惠州地区客家人群罕见地中海贫血基因突变分析及产前诊断

目的研究广东惠州地区客家人群罕见地中海贫血基因的突变类型及突变特点,干预中重型地贫儿的出生,为地贫的防控提供科学参考依据。方法收集2014年1月-2017年11月在惠州市中心人民医院进行地中海贫血筛查的客家人群样本2 771例,筛选出符合条件的108例患者采集外周血进行血细胞分析及毛细管电泳血红蛋白分析,用导流杂交法进行常规α和β地中海贫血基因检测,采用多重链接探针扩增技术(MLPA)、DNA测序、缺口PCR (Gap-PCR)技术及血红蛋白持续增多症缺失型电泳等技术分析其罕见基因型。结果检测到62例罕见地贫基因突变,人群突变率约为2. 24%(62/2771)。其中包含6种罕见的α珠蛋白基因突变,分别为泰国型(--THAI)、香港型(HKαα/αα)、两种α三联体(αααanti3. 7、αααanti4. 2)、CD74(GAC>CAC)以及CD30 (-GAG); 8种罕见β珠蛋白基因突变,分别为Vietnamese HPFH、Chinese Gγ+(Aγδβ) 0、-90 (C>T)、-31 (A> G)、CD37 TGG> TAG、CD54-58 (-TATGGGCAACCCT)、IVS-Ⅱ-2 (-T)、及CD39 (-A)。5对一方携带罕见地贫的同型地贫夫妇抽羊水进行了地贫产前诊断,检测到1例为中重型地贫儿,中重型地贫胎儿终止妊娠。结论本研究的数据充实了广东惠州地区客家人群的地贫基因突变图谱。当血液学表型与基因型不符时,在排除缺铁性贫血后应进一步做罕见基因型的检测以避免漏诊或误诊,特别是生育过重型地贫患儿的夫妇。这有助于指导临床诊断、人群筛查和遗传咨询。     

百色地区184例β-地中海贫血患儿基因突变类型分析

目的:研究百色地区β-地中海贫血的基因突变类型及基因频率。方法:采用PCR和β-地中海贫血芯片检测阅读系统(反向点杂交技术),对184例β-地中海贫血患者进行基因分析。结果:184例β-地中海贫血患者中,常见的基因突变位点为41~42M,基因频率为46.20%;其余基因突变位点及其频率为:17M频率为29.35%,β-EM频率为7.61%,17M(纯)频率为4.35%,IVS1-IM频率为3.80%,654M频率为3.80%,71~72M频率为2.72%,41~42M(纯)频率为1.63%,654M(纯)频率为0.54%。结论:本研究初步揭示了百色地区β-地中海贫血的基因突变类型及基因频率,为进行遗传咨询、临床治疗和婚育指导提供了有价值的基础资料。     

β地中海贫血的遗传预防研究概况

<正> β地中海贫血(简称β地贫)是中国南方常见的遗传性血液病。重型β地贫临床上表现为重度贫血、显著地贫外貌、体格发育落后、肝脾肿大,靠输血维持生命,往往少年早夭。目前本病根治尚难,给家庭和社会带来沉重的精神和经济负担,导致人口素质下降,β地贫已构成南方地区严重的公共卫生问题。我国在“九五”期间的目标之一是使广西地区的重型β地贫患儿减少一半。为达此目标,最重要的措施便是遗传预防。遗传预防的主要内容包括加强教育、遗传咨询、β地贫携带者筛查和产前诊断。这些要素组成一个系统,一个整体,削弱任何一个环节都将使整个预防计划失败,达不到预期目标。在我     

240例地中海贫血基因突变类型分析

目的了解广西南宁地区α与β地中海贫血(地贫)的基因突变类型和频率。方法用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(Reverse dot blot,RDB)技术对240例疑诊为地贫基因携带者进行地贫基因分析。结果240例中,检出α地贫127例,其中70例为东南亚缺失型杂合子(--SEA/αα)、右缺失型杂合子(-α3.7/αα)5例、左缺失型杂合子(-α4.2/αα)25例、HbConstant Spring(HbCS)21例、HbQuong Sze(HbQS)2例、Hb Westmead(HbWS)4例。β地贫53例,IVS1-1杂合子3例,CD41-42杂合子24例,CD17杂合子11例,-28杂合子6例,CD654杂合子3例,CD43杂合子2例,CD71-72杂合子4例;α与β复合地贫18例。结论初步阐明广西地区人口中的α与β地贫的基因突变类型和频率,为本地区的地贫基因检测业务提供了理论依据。     

