吸入不同浓度NO对脂多糖所致大鼠急性肺损伤TLR4表达的影响

目的 观察正常大鼠气道Toll样受体4(TLR4)的分布及脂多糖(LPS)对大鼠气道TLR4分布的影响,以及吸入不同浓度NO对TLR4表达的影响.方法 气管内滴注LPS复制大鼠急性肺损伤模型,观察6 h后的病理变化,免疫组化法观察气道内TLR4的变化,以及分别吸入10×10-6,20×10-6,40×10-6, 100×10-6mg/L的NO对大鼠气道内TLR4 mRNA表达的影响.结果 免疫组化和实时荧光定量PCR结果显示TLR4在正常组大鼠气道内有广泛分布和表达.LPS急性肺损伤组大鼠病理检查显示支气管、肺内炎症程度均明显高于正常组,免疫组化及荧光定量PCR结果显示主支气管和肺内细支气管上皮细胞内TLR4表达明显升高.NO 20×10-6mg/L组病理检查结果显示气管和主支气管的炎症程度明显减轻,免疫组化及荧光定量PCR结果提示肺内细支气管上皮细胞内TLR4的表达量较LPS损伤组明显降低.结论 TLR4在大鼠气道内广泛分布,LPS刺激可使TLR4的表达增加,吸入适当浓度NO可降低由LPS引起的肺内细支气管上皮细胞内TLR4表达的升高.     

脓毒症早期大鼠肝脏Toll样受体4基因表达及干预性研究

目的:探讨严重腹腔感染所致脓毒症大鼠肝脏Toll样受体4(Tolllikereceptor4,TLR4)基因表达变化规律及对其调节机制进行初步探讨。方法:采用大鼠盲肠结扎穿孔(CLP)模型造成脓毒症。将96只大鼠随机分为正常对照组、假手术组、CLP组、地塞米松(DXM)干预组,于CLP后2、4、6、12、24h处死动物,留取肝脏标本,以半定量逆转录多聚酶链反应技术及相关软件分析不同组TLR4mRNA、TNF鄄αmRNA的表达,检测血清丙氨酸转移酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及肝脏组织病理,评估肝脏损伤情况。结果:CLP组2h后肝脏TLR4mRNA、TNF鄄αmRNA及血清ALT、AST比正常对照组明显增多(P﹤0.01);DXM干预组各时间点TLR4mRNA、TNF鄄αmRNA的表达及血清ALT、AST较单纯CLP组显著降低(P﹤0.01),24h病理切片显示肝损伤轻于CLP组。结论:严重腹腔感染可致大鼠肝脏TLR4mRNA持续高表达,与肝脏的损伤密切相关;早期应用DXM可抑制TLR4mRNA的表达,减轻肝脏损伤。DXM抑制腹腔感染所致的炎症反应可能与抑制TLR4的表达有关。     

Toll样受体4抑制剂对脓毒症大鼠模型心肌损伤和肺损伤的保护作用研究

目的:研究Toll样受体4(TLR4)抑制剂对脓毒症大鼠模型心肌损伤和肺损伤的保护作用研究。方法:选择18只成年雄性SD大鼠作为实验动物,随机分为对照组、模型组、干预组,每组各6只,采用盲肠结扎法建立脓毒症模型并给予TLR4抑制剂C34灌胃治疗。造模后24h,测定血清中心肌损伤分子、肺损伤分子的含量以及心肌组织、肺组织中炎症因子的表达量、氧化应激分子的含量、凋亡分子的表达量。结果:模型组大鼠血清中KL-6、cTnI、CK-MB的含量、心肌组织和肺组织中NF-kB、TNF-α、IL-1β、Bax、Caspase-3、Caspase-9的mRNA表达量以及MDA、OH﹣的含量均显著高于对照组,心肌组织和肺组织中SOD的含量均显著低于对照组;干预组大鼠血清中KL-6、cTnI、CK-MB的含量、心肌组织和肺组织中NF-kB、TNF-α、IL-1β、Bax、Caspase-3、Caspase-9的mRNA表达量以及MDA、OH﹣的含量均显著低于模型组,心肌组织和肺组织中SOD的含量均显著高于模型组。结论:Toll样受体4抑制剂对脓毒症大鼠模型心肌损伤和肺损伤具有保护作用。     

高压氧调控TLR4/NF-κB通路对脓毒症大鼠海马区细胞凋亡的影响

目的:探究高压氧(hyperbaric oxygenation,HBO)调控Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/核因子(nuclear factor,NF)-κB通路对脓毒症相关性脑病(sepsis-associated encephalopathy,SAE)大鼠海马区细胞凋亡的影响...     

