低分子量肝素钠佐剂对甲型肝炎病毒疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响

目的探讨低分子量肝素钠(low molecular weight heparin sodium,LMWH-Na)佐剂对甲型肝炎病毒(Hepatitis A virus,HAV)疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响。方法将ICR小鼠随机分成8组,6只/组,分别为甲型肝炎减毒活疫苗Hep A-l(18 EU)与5种不同剂量(100μL,20μL,10μL,1μL,0.1μL)的低分子量肝素钠混合免疫小鼠作为实验组,并取生理盐水作为阴性对照组(Blank)、Hep A-l(18 EU)作为阳性对照组、Hep A-l混合Al(OH)3(300μg)作为铝佐剂对照组,共免疫一次,于免疫后第4、8、12、16周进行尾静脉采血,采用ELISA法检测小鼠血清中抗HAV抗原特异性Ig G抗体水平。在试验期间,对小鼠的健康状况进行观察,并于免疫16周后,取低分子量肝素钠最大剂量组100μL组及生理盐水组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏各主要器官制作病理切片进行对比观察。结果除阴性对照组外,各组小鼠免疫后第4周后均产生抗-HAV Ig G,并随时间的延长抗体水平逐渐升高,于第8周达到最高值,此后逐渐下降。同一时间不同组的抗体水平不同。其中,第4周,第8周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠100μL组,低分子量肝素钠20μL组,低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组且差异具有统计学意义(P0.05),第12周,铝佐剂对照组,低分子量肝素钠20μL组和低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组(P0.05),第16周,铝佐剂对照组和低分子量肝素钠10μL组的抗体水平高于阳性对照组(P0.05),但在整个实验期间,低分子量肝素钠各组的抗体水平都低于铝佐剂对照组的抗体水平。表明低分子量肝素钠可增强HAV抗原特异性体液免疫应答,具有佐剂效应,最佳剂量为10μL/组,但其佐剂效应低于铝佐剂效应。试验期间,各组小鼠均未出现异常。低分子量肝素钠100μL组小鼠肾、脾、肝、肺、心组织均未观察到病变。结论低分子量肝素钠可明显增强HAV抗原诱导小鼠的体液免疫应答,具有成为新型疫苗佐剂的研发价值。     

壬二酸佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗诱导小鼠体液免疫应答效应分析

目的探讨壬二酸作为佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其佐剂效应。方法分别将四种不同剂量的壬二酸(0.5 mg,1 mg,2 mg,3 mg)与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为佐剂组1、佐剂组2、佐剂组3、佐剂组4,同时设空白对照组、单纯抗原组、铝佐剂组,共免疫1次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体水平。结果除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAVIgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于8、12周达到峰值。免疫后4周,佐剂组4(壬二酸3 mg)产生的抗甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体水平与铝佐剂组相比较差异有统计学意义(P0.05,t=2.640)。同时,佐剂组4在免疫后4周、8周和12周产生的抗甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体水平较高,显著高于单纯抗原组(P0.05,t值分别为3.134、2.751、2.743)。结论适当剂量的壬二酸可快速、显著提高HepA-1诱导小鼠的体液免疫应答,有望成为一种新型的人用疫苗佐剂。     

吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂联合铝佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的效应分析

目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(IDO)抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂联合对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导小鼠体液免疫应答的影响,以评价其复合佐剂效应.方法 分别将三种不同剂量的INCB024360类似物(150 μg,100 μg,50 μg)与Al(OH)3(300 μg)复合后与HepA-1共同免疫ICR小鼠分别作为复合佐剂1组,2组,3组,同时设空白对照组、单纯疫苗组、铝佐剂对照组和单一INCB024360类似物(100 μg)组,共免疫一次,于免疫后4周、8周、12周、16周进行尾静脉采血,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清抗甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,各组小鼠免疫后4周、8周、12周、16周,均产生抗HAV IgG抗体,抗体水平随免疫时间的延长逐渐升高,于12周达到峰值.复合佐剂2组[HepA-118 EU+Al(OH)3 300 μg+INCB024360类似物100 μg]产生的抗体水平最高且持续时间较长,在8周和12周时,其对HepA-1的免疫增强效应显著高于单一佐剂组以及铝佐剂对照组(P＜0.05,t值分别为3.169、2.439).4周、8周、12周、16周,单一佐剂组与单纯疫苗组差异均不具有统计学意义(P＞0.05).结论 IDO抑制剂INCB024360类似物与铝佐剂复合后具有较强的复合佐剂效应,免疫增强效应优于铝佐剂对照组;但是单一的INCB024360类似物不具有显著佐剂效应.     

