骨关节炎、类风湿关节炎的关节滑液和血清中基质金属蛋白酶-1、2、3和9的含量及意义

目的探讨骨关节炎(OA)和类风湿关节炎(RA)的关节滑液和血清中基质金属蛋白酶(MMPs)含量的变化。方法采集17例非OA、RA患者(对照组)、33例OA患者(OA组)和10例RA患者(RA组)血清及关节滑液标本,采用酶联免疫吸附试验检测标本中MMP-1、2、3及9的含量。结果OA、RA组血清中MMP-2、3及9的含量分别为(17．1±6．9)、(3．6±0．2)、(2．7±0．4)ng／mL和(91．2±23．9)、(7．3±0．5)、(2．7±0．5) ng／mL,均显著高于对照组[(2．1±0．3)、(1．4±0．4)和(0．5±0．3)ng／mL,P值均<0．01];而MMP-1的含量分别为(20．7±7．8)和(19．0±2．8)ng／mL,与对照组[(18．7±5．2)ng／mL]的差异无统计学意义(P值均> 0．05)。OA、RA组关节滑液中MMP-1、2、3和9的含量分别为(557．4±41．5)、(1 246．0±42,0)、(384．3±44．6)、(15．2±1．4)ng／mL和(644．4±27．3)、(2 470．0±209．0)、(429．1±34．6)、(20．9±1．0)ng／mL,均显著高于对照组[(106．2±32．9)、(112．7±18．6)、(33．0±8．7)和(0．6±0．3)ng／mL,P值均<0．01]。RA组血清中MMP-2、3的含量均显著高于OA组(P值均<0．01),而两组血清中MMP-1、9含量的差异均无统计学意义(P值均>0．05);RA组关节滑液中MMP-1、2、3和9的含量均显著高于0A组(P值均<0．01)。结论OA、RA患者的关节滑液及血清中部分MMPs含量升高,且RA患者的MMPs含量高于OA患者。     

鼻息肉中MMP-2、MMP-9的表达及意义

目的 探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在观察组织、正常组织中表达程度的差异性.方法 选取45例为观察组、15例为对照鼻甲组,采用实时荧光定量RT-PCR方法检测标本中MMP-2、MMP-9的表达情况并行相关分析.结果 与对照组比较,观察组MMP-2、MMP-9的表达量明显增加(P＜0.05).结论 MMP-2、MMP-9在观察组织中表达增高,可能与鼻息肉发生、发展相关.     

胃癌患者血清中MMP-2和MMP-9的临床意义研究

目的探讨基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、9)检测在胃癌患者诊治中的意义。方法采用酶联免疫吸附法检测51例胃癌患者,31例健康者血清中的MMP-2和MMP-9的含量。结果胃癌患者血清中和MMP-9的含量明显高于健康者;胃癌患者血清中MMP-2和MMP-9的含量与胃癌的临床分期及预后明显相关,而与性别、年龄、肿瘤大小及分化程度无关;血清中MMP-2和MMP-9存在相关性;手术前后胃癌患者血清中MMP-2和MMP-9的含量具有显著性差异。结论检测血清中MMP-2、MMP-9的浓度对胃癌的诊断、治疗、预后评估及监测病情的进展有重要意义。     

膀胱癌组织中MMP-2和MMP-9的表达及其意义

目的:探讨膀胱癌中MMP-2和MMP-9表达的临床意义.方法:采用免疫组化方法对72例膀胱移行细胞癌及10例肾囊肿组织和10例正常膀胱粘膜组织中MMP-2和MMP-9进行染色,观察其与肿瘤的发生及分期、分级的关系.结果:MMP-2在膀胱癌组织、肾囊肿组织中阳性表达率分别为83.33%(60/72)和20.00%(2/10);MMP-9在膀胱癌组织、肾囊肿组织中阳性表达率分别为72.22%(52/72)和70.00%(7/10),MMP-2、MMP-9在正常膀胱粘膜组织中无1例阳性表达,三者阳性率比较,差异有统计学意义(P＜0.01);在癌组织Ta～T1、T2～T4、Ⅰ和Ⅱ～Ⅲ中MMP-2阳性率分别为56.67%(17/30)、76.19%(32/42)、72.00%(18/25)和78.72%(37/47),MMP-9阳性率分别为70.00%(21/30)、73.81%(31/42)、73.00%(19/25)和82.98%(39/47),随肿瘤分级的增高,MMP-2和MMP-9的表达显著增强(P＜0.01,P＜0.05).结论:MMP-2和MMP-9在膀胱移行细胞癌的发生和侵袭过程中起到了重要作用.     