149例β地中海贫血高危胎儿产前基因诊断分析

目的:探讨地贫基因产前诊断对于降低出生缺陷,提高人口质量的重要意义。方法:应用聚合酶链反应结合反向点杂交技术(RDB-PCR)对149份羊水样本进行常见的17种β地贫突变基因检测。结果:受检的149份羊水,未检出β地贫突变基因43例(28.86%);β地贫杂合子70例(46.98%);β地贫纯合子或双重杂合子36例(24.16%)。结论:通过地贫基因产前诊断技术可有效地避免中、重度β地中海贫血患儿的出生,对于降低出生缺陷率,提高人口质量具有重要意义。     

福州地区153例地中海贫血基因突变类型、频率及产前诊断研究

[目的]了解福州地区α与β地中海贫血（地贫）的基因突变类型和频率,探讨产前诊断的可行性。[方法]用聚合酶链反应（PCR）和反向斑点杂交（RDB）技术对241例疑诊为地贫患者进行地贫基因分析,对夫妇双方为东南亚缺失型地贫患者进行产前诊断。[结果]地贫患者检出率为63．5％（153／241）。a地贫69例,其中53例为东南亚缺失型杂合子（-^SEA／αα）,右缺失型杂合子（-α^3.7／αα）10例、左缺失型杂合子（-α^4.2／αα）2例、血红蛋白H病4例（-α^3.7／-^SEA3例,-α^4.2／-^SEA1例）;β地贫82例（IVS2nt654杂合子41例,CD41-42杂合子28例,-28杂合子4例,CD17杂合子4例,27／28杂合子2例,CD26杂合子1例,CD41—42／IVS2nt654双重杂合子2例）;α与β复合地贫2例。对4对夫妇双方均为东南亚型缺失型地贫基因携带者的孕妇行产前诊断,检出重型地贫3例。[结论]初步阐明福州地区人口中的α与β地贫的基因突变类型和频率,有必要开展地贫基因检测和产前诊断。     

广西崇左市中学生地中海贫血流行病学调查及基因突变类型分析

目的 对广西崇左市中学生进行地中海贫血(地贫)流行病学调查,了解地贫基因携带率和地贫基因突变类型.方法 2008年6月10-20口在崇左市所辖7个区县(市)中抽签分别确定一所中学,在志愿参加调查的学生中按当地人口0.5‰比例确定调查人数,检测12～16岁学生1097名(男515名,女582名),其中壮族968名(男438名,女530名),汉族128名(男76名,女52名),瑶族1名(男性).以Cell Dyn 1700全自动血细胞分析仪进行血细胞分析,以血红蛋白自动分析仪--VARIANT进行血红蛋白F和血红蛋白A2(HbA2)定量检测.HbA2≥4%为β地贫另进行α和β地贫基因分析,HbA2≤4%但平均红细胞体积(MCV)≤80 fl的标本进行a地贫基因分析.结果 1097名学生中地贫总检出率为25.62%.其中检出α地贫218例(19.87%),β地贫50例(4.56%),α地贫复合β地贫13例(1.19%).男生检出地贫133例(25.83%),女生检出地贫148例(25.43%),男女生间检出率差异无统计学意义(P>0.05).968名壮族学生检出地贫255例(26.34%),128名汉族学生检出地贫25例(19.52%),壮族学生检出率高于汉族学生,差异有统计学意义(P<0.01).检出3种缺失型α地贫基因(-α3.7/,-α<4.2/和--SEA/)和3种非缺失型α地贫基因(ααCS/、ααWS/和ααQS/),其中ααWS/检出率较高.β地贫基因突变类型以CD41-42最为常见.地贫MCV低于健康对照,差异有统计学意义(P<0.01).在MCV为79～80fl的样本中检出α地贫,如果以MCV<79 fl为地贫表型阳性的指标,则有32例漏诊,漏诊率达2.97%.结论 广西崇左市中学生地贫基因携带率高,壮族学生检出率高于汉族学生;ααWS/检出率较高,β地贫基因突变类型以CD41-42最为常见.     