TLR4信号通路与炎性反应

Toll样受体(TLR)是一类天然免疫受体,最早发现其与果蝇胚胎背、腹侧的发育有关。随着研究的深入,哺乳动物体内也发现有类似同源性受体,并统一称TLR家族。TLR的分布十分广泛,可以识别某些病原体或其产物所共有的特定结构。TLR4是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,而TLR4/CD14信号通路是介导内毒素诱导的炎性反应的重要通路。营养性肥胖、动脉粥样硬化、心肌梗死、哮喘等所引起的非细菌性炎性反应也与TLR4相关。本文就TLR4信号通路与炎性反应的研究进展进行综述。     

基于TLR4/NF-κB信号通路上调miR-143对颅内动脉瘤模型大鼠的干预作用

目的 观察通过TLR4/NF-κB信号通路上调miR-143对颅内动脉瘤模型大鼠的干预作用。方法 2020年12月—2021年9月于同济大学附属东方医院神经外科进行实验,选取SPF级SD大鼠60只随机数字表法分为空白组、模型组、上调组和下调组,各15只,除空白组外,其余大鼠建立颅内动脉瘤模型,造模成功后模型组转染空载质粒,上调组转染miR-143过表达质粒,下调组转染miR-143沉默质粒。miR-143慢病毒滴定测定miR-143基因表达量。评估大鼠颅内动脉瘤成瘤率,测定各组大鼠血清转化生长因子β₁(TGF-β₁)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9水平及大鼠颅内动脉TLR4/NF-κB信号通路蛋白表达量。结果 模型组miR-143基因表达量高于空白组(P<0.05),miR-143基因表达量下调组>模型组>上调组(F/P=7.484/0.001);模型组血清TGF-β₁、TNF-α、VEGF、MMP-2、MMP-9水平高于空白组(...     

地塞米松和TLR4在淡水淹溺型大鼠急性肺损伤中的作用

目的:探讨地塞米松和TLR4在大鼠淡水淹溺型肺损伤中的作用?方法:72只大鼠随机分为对照组?淹溺组和地塞米松组,通过淡水气道内吸入方法建立大鼠淡水淹溺型急性肺损伤模型,观察各时间点血气分析,检测0.5?2.0?4.0和8.0 h血清TNF-α?IL-6的含量以及肺组织湿/干重比值(W/D值)?MPO和TLR4 mRNA相对含量?结果:大鼠淡水淹溺型急性肺损伤模型建立成功;与对照组比较,淹溺组PaO2灌入淡水后急剧下降,随后逐渐回升,但仍维持较低水平?血清炎症因子TNF-α ?IL-6 分别在0.5?2.0 h开始表达,肺组织W/D值?MPO和TLR4 mRNA 含量分别在淹溺后0.5?2.0和8.0 h升高?地塞米松可抑制炎症因子和TLR4 mRNA表达,减轻肺损伤?结论:TLR4参与淡水淹溺型大鼠肺损伤,地塞米松通过抑制其表达可减轻肺损伤?     

白果内酯对脓毒症急性肺损伤大鼠TLR4/NFκB信号通路及Th1/Th2细胞的影响

目的 探讨白果内酯(BB)对脓毒症致急性肺损伤(ALI)大鼠Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及辅助性T细胞1/2(Th1/Th2)的影响.方法 50只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(ALI组)、BB低(2.5 mg/kg)剂量组、BB高(10 mg/kg)剂量组、地塞米...     

HMGB1基因敲除通过抑制TLR4/NF-κB通路减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的 研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因敲除减轻脓毒症小鼠急性肺损伤及抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的作用。方法 野生型(WT)小鼠分为WT-Sham组和WT-模型组,HMGB1基因敲除(KO)小鼠分为KO-Sham组和KO-模型组。WT-模型组和KO-模型组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症ALI模型,WT-Sham组和KO-Sham组进行假手术操作。造模后24 h,检测动脉血氧分压(PaO₂),计算氧合指数(OI),检测肺组织病理改变,计算肺损伤评分,检测血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的浓度,肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达。结果 WT-模型组的PaO₂、OI、血清及肺组织SOD的浓度低于WT-Sham组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达水平高于WT-Sham组(P<0...     