血清中MMP-2、MMP-9水平与乳头状甲状腺癌关系的分析

目的探讨基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases,MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases,MMP-9）与乳头状甲状腺癌的关系。方法采用酶联免疫吸附法测定30例健康者（对照组）和30例甲状腺腺瘤患者及32例乳头状甲状腺癌患者血清中MMP-2和MMP-9的水平,分析其与乳头状甲状腺癌之间的关系。结果乳头状甲状腺癌组血清中MMP-2和MMP-9的水平显著高于甲状腺腺瘤组和健康对照组（P〈0．01）。甲状腺腺瘤组和健康对照组之间没有差异（P〉0．05）。结论血清中MMP-2和MMP-9水平的检测对乳头状甲状腺癌患者的诊断有重要的临床意义。     

刺山柑果风湿止痛贴结合艾灸治疗对类风湿性关节炎大鼠TNF-α、IL-1β、VEGF和滑膜组织MMP-9表达的影响

目的 观察刺山柑和艾灸对类风湿性关节炎大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1β)和血管内皮生长因子(VEGF)含量,以及滑膜组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9蛋白)表达的影响.方法 将60只大鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、刺山柑组、艾灸组和综合组,采用足跖皮下注射完全弗氏佐剂建立类风湿...     

MMP-7、MMP-9及其抑制剂TIMP-3在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义

目的 探讨基质金属蛋白酶(MMP-7、MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制物(TIMP-3)在骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达和意义.方法 对40例膝关节滑膜标本应用SABC免疫组化法显色MMP-7、MMP-9及TIMP-3在病变组和正常组的表达,并用HE染色观察细胞形态.结果 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达在正常关节滑膜与重度骨性关节炎患者膝关节滑膜中的表达有显著差异(P<0.05).结论 MMP-7、MMP-9及TIMP-3的表达是骨性关节炎重要的标志性诊断指标.     

类风湿关节炎滑液MMPs表达与血清免疫球蛋白的相关性研究

目的:分析类风湿关节炎(RA)患者关节滑液中MMP(基质金属蛋白酶)-1、MMP-3的表达和血清免疫球蛋白IgG、IgM水平及相关性。方法:根据DAS28积分将42例RA患者分为:RA活动组(DAS28评分≥3.2)和RA缓解组(DAS28评分≤2.6);正常对照组27例。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测RA患者滑膜液中MMP-1、MMP-3水平;采用免疫散射比浊法测定滑膜液中免疫球蛋白IgG及IgM水平;并对MMP-1、MMP-3与IgG、IgM的关系进行相关性分析。结果:①RA患者组MMP-1及MMP-3水平均较正常对照组高(P<0.05),RA活动组MMP-1及MMP-3的表达均显著高于RA缓解组(P<0.05);②RA活动组IgG及IgM水平均显著高于RA缓解组及正常对照组(P<0.05);③RA患者滑液中MMP-1、MMP-3与血清中IgG及IgM均呈显著正相关(P<0.05)。结论:RA患者滑液MMP-1、MMP-3及血清IgG、IgM表达异常,与疾病活动度密切相关;滑液MMP-1、MMP-3及血清IgG、IgM的直线相关性提示,抑制RA体液免疫反应,下调MMPs表达可能是缓解RA骨质破坏的有效治疗方法。     

口腔扁平苔藓中MMP-2和MMP-9的表达及意义

[目的]探索MMP-2和MMP-9与口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)的发生、发展乃至癌变潜能的关系。[方法]采用免疫组化SP法检测MMP-2和MMP-9在22例OLP、11例正常口腔黏膜组织、22例白斑和22例口腔鳞癌组织表达。[结果]在正常口腔黏膜、扁平苔藓、白斑和鳞癌组织中MMP-2和MMP-9的表达依次增加。MMP-2和MMP-9在口腔扁平苔藓和白斑中的表达显著高于正常口腔黏膜(P<0.05),但在口腔扁平苔藓和白斑间的表达差异无显著性意义(P>0.05);在鳞癌中的表达显著高于其他3组(P<0.05)。[结论]MMP-2和MMP-9表达与OLP的发生、发展乃至癌变潜能有关。     