α和β地中海贫血无创产前诊断研究进展

地中海贫血是我国南方地区最常见的一种单基因遗传病,难以治愈且代价昂贵,通过穿刺术采集高风险胎儿的遗传物质进行产前基因诊断,防止重型患儿出生是国内外公认的首选措施。通过穿刺手术采集绒毛、羊水或脐带血而获取胎儿遗传物质进行产前诊断的有创性操作,可能造成胎儿损伤、流产或宫内感染等。自从母体血浆中发现存在胎儿DNA,以此胎儿遗传物质为检测靶标的无创产前诊断技术迅速发展。基于此类游离胎儿DNA的无创产前诊断更安全,且易于被受试者接受,也避免了获取胎儿遗传物质的创伤性操作导致的不必要风险。综述地中海贫血无创产前诊断的技术策略及其应用。     

广西三城市7岁以下儿童13地中海贫血发生率及其基因突变类型的研究

目的 对广西南宁、柳州、百色地区7岁以下儿童进行β地中海贫血发生率及基因突变类型分析.方法 按分层整群随机抽样方法,抽取南宁、柳州和百色地区7岁以下儿童共2261名,进行血常规检测、血红蛋白(Hb)分析和β珠蛋白基因分析.结果 2261名儿童中,Hb分析显示125名HbA2升高,经基因分析诊断为β地中海贫血杂合子.β地中海贫血的发生率为5.53%.共检出CD41-42基因突变59例,CD17基因突变33例,TATA box nt-28基因突变18例,IVS-Ⅱ-654基因突变7例,CD43基因突变3例,HbE基因突变3例,CD71-72基因突变1例,及TATAbox nt-29基因突变1例.基因型频率依次为:CD41-42为47.20%、CD17为26.40%、TATAbox nt-28为14.40%、IVS-Ⅱ-654为5.60%、CD43为2.40%、HbE为2.40%、CD71-72为0.80%和TATAbox nt-29为0.80%.结论 研究显示调查的3个地区地中海贫血发生率较高;7岁以下儿童中存在β地中海贫血基因突变携带者.     

β-地中海贫血表型儿童地中海贫血基因突变分析

目的:了解本地区β-地中海贫血表型儿童中地中海贫血发生情况、基因突变类型。方法:选取2010年1月~2014年6月在该院就诊的1 713例β-地中海贫血表型儿童进行β-地中海贫血基因检测,确诊为β-地中海贫血者再进行α-地中海贫血基因检测。结果:1 713例β-地中海贫血高危儿童中确诊为β-地中海贫血儿童1 428例(83.36%),其中合并α-地中海贫血222例(15.55%)。共发现11种突变、30种基因类型中以CD41-42(-TCTT)(42.23%)和CD17(A→T)(27.31%)杂合子突变为主,双重杂合子突变111例(7.77%),纯合子突变42例(2.94%)。6种α-地中海贫血突变、11种基因类型中以--sea(31.99%)、αWSα(18.91%)和-α3.7(18.47%)突变杂合子最常见,Hb H病3例(1.35%),其中合并β-地中海贫血双重杂合子和纯合子突变30例(13.51%)。结论:本地区儿童地中海贫血突变类型、基因类型多样,中重型β-地中海贫血及α-合并β-地中海贫血发生率高,应加强地中海贫血干预工作,以避免中间型或重型地中海贫血儿的出生。     

佛山市南海区地中海贫血基因类型分析

目的通过调查佛山市南海区地中海贫血基因的基因类型和构成比,了解本地区的地中海贫血基因型的分布,为防控本地区重型地贫的出现提供依据。方法采用gap-PCR法检测--~(SEA)/αα,-α~(3.7)/αα,-α~(4.2)/αα3种常见缺失型α地贫;采用反向斑点杂交法,可以检测α~(QS)α,α~(CS)α,α~(WS)α3种常见突变型α地贫;采用反向点杂交法检测β-地贫常见的17种点突变,包括-29、-28、17、βE、41-42、43、71-72、654、Int、14-15、27/28、Ⅰ-1、Ⅰ-5、31、-30、CAP、-32。结果检测α-地中海贫血缺失型1 359例标本,检出阳性标本490例,阳性率为36.06%(490/1359)。主要缺失类型是--~(SEA)/αα、-α~(3.7)/αα、-α~(4.2)/αα;进行α-地中海贫血突变型检测的有1 210例,阳性率为2.8%(35/1 210)。进行β-地中海贫血突变型检测的有1 073例,阳性率为24.98%(268/1 073),主要类型是CD41-42、IVS-Ⅱ-654、CD17、-28;共检出41例复合型地贫,其中α缺失合并α突变的有4例,α-地贫合并β-地贫有37例。结论本研究为佛山市南海区的遗传咨询和制定该地区人群筛查的地贫预防计划提供了有价值的基础资料。     

