青石棉处理的肺泡巨噬细胞上清液对人胚肺成纤维细胞？…

为了探讨青石棉对肺损伤的机理,用兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）和人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）组成体外模型,采用ＭＴＴ颜色反映法测定青石棉处理兔ＡＭ２４ｈ后的培养上清液刺激ＨＥＰＦ细胞增殖情况,同时用标准石英作为阳性对照,二氧化钛作为阴性对照,以不同粉尘处理的ＡＭ培养上清液作为正常对照。结果发现青石棉能明显刺激ＨＥＰＦ增殖,呈剂量－效应关系（Ｐ〈０．０１）。青石棉浓度在１００μｇ／ｍｌ时,青石棉组ＨＥＰＦ的     

SiO2尘刺激肺泡巨噬细胞上清液对Mv-1-lu细胞迁移的影响

目的探讨ＳｉＯ２刺激肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）的上清液对肺泡上皮细胞的迁移和增殖的影响。方法采用Ｂｏｙｄｅｎｃｈａｍｂｅｒ系统,观察空白对照（０μｇ／ｍｌＳｉＯ２）和２００μｇ／ｍｌＳｉＯ２刺激ＰＡＭ的上清液（１．０×１０６～１．５×１０６ＰＡＭ／ｍｌ）对貂肺泡上皮细胞株Ｍｖ１ｌｕ细胞的迁移和增殖的影响。结果２００μｇ／ｍｌＳｉＯ２ＰＡＭ的上清液对Ｍｖ１ｌｕ细胞的迁移和增殖效应明显低于空白对照组。结论ＳｉＯ２刺激ＰＡＭ的上清液对Ｍｖ１ｌｕ细胞的迁移和增殖均有明显的抑制作用;ＳｉＯ２吸入可以刺激ＰＡＭ分泌某些因子,对肺泡上皮细胞损伤的修复产生抑制作用。     

钒钛磁铁矿尘对家兔肺泡巨噬细胞毒作用的体外研究

目的探讨钒钛磁铁矿尘（钒钛尘）对肺泡巨噬细胞的毒性作用及程度。方法运用体外细胞培养及卵壳膜盖片透射电镜法来比较钒钛尘、五氧化二钒（Ｖ２Ｏ５）、二氧化钛（ＴｉＯ２）和石英（ＳｉＯ２）在不同时间、剂量作用下对肺泡巨噬细胞存活率、形态和功能的影响及培养液中乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）和酸性磷酸酶（ＡＣＰ）的活性变化。结果４种粉尘均可使肺泡巨噬细胞存活率下降，ＬＤＨ和ＡＣＰ活性升高，形态和功能发生变化。但程度因粉尘种类而异。结论钒钛尘对肺泡巨噬细胞的毒性作用低于Ｖ２Ｏ５和ＳｉＯ２，但高于ＴｉＯ２。ＴｉＯ２对肺泡巨噬细胞亦有轻微的毒性作用     

人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞的毒作用研究

目的比较１０种人造矿物纤维对肺泡巨噬细胞毒作用的差异。方法选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维），在体外用豚鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）作为靶细胞，分别对ＪＦＭ纤维作用于ＡＭ后超氧阴离子自由基（Ｏ－２）、过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）的产生，谷胱甘肽（ＧＳＨ）及细胞内游离Ｃａ２＋浓度的变化进行了测定。结果１０种ＪＦＭ纤维中，大多数都可引起Ｏ－２和Ｈ２Ｏ２的产生增多、ＧＳＨ含量下降及细胞内游离Ｃａ２＋浓度升高，但其作用均低于温石棉。结论ＪＦＭ纤维的一般细胞毒性均低于温石棉。这些人造矿物纤维虽然作为石棉的代用品使用，但对机体仍会产生一定的有害作用。     