清热解毒药配伍桔梗汤对急性肺损伤模型大鼠TLR4 mRNA表达的影响

目的 观察清热解毒中药配伍桔梗汤对内毒素致急性肺损伤(ALI)模型大鼠肺Toll样受体4(TLR4) mRNA表达的影响,探讨桔梗汤的配伍增效机制.方法 雄性SD大鼠按随机数字表法分为生理盐水组、ALI模型组、清热解毒药组、清热解毒药加桔梗汤组.股静脉注射内毒素脂多糖制备ALI大鼠模型,检测各组大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)含量及肺组织髓过氧化物酶(MPO)活性、TLR4 mRNA的表达.结果 与生理盐水组相比,ALI模型大鼠血清TNF-α、IL-10含量明显升高(P<0.01或P<0.05),肺组织MPO活性、TLR4 mRNA表达明显增强(P<0.01或P<0.05).中药干预后大鼠血清TNF-α、IL-10含量及肺组织MPO活性、TLR4 mRNA表达均明显下降(P<0.01或P<0.05),且清热解毒药与桔梗汤配伍疗效优于单纯清热解毒药(P<0.05).结论 桔梗汤对清热解毒药降低血清TNF-α、IL-10含量、抑制MPO活性及TLR4 mRNA基因表达、发挥解毒抗炎功效,具有促进作用.     

阿奇霉素对慢阻肺大鼠肺脏病理损伤、氧化应激及TLR4/NF -B信号通路的调节作用

目的 探讨阿奇霉素(Azi)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠肺脏病理损伤、氧化应激的影响及其机制。方法 选择6～8周龄雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(Control组)、模型组(COPD组)和治疗组1(COPD+Azi25 mg)、治疗组2(COPD+Azi 50 mg)、治疗组3(COPD+Azi 100 mg)5组。通过烟熏联合气管内滴入脂多糖的方法诱导建立大鼠COPD模型。治疗组于烟熏前30 min给予对应浓度的阿奇霉素灌胃,对照组和模型组给予等量的生理盐水,1次/d,连续4周。测定右肺湿重/干重比值(W/D);HE和MASSON染色检测肺组织病理形态及纤维化情况;Western blot检测裂解形式的半胱天冬酶3(Caspase-3)、基质金属蛋白酶9(MMP 9)的蛋白表达;RT-PCR和Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子 κB(NF κB)p65和NF -B抑制蛋白(IkBα)的mRNA及蛋白表水平;ELISA法检测肿瘤坏死因子 α(TNF α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)和丙二醛(MDA)含量。 结果 与模型组相比,阿奇霉素治疗能降低W/D比值(P＜0.05);减轻肺组织充血、水肿、炎性细胞浸润和胶原沉积;下调Caspase 3、MMP-9蛋白表达(P＜0.05);降低TNF、IL-1β和IL-6含量(P＜0.05);增加SOD和GSH Px活性,降低MDA表达(P＜0.05);同时抑制TLR4、NF -B p65和IκBα的磷酸化水平(P＜0.05)。 结论 阿奇霉素能改善慢阻肺模型大鼠肺脏组织形态和纤维化,并抑制其氧化应激,这与抑制TLR4/NF -B信号通路激活有关。     

脓毒症合并急性肾损伤患者TLR4信号通路相关因子的表达及其预后因素分析

目的 探讨影响脓毒症合并急性肾损伤（AKI）预后的危险因素。方法 回顾性分析萍乡矿业集团有限责任公司总医院2020年7月—2021年7月收治的脓毒症合并AKI患者90例的临床资料,根据患者自入院治疗日起1月内的存活情况分为存活组（40例）和死亡组（50例）。收集两组患者的基本资料[性别、年龄、体质量指数（BMI）、糖尿病史、高血压史、心血管病史、使用血制品、使用激素、机械通气、多器官衰竭]和实验室指标[Toll样受体4(TLR4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、血肌酐（Scr）、平均动脉压（MAP）]。多因素Logistic逐步回归分析影响脓毒症合并AKI患者预后不良的危险因素。绘制受试者工作特征（ROC）曲线分析TLR4、HMGB1、Scr预测脓毒症合并AKI患者预后不良的价值。结果 死亡组机械通气、多器官衰竭占比均高于存活组（P <0.05）,TLR4、HMGB1、Scr水平均高于存活组（P <0.05）。多因素Logistic逐步回归分析结果显示,机械通气[■=4.219(95%CI:2.851,6.313)]、多器官衰竭[■=3.110(95%CI:2.181,...     

miRNA-141通过调节TLR4信号通路抑制大鼠血栓形成

目的 研究微小RNA(miR)-141对血栓模型大鼠血栓形成、血小板聚集及血浆中一氧化氮(NO)、环磷酸鸟苷(cGMP)和前列环素(PGI2)的影响.方法 90只SD雄性大鼠随机进行分组,10只为正常对照组;模型组使用5 g/L的CMC-Na建立大鼠动静脉旁路血栓模型(20只);治疗组在CMC-Na基础上分别静脉注射1...     