穿山龙水溶性总皂苷对RSC-364细胞分泌MMP-2和MMP-9的影响

目的：观察穿山龙水溶性总皂苷对大鼠滑膜成纤维细胞系RSC-364细胞分泌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和MMP-9的影响。方法：应用肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素17（IL-17）刺激RSC-364细胞建立类风湿性关节炎细胞模型,并以不同剂量穿山龙水溶性总皂苷进行干预,ELISA法检测细胞培养液上清MMP-2和MMP-9的水平。结果：穿山龙水溶性总皂苷各剂量组（10、20、30mg/L）在不同时间点（24、48、72h）均可明显降低TNF-α和IL-17刺激的RSC-364细胞分泌MMP-2、MMP-9水平的升高,并呈剂量依赖性（P＜0.05）。结论：穿山龙水溶性总皂苷可能通过抑制RSC-364细胞分泌MMP-2和MMP-9发挥抗类风湿性关节炎的作用。     

类风关和骨关节炎关节液中溶菌酶及乳铁蛋白测定

对膝关节类风湿性关节炎及骨关节炎各４０例患者的关节液中溶菌酶和乳铁蛋白的含量进行测定，发现类风湿性关节炎关节液中溶菌酶及乳铁蛋白含量分别为１５．７５±０．４１、１００．４±１４．５２μｇ／ｍｌ，显著高于正常对照的５．７７±０．３９、５６．５１±４．２０μｇ／ｍｌ，亦明显高于骨关节炎的９．３６±２．５６、５８．２±７．２６μｇ／ｍｌ．说明类风湿性关节炎关节软骨的破坏是多形核白细胞释放的溶菌酶及活跃的氧自由基共同作用所致，以前者更为显著，乳铁蛋白的抗氧化作用不能防止关节软骨破坏的发生。骨关节炎关节液中溶菌酶较正常对照明显增高，且与软骨破坏程度呈正比，但乳铁蛋白增高却不明显，提示骨关节炎关节软骨破坏与软骨细胞退变破坏有关，而非多形核白细胞作用的结果。     

类风湿关节炎患者关节滑膜液免疫细胞功能分析

目的分析类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者关节滑膜液免疫细胞功能,并探讨其免疫功能紊乱的机制。方法收集2003年8月～2006年8月在浙江大学医学院附属医院骨科住院的20例RA患者及10例因外伤截肢患者的关节滑膜液,采用流式细胞仪分析关节滑膜液免疫细胞协同刺激分子CD28、CD154(CD40L)、CD80、CD86、CD40和淋巴细胞活化标志CD69、CD25、HLA-DR、CD71的表达,并用酶联免疫吸附法(ELISA)检测滑膜液中Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ的水平和Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平。结果RA患者关节滑膜液巨噬细胞CD80、CD86表达阳性率与正常对照组相比差异具有显著性[分别为(2.09±0.59)%vs(0.67±0.57)%,P<0.01;(0.39±0.18)%vs(0.21±0.11)%,P<0.05];淋巴细胞活化标志CD25、CD71表达阳性率与正常对照组相比差异亦具有显著性[分别为(6.97±2.83)%vs(3.83±1.84)%,P<0.01;(32.53±8.33)%vs(21.84±9.27)%,P<0.01];同时滑膜液中Th1细胞分泌的细胞因子IL-2、IFN-γ的水平均明显升高[分别为(158.83±48.83)pg/mlvs(72.33±21.92)pg/ml,P<0.01;(145.92±53.72)pg/mlvs(83.67±33.04)pg/ml,P<0.05],而Th2细胞分泌的细胞因子IL-6、IL-10的水平均明显降低[分别为(77.33±18.73)pg/mlvs(103.33±16.12)pg/ml,P<0.05;(57.83±18.85)pg/mlvs(84.67±18.96)pg/ml,P<0.05]。结论RA患者关节滑膜液免疫细胞协同刺激分子的异常表达可能与RA患者炎症局部Th1/Th2细胞及其分泌的细胞因子水平失衡及淋巴细胞过度活化密切相关,这将为RA的临床免疫治疗开辟新的途径。     

Expression of miRNA-140 in Chondrocytes and Synovial Fluid of Knee Joints in Patients with Osteoarthritis