嗜银蛋白在矽肺纤维化过程中的意义

目的探索ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞（具有肺泡巨噬细胞特性的人血单核细胞株）上清液对中国仓鼠肺成纤维（ＣＨＬ）细胞核仁组成区相关的嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲｓ）形成及其增殖的关系。方法通过５个系列浓度（０、５０、１００、２００和５００μｇ／ｍｌ）的ＳｉＯ２刺激ＴＨＰ１细胞培养上清液作用于ＣＨＬ细胞,采用综合改良ＡｇＮＯＲｓ染色技术,观察其ＡｇＮＯＲｓ形成并计数;四唑盐（ＭＴＴ）比色法检测ＣＨＬ细胞的增殖。结果随ＳｉＯ２浓度增大,ＣＨＬ细胞ＡｇＮＯＲｓ颗粒均数、颗粒分散度以及ＭＴＴ分析Ａ５７０ｎｍ值均相应增大,呈良好的剂量反应关系,并和ＳｉＯ２尘的肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）的细胞毒性指数呈高度负相关（ｒ＝－０．９６８,Ｐ＜０．０１）。结论ＳｉＯ２刺激的ＴＨＰ１细胞上清液可以引起肺成纤维细胞ＡｇＮＯＲｓ含量的改变,并与成纤维细胞的增殖和ＳｉＯ２尘ＰＡＭ细胞毒性相一致。     

3种煤尘细胞毒性与其成纤维细胞效应的关系

采用ＳＥＭ／ＥＤＸＳ和ＸＰＤ检测不同变质期３种煤尘的化学元素和矿物成分．将不同浓度的煤尘作用于大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ），测定粉尘－ＡＭ上清液中ＰＧＥ２、ＭＤＡ、ＬＤＨ含量和细胞存活率。将煤尘和标准石英作用过的粉尘－ＡＭ上清液，再作用于成纤维细胞。选用３Ｈ－ＴｄＲ同位素掺入法、ＭＴＴ法和放射自显影法，检测２ＢＳ细胞的增殖能力；对二甲氨基苯甲酸法测定２ＢＳ细胞胶原合成；在透射电镜下，观察２ＢＳ细胞超微结构变化．并测算其粗面内质网的扩张程度．结果显示：３种煤尘细胞毒性大小顺序Ａ＞Ｍ＞Ｆ，并不与其致纤维化效应强弱的顺序（Ｆ＞Ａ＞Ｍ）相一致。这可能与其矿物成分有关。     

BCG刺激的肺泡巨噬细胞培养上清液对肺成纤维细胞影响

７．５～６０ｍｇ／Ｌ卡介苗（ＢＣＧ）刺激的肺泡巨噬细胞（ＰＡＭ）培养上清液能显著促进肺成纤维细胞（ＰＦＢ）增殖和胶原合成。发现该上清液中含较高水平的肿瘤坏死因子（ＴＮＰ），且其促ＰＦＢ增殖作用与ＴＮＦ水平成正相关，提示ＢＣＧ在体外能刺激ＰＡＭ产生ＴＮＦ，ＴＮＦ为该上清液促ＰＦＢ增殖的主要因素；５０ｍｇ／ＬＳｉＯ２刺激的ＰＡＭ上清液亦能促进ＰＦＢ增殖和胶原合成，但上清液中几乎检测不到ＴＮＦ，说明其促ＰＦＢ增殖和胶原合成的成分是不同于ＴＮＦ的其它物质；ＴＮＦ能协同该物质促ＰＦＢ增殖和胶原合成。上述结果提示，结核菌刺激ＰＡＭ产生ＴＮＰ可能是矽肺结核病较单纯矽肺发展迅速的一个重要原因。     

3种粉尘对兔肺泡巨噬细胞合成NO及NOS活性的影响

为探讨一氧化氮（ＮＯ）和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）在粉尘致病中的作用，利用改良Ｍｙｖｉｒｋ法收集兔肺泡巨噬细胞（ＡＭ）进行体外培养，采用硝酸还原酶法测定二氧化钛、石英尘和新康温石棉处理ＡＭ后培养上清液中亚硝酸根／硝酸根／硝酸根（ＮＯ２＾－／ＮＯ３３＾－）的含量（ＮＯ的静成氧化形式），同时得用酶－底物反应形成有色物质测定ＡＭ的细胞裂解液中ＮＯＳ的酶活性。结果显示，随粉尘浓度的增加：（１）温石棉组和石英组     

血小板激活因子对人胚肺纤维母细胞生长调节的实验研究

血小板激活因子对人胚肺纤维母细胞生长调节的实验研究＊浙江省医学科学院（３１００１３）何令媛张群卫娄金萍钟惠仙二氧化硅（ＳｉＯ２）粉尘对肺泡巨噬细胞（ＡＭ）等的生物膜损伤是矽肺发病的关键性原因，ＡＭ吞噬ＳｉＯ２后可释放包括血小板激活因子（ＰＡＦ）在内的...     