胎血HbA定量分析诊断β地中海贫血的价值

目的 探讨胎儿脐血HbA定量在孕中、晚期诊断β地中海贫血(β地贫)的价值。方法 应用全自动电泳分析系统对75例胎儿脐血行血红蛋白(Hb)电泳并作HbA定量分析；用反向点杂交(RDB)法检测β地中海贫血基因DNA为诊断的金标准。结果 电泳法对重型、中间型B地贫及HbE的检出灵敏度、特异度和符合率较高，误诊率及漏诊率为0，而对轻型β地贫及其他类型的检出灵敏度、特异度及符合率较低，误诊率、漏诊率较高。结论 胎儿脐血HbA定量结合家系史可实现生化水平上对孕中晚期胎儿β地中海贫血的初步诊断，反向点杂交法结合HbA定量分析有利于提高B地贫的诊断准确率。     

2例罕见地中海贫血家系分析及产前诊断

目的 对2例罕见地中海贫血(地贫)家系进行分析及产前诊断。方法 采集家系成员外周血进行血细胞分析及毛细管电泳血红蛋白分析;采集外周血及羊水,用导流杂交法进行常规α和β地中海贫血基因检测;采用多重链接探针扩增技术(MLPA)、DNA测序、缺口PCR(Gap-PCR)技术及血红蛋白持续增多症缺失型电泳等技术分析其罕见基因型。结果 在2个家系中检测到1例罕见的越南型缺失β地中海贫血及1例东南亚缺失型α地贫复合α2基因CD124点突变;并对2个家系进行了产前诊断,检测到1个胎儿为越南型缺失β地中海贫血,另一个为东南亚缺失型α地贫。结论 当血液学表型与基因型不符时,应进一步做罕见基因型的检测以避免漏诊或误诊,特别是生育过重型地贫患儿的夫妇。这有助于指导临床诊断、人群筛查和遗传咨询。     

优生门诊患者β-地中海贫血基因结果分析

目的 回顾分析优生门诊患者β-地中海贫血基因诊断结果,了解不孕不育、有不良孕育史人群β-地中海贫血基因携带情况.方法 血液学筛查β-地贫阳性指征者,应用PCR结合反向斑点杂交法(RDB)进行β-地贫基因分析.结果 457例患者进行β-地贫基因检测,115例患者被检出β-地贫,共检出9种β-地贫基因突变类型,均为杂合子.发生频率最高的五种突变类型,按其发生频率从高到低依次为:CD41-42占32.17％.IVS-Ⅱ-654占22.61％;-28占20.87％;CD17占13.04％;CD71-72占4.35％.结论 不孕不育、有不良孕育史人群主要的β-地贫基因突变类型与其他人群无差异,做好孕前检查和必要的产前诊断对不孕不育、有不良孕育史的夫妇尤为重要.     

福建地区269对同型地中海贫血基因携带者夫妇产前基因诊断结果分析

目的:了解同型地中海贫血(简称地贫)基因携带者夫妇胎儿基因诊断情况,为遗传咨询提供依据。方法:2008年5月~2014年12月在本院确诊均为同型地贫基因携带者夫妇269对(同为α地贫基因携带者177对,同为β地贫基因携带者87对,其中一方为复合α、β地贫携带者5对),通过胎儿绒毛、羊水、脐血获取胎儿标本提取DNA,应用Gap-PCR和PCR结合反向斑点杂交技术等方法进行α、β地贫基因诊断,胎儿标本同时行染色体核型分析。产前诊断后1年随访妊娠结局。结果:177对α地贫基因携带者夫妇产前基因诊断结果为46例(26.0%)正常;68例(38.4%)杂合子;63例(35.7%)严重型地贫基因,其中55例巴氏水肿胎(51例东南亚缺失型纯合子,4例少见泰国缺失型α地贫1和东南亚型双重杂合子),8例HbH病。87对β地贫基因携带者夫妇产前基因诊断结果为23例(26.4%)正常;39例(44.8%)杂合子;25例(28.7%)严重型地贫基因,其中9例纯合子及16例双重杂合子。5对一方为复合α、β地贫携带者夫妇中产前基因诊断结果正常1例,地贫杂合子2例,α、β复合地贫1例,β地贫双重杂合子1例。266例胎儿细胞染色体核型分析正常,3例胎儿核型异常,分别为21三体1例、13三体1例、45,X1例。63例严重类型α地贫胎儿、26例严重类型β地贫胎儿、3例染色体异常胎儿均在孕期引产。结论:同型地贫基因携带者夫妇胎儿基因诊断可检出Hb Bart’s胎儿水肿综合征、Hb H病等重中型α地贫胎儿,以及β地贫纯合子、双重杂合子重型β地贫胎儿,应重视罕见突变基因型的检测,检测地贫基因同时应行染色体检查以排除染色体病。     