Objective To investigate the expression of miRNA-140 in chondrocytes and synovial fluid of osteoarthritis (OA) patients, and explore the relationship between the miRNA-140 expression and OA severity.
Methods This study enrolled 30 OA patients who underwent total knee arthroplasty for chondrocytes sampling and 30 OA patients who underwent intra-articular injection for synovial fluid sampling. All OA patients were grouped intomild [Kellgren and Lawrence (KL) grade 1-2], moderate (KL grade 3) and severe (KL grade 4), with 10 in each subgroups for each sampling purposes. 7 non-OA patients and 10 patients with knee injury were collected for cartilage and synovial fluid sampling respectively as control groups. Chondrocytes were isolated from the cartilage tissue and culturedin vitro. Quantitative real time PCR for miRNA-140 in chondrocytes and synovial fluid were performed, and the U6 snRNA was used as internal control. The expression difference of miRNA-140 among groups and correlation between the expression and the KL grade of OA were analysed using one-way ANOVA and Spearman test respectively.
Results The expression of miRNA-140 in chondrocytes of knees in OA patients was reduced than that in normal knees, and the between-group difference was statistically significant (F=305.464,P<0.001). miRNA-140 could be detected in synovial fluid of both normal knees and OA knees, its relative expression level was reduced in synovial fluid of OA group compared with normal group, and the between-group difference was statistically significant as well (F=314.245,P<0.001). The relative expression level of miRNA-140 in both chondrocytes and synovial fluid were negatively correlated with the KL grade of OA(r=-0.969,P<0.001;r=-0.970,P<0.001).
Conclusion miRNA-140 could be detected in chondrocytes and synovial fluid of OA patients, and its expression was negatively correlated with the severity of OA.     

干扰素-γ诱导单核细胞因子(MIG)在类风湿关节炎患者滑膜液及血清中的表达及意义

目的分析类风湿关节炎(RA)患者滑膜液及血清中干扰素(IFN)-γ诱导单核细胞因子(MIG)水平变化,探讨MIG在RA的临床意义。方法应用酶联免疫吸附法(ELISA)技术检测RA患者滑膜液及血清中MIG及IFN-γ水平,分析MIG与IFN-γ及临床指标的关系。结果滑膜液中,RA患者MIG及IFN-γ水平明显高于对照组(P均<0.01),MIG与IFN-γ水平呈正相关(r=0.486,P=0.035);血清中,RA患者活动组MIG及IFN-γ水平明显高于稳定组(P均<0.01),而后者又明显高于对照组(P均<0.01),RA活动期患者MIG与IFN-γ水平呈正相关(r=0.304,P=0.043);30例活动期RA患者治疗前MIG及IFN-γ水平明显高于治疗后(P均<0.01),且治疗前后MIG水平的变化与RF、ESR、CRP的变化无相关性(P均>0.05),与DAS28的变化呈正相关(r=0.405,P=0.029)。结论 RA患者的血清及滑膜液中存在异常增高的MIG,且其水平与病情活动相关,可作为RA病情活动新的参考指标,血清中MIG水平变化可为RA的疗效提供参考。     

膝骨关节炎患者滑液中炎症因子的表达及其与中医证型的相关性分析

目的分析膝骨关节炎（KOA）不同中医证型患者关节滑液中炎症因子水平及其与膝骨关节炎中医证型的相关性。方法90例KOA患者（119膝）根据中医辨证分为肾虚髓亏型、阳虚寒凝型及瘀血阻滞型。抽取关节液标本,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA法）测定基质金属蛋白酶-13（MMP-13）、白介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、组织型金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）水平。Pearson相关性检验分析其与中医证型、年龄、病程之间的关系。结果阳虚寒凝型患者MMP-13、IL-1、TNF-α水平明显高于肾虚髓亏型及瘀血阻滞型（P〈0．05）,TIMP-1水平明显低于肾虚髓亏型及瘀血阻滞型（P〈0．05）;相关性分析提示MMP-13、IL-1、TNF-α水平与年龄和病程呈正相关（P〈0．05）,TMP-1水平与年龄和病程呈负相关（P〈0．05）。结论不同中医证型的KOA患者炎症因子水平存在差异,阳虚寒凝型患者炎症因子水平较肾虚髓亏及瘀血阻滞型患者高,说明此类型的患者软骨组织免疫炎症反应处于一个高度激活的状态：年龄大、病程长的患者炎症因子水平较年龄小、病程短的患者高,提示KOA患者应该注意早期防治,以减少关节腔内炎症反应对膝关节的损伤。     

阳和汤对膝骨性关节炎患者血清和关节滑液中基质金属蛋白酶-3的影响

目的：观察阳和汤对膝骨性关节炎患者血清和关节滑液中基质金属蛋白酶-3（matrix metalloproteinase-3,MMP-3）的影响。方法：60例膝骨性关节炎患者予阳和汤治疗8周,治疗前、后分别测定患者血清和关节滑液中MMP-3的水平。结果：经阳和汤治疗后,膝骨性关节炎患者血清和关节滑液中MMP-3水平与治疗前比较显著下降（P〈0.01）。结论：阳和汤可通过调节MMP-3水平,抑制软骨细胞外基质中胶原的降解而发挥治疗骨性关节炎的作用。