外源性胰岛素样生长因子-1对脓毒血症大鼠肺保护的作用

目的观察外源性胰岛素样生长因子-1对大鼠脓毒血症引起急性肺损伤的肺保护作用。方法选择Wistar大鼠40只,随机分为4组（每组各10只）：对照组,脓毒血症组,IGF-1治疗1组和治疗2组（50μg/kg和100μg/kg）。采用颈静脉注射脂多糖（LPS,15 mg/kg）制作脓毒血症大鼠ALI模型。注射LPS 12 h后,测定各组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液IL-6和IL-8浓度。结果与对照组比较,脓毒血症组大鼠血清IL-6浓度[（25.5±3.71）vs（14.6±2.34）ng/mL]和支气管肺泡灌洗液IL-6浓度[（17.9±2.56）vs（9.1±1.19）ng/mL]均高于对照组,也高于IGF-1治疗组（均P〈0.05）,同时脓毒血症组在血清IL-8[（2.03±0.15）vs（1.62±0.13）ng/mL]和支气管肺泡灌洗液的IL-8浓度[（1.35±0.37）vs（0.98±0.11）ng/mL]均高于对照组和IGF-1治疗组（均P〈0.05）。IGF-1治疗2组大鼠血清和支气管肺泡灌洗液IL-6[（17.3±4.59）vs（17.3±4.59）,（11.4±2.93）vs（13.6±2.71）ng/mL]和IL-8[（1.73±0.11）vs（1.87±0.26）,（0.99±0.39）vs（1.09±0.43）ng/mL]浓度均低于IGF-1治疗1组（P〈0.05）。结论外源性IGF-1对脓毒血症大鼠引起的急性肺损伤具有保护作用,且随着剂量的加大保护作用更明显。     

TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸肝脏损伤中的作用研究

目的 探讨TLR4及其信号通路在阻塞性黄疸中引起肝脏损伤的作用机制.方法 将60只SD大鼠(雌雄各半)随机分为阻塞性黄疸+多粘菌素B组(OJ+PMB组,n=15)、阻塞性黄疸组(OJ组,n=15)、假手术组(SO组,n=15)、空白对照组(CG组,n=15).结扎胆总管建立阻塞性黄疸大鼠模型,并于术后7、14、21 d...     

吡非尼酮对急性胰腺炎大鼠胰腺损伤及TLR4/MYD88信号通路的影响

目的 探讨吡非尼酮（PFD）对急性胰腺炎（AP）大鼠胰腺损伤的影响及其作用机制。方法 将32只SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、AP组及PFD低、高剂量组,每组8只。AP组及PFD低、高剂量组均成功复制AP模型,PFD低、高剂量组分别给予PFD 50和150 mg/（kg·d）灌胃治疗24 h,AP组、对照组大鼠则灌胃等量0.5%羧甲基纤维素钠。干预完成后,测定各组大鼠腹水量、血清淀粉酶（AMY）、血清炎症因子水平,观察各组大鼠胰腺组织病理变化并进行病理评分,比较各组大鼠胰腺组织Toll样受体4/髓样细胞分化蛋白88(TLR4/MYD88)通路蛋白的表达。结果 与对照组比较,AP组大鼠腹水量增加（P <0.05）,血清AMY、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平、病理评分、Toll样受体4(TLR4)和MYD88蛋白相对表达量表达升高（P <0.05）;与AP组比较,PFD低、高剂量组腹水量减少（P <0.05）,血清AMY、IL-6、TNF-α水平、病理评分、TLR4和MYD88蛋白相对表达量降低（P <0.05）;与PFD低剂量组...     

乌司他丁联合抗菌药物对创伤弧菌脓毒症大鼠肺组织的保护作用

目的 探讨乌司他丁联合抗菌药物对创伤弧菌脓毒症大鼠外周血清致炎细胞因子白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）表达的变化和肺组织的病理改变.方法 将60只成年雌性SD大鼠随机分为：脓毒症对照组（C组）、氧氟沙星抗感染组（K组）、乌司他丁抗炎组（U组）、乌司他丁联合氧氟沙星抗炎抗感染组（L组）.每组各15只;所有大鼠均于腹腔内注射创伤弧菌悬液以建立脓毒症模型.同时采用ELISA法观察各组外周血IL-1 β、IL-6水平,并于光镜下观察肺组织病理变化和电镜下观察肺组织超微改变.结果 C组可见大量光滑的创伤弧菌菌落生长,K组和L组则均未见细菌生长.L组血IL-1 B和IL-6含量均较其他3组显著降低（均P＜0.01）;K组和U组血IL-6含量均较C组明显下降（均P＜0.01）.而3组IL-1 β含量的差异则均无统计学意义（均P＞0.05）.L组大鼠多数肺泡结构无明显改变,病理损害程度明显轻于C组.结论 乌司他丁联合抗菌药物对创伤弧菌脓毒症大鼠急性肺损伤具有明显保护作用.