人造矿物纤维的体外细胞毒性研究

目的;比较１０种人造矿物纤维对细胞毒性作用。方法：选用日本纤维状物质研究协会提供的１０种标准人造矿物纤维（ＪＦＭ纤维）,在体外以大鼠肺巨噬细胞（ＡＭ）和兔红细胞为靶细胞。测定ＪＦＭ纤维作用后ＡＭ乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性,ＡＭ吞噬能力和红细胞溶血率。结果：１０种ＪＦＭ纤维都可引起ＡＭ中ＬＤＨ逸出和活性增高,ＲＦ１明显高于温石棉,其它接近或低于温石棉。ＪＦＭ纤维对ＡＭ吞噬能力实验中,ＷＯ１作用下的ＡＭ吞噬能力明显高于温石棉,ＲＦ１、ＲＦ２、 ＲＦ３低于温石棉。 ＲＦ１、 ＲＦ２对红细胞溶血率与温石棉接近,其它明显低于温石棉。结论：ＪＦＭ纤维具一般细胞毒性, ＲＦ１、 ＲＦ２接近于温石棉,其它均低于温石棉,其中以 ＷＯ１为最低。     

蛋白激酶C信号通路在温石棉致肺成纤维细胞的细胞周期和凋亡改变中的作用

目的 探讨蛋白激酶C（PKC）信号通路与温石棉致人胚肺成纤维细胞（HEPF）的细胞周期及细胞凋亡改变的联系。方法 流式细胞技术测定PKC的抑制剂或激活剂对温石棉处理兔肺泡巨噬细胞（AM）的培养上清液致HEPF的细胞周期和凋亡改变的影响。同时设立空白对照、正常对照（不加粉尘的AM）、阴性对照（标准TiO2)和阳性对照（标准SiO2）。结果 温石棉处理AM的上清液刺激HEPF增殖时,HEPF的G／M期细胞百分比为7．2％,高于各对照组,而细胞凋亡百分率为3．5％,低于各对照组,差异均有显著性（P＜0．01）。PRKC抑制剂C25H24N4O2使温石棉所致HEPF增殖时的S期细胞百分比由37．8％减少到27．3％,凋亡百分率由3．5％增加到22．7％,差异均有显著性（P＜0．01）,而PKC激活剂PMA能使此S期细胞百分比增加。结论 温石棉所致HEPF增殖时的细胞周期变化与其上游PKC信号通路有关,PKC抑制剂和激活剂主要是作用 于S期DNA的合成和诱导细胞凋亡。     

蛋白激酶C信号通路对温石棉介导的肺成纤维细胞细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 研究细胞周期调控蛋白在温石棉所致成纤维细胞（HEPF）增殖中的表达和蛋白激酶C（PKC）对细胞周期调控蛋白的影响。方法 利用体外细胞培养技术,用流式细胞仪测定温石棉介导的HEPF的细胞周期调控蛋白的表达,同时设立阳性对照（标准SiO2)、阳性对照（标准TiO2)、正常对照（未经粉尘处理的免肺泡巨噬细胞）和空白对照。结果 温石棉细胞周期蛋白（cyclin)Cyclin D1、CyclinE、增殖细胞核抗原（PCNA）和CyclinA表达阳性率分别为19．0％、22．8％、79．7％和65．1％,均较各对照组低,差异有显著性（P＜0．05）,且CyclinD1和CyclinE表达阳性率低于PCNA和CyclinA,差异有显著性（P＜0．01)而 CyclinB1和p34cdc2激酶的阳性表达率较空白对照和正常对照略高。当PKC信号通路被阻断后,PCNA在温石棉组表达的阳性率明显降低,差异有显著性（P＜0．05）,p34cdc2激酶的阳性表达率改变不明显。结论 这几种蛋白可能均参与了温石棉所致HEPF增殖,其中PCNA表达的改变可能与上游PKC信号通路有关。     

