制备了粉末显微图谱;以灯盏甲素和绿原酸为指标性成分,采用薄层色谱法建立了藏紫菀的薄层色谱鉴别方法。3种来源藏紫菀在药材性状和粉末显微特征方面均具有一定的区别,二者结合可以较好的区分3种不同的来源;薄层色谱鉴别结果显示,来源于缘毛紫菀和萎软紫菀的药材薄层色谱图较为一致,块根紫菀具有一定差别。该实验建立的性状、显微和薄层色谱鉴别方法简便、准确、重复性好,可方便、有效地区别3种不同来源的藏紫菀药材。     

牡荆子和黄荆子的定性与定量鉴别研究

目的对牡荆Viter negundo var.cannabifolia子及黄荆Vitex negundo子进行比较研究,为其鉴别提供实验依据。方法采用原植物外观、性状、显微、薄层和HPLC鉴别方法,对黄荆子与牡荆子进行定性定量研究。结果黄荆子与牡荆子在原植物形态、药材性状上相似,通过原植物和性状进行鉴别存在一定困难;显微鉴别中石细胞特征可为两者的有效鉴别提供实验依据;薄层鉴别中以黄荆子素为对照品,黄荆子中黄荆子素丰度明显高于牡荆子;HPLC测定中,黄荆子中所含黄荆子素的量高于牡荆子。结论可采用显微、薄层和HPLC方法,结合药材粉末的石细胞特征和黄荆子素量差异对黄荆子与牡荆子进行有效地鉴别。     

两面针商品药材的质量评价

目的:对市售两面针商品药材进行质量调查和评价。方法:参照2010年版《中国药典》两面针项下方法,对18批两面针商品药材进行性状鉴别、薄层色谱及高效液相法检测氯化两面针碱含量,并建立两面针HPLC指纹图谱方法,结合相似度评价对样品药材进行鉴别分析。结果:样品性状,薄层鉴别和含量测定的结果显示,9批药材有伪品掺杂现象;样品总灰分的含量是2.4%~6.4%,水分含量是7.0%~12.1%,醇溶性浸出物含量是2.2%~8.6%;HPLC测定中有2批样品检测不到氯化两面针碱,11批样品图谱与对照指纹图谱相似度低于0.8;18批药材均不符合2010年版《中国药典》标准。结论:目前市场上的两面针药材品质参差不齐,伪品掺杂现象比较严重。     

枸杞叶新资源药材的生药学研究

目的：对枸杞叶生药学进行研究,为其新资源药材质量标准的建立提供参考。方法：分别采用形态组织学法和薄层色谱法研究枸杞叶性状、显微及薄层色谱特征,并采用高效液相色谱法(HPLC)对枸杞叶中的甜菜碱进行定量分析。结果：系统描述了枸杞叶药材性状和显微特征,主要包括枸杞干燥叶颜色、形状、大小及叶端、叶柄等性状特征。观察到叶柄密布棒槌状小腺毛、主脉下表面圆齿状等微性状特征;叶横切面显微图完整且详细地呈现了下陷气孔、腺毛、砂晶囊、簇晶、方晶、栅栏组织、厚角组织等重要特征;叶表面有不定式气孔和不等式气孔类型,观察到保卫细胞的形状和大小等特征;得到枸杞叶中芦丁和绿原酸的薄层色谱图;20批宁夏枸杞叶中甜菜碱的平均质量分数为4.856%。结论：在《宁夏中药材标准》《宁夏中药饮片炮制规范》中宁夏枸杞叶标准的基础上,进一步丰富了其性状和显微特征的描述,首次对其微性状特征进行了描述,建立了枸杞叶薄层色谱鉴别和HPLC含量测定方法。     

壮族药旱田草质量标准

目的:建立旱田草药材的质量控制标准,为其药用植物资源的开发利用提供科学依据。方法:对旱田草药材进行性状及显微鉴别研究;以毛蕊花糖苷为对照品,采用薄层色谱法对旱田草进行定性鉴别;按2015年版《中国药典》附录方法对各产地药材进行水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物测定;采用高效液相色谱法测定旱田草中毛蕊花糖苷的含量。结果:对旱田草药材的性状、显微特征进行了描述,且薄层色谱图中各斑点分离度好、清晰,鉴别特征稳定可靠;拟订旱田草药材中水分不得过13.00%,总灰分不得过21.00%,酸不溶性灰分不得过10.00%,醇溶性浸出物不得少于15.00%;毛蕊花糖苷的质量分数不得少于0.20%。结论:所建立的方法操作简便、准确可靠,重复性好,制订的标准限度合理,可用于旱田草药材的质量控制。     

薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用探讨

薄层色谱鉴别在历版《中国药典》中的应用经历了从无到有、从少到多的过程；而薄层扫描含量测定在最近几版《中国药典》中的应用比例逐渐降低。随着对中药质量标准体系要求的进一步提高，薄层色谱法的不足之处陆续显现，如仪器普及率低、设备并不简单、结果重复性和稳定性较差、鉴别速度及准确性不及高效液相色谱法、展开剂毒性大等，逐渐不合时宜。在制定中药质量标准时，研究者不应该墨守成规，薄层色谱鉴别也不应该是雷打不动的定性鉴别必备选项。高效液相色谱法具备完全取代薄层色谱法的可行性，薄层色谱法可作为高效液相色谱法的补充。为充分降低检测成本、缩短检测周期、提高鉴别效率，笔者建议中药质量标准体系应该大幅减少薄层色谱鉴别方法的应用，增加高效液相特征图谱鉴定，尽量做到“一个条件，一张图谱”；除非确有必要，《中国药典》等国家质量标准体系应将薄层色谱鉴别作为推荐方法，而非强制标准。     