硒化卡拉胶对甲型肝炎减毒活疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响

目的研究硒化卡拉胶(KSC)对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法随机分成7个组,每组7只ICR小鼠。分组:阴性对照组(生理盐水)、单纯抗原组(18EU HepA-1)、铝佐剂组[Al(OH)_3 0.3 mg+18EU HepA-1]、KSC实验组(KSC 1 mg+18EU HepA-1、KSC 0.5 mg+18EU Hep A-1、KSC 0.25 mg+18EU HepA-1、KSC 0.1 mg+18EU HepA-1),皮下多点免疫注射,注射总体积300μL,免疫1次。免疫注射后及其后4周、8周、12周、16周尾静脉采血,取血清用间接酶联免疫吸附法测定抗-甲型肝炎病毒(HAV)IgG抗体滴度。在实验期间,观察小鼠的健康状况,并于免疫后16周,取KSC最佳剂量组及阴性对照组小鼠肾脏、脾脏、肝脏、肺脏、心脏组织,制备病理切片,进行对比观察。结果除阴性对照组外,其余各组在各个检测时间点均检测到抗HAVIgG抗体,且存在先升高后降低的趋势,铝佐剂组在12周达到峰值,其余各组在8周达到峰值。KSC0.5 mg组在8周、12周抗体水平高于单纯抗原组(t=3.103,t=2.573,P0.05),KSC 0.25 mg组在12周抗体水平高于单纯抗原组(t=2.602,P0.05)。本次实验的最佳剂量为KSC0.5mg。试验期内,观察小鼠各项生理指标未见异常,KSC0.5mg组小鼠心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏组织均未观察到病变。结论 KSC能够作为佐剂增强HepA-1诱导的小鼠体液免疫反应。     

树鼩经甲型肝炎减毒活疫苗、乙型肝炎疫苗及联合硫酸乙酰肝素佐剂免疫后的免疫效果评价

目的 探讨甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-1)、乙型肝炎疫苗(Hbv)以及HepA-1、Hbv分别与佐剂硫酸乙酰肝素(HS)联合对树鼩进行免疫后树鼩体液免疫应答的影响.方法 按照疫苗种类、佐剂以及免疫途径将树鼩随机分组,同时设空白对照组,分别于末次免疫后的4周、8周、12周、16周和20周尾静脉采血,用ELISA法检测树鼩血清中的特异性IgG抗体水平.结果 除空白对照组外,实验组均在末次免疫的第四周检测到抗甲型肝炎病毒(HAV)及抗乙型肝炎病毒(HBV)抗体,抗体水平随着免疫时间延长而逐渐升高并于12周达到峰值,此后逐渐下降.同时,联合HS佐剂组的体液免疫效果均优于单纯疫苗免疫组.并且不同抗原以及联合佐剂采用不同的免疫途径免疫树鼩其免疫效果存在显著性差异.结论 通过对树鼩进行疫苗免疫原性和增强免疫效果检测,证实以树鼩作为动物模型进行疫苗评价的可行性.     

4-苯基咪唑+氢氧化铝复合佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗诱导小鼠体液免疫应答的影响