蛋白激酶在青石棉处理的肺泡巨噬细胞培养上清液致肺成纤维细胞增殖中的作用

为探讨蛋白激酶在青石棉诱导的肺成纤维细胞增殖中的作用 ,本研究采用体外细胞培养技术 ,用兔肺泡巨噬细胞 (AM)和人胚肺成纤维细胞 (HEPF)组成体外模型 ,用 MTT法测定 HEPF的增殖活力 ,检测了蛋白激酶 (PKA、PKC和 TPK)的抑制剂和激活剂对青石棉诱导的 HEPF增殖的影响 ,以二氧化钛为阴性对照 ,标准石英为阳性对照。结果发现 ,PKA、PKC和 TPK的抑制剂和激活剂均能使青石棉诱导的 HEPF增殖受到抑制和激活 ,并随剂量的变化而变化 ,呈显著的剂量 -效应关系 (P<0 .0 1) ,且青石棉组被抑制和激活的程度强于各对照组。从 3种蛋白激酶的作用强度分析 ,发现 TPK信号通路在青石棉诱导的 HEPF增殖中的作用最强 ,其次是 PKC信号通路 ,PKA信号通路的作用最弱。提示 PKA、PKC和 TPK信号通路均参与了青石棉处理 AM上清液致 HEPF增殖过程 ,TPK信号通路可能起着主导作用 ,这为寻找石棉致纤维化因子的研究方向提供了参考。     

蛋白激酶抑制剂对青石棉诱导肺成纤维细胞的细胞周期调控蛋白表达的影响

目的 探讨青石棉致人胚肺成纤维细胞（ＨＥＰＦ）增殖的细胞周期变化的机制。方法 用流式细胞技术检测青石棉诱导ＨＥＰＦ的细胞周期调控蛋白表达的改变,观察酷氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）和蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的抑制剂对其表达的影响。结果 青石棉可诱导ＨＥＰＦ的Ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１、Ｃｙｃｌｉｎ Ｅ、ＰＣＮＡ、Ｃｙｃｌｉｎ Ａ、Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ１和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶等蛋白的阳性表达率发生改变。在青石棉组,ＰＫＣ抑制剂使表达的阳性率较未加入ＰＫＣ抑制剂组明显降低,对Ｐ３４ｃｄｃ２激酶影响不大（Ｐ〉０．０５）;而ＴＰＫ抑制剂使ＰＣＮＡ表达的阳性率增高;Ｐ３４ｃｄｃ２激酶表达的阳性率降低（Ｐ〈０．０１）。结论 这几种蛋白可能均了青石棉致ＨＥＰＦ增殖,ＰＣＮＡ（和Ｐ３４ｃｄｃ２激酶）表达的改变可能与上游的ＰＫＣ（和ＴＰＫ）信号通路有关。     

矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞c-myc基因表达的影响

目的 探讨矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清对人胚肺成纤维细胞(HEFB)c-myc基因表达的影响.方法 AM分为加尘组(SiO2,30μg/ml)和对照组,培养1、2、6、12、24和36 h,收集培养上清.Ⅲ代HEFB用质量分数为0.5%的血清培养液培养48 h使大部分细胞处于静止期后,加人SiO2刺激6 h的AM培养上清(S6组),用反转录一聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot方法观察c-mycmRNA和蛋白的时程变化.然后将各组AM上清与静止状态的HEFB孵育2和7 h,观察c-myc mRNA和蛋白表达的变化.结果 HEFB在静止状态时c-myc mRNA和蛋白的表达为0,在对照组中,培养不同时间的AM上清刺激了c-myc mRNA及蛋白的表达,以AM培养12 h的卜清作用最明显,比值分别为0.749±0.088和0.759±0.101.加尘组中各上清也刺激了c-myc mRNA和蛋白的表达,但作用高峰提前,以SiO2刺激6 h的上清作用最明显,比值分别0.982±0.147和0.978±0.141.与同期对照相比,SiO2刺激1、2和6 h的AM上清诱导mRNA和蛋白表达增多,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论 SiO2激活的AM培养上清可促进HEFB c-myc基因的表达.     