意大利牛舌草与其易混淆品的鉴定

目的:研究建立意大利牛舌草及其易混淆品的鉴别方法,为意大利牛舌草的质量控制提供依据。方法:采集不同产地的意大利牛舌草及其混淆品,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别和DNA分子鉴别方法,对意大利牛舌草及其混淆品进行鉴别研究。结果:意大利牛舌草与琉璃苣、倒提壶在显微、薄层色谱有较为明显的差异,DNA分子鉴定表明,意大利牛舌草及其混淆品的最小种间K-2-P距离大于种内最大K-2-P距离,邻接法(NJ)树中意大利牛舌草的样品聚为一支,琉璃苣、倒提壶混淆品分别表现出单系性,可明显区分开。结论:该文在对意大利牛舌草及混淆品的茎、粉末显微特征比较研究的基础上,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别与DNA分子鉴定手段相结合的综合鉴别模式,确定了意大利牛舌草及其混淆品的鉴别要点,DNA分子鉴定技术对于意大利牛舌草及其混淆品的鉴别有较大的优势,该法专属性强、灵敏度高,是传统鉴别技术的重要补充,具有较大的潜力和应用前景。建议进一步提高和完善意大利牛舌草的质量标准,加强意大利牛舌草的质量控制。     

《中国药典》鹿衔草质量标准修订的研究

目的 针对《中华人民共和国药典》（以下简称《中国药典》）2020年版中鹿衔草药材标准存在的问题和局限性，对其质量标准进行改进和完善，为《中国药典》2020年版鹿衔草药材质量标准的修订提供参考。方法 采用显微鉴别法与薄层色谱法对鹿衔草的鉴别项进行研究，增加了粉末显微鉴别，修订了薄层鉴别中的薄层板和展开剂；增加了鹿衔草质量标准中有关杂质的检查项；采用高效液相色谱法对鹿衔草中的水晶兰苷含量测定方法进行了改进，修订了供试品溶液制备方法。通过直观分析和主成分分析（PCA）对14批鹿衔草样品部分检验项目的测定结果进行分析与评价。结果 粉末显微鉴别法使标准控制更为完善；与原标准的薄层鉴别项比较，新建方法通用性好，斑点清晰；建立的含量测定方法准确、简便、快速、重复性好，对不同仪器和不同色谱柱的适应性好；直观分析和PCA的结果均显示杂质是影响鹿衔草质量的重要因素。结论 增加和修订的检测项目简便可行、重复性好，可用于鹿衔草药材的质量控制。     

沙苑子及其伪品直立黄芪的显微鉴别研究

直立黄芪种子与沙苑子在外观形态上极为相似,是市场上常见的沙苑子伪品之一,其外观性状鉴别以及荧光法、紫外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法和蛋白电泳法等鉴别方法均有报道,但显微鉴别的相关报道较少.该文对沙苑子正品(扁茎黄芪种子)及其伪品直立黄芪种子进行了外观性状及显微鉴别研究,结果表明沙苑子和直立黄芪种子在颜色、形状上略有差异,在种皮和种脐的显微结构、子叶细胞中脂肪油滴的分布上与直立黄芪种子有显著差异.因此,显微鉴别可区别沙苑子和直立黄芪种子,为沙苑子药材鉴别提供科学依据.     

Seasonal Variation, Microscopic and Chromatographic Analysis of Leaves in Malus hupehensis: A Protocol for Its Quality Control

Objective To establish a quality control protocol based on microscopic, TLC, and HPLC methods, and to verify the optimal harvesting time for the leaves of Malus hupehensis(LMH). Methods The LMH were pulverized into powder for microscopic identification or TLC and HPLC analysis after ultrasonic extraction with methanol. Seasonal variations of the phlorizin content and average leaf weight were determined by HPLC analysis and weighing up the leaves collected from May to October. Results Microscopic and macromorphologic characteristics have been described for the leaf identification. A qualitative TLC assay and a quantitative HPLC method have been established for the quality control of LMH. Phlorizin was selected as a reference marker, which resolved at Rf 0.53 in TLC assay and at 14.0 min in HPLC assay. The content of phlorizin decreased gradually from 17.0% in leaves collected in May to 7.5% in October. The average leaf weight reached the level of 0.6 g in August and maintained until its falling.Conclusion These methods are simple, selective, accurate, and reliable for the quality control of LMH. The period from late August to early September is suggested as the optimal harvesting time of the LMH.     

降香檀叶的生药鉴定

目的：研究降香檀叶的显微及其活性成分的薄层色谱鉴别特征。方法：采用药材性状、显微及薄层色谱鉴定方法。结果：降香檀叶主要显微鉴别特征为射线细胞、韧皮部细胞等富含草酸钙结晶,下表皮主为平轴式气孔,粉末可见由2个大小悬殊细胞组成且壁疣明显的非腺毛;薄层色谱中两产地降香檀叶中均可检出异黄酮6-羟基-鹰嘴豆芽素A和鹰嘴豆芽素A。结论：该显微鉴别和薄层鉴别方法能有效鉴别降香檀叶。