目的 研究4-苯基咪唑(4-PI)+氢氧化铝[Al(OH)3]复合佐剂对甲型肝炎减毒活疫苗(HepA-l)诱导的小鼠体液免疫应答的影响.方法 实验设置7个分组,分别是:阴性对照组(1 × PBS),铝佐剂组[HepA-l+Al(OH)3],疫苗组(HepA-l),M1[HepA-l+Al(OH)3+4-PI500 μg]组,M2[HepA-l+Al(OH)3+4-PI 1 rmg]组,M3[HepA-l+Al(OH)3+4-PI 1.5 mg]组和M4(HepA-l+4-PI 1 mg)组,200 μL HepA-l,24 μLAl(OH)3,随机分配小鼠,7只/组,分别皮下注射300 μL,接种一次.用间接酶联免疫吸附法测试抗-甲型肝炎病毒(HAV) IgG抗体滴度,检测时间为免疫后4周、8周、12周、16周.实验过程中,观察和记录小鼠的健康情况.结果 除阴性对照组,其余各组4个时间点均检测到抗-HAVIgG抗体,12周达到峰值.M2组在整个检测阶段抗体水平最高,显著高于疫苗组(t=4.449、3.633、2.565、6.809,P＜0.05)和M4组(t=6.256、4.796、4.153、4.113,P＜0.05),且第4周高于铝佐组(t=2.877,P＜0.05);M4组在4个时间点检测到的抗体水平与疫苗组相当.4-PI最佳剂量组是1mg/只.实验全程观察到小鼠每项生理指标均正常.结论 4-PI+氢氧化铝复合佐剂能增强HepA-1诱导的小鼠体液免疫应答,有望开发成HepA-1新型复合佐剂.     

不同剂量CpG ODN联合STAg鼻内免疫BALB／c小鼠诱导的免疫应答

目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原（STAg）与不同剂量的CpG ODN联合滴鼻免疫小鼠的免疫效果，探索CpG ODN佐剂最佳剂量。方法 5-6周龄BALB／c小鼠50只随机分为5组，每组10只，实验组以20μg STAg联合不同剂量CpG ODN佐剂滴鼻免疫小鼠，佐剂剂量分别为0、1、5、10μg，对照组以PBS滴鼻，间隔2wk免疫2次。末次免疫后30d断颈处死全部小鼠，分离脾、Peyer＇s patch（PP结）、肠系膜淋巴结（MLN）和IEL淋巴细胞，观察淋巴细胞增殖情况。用ELISA的方法检测血清IgG和粪便IgA含量。结果 与PBS组和0剂量佐剂组相比，10μg CpG ODN联合STAg免疫后，小鼠肠粘膜淋巴组织和脾淋巴细胞增殖明显（P〈0．05）。10μg组血清IgG远高于对照组（P〈0．05），粪便IgA高于对照组（P〉0．05）。结论 CpG ODN可作为STAg的粘膜佐剂，10μg CpG ODN与STAg联合具有最佳的免疫效果。     

日本血吸虫HGPRT重组抗原与不同佐剂联合应用对小鼠免疫保护作用的研究

目的:观察日本血吸虫(大陆株)次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(hypoxanthine-guanine phosphoribosyl-transferase, HGPRT)重组抗原(reSjc HGPRT)与ISA206或弗氏佐剂联合免疫对小鼠诱导抗日本血吸虫感染的保护作用. 方法:雌性C57BL/6小鼠随机分为5组:reSjc HGPRT加ISA206佐剂免疫组、reSjc HGPRT加弗氏佐剂组、ISA206佐剂对照组、弗氏佐剂对照组和感染对照组.20 μg重组抗原和ISA206或弗氏佐剂乳化后小鼠项背部多点皮下注射,共免疫3次,每次间隔2周.佐剂对照组小鼠仅注射ISA206或弗氏佐剂和生理盐水,感染对照组不注射任何重组抗原或生理盐水.于末次免疫后3周,每只小鼠经腹部皮肤感染(30±1)条日本血吸虫尾蚴,6周后剖杀小鼠,门脉灌注收集成虫,计数成虫数、雌雄合抱数和小鼠肝组织虫卵数.在免疫前、攻击感染前和小鼠剖杀前分别采血并分离血清,用ELISA检测血清中特异性IgG抗体. 结果:重组抗原加ISA206佐剂或弗氏佐剂免疫组均诱导小鼠产生特异性IgG抗体应答,与感染对照组和弗氏佐剂对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);诱导小鼠产生的减虫率、减雌雄合抱率和肝组织减卵率分别为53.7%、59.3%、44.9%和43.3%、44.1%、33.0%,与感染对照组和2种佐剂对照组相比均有统计学意义(P<0.05).结论:reSjc HGPRT与ISA206或弗氏佐剂联合免疫,可诱导小鼠产生抗血吸虫感染保护作用.     