二氧化硅粉尘对实验大鼠肺泡巨噬细胞的毒性效应

目的观察二氧化硅粉尘对大鼠肺泡巨噬细胞(AMs)的毒性作用。方法测定不同二氧化硅(SiO2)粉尘浓度培养AMs24小时以及培养不同时间的AMs上清中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)含量,并记录不同浓度粉尘刺激AMs的死亡率。同时以二氧化钛粉尘为阴性对照。结果巨噬细胞死亡率随粉尘浓度的增加而增加,AMs上清中LDH及MDA含量与SiO2粉尘浓度呈良好的剂量-反应关系,且与其刺激时间呈良好的时间-效应关系。结论染SiO2粉尘的实验大鼠巨噬细胞呈现明显的毒性效应。     

矽肺肺泡巨噬细胞对肺成纤维细胞基质金属蛋白酶及其抑制因子和胶原表达的影响

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其抑制因子(TIMP-1)和Ⅲ型胶原表达的影响.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后吸出培养上清.将原代培养的HELF分为4组:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加人未经SiO2刺激的AM上清;(3)10%血清组:仅加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM;(4)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM.4组均分别于6、12、18、24、36、48 h取出细胞爬片,吸出上清,用免疫细胞化学方法 检测HELF中MMP-1和TIMP-1的表达,用Western blot法检测HELF条件培养上清中Ⅲ型胶原的表达.结果 处理组18、24、36、48 h MMP-1表达分别为0.0605±0.0201,0.0519±0.0117,0.0412±0.0105,0.0213±0.0106,较对照组和空白对照组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).与对照组和空白对照组相比,处理组各时间点TIMP-1表达和Ⅲ型胶原含量明显增高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),TIMP-1/MMP-1与Ⅲ型胶原呈正相关(r=0.88,P<0.01).结论 SiO2经AM的介导可促进FB表达TIMP-1和Ⅲ型胶原,抑制HELF表达TIMP-1,TIMP-1/MMP-1的失衡与Ⅲ型胶原的病理性累积有关.     

石英和温石棉致兔肺泡巨噬细胞谷胱甘肽过氧化物酶活性改变的比较研究

为了探讨石英、石棉对抗氧化酶活性的影响,利用改良Ｍｙｖｉｒｋ 法收集兔肺泡巨噬细胞进行体外培养,采用酶－ 底物反应形成有色物来测定巨噬细胞的细胞裂解液中谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨＰｘ）的酶活性。结果发现,随着粉尘浓度的增加,石英组和温石棉组巨噬细胞内的ＧＳＨＰｘ的酶活性相应降低,存在显著的剂量反应关系（Ｐ＜ ０．０１）。在不同的粉尘剂量组,温石棉组和石英组的ＧＳＨＰｘ 酶活性均显著低于二氧化钛组（Ｐ＜ ０．０５）,温石棉组低于石英组,但未发现显著的统计学差异。石英组和温石棉组的巨噬细胞死亡率均随粉尘浓度的增加而增大,存在着剂量反应关系,且温石棉组的死亡率高于石英组。石英组、温石棉组巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性和巨噬细胞的死亡率之间的相关系数分别为－ ０．９３１８ 和－ ０．８９８４,而二氧化钛组只有－ ０．３６３７。这说明石英、温石棉均可致巨噬细胞内ＧＳＨＰｘ 酶活性呈剂量反应关系的降低,使得胞内自由基Ｈ２Ｏ２ 不能正常消除,促使脂质过氧化加重,损害细胞;且温石棉的效应强于石英。提示ＧＳＨＰｘ 酶活性的降低在石英、温石棉致病中具有一定的作用     