β-地中海贫血不同分型、基因突变类型及其对输血的疗效

目的探讨本地区β-地中海贫血患儿不同分型及其基因突变类型,同时评估不同基因分型对输血的疗效。方法收集156例确诊β-地中海贫血儿童,根据临床表现及实验室检查将患儿分为轻型、中间型和重型,分析不同类型患儿其基因突变类型,并分别输同型红细胞2单位,1周后评估患者血红蛋白含量。结果由轻型到重型,患儿红细胞计数、血红蛋白含量及网织红细胞数量逐渐减少;轻型患儿其主要基因突变为CD17M/N和CD41-42M/N;中间型患儿主要基因突变为CD41-42M/CD41-42M、IVS-I-M和CD71-72M/N;而重型患儿主要基因突变为41-41M/17M和CD17M/CD17M;不同基因分型患儿对输血具有不同的疗效。结论本地区不同分型β-地中海贫血具有不同的基因突变类型,且不同基因分型对输血具有不同的疗效。     

婚前β地中海贫血的大人群筛查及预测性产前诊断

为了阐明珠海市这座新兴的“移民城市”人群中β地贫的携带率及其基因背景并进行预测性前前诊断，作者对婚前检查对查对象进行该病血液学筛查后，再采用ＰＣＲ／异源双链分析法和反向点杂交法（ＲＤＢ）确定阳性病例的基因型，结果９８５４人例行婚检对象中检出地贫阳性病例２２７人，β地贫的携带率为２．３０％。     

少数民族β-地中海贫血基因突变型分布特点

目的 了解β-地中海贫血在贵州省苗族、水族、瑶族中的基因突变型特点、基因型频率及分布规律。方法 采用“红细胞休克-管定量法”测定红细胞脆性，HbF和HbA2定量等方法对人群进行β-地中海贫血初筛，用常规酚-氯仿抽提法提取β地中海贫血携带者DNA，经PCR-反向点杂交法对β株蛋白进行突变基因分析。结果 受检2566人中，共检出134例β-地中海贫血携带者，总检出率为5．22％，其中苗族、水族、瑶族检出率分别为4．72％．6．06％，4．45％。经8珠蛋白突变基因分析，在这3个民族中仅检出两种中国人常见突变型CD41-42和CD17,检出率分别为88．1％，60．0％，23％。结论 在贵州省少数民族中β-地中海贫血有很高的发病率，基因突变类型具有显著的民族特征，并且提示在贵州省少数民族中有可能存在未知或罕见的突变类型。     

江西省部分地区1630例地中海贫血基因突变类型分布研究

目的了解江西省部分地区(包括赣州、南昌、宜春、吉安、萍乡) α、β-地中海贫血基因突变类型的分布,为该省地中海贫血防控提供参考依据。 方法收集2015年5月至2016年12月送江西金域医学检验所检测的3178例疑为地中海贫血患者的血液标本,采用跨跃断裂点PCR(gap-PCR)和PCR-膜反向点杂交(reversedot blot,RDB)技术对其进行地贫基因检测。 结果在3178例标本中,共检出地贫携带者1630例,其中包括α-地贫携带者915例,占56.13%,β-地贫携带者657例,占40.31%,α-地贫复合β-地贫携带者58例,占3.56%。α-地贫以αα/--SEA基因型突变为主,β-地贫以IVS-II-654、CD41-42杂合子基因型突变为主,α-地贫复合β-地贫以--SEA/β-地贫基因型突变为主。成年组阳性检出率与婴儿组、儿童组相比,差异无统计学意义(χ²=0.021、0.181,P>0.05)。 结论江西省部分地区地贫基因突变携带率相对较高,需引起高度重视,加强婚前筛查及产前诊断工作,为预防患儿的出生提供有效的指导。