空肠弯曲菌口服全菌佐剂疫苗的初步研究

目的本研究采用明胶为空肠弯曲菌菌苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌苗的免疫原性.方法采用明胶为佐剂的全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠.加明胶为佐剂全菌疫苗灌胃免疫Balb/c小鼠为实验组,全菌疫苗肌注和全菌疫苗灌胃免疫为实验对照组,PBS灌胃免疫为正常对照组,未作任何处理的Balb/c小鼠为阴性对照组;接种3次,间隔7d,末次接种1wk后收集小鼠血清和小肠粘液.采用ELISA间接法检测血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平.结果各组血清抗体IgG、IgA、IgM和肠道粘液抗体SIgA水平,加佐剂组明显高于未加佐剂组,有统计学差异(P＜0.05),肌注组与加佐剂组间没有统计学差异(P＞0.05).结论本研究显示佐剂疫苗口服有良好的免疫原性,明胶可作为口服疫苗的候选佐剂.     

柚皮素增强乙肝疫苗免疫效果的探讨

目的探讨柚皮素作为佐剂增强HBV疫苗的体液免疫效果。方法用柚皮素作为免疫佐剂免疫Balb/c小鼠,以佐剂铝盐作为阳性对照,在免疫3次后取小鼠血清做ELISA检测HBsAb滴度,比较各组的免疫效果。结果与无佐剂组小鼠对比,柚皮素和铝盐作为佐剂均可有效地引起小鼠对HBsAg的体液免疫应答。结论柚皮素可以增强乙肝疫苗的免疫效果,和铝盐相比没有统计学意义。     

先锋必玻璃体腔注入治疗眼内炎

目的 :探索一种安全、有效的抗生素以取代庆大霉素在眼科的应用。方法 :①将 5mg、10mg及 2 0mg先锋必分别注入 14只兔眼玻璃体腔 ,在不同的时间 ,摘取眼球 ,通过光镜及电镜观察兔眼视网膜的组织学改变。②收治 30例化脓性眼内炎患者 ,使用先锋必 10mg/0 .1ml经玻璃体注入部分病例联合玻璃体切割治疗化脓性眼内炎。结果 :5～ 10mg先锋必对兔眼视网膜无组织学影响 ,2 0mg先锋必对兔眼视网膜的损害仅局限在光感受器外段。结论 :10mg先锋必是玻璃体腔注入治疗眼内炎安全而有效的剂量。     

两种中药多糖对巨噬细胞超微结构影响的分析

目的：分析枸杞多糖（ＬＢＰＳ）和红毛五加多糖（ＡＧＰＳ）对小鼠腹腔巨噬细胞超微结构影响。方法：ＬＢＰＳ、ＡＧＰＳ分别腹腔注射于ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠体内,１２０ｈ后取出腹腔液,分离巨噬细胞。常规扫描电镜（ＳＥＭ）、透射电镜（ＴＥＭ）标本制作,置ＪＳＭ－３５Ｇ扫描电镜和Ｈ－６００透射电镜下观察。结果：ＬＢＰＳ、ＡＧＰＳ组巨噬细胞表面微绒毛数目增多、增长、增粗,胞质内糖原颗粒增多,线粒体增大;出现大量初、次     

异丙肌苷、环胞苷对HSV的抑制作用

在原代兔肾细胞上研究异丙肌苷、环胞苷及其联合应用对HSV-1、HSV-2的抑制作用,结果表明异丙肌苷抗病毒作用较环胞苷弱,二者联合应用对HSV-1、HSV-2的抑制作用分别为次相加和相加作用。     