二氧化硅刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞Ⅲ型胶原和Ⅲ型前胶原的表达

目的 探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞(AM)通过人胚肺成纤维细胞(HELF)对Ⅲ型胶原(CⅢ)和Ⅲ型前胶原(pCⅢ)表达的影响及抗TGF-β1抗体的干预作用.方法 收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组.培养18 h后获取培养上清.将原代培养的HELF分为:(1)处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;(2)对照组:加入未经SiO2刺激的AM上清;(3)空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM;(4)处理组+抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体干预组:在处理组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml);(5)对照组+抗TGF-β1抗体干预组:在对照组的基础上加上抗TGF-β1抗体(10 μg/ml).前3组分别培养6、12、18、24、36、48 h,后2组分别培养18、24、36 h,用免疫细胞化学法检测HELF中pCⅢ的表达,用免疫印迹(Western blot)法检测HELF条件培养上清中CⅢ的表达.结果 与对照组(0.1212±0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103、0.1715±0.0116)相比,处理组12、18、24、36和48 h pCⅢ表达(0.1423±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925±0.0056,0.2421±0.0097,0.2102±0.0103)明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照组(0.2296±0.0121、0.2778±0.0116、0.3367±0.0269、0.3722±0.0214)相比,处理组12、18、24、36、48 hCⅢ含量(0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441±0.0452、0.4751±0.0252)明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与同期相对应的非干预组相比,18、24、36 h抗TGF-β1抗体干预组CⅢ和pCⅢ均明显降低,差异均有统计学意义(P＜0.01或P＜0.05).结论 SiO2经AM的介导,诱导HELF高表达CⅢ和pCⅢ,部分效应是通过TGF-β1起作用.

Abstract：

Objective To study the effects of supernatant of alveolar macrophages (AM) exposed to SiO2 on the expression of type Ⅲ collagen and type Ⅲ procollagen in human lung fibroblasts (HELF) and the intervention effects of anti-TGF-β1 antibody Methods AMs collected from a silicotic by bronchoalveolar lavage were divided into 2 parts, one part was exposed to SiO2 and other part served as control. The supernatant was obtained from AMs cultured for 18 h. HELF were divided into (1) exposure group, which was added with supernatant from AMs exposed to SiO2; (2) control group, which was added with the supernatant from AMs not exposed to SiO2; (3) blank control group, which was added with DMEM; (4) exposure group plus anti-TGF-β1antibody (10μg/ml); (5) control group plus anti-TGF-β1 antibody (10 μg/ml). (1)-(3) groups were cultured for 6, 12, 18, 24, 36, 48h, respectively. (4)-(5) groups were cultured for 18, 24, 36, respectively.Immunocytochemical test and Western blot assay were used to detect pC Ⅲ expression levels in HELF and C Ⅲ expression levels in the supernatant of HELF culture, respectively. Results The pC Ⅲ expression levels of exposure group were 0.1423 ±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925 ±0.0050,0.2421 ±0.0097 and 0.2103 ±0.0103,respectively, which were significantly higher than those (0.1212±0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103 、0.1715±0.0116) of control group (P＜0.05 or P＜0.01). The C Ⅲ levels of exposure group were (0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441 ±0.0452、0.4751±0.0252), respectively, which were significantly higher than control group (0.2296±0.0121、0.2778±0.0116、0.3367±0.0269、0.3722±0.0214). The pC Ⅲ and C Ⅲ expression levels of exposure plus anti-TGF-β1 antibody group were significantly lower than those of control plus anti-TGF-β1 antibody group (P＜0.05 or P＜0.01).Conclusion AMs exposed to SiO2 can induce the elevated pC Ⅲ and C Ⅲ expression levels in HELF by TGF-β 1 to some extent.     

温石棉与吸烟对肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的影响

为探讨石棉与吸烟对人体健康影响的机制，用Ｇｒｅｉｓｓ法测定了温石棉及香烟烟雾溶液分别与共同作用下肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生的ＮＯ终产物ＮＯ－２。结果显示：温石棉可使ＡＭ产生的ＮＯ－２明显增加，且有剂量－效应关系，但烟溶液不能使ＡＭ产生的ＮＯ－２增加或减少，在两者共同作用时，烟溶液反而抑制温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ－２。当测定ＡＭ的吞噬功能时，发现烟溶液可明显抑制ＡＭ的吞噬功能。提示：烟溶液对温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ具有抑制作用，这种作用主要是由于其抑制了ＡＭ吞噬温石棉的能力造成的