空肠弯曲菌口服全菌佐剂疫苗研究

目的采用明胶为空肠弯曲菌死疫苗的佐剂,灌胃免疫小鼠,评价佐剂全菌死疫苗的免疫原性。方法采用空肠弯曲菌全菌死疫苗肌肉注射(A组),用明胶为佐剂全菌死疫苗(B组),全菌死疫苗(C组)及PBS(正常对照组)灌胃免疫Balb/c小鼠;接种3次,间隔7d,末次接种1周后收集小鼠血清和小肠粘液。采用ELISA间接法检测各组血清抗体IgGI、gAI、gM和肠道粘液抗体SIgA水平。结果A、B、C组血清抗体IgGI、gAI、gM和肠道粘液抗体SIgA水平均高于正常对照组,B组明显高于C组有统计学差异(P<0.05),A组与B组间没有统计学差异(P>0.05)。结论明胶作佐剂的全菌死疫苗口服具有良好的免疫原性,可作为口服疫苗佐剂后选。     

金利油的镇痛消炎和抗前列腺增生作用

金利油0.075～0.3ml/10g 灌胃对小白鼠热板法和扭体法以及电刺激法有明显的镇痛作用,0.255～0.3ml/10g 的疗效与0.6%颅通定(0.2ml/10g)相近。对致炎剂诱发的急性、亚急性、肉芽增生性以及免疫性炎症模型,金利油也有显著的抑制作用。金利油0.1和0.2ml/10g 连续灌胃30d,对反复皮下注射丙酸睾丸酮诱发的雄性小鼠前列腺增生的抑制率分别为27.92%和40.31%.限度实验表明,金利油灌胃对小鼠无明显的急性毒性.     

Evaluation of inactivated hepatitis A vaccine in Canadians 40 years of age or more.

OBJECTIVE: To assess the side effects and immune responses after three serial doses of a new inactivated hepatitis A vaccine in people 40 years of age or more. DESIGN: Open, noncomparative trial. SETTING: A hospital, a regional laboratory and public health units in British Columbia. PARTICIPANTS: A volunteer sample of 64 healthy adults aged 40 to 61 years who were seronegative for hepatitis A virus (HAV). All were staff or associates of the health facilities. Exclusion criteria included elevated serum alanine and aspartate aminotransferase levels, a history of liver disease and recent travel to areas of high risk for HAV infection. INTERVENTION: A formalin-inactivated, alum-adsorbed vaccine containing 720 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) units of antigen from HAV strain HM175 per 1.0-mL dose was injected intramuscularly into the delgoid area. The second and third doses were given 1 and 6 months later respectively. MAIN OUTCOME MEASURES: A detailed diary of any adverse effects for 3 days after each dose. HAV antibody levels in blood samples taken before and 30 days after each dose. RESULTS: All subjects completed the planned series of vaccinations and blood tests; symptom diaries were returned after 190 (99%) of 192 vaccinations. Local symptoms, most often soreness, were reported after 46% of the vaccinations but were mild and usually resolved within 24 hours. A temperature of more than 38.0 degrees C was never reported. Seroconversion occurred in all cases after the two primary doses, and the subjects were still seropositive at 6 months. After the booster dose the geometric mean titre was 2380 mIU/mL, all values being 200 mIU/mL or greater. CONCLUSION: In healthy adults 40 years of age or more the HAV vaccine was well tolerated and highly immunogenic. Final antibody levels were much higher than reported in people passively immunized against HAV with immune serum globulin.     

6，8－二－三氟甲基－7－乙酰氧基白杨素抑制人肝癌裸鼠移植瘤生长

目的：研究6,8-二-三氟甲基-7-乙酰氧基白杨素（dFMAChR）对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用。方法：建立人肝癌HepG2细胞裸鼠移植瘤模型．随机分为6组,生理盐水（0．1ml／10g）组、氟尿嘧啶（5-Fu,20mg／kg）组、白杨素（100mg／kg）组、低剂量dFMAChR（20mg／kg）组、中剂量dFMAChR（40mg／kg）组和高剂量dFMAChR（80mg／kg）组。测定移植瘤大小和重量;HE染色,光镜下观察移植瘤组织形态学特征;TUNEL法检测移植瘤细胞凋亡作用。结果：20、40、80mg／kgdFMAChR诱导的移植瘤的瘤重抑制率分别为40．17％、47．41％和66．81％。HE染色与TUNEL法检测结果表明,dFMAChR能明显诱导移植瘤细胞凋亡。结论：dFMAChR具有抗人肝癌治疗作用。